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高山离子芥冷诱导基因转化甘蔗二元植物表达载体构建
被引量:
6
1
作者
卢双楠
李粲
+10 位作者
滕峥
刘开雨
刘芳
邱永福
梁朝旭
方位宽
何姗珊
刘晓静
李鸣
梁俊
李容柏
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第9期1262-1268,共7页
【目的】利用载体重组技术分别将高山离子芥冷诱导基因(Cbcor15a)和报告基因eGFP插入载体pCambia1300-bar,并引入玉米泛素基因启动子UBi-1代替载体本身启动子CaMV35s,重组为适合甘蔗转基因的二元植物表达载体pCambia1300-cbcor15a-bar...
【目的】利用载体重组技术分别将高山离子芥冷诱导基因(Cbcor15a)和报告基因eGFP插入载体pCambia1300-bar,并引入玉米泛素基因启动子UBi-1代替载体本身启动子CaMV35s,重组为适合甘蔗转基因的二元植物表达载体pCambia1300-cbcor15a-bar。【方法】参照pCambia1300-bar载体多克隆位点和基因Cbcor15a、eGFP和启动子UBi-1的核苷酸序列设计引物,通过载体重组技术将基因和启动子分别插入相应的位点。利用基因枪分别将pCambia1300-bar载体和重组载体导入洋葱表皮细胞,用荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察。【结果】与导入pCambia1300-bar载体的洋葱表皮细胞相比较,导入重组载体pCambia1300-cbcor15a-bar的洋葱表皮细胞内有强烈的绿色荧光信号。【结论】重组甘蔗转基因二元植物表达载体启动子Ubi-1能够调控下游冷诱导基因Cbcor15a和报告基因eGFP的正常高效表达,为外源基因Cbcor15a转化甘蔗提供保障。
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关键词
cbcor15a
甘蔗
转基因
植物表达载体构建
瞬时表达
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职称材料
荠菜CBF冷诱导途径多价载体的构建和烟草转化
2
作者
沈忱
周明琦
+1 位作者
吴丽华
林娟
《上海交通大学学报(农业科学版)》
2014年第3期33-38,44,共7页
为了研究荠菜CBF抗冷途径多基因共表达对转基因植株耐寒性的影响,通过同尾酶法将CbCBF、CbICE53、CbRCI35以及CbCOR15bP进行结合,构建了CbCOR15bP::CbICE53+pCaMV35S::CbCBF+pCaMV35S::CbRCI35多价植物表达载体并进行了烟草的转化,通过...
为了研究荠菜CBF抗冷途径多基因共表达对转基因植株耐寒性的影响,通过同尾酶法将CbCBF、CbICE53、CbRCI35以及CbCOR15bP进行结合,构建了CbCOR15bP::CbICE53+pCaMV35S::CbCBF+pCaMV35S::CbRCI35多价植物表达载体并进行了烟草的转化,通过形态观察以及电解质渗透率和相对水含量这两个生理指标的测定显示,转基因植株在4℃和-4℃低温处理情况下,多基因共转化的转基因植株在电解质渗透率和相对水含量与野生型和空载对照之间的差异非常明显,转基因植株在低温下的抗寒冻能力也明显增强,说明CBF途径多基因共转化可以明显提高烟草的抗寒冻能力,此项研究具有一定的实际应用意义。
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关键词
抗冷
CbCOR15bP
CbICE53
CbCBF
CbRCI35
共转化
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职称材料
题名
高山离子芥冷诱导基因转化甘蔗二元植物表达载体构建
被引量:
6
1
作者
卢双楠
李粲
滕峥
刘开雨
刘芳
邱永福
梁朝旭
方位宽
何姗珊
刘晓静
李鸣
梁俊
李容柏
机构
广西大学生命科学与技术学院
广西作物遗传改良重点开放实验室
广西大学农学院
广西甘蔗遗传改良重点实验室/广西农业科学院甘蔗研究所
亚热带农业生物资源保护利用重点实验室
出处
