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TM9SF1 promotes bladder cancer cell growth and infiltration 被引量:1
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作者 Long Wei Shi-Shuo Wang +9 位作者 Zhi-Guang Huang Rong-Quan He Jia-Yuan Luo Bin Li Ji-Wen Cheng Kun-Jun Wu Yu-Hong Zhou Shi Liu Sheng-Hua Li Gang Chen 《World Journal of Clinical Oncology》 2024年第2期302-316,共15页
BACKGROUND Bladder cancer(BC)is the most common urological tumor.It has a high recur-rence rate,displays tutor heterogeneity,and resists chemotherapy.Furthermore,the long-term survival rate of BC patients has remained... BACKGROUND Bladder cancer(BC)is the most common urological tumor.It has a high recur-rence rate,displays tutor heterogeneity,and resists chemotherapy.Furthermore,the long-term survival rate of BC patients has remained unchanged for decades,which seriously affects the quality of patient survival.To improve the survival rate and prognosis of BC patients,it is necessary to explore the molecular mechanisms of BC development and progression and identify targets for treatment and intervention.Transmembrane 9 superfamily member 1(TM9SF1),also known as MP70 and HMP70,is a member of a family of nine transmembrane superfamily proteins,which was first identified in 1997.TM9SF1 can be expressed in BC,but its biological function and mechanism in BC are not clear.AIM To investigate the biological function and mechanism of TM9SF1 in BC.Overexpression of TM9SF1 increased the in vitro proliferation,migration,and invasion of BC cells by promoting the entry of BC cells into the G2/M phase.Silencing of TM9SF1 inhibited in vitro proliferation,migration,and invasion of BC cells and blocked BC cells in the G1 phase.CONCLUSION TM9SF1 may be an oncogene in BC. 展开更多
关键词 TM9sf1 Bladder cancer Biological function Cell function assay ONCOGENE
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TM9SF1 is implicated in promoting the proliferation and invasion of bladder cancer cells
2
作者 Shu-Qing Zhou Lian-Xiang Luo 《World Journal of Clinical Oncology》 2024年第2期175-177,共3页
