Caveolin-1介导流体剪切应力调控MC3T3-E1成骨细胞增殖和凋亡

背景:流体剪切应力在成骨细胞增殖和凋亡中起着重要作用。然而,Caveolin-1(Cav-1)是否参与成骨细胞中流体剪切应力诱导的增殖与凋亡过程尚不清楚。目的:探讨Cav-1在流体剪切应力调控成骨细胞增殖和凋亡中的作用。方法:选择生长状态良好的MC3T3-E1成骨细胞,加载不同时间(0,30,60,90 min)且强度为1.2 Pa的流体剪切应力,观察Cav-1蛋白的表达,筛选出时间为60 min的条件进行实验。将MC3T3-E1细胞分为:对照组、流体剪切应力组、流体剪切应力+pcDNA 3.1组(对照)、流体剪切应力+pcDNA Cav-1组(过表达质粒),分别采用流体剪切应力和过表达Cav-1等方式干预,通过q RT-PCR和Western blot检测MC3T3-E1细胞内增殖以及凋亡相关分子的表达量;通过CCK-8与Ed U实验检测MC3T3-E1细胞增殖活性;采用Hoechst 33258染色以及流式细胞术检测MC3T3-E1细胞凋亡情况。结果与结论:加载流体剪切应力后MC3T3-E1细胞中Cav-1的表达显著下调,且加载60 min表达水平最低。过表达Cav-1减弱了流体剪切应力促进MC3T3-E1细胞增殖及抑制细胞凋亡的效应。说明Cav-1在流体剪切应力调节成骨细胞增殖和凋亡过程中具有重要的作用,并可能为骨质疏松症提供潜在治疗策略。

芹菜素调控Caveolin-1对慢性心力衰竭大鼠血管紧张素1-7及左室舒张功能的影响

目的:探讨芹菜素通过调控窖蛋白-1(Caveolin-1)对慢性心力衰竭(CHF)大鼠血管紧张素1-7(Ang1-7)及左室舒张功能的机制研究。方法:按照随机数字表法将大鼠分为假手术(Sham)组、CHF组、芹菜素组、Caveolin-1组及联合组,每组10只,除Sham组外均建立CHF大鼠模型。建模后24 h,芹菜素组大鼠腹腔注射2 mg/kg的芹菜素,Caveolin-1组腹腔注射1.2 mg/kg的Caveolin-1质粒的脂质体溶液,联合组大鼠腹腔注射2 mg/kg的芹菜素及1.2 mg/kg的Caveolin-1质粒的脂质体溶液,Sham组及CHF组大鼠腹腔注射等体积生理盐水。比较各组大鼠心脏收缩及舒张功能指标、血清因子水平;苏木精-伊红(HE)染色检测心肌组织病理形态;电镜观察心房超微结构;免疫组化检测心肌组织血管生成情况;蛋白免疫印迹检测心肌组织Caveolin-1、缺氧诱导因子1(HIF-1)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白水平。结果:CHF组与Sham组比较,大鼠左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)、Ang1-7及Caveolin-1蛋白、HIF-1蛋白、VEGF蛋白降低,左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期容积(LVEDV)、左心室收缩末期容积(LVESV)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(ALD)、肾素活性(PRA)升高,差异有统计学意义(P<0.05);芹菜素组、Caveolin-1组与CHF组比较,大鼠LVEF、LVFS、Ang1-7、Caveolin-1蛋白、HIF-1蛋白、VEGF蛋白及血管数目升高,LVESD、LVEDD、LVEDV、LVESV、AngⅡ、ALD、PRA降低,差异有统计学意义(P<0.05);芹菜素组与Caveolin-1组各指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05);联合组与芹菜素组及Caveolin-1组各指标比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:芹菜素对慢性心力衰竭大鼠心脏舒张及收缩功能具有改善作用,并可通过上调Ang1-7改善心肌重塑从而保护心脏,其机制可能与激活Caveolin-1表达而增加心肌新生血管相关。

