Activity Screening Study on the Anti-tumor Effects of Extracts from Mahoniae caulis

[Objectives]To explore the anti-tumor activity of the extracts of petroleum ether,ethyl acetate,n-butanol and aqueous solution from Mahoniae caulis.[Methods]The extracts were extracted with petroleum ether,ethyl acetate,n-butanol and aqueous solution respectively,and then concentrated.The inhibitory effects of these extracts on the growth of three tumor cell lines in vitro were detected by CCK-8 method,and the IC 50 value was calculated.[Results]The four extracts inhibited the growth of the three tumor cell lines in vitro,among which the n-butanol extract had the best anti-tumor activity.The IC 50 values of the n-butanol extract on human gastric cancer(SGC-7901),human breast cancer(MCF-7)and human liver cancer(BEL-7404)cell lines were 0.23,0.25 and 0.58 mg/mL,respectively.[Conclusions]The ethanol extract of Mahoniae caulis under petroleum ether,ethyl acetate,n-butanol and aqueous solution had certain anti-tumor effect,and n-butanol extract had the best anti-tumor activity.

基于网络药理学探究功劳木治疗严重蜂蜇伤的作用机制及分子对接研究

目的 基于网络药理学及分子对接技术预测功劳木治疗严重蜂蜇伤的潜在靶点,并探究其可能的作用机制。方法 通过化学专业数据库获得功劳木的有效成分。利用中药分子机制的生物信息学分析工具(BATMAN-TCM)、SwissTargetPrediction、PubMed数据库获得功劳木有效成分的靶点并与GeneCards数据库获得的蜂蜇伤相关靶点取交集,通过String数据库对交集靶点构建蛋白相互作用(PPI)分析网络。利用Cytoscape软件及其MCODE聚类插件获得核心靶点。通过分子对接技术验证预测结果。结果 分析后获得4个核心成分和8个核心靶点,并进行分子对接,结果表明有较强的结合能力。涉及5-羟色胺能突触通路、花生四烯酸代谢通路、TRP通道的炎症介质调节等通路。结论 功劳木治疗严重蜂蜇伤的作用机制可能主要与5-羟色胺能突触通路、花生四烯酸代谢通路、TRP通道的炎症介质通路等有关。

不同方法分析十大功劳中生物碱类成分的比较

比较紫外分光光度法和HPLC法分析不同产地十大功劳药材中生物碱类成分的差异。通过高效液相色谱法测量药根碱、小檗碱、巴马汀含量,以三者含量之和为总生物碱含量。并用紫外分光光度法测量总生物碱含量,以小檗碱为对照,测定波长为345 nm。最后两种方法测定结果中,15个样品中不合格的有2个,紫外分光光度法测定结果低于液相色谱的有3个。十大功劳药材质量评价仍应选择HPLC法。

功劳木及同属6种药用植物的红外光谱研究

对功劳木及同属６种药用植物的石油醚、乙醚和水提取物进行红外光谱测定，其红外光谱的差异能大体反映出不同样品间化学成分相对差异的大小。该法可为在同科属植物中寻找新药源的工作提供信息。

复方黄芩片质量标准的研究

目的建立复方黄芩片的质量控制标准。方法采用薄层色谱法对复方黄芩片中的黄芩、虎杖、功劳木等进行了定性鉴别。采用HPLC法对制剂中的黄芩苷进行了含量测定。流动相:甲醇-0.4%磷酸(50∶50),流速:1.4mL/min;柱温:40℃;检测波长:278nrn。结果鉴别项下阴性对照无干扰,专属性强;黄芩苷在0.12～0.72μg范围内有良好线性关系(r=0.9996),平均回收率为97.17%,RSD=1.78%(n=5)。结论该方法可为复方黄芩片的质量评价提供科学依据。

功劳木质量标准的改进

目的改进功劳木Mahoniae Caulis的质量标准。方法通过TLC、HPLC法,分别定性鉴别、定量测定盐酸巴马汀、盐酸药根碱、盐酸小檗碱;参照2015年版《中国药典》四部通则,测定水分、总灰分、酸不溶性灰分、醇浸出物含有量。结果 TLC斑点清晰,分离度良好。水分、总灰分、酸不溶性灰分、醇浸出物平均含有量分别为4.21%、3.40%、0.35%、5.78%。盐酸药根碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱分别在0.125~1.004、0.053~0.424、0.146~1.171μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均加样回收率(RSD)分别为96.45%(0.58%)、100.35%(3.60%)、97.86%(2.37%)。结论该方法稳定可靠,重复性好,可用于功劳木的质量控制。