Zhuo et al looked into the part of transmembrane 9 superfamily member 1(TM9SF1)in bladder cancer(BC),and evaluated if it can be used as a therapeutic target.They created a permanent BC cell line and tested the effects... Zhuo et al looked into the part of transmembrane 9 superfamily member 1(TM9SF1)in bladder cancer(BC),and evaluated if it can be used as a therapeutic target.They created a permanent BC cell line and tested the effects of TM9SF1 overexpression and suppression on BC cell growth,movement,invasion,and cell cycle advancement.Their results show that TM9SF1 can boost the growth,movement,and invasion of BC cells and their access into the G2/M stage of the cell cycle.This research gives a novel direction and concept for targeted therapy of BC. 展开更多
关键词 Bladder cancer TM9sf1 Cell proliferation Migration INVASION TM9sf1 overexpression TM9sf1 silencing inhibits
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Catquest-9SF的研究进展及临床应用
3
作者 海玥(综述) 廖萱(审校) 《山东大学耳鼻喉眼学报》 CAS 2021年第6期142-146,共5页
随着手术技术和材料设备的发展,白内障手术已成为屈光性手术,其治疗目标从早期的单纯复明发展到追求功能性视力和精准化医疗。值得注意的是,部分白内障患者尽管术后主观视力和客观视觉质量恢复良好,却仍不满意术后效果。由于视功能相关... 随着手术技术和材料设备的发展,白内障手术已成为屈光性手术,其治疗目标从早期的单纯复明发展到追求功能性视力和精准化医疗。值得注意的是,部分白内障患者尽管术后主观视力和客观视觉质量恢复良好,却仍不满意术后效果。由于视功能相关生存质量研究作为评价白内障手术干预效果的工具,能够提供前述指标以外的重要的信息,在临床上越来越受到重视。Catquest-9SF是一种评价白内障视功能相关生存质量量表,经翻译、回译及跨文化调试后目前已经在国际被广泛应用。本文将对其演变进程以及近年来临床和科研中的应用情况进行综述。 展开更多
关键词 白内障 视功能 catquest-9sf 量表 临床应用
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The Italian Catquest-9SF cataract questionnaire: translation, validation and application 被引量:1
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作者 Eirini Skiadaresi Giuseppe Ravalico +3 位作者 Silvio Polizzi Mats Lundstrom Miguel Gonzalez-Andrades Colm McAlinden 《Eye and Vision》 SCIE 2016年第1期89-96,共8页
Background:To validate the Catquest-9SF questionnaire in Italian,assess the change in visual disability with cataract surgery and determine the correlation between pre-operative Catquest-9SF scores and Lens Opacities ... Background:To validate the Catquest-9SF questionnaire in Italian,assess the change in visual disability with cataract surgery and determine the correlation between pre-operative Catquest-9SF scores and Lens Opacities Classification System(LOCS)III cataract grading.Methods:Prospective,questionnaire validation study.The Catquest-9SF questionnaire was forward and back translated and completed by 209 Italian patients before and three months following cataract surgery.Rasch analysis was used to assess its psychometric properties.Results:The Italian Catquest-9SF demonstrated ordered response categories,unidimensionality(item fit statistics range:0.73–1.34),adequate