补阳还五汤通过Cav-1抑制铁死亡对脑缺血小鼠的神经保护作用

目的 探讨补阳还五汤通过小窝蛋白-1(Cav-1)抑制铁死亡对脑缺血后小鼠的神经保护作用。方法 将雄性Cav-1敲除(KO)及同源野生型(WT)小鼠分别随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组(18.5 g/kg),采用大脑中动脉栓塞(MCAO)复制脑缺血模型,给药干预7 d后,对小鼠进行神经行为学评分以评估神经功能缺损情况,HE及尼氏染色观察脑皮层形态结构,透射电镜下观察线粒体结构,采用生化试剂盒检测脑组织总铁、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性,免疫组化及RT-qPCR法检测铁死亡相关分子谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的蛋白及mRNA表达。结果 WT小鼠脑缺血后表现为神经功能缺损明显,神经元及线粒体损伤严重,伴随铁及MDA水平增加,而GSH水平、SOD活性及GPX4蛋白和mRNA表达降低;补阳还五汤可促进神经功能恢复,并且降低脑内总铁及MDA水平,增加脑内GSH水平、SOD活性及GPX4蛋白和mRNA表达。然而,与WT模型组比较,Cav-1 KO脑缺血小鼠表现出更严重的神经功能受损、神经元损伤及铁死亡程度,并且Cav-1缺失在一定程度上逆转补阳还五汤对脑缺血的改善作用。结论 补阳还五汤可能通过Cav-1抑制神经元铁死亡,减轻脑缺血诱导的铁死亡。

血清Cav-1、sLOX-1、FGF4水平与急性缺血性脑梗死患者病情程度的相关性分析及其临床意义

目的:探讨急性缺血性脑梗死(AIS)患者陷窝蛋白1(Cav-1)、血清可溶性凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(sLOX-1)、成纤维细胞生长因子4(FGF4)水平与病情程度的相关性,并分析其临床应用价值。方法:采集中国人民解放军联勤保障部队第九九〇医院2021年1月至2023年1月入院治疗的108例AIS患者为研究对象,通过美国国立卫生研究所卒中量表(NIHSS)评分进行分组;根据入院时脑梗死体积评估梗死面积,并通过改良Rankin量表(mRS)评分评估患者预后。对比3组及不同梗死体积患者入院时血清Cav-1、sLOX-1、FGF4水平,对比不同预后患者入院时及治疗后血清各指标水平,分析入院时血清各指标与NIHSS评分及梗死体积的相关性,并分析对患者预后的预测价值。结果:入院时3组血清Cav-1、sLOX-1、FGF4水平比较:重度组>中度组>轻度组(P<0.05);不同梗死体积患者入院时血清Cav-1、sLOX-1、FGF4水平比较:大梗死>中梗死>小梗死(P<0.05);预后不良患者治疗后血清Cav-1、sLOX-1、FGF4水平显著高于预后良好患者(P<0.05);入院时血清Cav-1、sLOX-1、FGF4水平与NIHSS评分、梗死体积均呈正相关(P<0.05);治疗后血清Cav-1、sLOX-1、FGF4水平联合预测AIS患者预后不良的AUC为0.845。结论:血清Cav-1、sLOX-1、FGF4水平与AIS患者病情程度的密切相关,并可作为评估患者预后的有效指标,对临床诊疗具有重要价值。