快速液相法同时测定鸡血藤原儿茶酸、儿茶素和表儿茶素的含量

【目的】建立快速液相色谱法同时测定鸡血藤药材中原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素含量。【方法】采用Phenomenex Kinetex XB-C18（4.6 mm×100 mm,2.6μm）色谱柱,以乙腈—磷酸—水为流动相,等度洗脱（体积比为10∶90）,流速1.3mL/min,柱温25℃,检测波长260 nm,进样体积2μL。【结果】原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素的线性范围分别0.091 6～0.549 6μg（r=0.999 7）、0.772～3.86μg（r=0.999 4）、0.670 5～4.023μg（r=0.999 7）;平均加样回收率分别为102.96%（sR=1.62%）、99.44%（sR=2.68%）、97.34%（sR=1.88%）。【结论】该方法简便、快捷,可用于鸡血藤中原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素的含量测定,可为鸡血藤的质量控制研究提供参考。

功劳木中总生物碱固-液萃取动力学研究

研究功劳木药材中总生物碱的固-液萃取动力学特征，为总生物碱的萃取条件选择和优化提供依据。基于Fick第一扩散定律，以萃取体系溶液中总生物碱浓度为目标函数，建立功劳木中总生物碱的固-液萃取动力学方程，探讨药材原料粒度、液固比、萃取温度及时间等因素对总生物碱萃取的影响。实验结果表明，所建立的动力学方程完全能够描述功劳木中总生物碱的固-液萃取过程，减少原料粒度、提高萃取温度有利于功劳木中总生物碱的萃取，在5ц20 mL/g范围内，液固比总生物碱的萃取影响不大。研究结果对功劳木中总生物碱的工业萃取条件选择具有指导作用。

超声辅助提取功劳木中盐酸小檗碱工艺研究

为了优化功劳木中盐酸小檗碱的超声波辅助提取工艺,采用单因子实验和L9(34)正交实验设计,研究了超声时间、超声功率、乙醇浓度、提取温度、液料比、筛分目数对功劳木中盐酸小檗碱提取的影响。结果表明,影响盐酸小檗碱得率的主次因素为乙醇浓度,液料比,超声时间,超声功率;经正交实验确定功劳木盐酸小檗碱最佳提取工艺条件为:乙醇浓度80%,超声提取时间为30min,超声功率选择为500W,液料比为9,经5次平行实验验证,该实验工艺稳定可靠,与对照实验相比,盐酸小檗碱得率可提高56.1%。

功劳木有效成分的指纹图谱及含量测定研究

目的立全面评价功劳木的高效液相指纹图谱,为科学评价和有效控制质量提供可靠方法。方法采用高效液相色谱方法分析阔叶十大功劳和细叶十大功劳的生物碱成分和非生物碱成分指纹图谱。结果运用指纹图谱相似度软件和系统聚类分析,确定了17个色谱峰为共有峰,其中指认出6个峰,指纹图谱相似度都在0.8以上。并测定了功劳木3个有效成分(药根碱,巴马亭,小檗碱)的含量,其回收率分别为97.83%,100.03%,100.08%和线性条件良好(r>0.999 0)。结论本法简便,特征性强,化学信息比较全面,可用于不同产地功劳木药材的指纹图谱鉴定和质量评价。

丁公藤东莨菪内酯含量测定方法的优化研究

【目的】优化丁公藤东莨菪内酯高效液相色谱（HPLC）含量测定方法。【方法】采用甲醇—体积分数5%HCl直接提取东莨菪内酯,并采用Waters X Bridge Shield RP18（4.6 mm×250 mm,5μm）为色谱柱,乙腈—体积分数0.16%冰醋酸水为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,检测波长为298 nm。【结果】东莨菪内酯在2.83~118μg/m L内线性关系良好,平均回收率为99.47%（相对标准偏差sR=1.07%）。【结论】该方法操作简单,重复性好,可为合理制定丁公藤的含量测定方法提供参考。