person separation(2.04),and no differential item functioning.Mistargeting was evident with a mean difference in item difficulty and person ability of 2.04 logits but improved with inclusion of pre-operative data only.There was a statistically significant(Friedman tests,p<0.001)median improvement in visual disability of 1.92,3.57,1.44 and 2.94 logits in patients undergoing first eye surgery with and without ocular comorbidity,and second eye surgery with and without ocular comorbidity respectively.There was no statistically significant difference in the improvements among the four groups(Kruskal-Wallis H test,X^(2)(3)=5.445,p=0.142).There was no correlation between Catquest-9SF scores and nuclear opalescence(r_(s)=0.049,p=0.478),nuclear colour(r_(s)=0.008,p=0.909),cortical(r_(s)=0.066,p=0.341),and posterior subcapsular components(r_(s)=0.048,p=0.494).Conclusions:The Italian Catquest-9SF demonstrated good psychometric properties and is suitable for use in Italian speaking patients.There were similar improvements in visual disability in patients undergoing first or second eye surgery,with or without ocular comorbidity.There was no correlation between pre-operative Catquest-9SF scores and LOCS III cataract grading. 展开更多
关键词 catquest-9sf Questionnaires Patient-reported outcomes CATARACT Cataract surgery Rasch analysis
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Validity of the French version of Catquest-9SF and use of an electronic notepad for entering patient-reported outcome measures
5
作者 Gregory Katz Alexandra Rouquette +3 位作者 François Lignereux Thierry Mourgues Michel Weber Mats Lundström 《Eye and Vision》 SCIE CSCD 2021年第1期92-100,共9页
Background:The Catquest-9SF questionnaire is a patient reported outcome measure that quantifies the visual benefits from cataract surgery.The purpose of this study was to translate and adapt the Catquest-9SF questionn... Background:The Catquest-9SF questionnaire is a patient reported outcome measure that quantifies the visual benefits from cataract surgery.The purpose of this study was to translate and adapt the Catquest-9SF questionnaire for France,to assess its psychometric properties via Rasch analysis,and to assess its validity when completed using an electronic notepad.Methods:The Catquest-9SF questionnaire was translated following the guidelines of the International Society for