补阳还五汤对Cav-1^(-/-)小鼠脑缺血后m^(6)A修饰和血管新生的影响

目的观察补阳还五汤对小窝蛋白1基因敲除(Cav-1^(-/-))小鼠脑缺血后N6-甲基腺苷(m^(6)A)修饰和血管新生的影响,探讨其可能的作用机制。方法将72只雄性野生型(WT)小鼠及Cav-1^(-/-)(KO)小鼠分别随机分为对照组、模型组和补阳还五汤组,采用大脑中动脉栓塞法制备脑缺血模型,补阳还五汤组予补阳还五汤(18.5 g/kg)灌胃,对照组和模型组予等体积蒸馏水灌胃,连续7 d。对小鼠进行神经行为学评分,试剂盒检测缺血侧皮质m^(6)A水平,HE染色观察缺血侧皮质病理变化,免疫荧光双标法检测缺血侧皮质血管新生情况,RT-qPCR检测缺血侧皮质甲基转移酶样3(METTL3)、甲基转移酶样14(METTL14)、肾母细胞瘤1相关蛋白(WTAP)、肥胖相关蛋白(FTO)及AlkB同系物5(ALKBH5)mRNA表达。结果与同基因型对照组比较,WT、KO模型组小鼠神经行为学评分及缺血侧皮质m^(6)A水平明显升高(P<0.01),缺血侧皮质出现病理形态损伤,血管性血友病因子(VWF)/Ki-67双标阳性细胞数明显增加(P<0.01),KO模型组小鼠缺血侧皮质WTAP mRNA表达明显升高(P<0.01),FTO和ALKBH5 mRNA表达明显下降(P<0.01);与同基因型模型组比较,WT、KO补阳还五汤组小鼠神经行为学评分及m^(6)A水平明显降低(P<0.01,P<0.05),缺血侧皮质病理形态损伤改善,VWF/Ki-67双标阳性细胞数目明显增加(P<0.05),KO补阳还五汤组小鼠缺血侧皮质WTAP mRNA表达明显降低(P<0.01),FTO和ALKBH5 mRNA表达明显升高(P<0.01,P<0.05)。WT模型组和WT补阳还五汤组各项指标优于KO组(P<0.01,P<0.05)。结论补阳还五汤可能通过Cav-1调控脑缺血小鼠m^(6)A修饰和血管新生,从而发挥保护脑缺血损伤作用。

血清ADMA、Cav-1水平联合血小板聚集功能检测对急性脑梗死患者END的预测价值

目的:分析非对称性二甲基精氨酸(ADMA)、陷窝蛋白1(Cav-1)水平联合血小板聚集功能(PAgT)对急性脑梗死患者早期神经功能恶化(END)的预测效果。方法:选取我院2019年5月—2022年1月收治的100例急性脑梗死患者为观察对象,参考美国卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分分为END组(37例)和非END组(63例)。比较两组入院时一般临床资料及血清ADMA、Cav-1水平、PAgT,并分析发生END的危险因素,各指标不同水平患者发生END危险度分析。结果:与非END组相比,END组入院时血清ADMA、Cav-1水平及PAgT均较高(P<0.05);血清ADMA、Cav-1水平及PAgT与基线NIHSS评分、梗死体积呈正相关(P<0.05);Logistic分析显示,将基线NIHSS评分、梗死体积因素控制后,入院时血清ADMA水平>0.91μmol/L、Cav-1水平>21.81ng/ml、PAgT>69.62%为急性脑梗死患者发生END的独立危险因素(P<0.05);ADMA、Cav-1、PAgT高水平患者发生END危险度较高(P<0.05)。结论:急性脑梗死END患者血清ADMA、Cav-1水平及PAgT偏高,可作为预测END的指标,为临床早期防治提供可参考依据。

新活络效灵丹对ApoE基因敲除早期动脉粥样硬化小鼠Cav-1、SR-BI的影响

目的:观察新活络效灵丹对ApoE基因敲除小鼠早期动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)斑块面积及对Cav-1、SR-BI表达的影响,探讨新活络效灵丹抗早期AS斑块的可能机制。方法:采用高脂饲料喂养ApoE基因敲除小鼠建立AS模型,将45只小鼠随机分为西药组、模型组、新活络效灵丹组,另将10只C57BL/6J小鼠设为空白组,连续给药13周后测量计算各组斑块面积及斑块/管腔面积比值(PA/ALA),检测各组主动脉Cav-1 mRNA、SR-BI mRNA表达水平。结果:与模型组比较,西药组斑块面积显著缩小,PA/ALA显著降低;中药组与模型组比较,斑块面积、PA/ALA均有显著改变;模型组小鼠主动脉组织中Cav-1 mRNA、SR-BI mRNA表达水平低于空白组;西药组表达水平高于模型组,中药组表达水平明显高于模型组,中西药组表达水平比较差异无统计学意义。结论:新活络效灵丹具有预防AS斑块形成的作用,是提高AS小鼠主动脉组织Cav-1 mRNA、SR-BI mRNA表达机制之一。