不同中药配伍对关木通毒性成分马兜铃酸A含量的影响

【目的】观察比较关木通及龙胆泻肝汤各拆方组中马兜铃酸A的变化趋势,探讨中药配伍对马兜铃酸A含量的影响。【方法】按龙胆泻肝汤原方比例将供试样品分7组:关木通组、全方组、关木通+清热组、关木通+滋阴组、关木通+利水组、关木通+甘草组、阴性对照组(全方去关木通);采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,以DiamonsilTM(钻石)C18(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,以甲醇—水—冰乙酸(体积比74:24:1)为流动相,检测波长315 nm,测定各组中马兜铃酸A的含量。【结果】与关木通组相比,龙胆泻肝汤全方中马兜铃酸A含量最低;关木通+滋阴组马兜铃酸A含量也有明显降低。【结论】在方剂配伍理论指导下,通过合理配伍降低关木通的毒性是可行的。

中药功劳木提取物对肿瘤MDR的逆转作用

目的:研究中药功劳木的4种不同工艺提取物逆转肿瘤多药耐药性(multidrug resistance,MDR)的作用,以开发新型的肿瘤MDR逆转剂。方法:采用MTT法检测4种提取物的细胞毒性及其对阿霉素(adriamycin,ADM)的增敏效果;罗丹明123(Rhodamine123,Rh123)蓄积实验检测4种提取物对细胞内药物浓度及P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)功能的影响;流式细胞仪检测4种提取物对耐药肿瘤细胞凋亡的影响。结果:10 mg/L为4种提取物的无毒剂量;在此剂量下,4种提取物对K562/ADM细胞逆转倍数分别为Ⅰ-4.81倍,Ⅱ-2.31倍,Ⅲ-4.17倍,Ⅳ-2.39倍,对MCF-7/ADM细胞的逆转倍数分别为Ⅰ-1.82倍,Ⅱ-1.40倍,Ⅲ-2.54倍,Ⅳ-1.51倍;此剂量的4种提取物应用后,使K562/ADM细胞凋亡率分别增加了Ⅰ-13.27%、Ⅱ-7.03%、Ⅲ-20.24%、Ⅳ-11.75%,使MCF-7/ADM细胞凋亡率分别增加了Ⅰ-6.3%、Ⅱ-3.67%、Ⅲ-8.6%、Ⅳ-3.48%。结论:中药功劳木的4种不同工艺提取物能够不同程度的逆转肿瘤细胞的MDR,抑制肿瘤细胞膜上P-gp的“药泵”功能,增加耐药细胞内药物浓度,有望成为肿瘤多药耐药逆转剂的候选药物。

野木瓜的研究进展

木通科植物野木瓜藤茎在江西一带民间用作止痛药已有相当长的历史,收载于《中国药典》1977版及2010版。本文综述了本品近20年来在基源、形态、化学、药效及质量分析方面的研究情况,为本品的开发利用提供有用的信息。

鸡血藤与其常见混淆品的薄层色谱鉴别研究

【目的】探讨鸡血藤与其常见混淆品的薄层色谱鉴别条件,并开展鸡血藤薄层色谱指纹图谱的初步研究,分析不同居群鸡血藤野生种质在化学组分上的差异。【方法】采用三氯甲烷—甲醇—甲酸(体积比为7∶1∶0.2)和三氯甲烷—丙酮—甲酸(体积比为8∶1∶0.5)为展开剂,体积分数5%硫酸乙醇溶液显色,可鉴别鸡血藤与其常见混淆品;三氯甲烷—甲醇—甲酸(体积比为10∶1∶0.4)能很好地分离不同居群鸡血藤中的组分,采用Ntsys 2.10软件非加权组平均法(UPGMA)聚类分析不同居群鸡血藤种质品质间的差异性。【结果】建立了鸡血藤与其常见混淆品的薄层色谱鉴别方法;建立了13个特征荧光斑点构成的鸡血藤薄层色谱指纹图谱。通过聚类分析,可将11个不同居群正品鸡血藤归为4类。【结论】薄层色谱法可以有效地鉴别鸡血藤类药材,不同居群鸡血藤野生种质品质间存在较大的差异性。