迷迭香酸对H_(2)O_(2)诱导的视网膜色素上皮细胞衰老及HMGB1,Caveolin-1通路的影响

目的探讨迷迭香酸(RA)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)衰老的作用及可能机制。方法首先用不同浓度(100,200,400,800,1600μmol/L)H_(2)O_(2)处理ARPE-19细胞,CCK-8法检测细胞增殖,筛选合适的H_(2)O_(2)浓度构建细胞衰老模型。然后将ARPE-19细胞分为对照组、H_(2)O_(2)组(200μmol/L)和不同浓度(20,40,80μmol/L)RA预处理+H_(2)O_(2)(200μmol/L)组,CCK-8法检测细胞增殖,筛选最佳RA干预浓度。最后将ARPE-19细胞分为对照组、H_(2)O_(2)组(200μmol/L)、H_(2)O_(2)(200μmol/L)+RA(80μmol/L)组,用倒置显微镜观察各组细胞形态,SA-β-gal染色法检测细胞衰老情况,Western blotting检测衰老标志蛋白P16、P21的表达以及HMGB1,Caveolin-1的表达。结果ARPE-19细胞增殖率随H_(2)O_(2)刺激浓度的增加而降低(各浓度组两两比较,均P<0.01),随着RA浓度的增加而增加(各浓度组两两比较,均P<0.01)。倒置显微镜观察显示,与对照组相比,H_(2)O_(2)组ARPE-19细胞数量明显减少,细胞衰老率明显增加(均P<0.05);与H_(2)O_(2)组相比,H_(2)O_(2)+RA组ARPE-19细胞数量明显增多,细胞衰老率明显降低(均P<0.05)。Western blotting检测显示,H_(2)O_(2)组细胞P16,P21蛋白表达较对照组明显增加(P<0.05);H_(2)O_(2)+RA组细胞P16,P21蛋白表达较H_(2)O_(2)组明显降低(P<0.05);H_(2)O_(2)组细胞HMGB1和Caveolin-1的蛋白表达较对照组明显增加(P<0.05);H_(2)O_(2)+RA组细胞HMGB1和Caveolin-1的蛋白表达较H_(2)O_(2)组明显降低(均P<0.05)。结论RA可以减轻H_(2)O_(2)诱导的ARPE-19细胞衰老,其机制可能与RA抑制HMGB1和Caveolin-1的激活有关。

Caveolin-1蛋白及其对血脑屏障通透性改变调节作用研究

血脑屏障(blood brain barrier)是人体血液与脑组织液进行物质交换的重要保护屏障系统,对中枢神经系统微环境稳态起着重要作用。Caveolin-1是横跨膜的支架蛋白,可以通过不同信号通路的转导、内吞、转细胞、胆固醇转运和脂质稳态作用,调节细胞增殖、凋亡、迁移、分化、血管生成等作用,是神经系统中非常重要的蛋白。本论文主要从Caveolin-1的结构、功能、相关通路、及治疗出发,对血脑屏障通透性改变调节进行论述,对脑血管相关疾病的治疗提供思路。