食管鳞癌中CAV-1基因的表达及甲基化状态

背景与目的:作为重要的表观遗传学现象之一,DNA甲基化对基因表达发挥着重要的调控功能。研究表明肿瘤细胞基因组正常DNA甲基化模式异常改变所导致的肿瘤相关基因功能异常可能参与肿瘤发生与发展。本研究通过检测食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinomas,ESCC)组织中质膜微囊蛋白-1(caveolin-1,CAV-1)基因的表达及甲基化状态,探讨CAV-1基因在食管鳞癌发生及发展中的作用。方法:分别应用甲基化特异性PCR(MSP)、RT-PCR法、免疫组织化学SP法检测食管癌及相应癌旁正常黏膜组织标本中CAV-1基因甲基化状态、mRNA及蛋白表达情况。结果:CAV-1 mRNA在食管癌和癌旁正常组织中的表达量分别为0.86±0.56和0.40±0.36,食管癌组织中CAV-1 mRNA表达量明显高于癌旁正常组织,2者差异有统计学意义(P<0.05)。CAV-1 mRNA表达与患者的淋巴结转移及肿瘤组织学分级有关(P<0.05);食管鳞癌组织中,CAV-1蛋白表达阳性率为66.7%(34/51);显著高于正常食管黏膜组织(15.7%,8/51)(P<0.01)。CAV-1蛋白表达与患者的淋巴结转移有关(P<0.05),而与肿瘤的临床分期和分化程度无关(P>0.05)。51例食管癌组织中1例发生了基因启动子区甲基化,甲基化率为2.0%(1/51);而相应癌旁正常黏膜组织中未发现有该基因的甲基化现象。食管癌组织中该基因的甲基化率与相应癌旁正常组织相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CAV-1基因在食管鳞癌组织中mRNA及蛋白表达均明显高于癌旁正常黏膜组织,该基因的高表达对于肿瘤的发生及淋巴结的转移起到了一定的促进作用;癌及癌旁组织中该基因的表达异常均与该基因的甲基化状态无关。

Cav-1在肝癌组织的表达及其意义

目的:探讨小窝蛋白-1(Cav-1)在肝癌(HCC)细胞及间质中的表达及意义。方法:采用组织微阵列及免疫组织化学法检测100例肝癌及癌旁组织Cav-1的表达,并分析其表达程度与病理参数的相关性。结果:Cav-1在肝癌细胞的高表达率显著高于癌旁组织(P<0.05);而且与微血管的侵袭、癌栓的形成、周围脏器的直接侵袭、是否伴有肝硬化显著正相关。Cav-1在肝癌间质的高表达率显著低于癌旁间质(P<0.05),而且与肿瘤的大小、卫星结节的形成、微血管的侵犯、癌栓的形成、周围脏器的直接侵袭显著正相关。结论:在肝癌组织中,Cav-1的高表达率在肝癌细胞上调,而在肝癌间质下调;Cav-1在肝癌细胞及肝癌间质的表达变化与肝癌的侵袭性有关。

红藻氨酸致痫大鼠海马小窝蛋白(Cav-1)和核因子(NF-κB)的变化及灵芝多糖的干预

观察灵芝多糖(GLP)对于红藻氨酸(kainicacidKA)致痫大鼠海马Cav-1和NF-κB的影响。方法:将60只健康雄性Wistar大鼠随机分成正常对照组、假手术组、癫痫模型组、灵芝多糖治疗低浓度组、灵芝多糖治疗中浓度组、灵芝多糖治疗高浓度组每组10只。采用激光共聚焦方法计数各组海马Cav-1和NF-κB阳性细胞的数量。结果:癫痫模型组Cav-1阳性细胞数明显高于正常对照组;灵芝多糖治疗组Cav-1阳性细胞数高于癫痫模型组;NF-κB阳性细胞数癫痫模型组明显高于正常对照组;灵芝多糖治疗各组NF-κB阳性细胞数低于癫痫模型组。同时,高、中浓度组之间Cav-1和NF-κB蛋白光密度未见明显异常。结论:灵芝多糖能增强大鼠海马神经元Cav-1表达和抑制NF-κB的表达,减轻海马神经元的变性、坏死和凋亡,起到抗癫痫作用。