HPLC法测定不同产地功劳木中3个有效成分

目的测定功劳木中3,4,5-三甲氧基苯酚-1-O-β-D-葡萄糖苷(1)e、rythro-syringoylglycerol-8-O-β-D-glucoside(2)、5,5'-二甲氧基落叶松脂醇-4'-O-β-D-葡萄糖苷(3),为功劳木质量控制提供科学依据。方法采用高效液相色谱法,依利特Hypersil-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-水(14∶86);检测波长280 nm;体积流量1 mL/min;柱温25℃。结果化合物12,,3分别在0.12～2.40μg(r=0.999 5),0.20～4.00μg(r=0.999 6),0.07～1.40μg(r=0.999 6)与峰面积Y线性关系良好,平均加样回收率依次为100.3%,98.8%,97.2%(n=6)。结论该方法快速,简单,重复性好,适用于同时测定功劳木中化合物12,3,。

正交设计优选功劳木中盐酸小檗碱提取工艺

目的:优选功劳木中盐酸小檗碱的提取工艺。方法:以盐酸小檗碱的含量为指标,应用正交试验设计筛选功劳木的最佳提取工艺条件。结果:最佳提取工艺为D3A2B3C2,即用8倍量的70%乙醇热回流提取3次,每次2h。结论:优选得到的工艺稳定可行。

平远岗梅基地药材质量评价研究

【目的】对基地和市售岗梅商品药材进行质量调查和评价。【方法】参照2010年版《中华人民共和国药典》附录ⅨH、ⅩA方法检测19批商品药材的醇溶性浸出物,采用《广东省中药材标准》中岗梅项下方法对药材进行显微鉴别,并优化薄层鉴别,建立岗梅指纹图谱。指纹图谱采用Waters XBridge TM C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以乙腈—体积分数0.2%磷酸梯度洗脱,流速1.0 m L/min,检测波长220 nm。【结果】样品性状、显微及薄层鉴别结果显示：收集的样品为正品,但有根茎混用现象;高效液相色谱（HPLC）指纹图谱分析结果通过相似度分析软件确定了7个共有色谱峰,检测的15批基地药材相似度均达到0.9以上,19批商品岗梅药材中有11批相似度达到0.9以上;样品醇溶性浸出物范围为64.55~186.18mg/g。【结论】收集的商品药材均为正品,但根茎混用以及生长年限不够等现象导致质量参差不齐,基地药材质量较好;本研究建立的质量评价方法可为岗梅根药材的质量评价与质量控制提供参考依据。

功劳木中总生物碱的含量测定

目的：采用柱色谱-紫外分光光度法测定功劳木中总生物碱（以盐酸小檗碱计）含量的方法,为功劳木药材的质量控制提供科学的依据.方法：用柱色谱-紫外分光光度法,以盐酸小檗碱为对照品,采用盐酸-甲醇（1：100）冷浸后超声提取,经过中性氧化铝柱分离纯化,在265 nm处测定功劳木药材的含量.结果：盐酸小檗碱浓度在2.11～12.66 μg＆#183;mL-1时具有良好的线性关系（r2=0.9995）,平均回收率为98.61％,重复性试验RSD为1.31％（n=6）.结论：柱色谱-紫外分光光度法测定功劳木中总生物碱含量,方法操作简便可靠,重现性好,可以作为功劳木药材的质量控制方法之一.

功劳木中生物碱类成分抗氧化活性研究

利用DPPH法测定功劳木中生物碱成分的抗氧化活性，采用pH-区带精制逆流色谱分离出小檗碱、药根碱、巴马汀、非洲防己碱和千金藤宁碱5种成分。通过测定功劳木总生物碱以及单体生物碱成分对DPPH自由基清除力，来评价功劳木中主要生物碱类成分的体外抗氧化能力。结果显示，在0～25μg／mL范围内DPPH溶液浓度与吸光度呈线性正相关关系。功劳木总生物碱、小檗碱、药根碱、巴马汀、非洲防己碱以及千金藤宁碱的半抑制浓度（IC50）依次为0．07、0．32、0．24、0．20、0．18、0．59mg／mL。因此，功劳木生物碱类成分具有一定的抗氧化能力，且随生物碱浓度的升高而增强，总生物碱抗氧化能力强于单体成分。功劳木生物碱抗氧化活性可能为协同效应。