Caveolin-2通过Hippo信号通路调控LPS诱导的小鼠肺泡巨噬细胞凋亡

目的探讨Caveolin-2(Cav-2)调控Hippo信号通路在LPS诱导下对肺泡巨噬细胞(MH-S)凋亡的作用。方法使用LPS诱导建立MH-S细胞凋亡模型,质粒构建Cav-2低表达和过表达模型。CCK-8检测细胞活力。ELISA检测细胞培养上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6含量。ROS检测细胞活性氧水平。qRT-PCR检测Cav-2、YAP、TNF-α、IL-1β及IL-6基因表达水平。Western blot检测Cav-2蛋白、Hippo信号通路相关蛋白和细胞凋亡相关蛋白的表达水平,细胞免疫荧光检测Cav-2、YAP蛋白的荧光表达水平。结果随着LPS作用浓度的升高,MH-S细胞活力下降,促凋亡蛋白Bak、Bax、cleaved-Caspase-3/Caspase-3表达水平升高,抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平降低(P<0.05)。YAP的表达水平升高,p-YAP的表达水平降低(P<0.05)。Cav-2表达水平升高(P<0.05)。随着LPS作用时间的增加,YAP蛋白的表达水平升高,p-YAP蛋白的表达水平降低(P<0.05),Cav-2的表达水平升高(P<0.01)。与LPS组相比,Cav-2低表达组TNF-α、IL-1β和IL-6的基因及蛋白表达水平降低(P<0.05),细胞活性氧生成减少(P<0.05),YAP的mRNA、蛋白及荧光表达水平降低,p-YAP蛋白表达水平升高(P<0.05),促凋亡蛋白表达水平降低,抗凋亡蛋白表达水平升高(P<0.05);而Cav-2过表达组结果与上述结果相反。结论靶向抑制Cav-2的表达可以增加YAP的磷酸化,激活Hippo信号通路,减少ROS生成,抑制炎症因子释放,抑制细胞凋亡,Cav-2可能作为干预肺部炎性疾病的潜在治疗靶标。

Caveolin-1的结构及其在骨代谢中的生物学功能

Caveolin-1(Cav1)是小窝(Caveolae)的结构蛋白组成部分,是多种信号分子中的主要调控因子,参与包括信号转导、胞吞作用、胆固醇分布和细胞迁移等在内的多种细胞过程,是多种疾病预防和治疗的候选靶点。随着研究的深入,Cav1在维持骨代谢平衡中的作用也被发现。本文综述了Cav1的基因结构和蛋白结构,分别从间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨、成脂分化和造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSCs)破骨分化方向总结了Cav1对骨代谢的调控机制。

老年2型糖尿病患者血清CYR61、caveolin-1水平与骨质疏松症的关系

目的探讨血清高半胱氨酸蛋白61(CYR61)、小凹蛋白-1(caveolin-1)水平与老年2型糖尿病(T2DM)患者合并骨质疏松症的关系。方法选取2020年3月至2022年8月就诊的208例T2DM患者作为研究对象。记录患者一般资料,根据骨密度检测结果分为骨量正常组(骨密度T值>1)60例、骨量减少组(-2.5<骨密度T值≤-1)62例、骨质疏松组(骨密度T值≤-2.5)86例。采用酶联免疫吸附法检测血清CYR61、caveolin-1水平,采用全自动电化学发光仪检测骨代谢标志物Ⅰ型前胶原N端前肽(PINP)、骨钙素(BGP)、25羟基维生素D_(3)[25(OH)D_(3)]、Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(β-CTX)的水平;采用Pearson法分析T2DM合并骨质疏松症患者血清CYR61、caveolin-1水平与各指标的相关性;采用logistic多因素回归分析T2DM患者合并骨质疏松症的影响因素。结果骨质疏松组糖尿病病程、β-CTX显著高于骨量减少组和骨量正常组,血清CYR61、caveolin-1、PINP、BGP、25(OH)D_(3)水平显著低于骨量减少组和骨量正常组(P<0.05)。骨量减少组糖尿病病程、β-CTX显著高于骨量正常组,血清CYR61、caveolin-1、PINP、BGP、25(OH)D_(3)水平显著低于骨量正常组(P<0.05)。T2DM合并骨质疏松症患者CYR61与caveolin-1水平呈正相关(r=0.500,P<0.05),二者与PINP、BGP、25(OH)D_(3)呈正相关,与糖尿病病程、β-CTX呈负相关(P<0.05)。CYR61、caveolin-1是T2DM患者合并骨质疏松症的保护因素(P<0.05)。结论老年T2DM合并骨质疏松症患者血清CYR61、caveolin-1低表达,可一定程度反映患者骨代谢情况。