齐墩果酸对白血病HL-60细胞cav-1表达的影响

目的:研究齐墩果酸(oleanolic acid,OA)对白血病HL-60细胞窖蛋白-1(Caveolin-1,CAV-1)表达的影响。方法:OA作用HL-60细胞后,倒置显电镜观察细胞形态;RT-PCR检测HL-60细胞cav-1的mRNA表达;Western blot检测CAV-1蛋白水平。结果:OA作用HL-60细胞后,RT-PCR检测cav-1mRNA表达上调(P<0.01);Western blot检测CAV-1蛋白水平升高(P<0.01)。结论:OA通过上调CAV-1的表达,抑制HL-60细胞增殖。

齐墩果酸对白血病HL-60细胞PI3K、Akt、Cav-1表达的影响

目的:研究齐墩果酸(Oleanic acid,OA)对人白血病HL-60细胞PI3K、Akt、Cav-1表达的影响。方法:OA作用HL-60细胞后,采用透射电镜观察细胞形态,RT-PCR法检测HL-60细胞PI3K、Akt、Cav-1的mRNA表达。结果:OA作用于HL-60细胞后,细胞形态改变明显,出现凋亡小体,且PI3K、Akt、Cav-1的mRNA表达下调(P<0.01)。结论:OA可抑制HL-60细胞增殖,这可能与其下调HL-60细胞中PI3K、Akt、Cav-1的表达有关。

人pcDNA3.1(+)-Cav-1真核表达载体的构建及鉴定

目的构建pcDNA3.1(+)-Cav-1真核表达载体,建立稳定转染pcCav-1的6-10B细胞系(6-10B-Cav-1)。方法提取5-8F细胞总RNA,利用RT-PCR获取caveolin-1(Cav-1)开放读码框(Openreading frame,ORF)序列构建Cav-1/TA亚克隆载体,再将双酶切后的目的片段连入pcDNA3.1(+)真核表达载体并转染6-10B细胞。结果 RT-PCR扩增Cav-1基因ORF序列在783 bp附近见目的条带;质粒酶切鉴定及菌落PCR鉴定分别在783 bp及346 bp附近见目的条带;转染6-10B细胞后,转染组与对照组相比,Cav-1在mRNA水平表达差异具有统计学意义(P=0.027),在蛋白质水平前者比后者高出2倍以上。结论人Cav-1重组真核表达载体pcDNA3.1(+)-Cav-1构建成功并获得稳定表达Cav-1的6-10B细胞,为进一步检测Cav-1在鼻咽癌转移过程的作用奠定基础。

