鹿尾研究进展

鹿尾是鹿正常生存必不可少的一部分,它不仅具有特殊的生物学功能和组织结构,而且其产品也具有很强的药理活性,是药中上品。文章从鹿尾生物学功能、组织学结构及其调控、化学成分、药理作用方面较全面的对鹿尾的研究进展进行概述,为以后鹿尾的深入研究及合理利用提供依据。

梅花鹿尾和马鹿尾中4种核苷类成分的高效液相色谱分析

利用高效液相色谱(HPLC)法,首次测定比较了梅花鹿尾和马鹿尾药材中的尿嘧啶、次黄嘌呤、尿苷和黄嘌呤4种核苷类成分的含量.色谱条件:分离柱为SunfireTM C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速1mL/min,检测波长260nm,柱温30℃.结果表明:4种核苷类组分含量在2种鹿尾药材中均无显著性差异(P>0.05).该方法操作简便、结果可靠、重现性好、定量准确,可为鹿尾药材质量控制提供依据.

2种不同品种鹿尾中磷脂含量的测定

[目的]比较不同品种鹿尾中的磷脂含量,为鹿尾的质量评定提供依据。[方法]用Folch试剂超声提取鹿尾中的磷脂,经消化后采用钼酸铵比色法测定其总磷脂含量。[结果]梅花鹿尾中磷脂平均含量为11.39 mg/g;马鹿尾中磷脂平均含量为11.85 mg/g。[结论]2种鹿尾中总磷脂含量差异不显著(P>0.05);该方法操作简单,结果准确,重现性高,可以作为鹿尾药材的质量控制方法。

两种鹿尾中总多糖含量测定

采用水热回流法提取中药材鹿尾中的总多糖,经三氯乙酸除蛋白、活性炭脱色处理,用苯酚-硫酸比色法对鹿尾样品中的总多糖含量进行测定,检测波长为486nm。结果表明,梅花鹿尾中总多糖平均含量为4.70mg/g,马鹿尾中总多糖平均含量为5.86mg/g,2种鹿尾中总多糖含量差异不显著(P>0.05);该方法操作简便,结果可靠,适用性强,可以作为鹿尾药材的质量控制方法。

鹿尾中5种有害元素的测定

目的通过测定2种鹿尾药材中铜、铅、镉、汞、砷5种有害元素,对鹿尾药材进行质量和食用安全性评价。方法采用微波消解前处理,用火焰原子吸收分光光度法测定铜,用石墨炉原子吸收分光光度法测定铅、镉,用原子荧光法测定汞、砷。结果花鹿尾中铜、铅、镉、汞、砷平均质量分数分别为4.41、0.68、0.054、0.030、0.022mg/kg;马鹿尾中铜、铅、镉、汞、砷平均质量分数分别为4.57、1.08、0.058、0.040、0.018 mg/kg;所有样品中的5种有害元素均在规定的安全标准范围之内。结论该实验证明鹿尾应用具有一定的安全性;本方法操作简单,结果准确,可以作为鹿尾药材质量控制中有害元素的定量方法。

鹿尾蛋白与多肽制备工艺优化及其对TM3细胞增殖活性研究

以梅花鹿尾为研究对象,采用正交试验优化超声水提蛋白工艺及水酶法提取多肽工艺,比较两种最佳工艺所得物对小鼠睾丸间质细胞(TM3)增殖活性的影响。结果表明,超声水提蛋白工艺最佳条件为料液比1∶5 g/mL、超声功率200 W、提取时间1 h、提取温度40℃,在此条件下蛋白含量为60.72%±0.56%;水酶法提取多肽工艺中最佳蛋白酶为胰蛋白酶,酶解最佳条件为pH8、加酶量1500 U/g、酶解时间4 h、提取温度50℃,在此条件下水解度为22.85%±0.35%。水酶法提取鹿尾多肽对小鼠睾丸间质细胞(TM3)增殖活性优于超声水提鹿尾蛋白。

鹿尾腺总蛋白双向电泳体系的建立

目的:建立一套适用于鹿尾腺总蛋白分析的双向电泳体系,为实现通过蛋白质组学研究手段探究鹿尾腺的组织发育及其发挥药理作用的机制奠定基础。方法:使用三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法、饱和酚抽提法和Trizol法3种方法提取鹿尾腺中总蛋白,采用固相pH梯度胶条进行双向电泳,并对蛋白上样量和等电聚焦参数进行选择和优化,凝胶考马斯亮蓝染色后用PDQuest 8.0软件进行图谱分析。结果:Trizol法得到的总蛋白质纯度最高,能满足双向电泳分析对样品的要求,蛋白质样品在7 cm pH 3～10 IPG胶条上,上样量为300μg,按优化的程序Ⅱ进行双向电泳,可以得到较满意的双向电泳图谱,此时清晰可见蛋白点数多达209个。结论:通过优化双向电泳条件,建立了适合鹿尾腺蛋白质组学研究的双向电泳体系。同时该体系可以为其他类似的动物组织样品制备和双向电泳提供借鉴。