Effects of tip-pruning treatment on source-sink regulation of Catharanthus roseus seedlings

Fifty cultivated Catharanthus roseus seedlings were selected for tip-pruning treatment and the effects of tip-pruning on seedling growth and source-sink regulation were investigated for revealing physiological mechanisms of plants. The results showed that tip-pruning treatment resulted in obvious inhibition of apical dominance and enhancement of branching numbers. The contents of soluble sugars, acid sucrose invertase activity (AI) had a great change in differently positional leaves of the seedling. The sink strength in tip leaves of seedlings dramatically declined after tip-pruning treatment, while that in the leaves at the middle and bottom of seedlings had no obvious changes. The inhibition of apical dominance of tip leaves of seedlings was caused by the diminished sink strength due to tip-pruning treatment,

长春花内生真菌的分离及其发酵产生药用成分的初步研究

首次报道从长春花 Catharanthus roseus (L .) G. Don茎的韧皮部中分离出尖孢镰刀菌 Fusariumoxysporum,为该植物的一种内生真菌 ,并用 TL C和 HPL C对该菌的 97CG3菌株培养物进行了分析 ,初步结果表明该真菌能产生抗癌药长春新碱成分。

一株产长春新碱内生真菌的初步研究

目的 通过长春花叶内生真菌的分离 ,筛选产生长春新碱的菌株。方法 从长春花叶中分离内生真菌 ,对其发酵提取物进行 TL C和 HPL C分析。结果 从长春花叶中分离筛选到一株无孢菌群菌株 :97CY3。它能产生长春新碱 ,HPL C测定其长春新碱含量约为 0 .2 0 5 μg/ L。结论 长春花内生真菌中 ,有的菌株可产生与宿主所产相同的抗癌物质长春新碱。

长春花叶片中吲哚生物碱增产的研究

目的探讨乙烯利、乙酰水杨酸、色氨酸3种试剂对长春花植株中药用成分积累的影响。方法用不同质量浓度的3种试剂溶液分别处理温室盆栽长春花植株,2d后,测定叶片中的总吲哚生物碱含量,并采用RP-HPLC法测定长春碱和长春质碱的含量。结果3种试剂处理后吲哚总碱、长春碱、长春质碱的积累均有明显的提高,并确定了最适的处理质量浓度。结论3种试剂对长春花植物中吲哚生物碱的产生有明显的促进作用。

EMS诱变的长春花细胞系突变研究

目的 通过化学诱变的手段筛选生长快且吲哚碱含量高的长春花突变细胞系。方法 用不同浓度的甲基磺酸乙酯 (EMS)处理长春花愈伤组织 ,挑选成活愈伤组织块继代扩大培养 ,比较其与对照愈伤组织生长速率、吲哚总碱积累等方面的差异。结果 用 EMS处理的长春花愈伤组织与对照相比 ,不仅生长快 ,并且吲哚总碱含量高。结论 EMS处理的愈伤组织发生了变异 ,变异种是所期望的比较理想的细胞系。

生物技术在长春花研究中的应用

长春花为重要的抗癌药用植物 ,对细胞组织培养、Ti和 Ri质粒遗传转化等生物技术在长春花研究中的应用作一综述 。

长春花愈伤组织的诱导和增殖

以长春花(Catharanthusroseus(L.)G.Don)幼嫩叶片作为外植体,接种于附加不同浓度的NAA,2,4-D、6-BA、KT及其组合的MS固体培养基上,结果发现除单独使用KT不能产生愈伤组织外,其它3种单独使用时,在一定的浓度范围均有愈伤组织产生;最佳的组合培养基为MS+NAA0.5mg/L+2,4-D0.5mg/L+6-BA2.0mg/L.进一步研究发现,在黑暗和光照培养条件下,愈伤组织增殖呈"S"型,且生长周期均为27d.