小窝蛋白Cav-1介导人参皂苷Rb1对小鼠脑缺血再灌注损伤的脑保护作用

目的:探讨小窝蛋白Cav-1介导人参皂苷Rb1对小鼠脑缺血再灌注损伤的脑保护作用。方法:将120只C57BL/6小鼠按随机数字表法分成假手术组、模型组、人参皂苷Rb1组、人参皂苷Rb1+Cav-1 siRNA组、人参皂苷Rb1+siNC组,每组24只。采用大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)法建立小鼠脑缺血再灌注损伤模型。人参皂苷Rb1组在造模后即刻给予人参皂苷Rb1(40 mg/kg,i.p.),假手术组和模型组给予等量生理盐水。人参皂苷Rb1+Cav-1 siRNA组和人参皂苷Rb1+siNC组在造模前24 h分别侧脑室注射Cav-1 siRNA和siNC,其他操作同人参皂苷Rb1组。再灌注24 h时测各组小鼠神经行为学评分,然后每组各取6只小鼠分别检测脑组织含水量、脑梗死体积,大脑皮质半暗带区Cav-1 mRNA和Cav-1、Bcl2、Bax蛋白表达量。结果:与假手术组相比,模型组小鼠的神经行为学评分、脑梗死体积、脑组织含水量明显增加(P<0.05),Cav-1 mRNA和Cav-1蛋白表达量、Bcl-2/Bax比值明显减少(P<0.05)。与模型组相比,人参皂苷Rb1组小鼠的神经行为学评分、脑梗死体积、脑组织含水量明显减少,Cav-1 mRNA和Cav-1蛋白表达量、Bcl-2/Bax比值明显增加(P<0.05);与人参皂苷Rb1组相比,人参皂苷Rb1+Cav-1 siRNA组神经行为学评分、脑梗死体积、脑组织含水量明显增加,且Cav-1 mRNA和Cav-1蛋白表达量、Bcl-2/Bax比值明显减少(P<0.05)。结论:人参皂苷Rb1对脑缺血再灌注损伤小鼠具有脑保护作用。而Cav-1 siRNA使小鼠脑组织中Cav-1蛋白表达下降后,可以明显逆转人参皂苷Rb1的脑保护作用,说明Cav-1蛋白介导了人参皂苷Rb1对脑缺血再灌注损伤小鼠的脑保护作用。

补阳还五汤对Cav-1敲除小鼠脑缺血后mTOR通路的影响

目的探讨小窝蛋白(caveolin-1,Cav-1)对脑缺血后哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的影响及补阳还五汤抗脑缺血的可能作用机制。方法将Cav-1基因敲除(knock out,KO)与野生型(wild type,WT)小鼠随机分为KO假手术组、KO模型组、KO补阳还五汤组(补阳组)、WT假手术组、WT模型组及WT补阳组。采用大脑中动脉栓塞法建立脑缺血模型,干预14 d后观察小鼠神经功能评分;免疫组化检测大脑mTOR、磷酸化核糖体S6蛋白激酶(phospho-ribosomal S6 kinase,p-S6K1)、磷酸化真核细胞翻译起始因子4E结合蛋白-1(phospho-eukaryotic initiation factor 4E-binding protein 1,p-4EBP1)的蛋白表达;qRT-PCR检测大脑mTOR的mRNA水平。结果与同类假手术组比较,其他4组神经功能评分、mTOR、p-S6K1、p-4E-BP1蛋白表达及mTOR mRNA表达明显上升(P<0.01);与同类模型组比较,KO补阳组、WT补阳组神经功能评分明显下降(P<0.01),各蛋白表达与mRNA表达明显上升(P<0.01);与WT模型组比较,KO模型组神经功能评分上升(P<0.05),各蛋白与m RNA表达明显下降(P<0.01);与WT补阳组比较,KO补阳组神经功能评分明显上升(P<0.01),各蛋白及m RNA明显下降(P<0.01)。结论Cav-1基因的缺失会导致mTOR通路活性降低并加重脑缺血后神经功能损伤;补阳还五汤可能通过Cav-1调控mTOR信号通路的活性,发挥抗脑缺血损伤的作用。

子宫内膜癌组织Cav-1 mRNA表达及意义

目的探讨小窝蛋白(Cav-1)在子宫内膜癌发生、发展中的作用。方法采用实时荧光定量RT-PCR(FQ-PCR)法定量检测20例正常子宫内膜组织(正常组),45例子宫内膜良性病变组织(良性组)和49例子宫内膜癌组织(内膜癌组)Cav-1 mRNA的表达量,分析Cav-1 mRNA表达量与子宫内膜癌临床病理参数的关系。结果正常组Cav-1 mRNA相对表达量为1.000±0.138,良性组为3.531±0.727,内膜癌组为8.534±1.502,Cav-1 mRNA相对表达量内膜癌组高于良性组,良性组高于正常组,P均<0.05。内膜癌组Cav-1 mRNA表达与临床分期、分化程度和淋巴结转移有关(P均<0.05)。结论 Cav-1高表达可促进子宫内膜癌的发生及发展,Cav-1有望成为子宫内膜癌早期诊断的新指标及治疗的新靶点。