Caveolin-1与中枢神经系统疾病

Caveolae是细胞膜上特定的50～100 nm的微区域，呈烧瓶状，主要由caveolin、胆固醇、鞘磷脂、鞘糖脂、酰基鞘氨醇和糖基磷脂酰肌醇（ glycosyl phosphatidyl inositol ， GPI）锚着蛋白组成，可单独或成串出现，形成一个不被去垢剂溶解的区域。 Palada于1953年首先在电镜下发现了caveolae结构，并将之命名为质膜小泡（ plasmalemmal vesicle ）。2年后， Yamada 报道了相似的结果，并将之命名为小窝蛋白（caveolae）［1］。 caveolae的主要作用是介导细胞的内化和胞吞转化。

Caveolin-1在大鼠肝脏不同发育阶段的表达及意义

胞膜窖（Caveolae）是一种细瓶颈状的细胞膜内陷结构,由Palade等（1953）首次发现,后来由Yamada命名.Caveolin-1是相对分子质量为21 000～24 000的整合膜蛋白,是胞膜窖的主要结构成分.至今已克隆到caveolin基因家族中的3个成员：CAV1、CAV2和CAV3.因组织分布和序列结构的不同,又可产生5种mRNA和6种基因产物,分别命名为窖蛋白1α、1β、2α、2β、2γ和3[2].

缺氧肾小管上皮细胞Rab7/Caveolin-1/MMP-2轴失调促进肾纤维化

目的:研究肾纤维化晚期Ras相关GTP结合蛋白7(Ras-related GTP binding protein 7,Rab7)可否通过小窝蛋白-1(Caveolin-1)的介导调节基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2, MMP-2)的活性,从而对肾纤维化产生影响。方法:通过单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction, UUO)法构建C57BL/6小鼠肾纤维化模型,检测肾纤维化组织中缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)、Rab7和Caveolin-1的表达以及MMP-2的活性。利用肾小管上皮细胞株(HK-2)进行体外实验,构建HK-2 Rab7-shRNA细胞,将HK-2和HK-2 Rab7-shRNA细胞分别进行常氧和缺氧培养,并检测各组中HIF-1α、Rab7、Caveolin-1的表达和MMP-2的活性,以及纤维化相关指标I型胶原(Collagen-1)、波形蛋白(Vimentin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)的表达。结果:利用小鼠UUO模型发现,相较正常肾脏组织,肾纤维化组织中Rab7和Caveolin-1的表达均上调,而MMP-2的活性反而下降。进一步体外实验显示,在HK-2细胞中Rab7下调后可通过抑制Caveolin-1的表达进而提高MMP-2的活性,并会使Collagen-1、Vimentin和α-SMA等反映纤维化的指标表达下调。结论:Rab7与MMP-2的活性密切相关;Rab7对MMP-2活性的调节通过Caveolin-1介导;当Rab7表达受抑后,可促进肾纤维化的缓解。