Pharmacoeconomics and Outcomes Research.Catquest-9SF and clinical data were collected from patients before and after routine cataract surgery.All questionnaire data were collected via an electronic notepad.Rasch analysis was performed to assess psychometric properties,and sensitivity to change was analysed for patients with complete paired pre-and post-operative questionnaires.Results:A complete filled-in preoperative questionnaire was obtained for 848 patients.Rasch analysis showed good precision(person separation:2.32,person reliability:0.84),ordered category probability curves,no item misfit,and unidimensionality.The respondents were slightly more able than the level of item difficulty(targeting:−1.12 logits).Sensitivity was analysed on 211 paired questionnaires,and the postoperative questionnaires showed a clear ceiling effect.The effect size was 2.6.The use of an electronic notepad for completing the questionnaire worked out very well after some adjustments.Conclusions:The French version of Catquest-9SF has good psychometric properties and is suitable for use in French-speaking patients.The use of the Catquest-9SF questionnaire in an electronic format showed good validity. 展开更多
关键词 CATARACTS Patient-related outcome measures Quality of life QUESTIONNAIRE Value-based health care catquest-9sf
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人胰岛素基因杆状病毒表达载体的构建及其在Sf_9细胞中的表达 被引量:5
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作者 李华 刘维全 +5 位作者 王吉贵 江禹 王本旭 王萍 齐顺章 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期258-262,共5页
对人胰岛素基因组基因真核表达载体 ( p CMA/m INS)进行 Xho 酶切 ,回收的含人胰岛素基因组基因的 1 60 8bp片段与线性化的杆状病毒载体 p Fast Bac 进行连接 ,获得重组载体 p Fast/m INS。将该重组载体转化 DH1 0 Bac感受态细菌 ,在体... 对人胰岛素基因组基因真核表达载体 ( p CMA/m INS)进行 Xho 酶切 ,回收的含人胰岛素基因组基因的 1 60 8bp片段与线性化的杆状病毒载体 p Fast Bac 进行连接 ,获得重组载体 p Fast/m INS。将该重组载体转化 DH1 0 Bac感受态细菌 ,在体内进行重组 ,并经 2次抗性与蓝白斑筛选 ,得到杆状病毒重组载体 Bacmid/m INS。将该载体转染 Sf9细胞 ,获得了重组杆状病毒 ,经 Tricine-SDS-PAGE和 Western-blotting检测 ,重组杆状病毒在 Sf9细胞中的表达产物是胰岛素原 。 展开更多
关键词 人胰岛素基因 杆状病毒表达系统 表达载体 sf9细胞 基因表达
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喜树碱诱导的草地贪夜蛾Sf9细胞凋亡 被引量:7
7
作者 王文祥 钟国华 +2 位作者 胡美英 黄劲飞 葛萃萃 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期894-901,共8页