蒙古马高负荷运动训练前后COX4I2、FABPpm和CAV-1基因表达量的研究

为研究蒙古马高负荷运动训练前后COX4I2、FABPpm和CAV-1基因表达量的影响,实验选择3匹5岁雌性蒙古马,采用qRT-PCR方法检测为期4个月的强度递增高负荷运动训练后蒙古马臀中肌3种基因在mRNA水平的表达变化。结果表明:经训练后蒙古马肌肉中COX4I2和FABPpm基因表达量均显著升高(P<0.05);CAV-1基因表达量也有升高(P>0.05)。可见,COX4I2、FABPpm和CAV-1基因与蒙古马的运动能力存在密切关系。

胸水HIF-1α和Cav-1对肺腺癌胸腔积液的诊断价值

目的分析HIF-1α和Cav-1鉴别诊断肺腺癌胸腔积液(LA-MPE)和结核性胸腔积液(TBPE)的价值并与癌胚抗原(CEA)比较。方法选择2013年1月—2015年12月本院收治的30例LA-MPE和29例TBPE患者作为研究对象,收集临床患者资料和胸水标本,ELISA法测定胸水HIF-1α、Cav-1浓度,分析与CEA、CA125相关性,ROC曲线分析HIF-1α、Cav-1诊断LA-MPE敏感性、特异性及与CEA联合检测的价值。结果LA-MPE组胸水HIF-1α、Cav-1水平明显高于TBPE组[HIF-1α:(117.58±53.09)pg/ml vs(81.33±23.45)pg/ml;Cav-1:(95.02±50.28)pg/ml vs(53.67±23.48)pg/ml](P<0.05),CEA水平也明显高于TBPE组(P<0.01);CA125水平无显著差异。HIF-1α、Cav-1与CEA显著正相关(P<0.01),两者诊断敏感性、特异性分别为77.4、65.5%,64.5、75.9%;截断值分别为100.97、57.76 pg/ml;截断值为56.18 ng/ml时,CEA诊断敏感性、特异性为87.1%、83.7%。HIF-1α联合Cav-1增强了LA-MPE诊断效能,而HIF-1α、Cav-1和CEA三者组合诊断效率最高。结论检测胸水HIF-1α、Cav-1有助于鉴别LA-MPE和TBPE,两者联合CEA将增加LA-MPE诊断准确性。

胃癌细胞中Caveolin-1对表皮生长因子受体2活化的影响

目的:检测Caveolin-1蛋白(Cav-1)对胃癌(gastric cancer,GC)细胞株NCI-N87恶性生物学行为的影响及其可能的作用机制。方法:构建Cav-1过表达稳转染细胞系N87/Cav-1,应用MTT、克隆形成、划痕修复实验检测Cav-1对胃癌细胞株NCI-N87恶性生物学行为的影响,应用Western blotting检测在EGF配体诱导下Cav-1蛋白对Her-2活化及ERK、Akt信号通路的影响。结果:Cav-1过表达可明显抑制胃癌细胞NCI-N87的增殖及迁移能力;在配体EGF刺激下,Cav-1过表达明显抑制了Her-2酪氨酸磷酸化水平以及P-ERK/ERK、P-AKT/AKT的比率(P<0.01)。结论:Cav-1过表达可明显抑制EGF诱导的Her-2酪氨酸磷酸化水平,并可能通过下游MAPK及PI3K/Akt信号通路的作用抑制了胃癌细胞株NCI-N87的增殖及迁移能力。