长春花及银杏植物细胞悬浮培养对青蒿素的生物转化研究

目的 对抗疟药物青蒿素 ( )进行了生物转化研究。方法 利用长春花及银杏植物细胞悬浮培养细胞进行生物转化。用硅胶柱色谱进行产物的分离 ,波谱方法鉴定产物的结构。结果 此两种植物悬浮细胞体系均能将青蒿素转化成 3α-羟基去氧青蒿素 ( )。结论 此两种植物悬浮细胞体系均能有效转化青蒿素。

弱光胁迫对大田长春花生物量分配及次生代谢的影响

以长春花(Catharanthus roseus(L.)Don.)为材料,研究了田间栽培长春花在全光和20%透光率下,经过一个生长季后生物量配置、抗氧化次生代谢产物和文朵灵、长春质碱、长春碱等目的活性物质含量的变化。研究结果表明,弱光条件显著抑制了长春花植株总生物量增长,特别是抑制了有性生殖的投入;弱光组叶片总酚和总黄酮含量显著降低,干重含量分别为对照组的62.50%和50.00%,原花青素含量则略有升高,但与全光组的差异不显著;弱光组叶片文朵灵和长春质碱含量显著高于对照组,长春碱含量略有上升但差异不显著,受生物量降低影响,3种生物碱的产量均显著下降。上述结果表明,长春花能够调控生理代谢以适应低光强环境,特别是文朵灵和长春质碱含量提升显著,林下低光强环境种植长春花可以满足土地资源充分利用和文朵灵、长春质碱优质原料的需求。

人工种植长春花生物学性状和生物碱含量的季节动态

以人工种植的长春花(Catharanthus roseus(L.)G.Don)为材料,研究了一个生长季节内长春花的生物学性状和生物碱含量的季节动态。研究发现,长春花的株高、生物量和叶片数呈现相似的生长趋势,即前期(5～7月)缓慢增长、中期(7～9月)快速增长和后期(9～10月)增长缓慢3个明显的季节生长特征,而花总数在前期和中期也呈现相似的规律,但在后期(9～10月)快速下降。长春花叶片中3种生物碱含量的季节变化规律明显,变化趋势相一致。3种生物碱的含量在一个生长季节内均是先增加后降低再增加的趋势,且3种生物碱含量均在7月下旬和10月下旬出现2个明显的高峰值。长春花叶片中长春碱含量与长春质碱和文多灵含量之间均有较强的正相关,且与文多灵含量呈显著的正相关(p<0.05),长春花叶片中长春质碱含量与文多灵含量之间呈显著的正相关(p<0.05)。因此,生产实践中人工种植长春花的最佳采收期是10月末,并可通过改变环境因子进一步诱导长春花叶片中长春碱类物质的积累。

长春花叶片愈伤组织诱导及培养过程中生物碱合成类型的变化和调节及有关酶的分析

在４种不同培养基上诱导长春花叶片愈伤组织发生的过程中，叶片中含量较高的文多灵（ｖｉｎｄｏｌｉｎｅ）和长春质碱（ｃａｔｈａｒａｎｔｈｉｎｅ）迅速降解至极低水平，而在叶片中含量较低的阿玛碱（ａｊ－ｍａｌｉｃｉｎｅ）和蛇根碱（ｓｅｒｐｅｎｔｉｎｅ）的合成却逐渐增加，同时酸性和碱性过氧化物酶（ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ）活性呈上升趋势，尤其碱性过氧化物酶与蛇根碱和阿玛碱的相关性较密切。光照和黑暗中的变化趋势基本一致，但光照可提高过氧化物酶的活性，对培养物的长春质碱、文多灵和蛇根碱的合成有利。不同的培养基对生物碱的合成影响较大，２，４－Ｄ显著抑制生物碱的合成，持续光照使愈伤组织的生长受到抑制，使阿玛碱向其蛇根碱转化。

提高长春花冠瘿细胞中吲哚生物碱含量的研究

研究了长春花冠瘿细胞接种物年龄与接种量对悬浮培养细胞生物产量的影响，探讨了以大丽花轮枝孢菌的匀浆物为外源刺激物处理冠瘿细胞，对细胞生长和吲哚生物碱积累的作用。确立了外源刺激物产生效应的最适条件。

长春花激素自养型细胞株C_(20)hi中阿玛碱过量合成分子机制研究

通过RT-PCR半定量技术分析了长春花生物碱生物合成过程中7个关键酶基因在长春花激素自养型细胞株C20hi及其母株C20D中转录表达水平的差异,发现关键酶基因asat、dc、hmgr、g10h、scss、ss、sgd在C20hi中的转录表达水平高于C20D中的表达水平。推测,长春花激素自养型细胞株C20hi中阿玛碱的过量合成可能与2,4-D抑制了阿玛碱生物合成关键酶的表达水平有关。