依达拉奉通过Caveolin-1/VEGF信号通路促进缺血性卒中大鼠脑血管新生及神经功能修复的作用机制探讨

目的探讨依达拉奉促进缺血性卒中大鼠脑血管新生及神经功能修复的作用机制。方法选择无特定病原(SPF)级SD雄性大鼠60只。随机取12只作为假手术组,剩余48只大鼠通过阻塞大脑中动脉血流构建缺血性卒中模型,并分为缺血性卒中组、依达拉奉组、抑制剂组和依达拉奉+抑制剂组,每组12只。通过Morris水迷宫检测认知功能,通过2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测脑梗死面积。取全脑组织,冷冻切片后通过免疫荧光法观察缺血核心区小凹蛋白-1(Caveolin-1)/CD34、双肾上腺皮质激素(DCX)/5-溴脱氧尿苷(BrdU)蛋白荧光强度。取脑组织缺血侧基底结区组织,通过Western blot法检测Caveolin-1、血管内皮生长因子(VEGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)与酪氨酸激酶受体B(TrkB)蛋白表达水平。结果与假手术组相比,缺血性卒中组大鼠神经功能评分增加,逃避潜伏期增加且穿越平台次数减少,Caveolin-1、CD34荧光强度增加,Caveolin-1与VEGF蛋白表达增加,BDNF、TrkB、DCX和BrdU蛋白表达减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与缺血性卒中组相比,依达拉奉组大鼠神经功能评分、逃避潜伏期减少,穿越平台次数增加,脑梗死面积减少,Caveolin-1与CD34共表达提高,Caveolin-1、VEGF蛋白表达水平进一步增加,BDNF、TrkB、DCX和BrdU蛋白表达增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与依达拉奉组相比,抑制剂组与依达拉奉+抑制剂组大鼠Caveolin-1与VEGF蛋白表达降低,Caveolin-1与CD34共表达减少,脑梗死面积与逃避潜伏期增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论依达拉奉的抗缺血性卒中作用与Caveolin-1/VEGF信号通路激活相关,并通过促进神经血管新生,恢复缺血区血供,减轻大鼠神经功能损伤,提高认知功能。

Caveolin-1蛋白和妊娠期糖尿病产妇胎盘组织中糖脂代谢信号转导通路和妊娠结局的关联研究

目的 探讨小凹蛋白-1(Cav-1)与妊娠期糖尿病(GDM)产妇胎盘组织中糖脂代谢信号转导通路和妊娠结局的关系。方法 选择2021年1—12月于本院进行产检并住院分娩的GDM产妇所产新生儿120例作为研究对象,根据产妇分娩结果将其分为GDM合并巨大儿(GDMM组,46例)与GDM合并正常新生儿(GDMN组,74例),另选同期在本院产检并住院分娩的正常产妇所产正常新生儿60名作为正常对照组。检测GDM产妇胎盘组织中Cav-1、GLUT1、p-AMPK(Thr172)以及p-ACC(Ser79)的蛋白表达水平并进行分析。结果 GDMM组产妇体质指数(孕前、分娩前)、孕期体重增加、空腹血糖(孕中期、孕晚期)、新生儿出生体重均分别明显高于GDMN组(P<0.05)。GDMM组产妇Cav-1、p-AMPK(Thr172)及p-ACC(Ser79)蛋白表达量均分别明显低于GDMN组,GLUT1蛋白表达量明显高于GDMN组(P<0.05)。新生儿出生体重与胎盘组织Cav-1、p-AMPK(Thr172)及p-ACC(Ser79)蛋白表达呈负相关(均P<0.05),与胎盘组织GLUT1呈正相关(P<0.05);胎盘组织Cav-1与GLUT1蛋白表达呈负相关(P<0.05),与p-AMPK(Thr172)及p-ACC(Ser79)蛋白表达呈正相关(均P<0.05);胎盘组织GLUT1与p-AMPK(Thr172)及p-ACC(Ser79)蛋白表达呈负相关(均P<0.05);胎盘组织p-AMPK(Thr172)与p-ACC(Ser79)蛋白表达呈正相关(P<0.05)。结论 GDM产妇胎盘组织中糖脂代谢信号转导通路相关蛋白的表达与新生儿出生体重密切有关,并参与了巨大儿的发生,应予以重视。

Caveolin与脑功能关系的研究进展

Caveolin作为细胞质膜微囊——Caveolae的标志蛋白,参与Caveolae的形成、定位,并具有介导膜泡运输、维持细胞胆固醇稳态和调控信号转导等功能.近年来发现,Caveolin与脑功能的生理或病理变化有关,在神经发育、突触可塑性以及神经退行性疾病中起着重要的作用.结合最新的研究进展和前期实验结果,简单介绍Caveolin的结构和功能,并对其在脑功能中的调控作用作一阐述与展望.