信号转导和转录激活因子3及小凹蛋白1在X射线诱导肺腺癌A549细胞早衰中的调控关系研究

目的:探讨信号转导和转录激活因子3(STAT3)和小凹蛋白1(Cav-1)在X射线诱导A549细胞早衰过程中的调控关系,完善X射线诱导A549细胞早衰的分子机制。方法:利用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测不同肿瘤细胞A875、BGC-823、A549细胞和正常细胞株Hacat细胞中STAT3和Cav-1蛋白表达水平,并检测X射线照射和STAT3过表达及抑制剂处理后A549细胞中p53蛋白、Cav-1蛋白表达水平。结果:肿瘤细胞A875、BGC-823、A549细胞及正常细胞Hacat细胞中STAT3、Cav-1蛋白呈现阳性表达;X射线照射A549细胞后p53蛋白表达增加,STAT3过表达及活化可引起p53蛋白表达水平升高,同时抑制Cav-1蛋白的表达。结论:X射线诱导的A549细胞p53蛋白早衰通路部分依赖于STAT3激活,STAT3负向调控Cav-1蛋白表达。

新型雌激素受体ERα36与窖蛋白-1在皮肤组织细胞中的表达和分布特征

采用蛋白免疫印迹杂交和免疫细胞荧光等方法首次研究了新型雌激素受体ERα36和窖蛋白-1(Caveolin-1)在大鼠皮肤组织中以及角质细胞系中的表达,探讨了二者的表达关系和分布特征.结果发现:(1)大鼠皮肤中有ERα36的表达,其表达的量与Caveolin-1的表达量呈负相关,且存在性别差异和部位差异;(2)表皮角质细胞中有ERα36的表达,主要分布在细胞膜上,且与Caveolin-1共定位.提示新型雌激素受体ERα36存在于皮肤细胞中,且可能参与Caveolin-1介导的雌激素信号转导,在雌激素治疗皮肤疾病过程中发挥一定作用.

抑制小窝蛋白-1磷酸化对机械通气所致肺损伤的保护作用

目的：研究抑制小窝蛋白－1（ Cav－1）磷酸化对机械通气所致肺损伤的效应。方法50只健康雄性SD大鼠随机分为A、B1、B2、C1及C2五组（每组10只）。 A组为正常对照组，仅做气管切开；B1组为1 h大潮气量机械通气组；B2组为2 h大潮气量机械通气组；C1组为1 h大潮气量机械通气＋酪氨酸蛋白激酶抑制剂PP2（5 mg／kg）组；C2组为2 h大潮气量机械通气＋酪氨酸蛋白激酶抑制剂PP2（5 mg／kg）组。 C1和C2组在机械通气前1 h腹腔注射抑制剂。各组大鼠均连续监测平均动脉压（ MAP ）。光镜观察肺组织病理改变，并做弥漫性肺泡损伤系统（ diffuse alveolar damage， DAD）评分，比色法测定髓过氧化物酶（ myeloperoxidase， MPO）活性，计算肺湿／干比（W／D），蛋白印迹检测磷酸化小窝蛋白－1[P －Cav －1（Y14）]和小窝蛋白－1（Cav－1）表达情况，免疫组织化学染色法检测肺组织中内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和白细胞介素－1受体相关激酶4（IRAK4）表达情况，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组大鼠肺泡灌洗液TNF－α水平，伊文思蓝（ Evans blue）法检测肺血管通透性。结果 B1、B2、C1、C2组病理损伤评分、肺湿／干比、Cav－1、eNOS、IRAK4表达量、TNF－α水平、Evans blue渗出量、MPO活性、MAP及血气分析与A组比较差异均有统计学意义（均P＜0．05）；与A组比较，B1、B2、C1组P－Cav－1表达升高（均P＜0.05），而C2组P－Cav－1（Y14）表达量差异无统计学意义（P＞0．05）；C1组与B1组比较，C2组与B2组比较，病理损伤评分、肺湿／干比，P－Cav－1（Y14）、eNOS、IRAK4表达量、TNF－α的水平、Evans blue含量、MPO活性、MAP、及血气分析差异均有统计学意义（均P＜0.05）；C1组与B1组比较，C2组与B2组比较，Cav－1表达量差异无统计学意义（均P＞0．05）。结论抑制Cav－1磷酸化能够降低肺毛细血管通透性，减少炎症因子和炎症细胞的迁移，从而对大鼠机械通气所致肺损伤起到保护作用。