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第9期1262-1268,共7页
基金
广西科学基金项目(桂科自0990182
桂科基0778006-4
+8 种基金
桂科青0832059
2011GXNSFF018002
2011GXNSFD018021)
广西农业科学院博士后基金项目(桂农科博2009013)
广西农业科学院基本科研业务专项项目(201107Z基
G2010003
G2010003)
广西农业科学院公益性维持项目(桂农科2012GW13)
南宁市科学研究与技术开发计划项目(201102026B)
文摘
【目的】利用载体重组技术分别将高山离子芥冷诱导基因(Cbcor15a)和报告基因eGFP插入载体pCambia1300-bar,并引入玉米泛素基因启动子UBi-1代替载体本身启动子CaMV35s,重组为适合甘蔗转基因的二元植物表达载体pCambia1300-cbcor15a-bar。【方法】参照pCambia1300-bar载体多克隆位点和基因Cbcor15a、eGFP和启动子UBi-1的核苷酸序列设计引物,通过载体重组技术将基因和启动子分别插入相应的位点。利用基因枪分别将pCambia1300-bar载体和重组载体导入洋葱表皮细胞,用荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察。【结果】与导入pCambia1300-bar载体的洋葱表皮细胞相比较,导入重组载体pCambia1300-cbcor15a-bar的洋葱表皮细胞内有强烈的绿色荧光信号。【结论】重组甘蔗转基因二元植物表达载体启动子Ubi-1能够调控下游冷诱导基因Cbcor15a和报告基因eGFP的正常高效表达,为外源基因Cbcor15a转化甘蔗提供保障。
关键词
cbcor15a
甘蔗
转基因
植物表达载体构建
瞬时表达
Keywords
cbcor15a
sugarcane
transgene
construction of plant expression vector
transient expression
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
下载PDF
职称材料
题名
荠菜CBF冷诱导途径多价载体的构建和烟草转化
2
作者
沈忱
周明琦
吴丽华
林娟
机构
复旦大学生命科学学院
出处
《上海交通大学学报(农业科学版)》
2014年第3期33-38,44,共7页
基金
上海市基础研究重点项目(09JC1401700)
国家863计划项目(2008AA10Z105)
国家转基因生物新品种培育重大专项(2008ZX08003-004)
文摘
为了研究荠菜CBF抗冷途径多基因共表达对转基因植株耐寒性的影响,通过同尾酶法将CbCBF、CbICE53、CbRCI35以及CbCOR15bP进行结合,构建了CbCOR15bP::CbICE53+pCaMV35S::CbCBF+pCaMV35S::CbRCI35多价植物表达载体并进行了烟草的转化,通过形态观察以及电解质渗透率和相对水含量这两个生理指标的测定显示,转基因植株在4℃和-4℃低温处理情况下,多基因共转化的转基因植株在电解质渗透率和相对水含量与野生型和空载对照之间的差异非常明显,转基因植株在低温下的抗寒冻能力也明显增强,说明CBF途径多基因共转化可以明显提高烟草的抗寒冻能力,此项研究具有一定的实际应用意义。
关键词
抗冷
CbCOR15bP
CbICE53
CbCBF
CbRCI35
共转化
Keywords
cold resistance
CbCOR15bP
CbICE53
CbCBF
CbRCI35
co-transgenic
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高山离子芥冷诱导基因转化甘蔗二元植物表达载体构建
卢双楠
李粲
滕峥
刘开雨
刘芳
邱永福
梁朝旭
方位宽
何姗珊
刘晓静
李鸣
梁俊
李容柏
《南方农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
6
下载PDF
职称材料
2
荠菜CBF冷诱导途径多价载体的构建和烟草转化
沈忱
周明琦
吴丽华
林娟
《上海交通大学学报(农业科学版)》
2014
0
下载PDF
职称材料
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