传统植物源杀虫剂喜树碱具有优异的抑制昆虫生长发育活性,其诱导昆虫细胞凋亡的作用方式和机制尚不明确,极大地限制了喜树碱在植物保护领域的应用开发。本研究以1μmol/L喜树碱诱导草地贪夜蛾Spodopterafrugiperda Sf9细胞呈现细胞皱缩... 传统植物源杀虫剂喜树碱具有优异的抑制昆虫生长发育活性,其诱导昆虫细胞凋亡的作用方式和机制尚不明确,极大地限制了喜树碱在植物保护领域的应用开发。本研究以1μmol/L喜树碱诱导草地贪夜蛾Spodopterafrugiperda Sf9细胞呈现细胞皱缩、微绒毛消失和染色质边集等典型细胞凋亡早期超微结构形态特征,中期凋亡小体逐渐出现并急剧增多,DNA电泳分析可见清晰DNA片段化凋亡特征。流式细胞术分析表明1μmol/L喜树碱诱导Sf9细胞12h凋亡率达到最大值39.67%,是对照的13.13倍,随后减小。喜树碱诱导Sf9细胞凋亡在12h和24h时Sf caspase-1分别出现两个活性高峰,表明其作为效应因子在细胞凋亡级联反应过程中具有影响作用。喜树碱显著抑制Sf9细胞拓扑异构酶Ⅰ活性,阻断解旋负超螺旋pBR322DNA,导致DNA损伤进而启动细胞凋亡级联反应使Sfcaspase-1活性增加,提示其信号转导过程是细胞凋亡诱导机制之一。本研究通过分析喜树碱的诱导昆虫Sf9细胞凋亡,对揭示喜树碱诱导昆虫细胞凋亡的作用机制具有重要启示和帮助。 展开更多
关键词 草地贪夜蛾 喜树碱 sf9细胞 细胞凋亡 级联反应 流式细胞术
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不同杀虫成分对Sf9细胞凋亡的影响 被引量:6
8
作者 贾建文 黄劲飞 +2 位作者 王文祥 胡美英 钟国华 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期29-35,共7页
通过倒置显微形态观察凋亡小体、DNA琼脂糖凝胶电泳确证的模型,研究了8种代表性杀虫成分对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda离体培养细胞系Sf9的凋亡诱导效果,以探讨不同杀虫成分对昆虫细胞凋亡的影响.结果表明,印楝素0.15-1.50μg/mL... 通过倒置显微形态观察凋亡小体、DNA琼脂糖凝胶电泳确证的模型,研究了8种代表性杀虫成分对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda离体培养细胞系Sf9的凋亡诱导效果,以探讨不同杀虫成分对昆虫细胞凋亡的影响.结果表明,印楝素0.15-1.50μg/mL处理后72 h内、喜树碱0.35-3.50μg/mL处理后36 h,Sf9细胞产生大量典型凋亡小体,处理时间延长或剂量加大则以造成细胞坏死为主;DNA电泳产生典型的DNA Ladder,表明印楝素和喜树碱对Sf9具有明显的细胞凋亡诱导作用.印楝素1.5μg/mL诱导处理Sf9细胞凋亡高峰期为处理后24-48 h,喜树碱0.35-3.50μg/mL诱导处理Sf9细胞凋亡高峰期为处理后12 h.苦参碱、氟铃脲、毒死蜱、灭多威、氯氰菊酯以0.1-10.0μg/mL及昆虫蜕皮激素20-羟基蜕皮酮(20-hydroxyecdysone)以0.048-4.800μg/mL处理后72 h内对Sf9均无明显的细胞凋亡诱导作用.杀虫剂对昆虫细胞凋亡诱导效应随供试化合物、细胞种类、处理剂量、处理时间而异. 展开更多
关键词 细胞凋亡 草地贪夜蛾细胞系sf9 印楝素 喜树碱
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印楝素A诱导Sf9细胞凋亡的显微和超微形态变化 被引量:4
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作者 程杏安 黄劲飞 +2 位作者 胡美英 胡黎明 张颜博 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期52-58,共7页
利用倒置显微镜和透射电子显微镜技术观察印楝素A诱导草地贪夜蛾Spodoptera frugperda蛹卵巢Sf9细胞凋亡的显微和超微形态变化.结果表明:1.5μg.mL-1印楝素A对Sf9细胞具有显著的凋亡诱导作用,从凋亡小体和贴壁细胞数量变化判断,印楝素... 利用倒置显微镜和透射电子显微镜技术观察印楝素A诱导草地贪夜蛾Spodoptera frugperda蛹卵巢Sf9细胞凋亡的显微和超微形态变化.结果表明:1.5μg.mL-1印楝素A对Sf9细胞具有显著的凋亡诱导作用,从凋亡小体和贴壁细胞数量变化判断,印楝素A处理12 h,细胞开始出现少量凋亡小体,12~24 h凋亡小体逐渐增多,但贴壁细胞未见明显减少,因此24 h之前(0~24 h)属于凋亡早期阶段;24~36 h凋亡小体大量出现,贴壁细胞逐渐减少,属于凋亡中期;处理36 h以上,凋亡小体和贴壁细胞急剧减少,细胞凋亡进入晚期.观察诱导24 h的细胞超微结构发现,胞内的主要细胞器在数量或形态上发生了显著变化,包括溶酶体数量显著增加,线粒体内部嵴变模糊,内质网从囊泡状变成线管状,细胞核出现分页、皱缩以及区域性膨大等. 展开更多
关键词 细胞凋亡 凋亡小体 印楝素A 超微结构 sf9细胞系
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昆虫细胞Sf9在四种生物反应器中的培养 被引量:5
10
作者 谢秋玲 郑云程 廖美德 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期96-100,共5页