长春花愈伤组织的诱导及限速酶活性的研究

长春花生物碱是目前应用最有效的天然植物抗肿瘤药物,目前利用生物工程生产长春花生物碱成果甚微。通过对长春花愈伤组织的诱导条件进行研究,同时对植株各部位的色氨酸脱羧酶(TDC)、过氧化物酶(POD)进行精确测定。认为长春花愈伤组织的诱导以MS培养基、激素2,4-D 2 mg/L和6-BA 0.5 mg/L最好,生物碱的合成是植物体多器官共同参与的结果。

长春花核型的研究

对长春花属的长春花(Catharanthusroseus(L.)G.Don)、白长春花(C.roseus(L.)G.Don‘Albus’)和黄长春花(C.roseus(L.)G.Don‘Flavus’)的染色体数目和核型进行了研究。结果表明,它们的核型公式均为2n=2x=16=2m+12sm+2T,均属于"3A"核型,染色体数目均为2n=16,但它们的端部和中部着丝点染色体在核型分析中的排列次序不同。

土壤条件对长春花生物碱含量的影响

目的:研究不同土壤条件对长春花体内3种生物碱含量的影响。方法:采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定不同土壤下长春花中长春碱、长春质碱、文多灵含量。结果:沙质壤土中长春碱、长春质碱、文多灵含量最高,分别为0.0058、0.0317、0.0823mg/mL。结论:以沙质壤土种植长春花可提高其植株体内长春碱、长春质碱、文多灵的含量。

长春花钙调素基因克隆及其假基因的识别

以长春花[Catharanthus roseus(L.)G.Don]叶片cDNA和基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增得到了长春花钙调素基因447 bp的全长编码cDNA序列和2个大小不同的DNA片段.序列分析表明,DNA长片段全长1 551 bp,由2个外显子和1个内含子构成,为长春花钙调素基因编码区DNA片段;DNA小片段全长447 bp,与447 bp的长春花钙调素基因cDNA核苷酸一致性高达87%,有56个碱基的差异,其中位于226 bp处的碱基A突变为T,即由AAG突变为终止密码子TAG使翻译提前终止.推测此447 bp的DNA小片段可能为长春花钙调素基因的假基因,命名为CCaMP1.

长春花突变细胞生理特征的研究

目的研究以秋水仙碱处理的长春花突变细胞在继代培养过程中的生长规律、吲哚生物碱积累的规律及营养成分的适宜浓度等方面的特征,期望得到适于工业化细胞培养的理想材料。方法将突变细胞培养于MS固体培养基上,定期称取其鲜质量,用有机溶剂萃取吲哚生物碱,应用RP-HPLC法检测药用成分阿玛碱和长春质碱。结果突变细胞培养至第30代时,生长速度和吲哚总碱积累得最快,培养至第45代时,两者均明显下降。而药用成分的量于第20代达到最高;在培养基中添加适量的色氨酸能提高药用成分的量;培养基中Ca2+和Zn2+的质量浓度分别为1760和12.6mg/L时,明显促进了药用成分的积累。结论长春花突变细胞可能是一种适于工业化细胞培养的理想材料。

外源氮对盐胁迫条件下长春花生长和氮代谢途径的影响

以药用植物长春花(Catharanthus roseus(L.)G.Don)为对象,研究不同形态外源氮供应条件下,长春花生长发育与体内氮代谢响应盐胁迫的变化特点。结果表明,无盐胁迫条件下,不同形态氮源供应对长春花生长影响不显著,但硝态氮与氨态氮混合供应的情况下,硝酸还原酶(NR)和谷氨酰胺合成酶(GS)的活性及游离氨基酸总质量分数显著高于其他氮源条件下的;在盐胁迫条件下,硝态氮和氨态氮混合供应显著增加了叶片生物量积累,同时,NR活性也显著提高。总体上,混合氮源供应可以减少盐胁迫对长春花的伤害。这种作用可能与氮代谢过程中关键酶活性的增加有关,特别是与氨代谢有关的酶有关,适量的氨离子可以节省植物代谢硝态氮的能量。