caveolin-1、Dnmt1基因与胃癌发生发展的关系及其临床意义

目的:研究正常胃黏膜及胃癌组织中caveolin-1、Dnmt1蛋白的表达,并探讨caveolin-1、Dnmt1基因与胃癌发生发展的关系及其临床意义.方法:采取甲基化特异性聚合酶链反应(methylation-specific PCR,MSP)检测不同分化程度的60例胃癌组织(其中包括新鲜组织50例、石蜡包埋组织10例)和14例正常胃组织中caveolin-1基因启动子区域甲基化状态;同时用SP免疫组织化学法、原位杂交法检测caveolin-1蛋白、Dnmt1蛋白及mRNA的表达.结果:14例正常胃组织中,未检测到caveolin-1基因甲基化;在60例胃癌组织中,检测到44例胃癌组织中存在甲基化,甲基化发生率为73.33%,两组间差异具有统计学意义(P<0.005).caveolin-1基因甲基化的发生与患者年龄有关.60例胃癌标本中,caveolin-1蛋白阳性表达率仅为30%(18/60),Dnmt1蛋白阳性表达率为63.3%(38/60),Dnmt1基因mRNA阳性表达率为53.3%(32/60).结论:在胃癌组织中,caveolin-1基因可能在Dnmt1基因的作用下发生甲基化,丧失其活性,进而导致胃癌的发生、发展.

大鼠心肌APJ受体及caveolin-1/ERK1/2表达的年龄变化研究

目的apelin是新发现的内源性肽,其受体是G蛋白偶联受体APJ,该实验比较不同年龄大鼠心肌APJ受体及信号分子caveolin-1/ERK1/2的表达差异。方法采用West-ern blot方法观察胎鼠、乳鼠、成年鼠、老龄鼠等不同年龄阶段心肌组织APJ受体、ERK1/2、pERK1/2、caveolin-1的表达及其增龄性变化。结果随年龄增长APJ受体、caveolin-1表达增加,ERK1/2及pERK1/2随年龄增长表达减少。结论APJ受体及其caveolin-1/ERK1/2途径可能与心脏的生长发育、衰老过程有关。

大鼠脑内caveolin-1蛋白的表达及其在分辨学习中的作用

Caveolin-1(Cav-1)蛋白作为细胞质膜结构小窝(caveolae)的标志蛋白,在胆固醇运输、膜组装、信号转导和细胞转化过程中扮演重要的角色。为了探讨Cav-1蛋白在中枢神经系统可塑性及学习记忆中的作用,本文以Sprague-Dawley大鼠为实验对象,利用蛋白质免疫印迹杂交方法观察了Cav-1蛋白在不同年龄大鼠脑内表达的特征,并研究了Y-迷宫训练前后Cav-1蛋白表达的变化。结果表明:(1)大鼠不同脑区Cav-1蛋白表达的年龄特征不同。海马内的表达属青年鼠最高,其次是老年鼠和幼年鼠;皮层内的表达属幼年鼠最高,其次是老年鼠,青年鼠最低;小脑内的表达无明显年龄差异。(2)Y-迷宫训练引起青年鼠海马和前额叶皮层内Cav-1蛋白的表达显著增加。结果提示,Cav-1蛋白与动物脑发育和学习记忆有密切关系,可能参与中枢可塑性的调节。

补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠脑内caveolin1、2的影响

目的探讨补阳还五汤对局灶性脑缺血大鼠脑内caveolin1、2的影响。方法采用大脑中动脉阻塞法复制脑缺血模型,将动物随机分为正常组、假手术组、模型组、补阳还五汤组,分别给予不同处理,在12 h、1、3、7 d不同时间点处死动物,采用免疫组织化学法观察caveolin1、2的表达。结果补阳还五汤能显著减轻神经功能缺损;正常脑内有一定量的caveolin1、2表达,缺血后caveolin1、2迅速增加,分别于术后3 d或1 d达高峰,补阳还五汤组显著提高caveolin1、2的表达,在3、7 d时模型组与补阳还五汤组差异有统计学意义(P<0.01)。结论补阳还五汤可调节脑缺血后caveolin1、2的表达,是其促进神经功能恢复的可能机制之一。