昆虫细胞表达系统已广泛的应用于表达各种重组蛋白,研究昆虫细胞Sf9分别在4种生物反应器:转瓶、摇瓶、Bellocell反应器、发酵罐中进行悬浮培养.转瓶、摇瓶、Bellocell和发酵罐的细胞接种密度都是5×105/mL.对细胞数量、葡萄糖浓度... 昆虫细胞表达系统已广泛的应用于表达各种重组蛋白,研究昆虫细胞Sf9分别在4种生物反应器:转瓶、摇瓶、Bellocell反应器、发酵罐中进行悬浮培养.转瓶、摇瓶、Bellocell和发酵罐的细胞接种密度都是5×105/mL.对细胞数量、葡萄糖浓度以及主要代谢产物乳酸、氨的浓度进行检测.昆虫细胞经转瓶和摇瓶培养,细胞密度达到最高分别为:5.5×106、7.3×106/mL,是起始密度的11倍和14.6倍.昆虫细胞经Bellocell和发酵罐培养,细胞密度达到最高分别为:8.01×106、1.52×107/mL,是起始密度的16.02倍和30.4倍.昆虫细胞经四种生物反应器中的悬浮培养之后,都达到了很高的密度,尤其是经发酵罐培养达到如此高密度,为高效大规模表达药物蛋白,奠定重要的基础. 展开更多
关键词 昆虫细胞sf9 转瓶 摇瓶 Bellocell反应器 发酵罐
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利用杆状病毒Bac-to-Bac系统在Sf9细胞中表达真菌细胞色素P450nor(英文) 被引量:3
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作者 周建刚 江月 +2 位作者 段媛媛 彭建新 刘德立 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期177-181,共5页
利用Bac to Bac杆状病毒载体表达系统将真菌细胞色素P4 5 0nor基因克隆至转移载体pFastBac1中 ,得到重组质粒pFastBac P4 5 0nor,再将其转化进入含穿梭载体Bacmid的受体菌DH10Bac中发生转座作用 ,得到含P4 5 0nor基因的重组穿梭载体rBac... 利用Bac to Bac杆状病毒载体表达系统将真菌细胞色素P4 5 0nor基因克隆至转移载体pFastBac1中 ,得到重组质粒pFastBac P4 5 0nor,再将其转化进入含穿梭载体Bacmid的受体菌DH10Bac中发生转座作用 ,得到含P4 5 0nor基因的重组穿梭载体rBacmidpAc P4 5 0nor。分离提取重组BacmidDNA ,并转染培养的昆虫细胞Sf9,得到重组病毒rAc p4 5 0nor。经酶切和PCR鉴定 ,细胞色素P4 5 0nor基因正确地插入到病毒基因组的多角体蛋白基因启动子下 ,SDS PAGE分析证明 :表达蛋白的分子量为 4 3kD左右。Westernblotting分析结果表明 :有一条特定的杂交带存在 ,且分子量相同 (约 4 3kD)。进一步证明了含有真菌细胞色素P4 5 0nor基因的重组表达载体和重组病毒构建成功 ,并在昆虫细胞Sf9中实现了高效表达 ,经MTT法测定表达的细胞色素P4 5 0nor具有还原NO的生物学活性。 展开更多
关键词 杆状病毒 BAC-TO-BAC系统 sf9细胞 表达 真菌 细胞色素P450nor 基因 生物学活性
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血清AFP、CA19-9、SF检测在原发性肝癌诊断中的应用 被引量:6
12
作者 洪锡田 张瑞丽 王丹 《临床肝胆病杂志》 CAS 2007年第1期57-57,共1页
关键词 原发性肝癌患者 肝癌诊断 检测结果 CA19-9 血清AFP 肿瘤标志物 sf 血清甲胎蛋白
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CA19-9、CEA、β_2-m、SF RIA联合检测对消化道恶性肿瘤的诊断价值 被引量:10
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作者 王广贤 万栢建 +3 位作者 戴萍 马永泉 秦叔逵 展皖遇 《放射免疫学杂志》 CAS 1995年第6期391-393,共3页
近年来,国内外将血清癌胚抗原(CEA)、铁蛋白(SF)、β2-微球蛋白(β2-m)测定用作恶性肿瘤的常规诊断指标,但不论作CEA、SF、β2-m何项单项检测,其对消化道阳性检出率均不够理想。因此,本文对我室近年来经细胞或病理所确诊的消化道... 近年来,国内外将血清癌胚抗原(CEA)、铁蛋白(SF)、β2-微球蛋白(β2-m)测定用作恶性肿瘤的常规诊断指标,但不论作CEA、SF、β2-m何项单项检测,其对消化道阳性检出率均不够理想。因此,本文对我室近年来经细胞或病理所确诊的消化道恶性肿瘤患者血清作CA19-9、CEA、SF,β2-m四项联检,探讨其对诮化道恶性肿瘤前诊断价值。现将结果报告如下。 展开更多
关键词 sf Β2-M CEA 诊断价值 CA19-9 消化道恶性肿瘤 对消 细胞 铁蛋白
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苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒的感染对Sf9细胞周期的影响 被引量:4
14
作者 王颖 余泽华 +2 位作者 姚汉超 陶德定 陈曲侯 《中国病毒学》 CAS CSCD 2002年第2期132-136,共5页
病毒的感染导致细胞内部发生一系列变化。应用流式细胞仪FACS的荧光检测 ,测出Sf9细胞完成整个周期循环大约需要 18h ,G1、S、G2 /M各时相的时间间隔约为 6h ;AcNPV感染Sf9细胞 12 18h ,细胞被抑制于G2 /M期 ;Sf9细胞同步于G1/S期后释... 病毒的感染导致细胞内部发生一系列变化。应用流式细胞仪FACS的荧光检测 ,测出Sf9细胞完成整个周期循环大约需要 18h ,G1、S、G2 /M各时相的时间间隔约为 6h ;AcNPV感染Sf9细胞 12 18h ,细胞被抑制于G2 /M期 ;Sf9细胞同步于G1/S期后释放细胞并用AcNPV感染 ,12h后 ,2 / 3的细胞处于G2 /M期 ,1/ 展开更多
关键词 苜蓿银纹夜蛾核型 多角体病毒 感染 sf9细胞周期 流式细胞仪分析 周期抑制
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荧光定量PCR检测TM9SF1在氟中毒暴露者外周血中的表达 被引量:3
15
作者 张丽 张亚楼 +4 位作者 唐莉 刘开泰 白生宾 范淑玲 钟近洁 《新疆医科大学学报》 CAS 2011年第9期941-943,948,共4页
目的探讨氟中毒患者与对照人群外周血中transmembrane 9 superfamily member 1(TM9SF1)表达的差别。方法选取饮水型氟中毒轻度患者(暴露组)、对照人群(非暴露组)各11例,采用SYBRGreen1嵌合荧光法进行实时定量PCR的方法,检测并比较氟暴... 目的探讨氟中毒患者与对照人群外周血中transmembrane 9 superfamily member 1(TM9SF1)表达的差别。方法选取饮水型氟中毒轻度患者(暴露组)、对照人群(非暴露组)各11例,采用SYBRGreen1嵌合荧光法进行实时定量PCR的方法,检测并比较氟暴露组和非暴露组外周血淋巴细胞中TM9SF1 mRNA的表达水平。结果暴露组人群TM9SF1 mRNA表达水平(1.33±0.22)高于非暴露组人群(1.20±0.24),但差异无统计学意义(P>0.05)。结论氟暴露可以使患者外周血中TM9SF1 mRNA表达轻度上调,其诊断价值有待进一步研究。 展开更多
关键词 TM9sf1基因 定量逆转录聚合酶链反应
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白蜡虫蜡酯合酶在昆虫细胞Sf9中的表达 被引量:2
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作者 亓倩 于淑惠 +4 位作者 孙涛 王雪庆 刘博文 杨璞 陈晓鸣 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2016年第2期191-195,共5页
[目的]本研究欲利用Bac-to-Bac表达系统,在Sf9细胞中表达WS。[方法]将WS编码序列克隆到质粒p FastBac^(TM)HT B后,转化大肠杆菌DH10Bac^(TM),经抗性和蓝白斑筛选,获得重组杆粒r Bacmid/Epel WS。将r Bacmid/EpelWS转染Sf9细胞。[结果]... [目的]本研究欲利用Bac-to-Bac表达系统,在Sf9细胞中表达WS。[方法]将WS编码序列克隆到质粒p FastBac^(TM)HT B后,转化大肠杆菌DH10Bac^(TM),经抗性和蓝白斑筛选,获得重组杆粒r Bacmid/Epel WS。将r Bacmid/EpelWS转染Sf9细胞。[结果]免疫荧光标记检测表明:WS在受感染细胞的细胞质中表达。[结论]本研究成功表达了白蜡虫WS,为白蜡虫WS的生化特性研究奠定了基础。 展开更多
关键词 白蜡虫 蜡酯合酶 载体构建 Bac-to-Bac表达系统 sf9细胞系
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斑蝥素诱导草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)卵巢细胞系Sf9凋亡的临界条件 被引量:9
17
作者 张来喜 杨宝东 +3 位作者 张民照 王进忠 张爱环 张志勇 《北京农学院学报》 2011年第2期14-17,共4页
为进一步利用昆虫细胞研究斑蝥素对鳞翅目昆虫的毒杀机理,采用细胞形态学观察法和DNA凝胶电泳法研究斑蝥素诱导草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)卵巢细胞系Sf9细胞凋亡的临界条件。结果表明:供试细胞凋亡率与斑蝥素处理剂量、时间呈... 为进一步利用昆虫细胞研究斑蝥素对鳞翅目昆虫的毒杀机理,采用细胞形态学观察法和DNA凝胶电泳法研究斑蝥素诱导草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)卵巢细胞系Sf9细胞凋亡的临界条件。结果表明:供试细胞凋亡率与斑蝥素处理剂量、时间呈现密切相关性;在较低剂量处理下,可观察到细胞凋亡。当斑蝥素质量浓度达到6.25μg/mL,处理细胞3 h或3.125μg/mL处理细胞12 h时,斑蝥素处理Sf9导致细胞出现明显畸形、形成凋亡小体等凋亡症状。DNA Ladder条件要求严格,在冰浴条件下,当斑蝥素处理质量浓度达到6.25μg/mL处理细胞24 h时,或者12.5μg/mL处理细胞12 h时,可观察到明显的DNA梯度条带。 展开更多
关键词 斑蝥素 草地贪夜蛾 凋亡 临界条件 sf9