Caveolae/Caveolins与病毒感染

Caveolae是直径为 5 0～ 10 0nm的细胞表面特异性内陷结构 ,Caveolins是它的主要标志蛋白。Caveolae/Caveolins在许多生理、病理活动中起重要作用。近年来还发现 ,Caveolae/Caveolins介导了许多病毒的感染 ,参与了病毒的吸附、穿入、转运、生物合成、组装及出泡等环节。这一病毒感染途径的发现 ,有助于抗病毒新药的开发和肿瘤治疗新领域的开辟。

Daxx通过上调caveolin-1的表达介导Ox-LDL诱导巨噬细胞胆固醇蓄积和凋亡(英文)

为探讨Daxx对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,Ox-LDL)诱导巨噬细胞胆固醇蓄积和凋亡的介导作用及其可能的分子机制,用高效液相色谱法检测细胞内胆固醇含量,油红O染色观察细胞内脂滴的形成情况,流式细胞术和吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色法研究Ox-LDL对细胞凋亡的影响,Realtime RT-PCR检测细胞内Daxx mRNA的表达水平,Western blot检测caveolin-1蛋白的表达,用特异性siRNA沉默Daxx在RAW264.7细胞中的表达.Ox-LDL上调Daxx mRNA和caveolin-1的表达、增加细胞内胆固醇含量、促使RAW264.7细胞凋亡,用特异性siRNA干扰Daxx在RAW264.7细胞中的表达能降低caveolin-1的表达、减少细胞内胆固醇含量、以及抑制细胞凋亡.上述结果表明,Daxx对Ox-LDL诱导RAW264.7巨噬细胞胆固醇蓄积和凋亡具有介导作用,这一作用可能与Daxx上调caveolin-1的表达有关。

Caveolin-1、GPR30和Vimentin在甲状腺乳头状癌组织中的表达及意义

目的:探讨Caveolin-1、GPR30和Vimentin在人甲状腺乳头状癌(Papillary thyroid carcinoma,PTC)的表达及意义。方法:选取甲状腺乳头状癌76例和正常的甲状腺组织44例,采用免疫组织化学S-P法检测Caveolin-1、GPR30和Vimentin的表达,分析其与患者临床病理指标的关系,以及三者之间表达的相关性。结果:在PTC组织中,Caveolin-1、GPR30和Vimentin的阳性表达率分别为9.21%(7/76)、80.26%(61/76)、76.32%(58/76),其中Caveolin-1的阳性表达率明显低于正常组织81.82%(36/44),而GPR30、Vimentin的阳性表达率明显高于正常组织0(0/44)、0(0/44),差异具有统计学意义(P<0.001)。Caveolin-1、GPR30和Vimentin的表达与肿瘤的分期(P=0.005,P<0.001,P<0.001)以及颈部淋巴结转移(P≤0.001)显著相关。此外Caveolin-1与GPR30的表达呈负相关(rs=-0.528,P<0.001),Caveolin-1与Vimentin的表达呈负相关(rs=-0.572,P<0.001),GPR30与Vimentin的表达呈正相关(rs=0.812,P<0.001)。Caveolin-1联合GPR30或Vimentin表达的条件下:Caveolin-1阴性表达伴随GPR30或Vimentin阳性表达与颈部淋巴结转移更具有相关性(P<0.05);GPR30与Vimentin联合阳性表达较只有一种蛋白阳性表达与颈部淋巴结转移更具有相关性(P=0.005);Caveolin-1阴性表达伴随GPR30和Vimentin阳性表达与颈部淋巴结转移的相关性最强(P<0.001)。结论:Caveolin-1、GPR30和Vimentin在PTC组织中的表达与肿瘤分期,以及颈部淋巴结转移密切相关,且三者的表达密切相关,Caveolin-1、GPR30和Vimentin在PTC中的表达情况可作为检测PTC颈部淋巴结转移的指标。