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FOXO基因对印楝素诱导sf9细胞凋亡的影响 被引量:3
18
作者 邵雪花 赖多 匡石滋 《广东农业科学》 CAS 2021年第11期96-102,共7页
【目的】探讨印楝素(azadirachtin,AZA)通过转录因子FOXO诱导草地贪夜蛾卵巢细胞sf9凋亡的分子机制。【方法】将体外培养的草地贪夜蛾卵巢细胞分为AZA处理组和未处理组,采用CCK-8法检测AZA对sf9细胞增殖的影响;透射电镜观察sf9细胞的超... 【目的】探讨印楝素(azadirachtin,AZA)通过转录因子FOXO诱导草地贪夜蛾卵巢细胞sf9凋亡的分子机制。【方法】将体外培养的草地贪夜蛾卵巢细胞分为AZA处理组和未处理组,采用CCK-8法检测AZA对sf9细胞增殖的影响;透射电镜观察sf9细胞的超微结构变化;流式细胞术分选Annexin V-FITC/PI染色的凋亡细胞;Western blot检测p-FOXO及凋亡相关蛋白的表达情况;RNAi FOXO后,检测FOXO基因表达量与Caspase-3的酶活性变化。【结果】CCK-8检测发现AZA可显著抑制sf9细胞增殖,并呈时间和浓度依赖性;通过透射电镜检测到5 mmol/L AZA可破坏sf9细胞的微观结构,导致细胞核收缩,染色质聚集,细胞质空泡状;流式细胞术分选Annexin V-FITC/PI染色的凋亡细胞,发现AZA诱导sf9细胞凋亡与时间呈正相关;进一步通过Western blot检测凋亡相关蛋白,发现AZA可诱导凋亡相关蛋白Bim和Cleaved Caspase-3的表达水平显著增加,而P-FOXO蛋白表达量降低,FOXO总蛋白表达无明显差异;利用qRT-PCR进一步检测发现,FOXO基因表达量与AZA处理时间呈正相关,在此基础上通过RNAi技术沉默FOXO后,经AZA处理发现Caspase-3的酶活性显著降低。【结论】AZA可通过上调FOXO基因抑制草地贪夜蛾卵巢细胞sf9的增殖并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 印楝素 sf9细胞 细胞增殖 细胞凋亡 FOXO基因
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草地贪夜蛾Sf9细胞对饥饿诱导自噬的响应 被引量:1
19
作者 谢昆 王丽仙 +4 位作者 王靖 朱灵明 尹建华 叶青霞 孙艳 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2017年第3期91-95,共5页
为研究草地贪夜蛾对饥饿诱导自噬的响应。从草地贪夜蛾EST数据库中筛选到一段核苷酸序列,设计特异性引物,RT-PCR技术从草地贪夜蛾Sf9细胞中扩增该核苷酸序列,经过生物信息学分析该序列与昆虫自噬相关基因ATG8同源性最高,命名为SfATG8基... 为研究草地贪夜蛾对饥饿诱导自噬的响应。从草地贪夜蛾EST数据库中筛选到一段核苷酸序列,设计特异性引物,RT-PCR技术从草地贪夜蛾Sf9细胞中扩增该核苷酸序列,经过生物信息学分析该序列与昆虫自噬相关基因ATG8同源性最高,命名为SfATG8基因,并构建了pIEX-4-mCherry-EGFP-SfATG8载体转染Sf9细胞。Sf9细胞经饥饿(PBS)诱导4 h后,Lyso-Tracker染色、Western Blotting、共聚焦显微镜检测细胞对自噬的响应程度。结果表明,经饥饿(PBS)诱导4 h的Sf9细胞中出现Sf Atg8-PE的表达,共聚焦显微镜检测到Sf9细胞膜上的自噬小体。以上证据证实饥饿(PBS)能诱导Sf9细胞发生自噬,为深入研究Sf9细胞对自噬的响应奠定了基础。 展开更多
关键词 草地贪夜蛾 sf9 饥饿 自噬
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小牛血清和胎牛血清对Sf9细胞生长和重组蛋白表达影响的比较 被引量:2
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作者 金小红 孟哲峰 陈存国 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期415-416,共2页
目的:比较小牛血清和胎牛血清对Sf9细胞生长的影响以及两种血清条件下重组蛋白表达的差异,探讨小牛血清用于Sf9细胞培养和重组蛋白工艺化生产的可行性。方法:①在细胞培养板中,分别以含10%小牛血清和10%胎牛血清的Grace培养液培养Sf9细... 目的:比较小牛血清和胎牛血清对Sf9细胞生长的影响以及两种血清条件下重组蛋白表达的差异,探讨小牛血清用于Sf9细胞培养和重组蛋白工艺化生产的可行性。方法:①在细胞培养板中,分别以含10%小牛血清和10%胎牛血清的Grace培养液培养Sf9细胞,每天进行细胞计数和XTT比色分析,并绘制生长曲线。②重组杆状病毒感染两种血清培养下的Sf9细胞,培养72h后收集细胞,ELISA检测细胞内重组蛋白的表达量。结果:胎牛血清培养液中Sf9细胞生长曲线好于小牛血清培养液中生长的Sf9细胞,但两种血清培养液中Sf9细胞增殖活力、重组蛋白的表达并无显著差别(P>0·05)。结论:胎牛血清能更好的促进Sf9细胞生长,小牛血清也可用于Sf9细胞的培养以及重组蛋白生产。 展开更多
关键词 幼牛血清 胎牛血清 sf9细胞 重组蛋白质类
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