持续高产AmpC酶的检测及其临床意义

目的调查持续高产AmpC酶在大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌中的携带率和流行趋势。方法用头孢西丁药敏纸片法(K-B法)和头孢西丁三维试验作AmpC酶的筛选、确证试验,对AmpC酶阳性者进行质粒接合试验。结果11种抗生素中亚胺培南的抗菌活性最强,耐药率仅为1.1%。头孢西丁纸片筛选法阳性率为84.4%,三维试验阳性率为32.2%。与三维试验相比,纸片筛选法总的假阳性率为54.4%,两种方法差异具有高度显著性(P<0.001)。AmpC酶、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、AmpC酶+ESBLs阳性率分别为24.4%、54.4%和7.8%,其中以肺炎克雷伯菌AmpC酶阳性率最高,达33.3%。大肠埃希菌ESBLs阳性率最高,达70.0%。29株AmpC酶阳性菌中,5株耐药质粒转移成功。结论AmpC酶可由染色体或质粒介导,但以染色体介导为主。头孢西丁三维试验可准确检出持续高产AmpC酶,对指导临床用药有积极意义。

产AmpC酶大肠埃希菌对氨基糖苷类抗生素的耐药性研究

目的了解本地产AmpC酶大肠埃希菌(escherichia coli,E.coli)对氨基糖苷类抗生素(aminoglyco-sides,AGs)的耐药情况,分析氨基糖苷修饰酶(aminoglycoside modifying enzymes,AMEs)基因与AmpC酶、AGs耐药表型之间的相互关系。方法头孢西丁三维试验方法,检测产AmpC酶菌株;用KB纸片扩散抗生素做药敏试验以及采用PCR技术检测AMEs基因。结果分离出产AmpC酶的菌株9株(11.69%);产酶菌对氨基糖苷类抗生素的耐药及交叉耐药率明显高于非产酶菌株,其中耐3种及以上AGs差异有统计学意义(P<0.05);产酶菌株AMEs基因携带率高于非产酶菌株,以aac(3)-Ⅱ、aac(6)'-Ⅰ、an(t3")-Ⅰ等3种基因明显(P<0.05)。结论产AmpC酶菌株耐药对AGs耐药率亦高于非产AmpC酶菌株,提示AmpC酶与AMEs基因导致的耐药存在一定的相关性。

血流感染病原菌AmpC酶及相关耐药机制的初步研究

目的了解血流感染病原菌中产AmpCβ-内酰胺酶(简称AmpC酶)菌株的分布情况和临床病例特点,并对相关基因ampC和ampD进行初步研究。方法收集2006年1月—2008年9月血流感染革兰阴性菌181株,分别采用头孢西丁初筛试验和三维试验筛选产AmpC酶菌株和高产AmpC酶菌株;对初筛试验阳性相关临床病例进行回顾性分析。同时对初筛试验阳性菌株ampC、ampD基因PCR扩增、测序和比对,Rep-PCR分析ampC阳性菌株基因型。结果181株病原菌中头孢西丁初筛试验法检出产AmpC酶39株,概率为21.5%(39/181);三维试验法检出高产AmpC酶菌株的概率为43.6%(17/39)。PCR结果显示ampC和ampD基因阳性率分别为41%(16/39)和56.4%(22/39)。对16株ampC阳性菌进行基因测序,与GenBank相应ampC核酸序列比对发现同源性达98%～100%;2株阴沟肠杆菌ampD基因的测序发现在ampD基因羧基端存在可疑的突变位点。结论本研究相关败血症患者血流耐药病原菌感染主要源自院内感染。在产AmpC酶的血流病原菌中,ampC基因突变比较少见,而阴沟肠杆菌ampD基因突变发生率比较高,且ampD蛋白羧基末端氨基酸的缺失或替代可能与AmpC酶去阻遏表达高度相关。

评价三种检测AmpC酶的方法及临床应用

目的:比较三种检测AmpC酶的方法,以找出一种能简便、准确、适合临床常规应用的检测AmpC酶的方法。同时了解我院临床分离菌株AmpC酶的产生情况。方法:采用酶提取物三维试验、头抱西丁三相试验及氯唑西林双纸片协同法同时检测75株阴沟肠杆菌和55株鲍曼不动杆菌的AmpC酶产生情况。结果:用酶提取物三维试验检测到所试阴沟肠杆菌和鲍曼不动杆菌的AmpC酶阳性株分别为22株(占29.3%)和10株(占18.2%)、头孢西丁三相试验及氯唑西林双纸片协同法与酶提取物三维试验的符合率分别为70.8%(92/130)和94.6%(123/130)。结论:头孢西丁三相试验检测AmpC酶存在严重的假阳性,而氯唑西林双纸片协同法结果可靠、方法简便,适合于临床常规应用。

鲍氏不动杆菌产AmpC酶的检测与耐药性分析

目的探讨鲍氏不动杆菌AmpC酶初筛及确证检测意义,了解医院鲍氏不动杆菌产AmpC酶的情况。方法对分离出的细菌采用BD Phoenix100全自动细菌鉴定系统进行鉴定,分别用头孢西丁三相试验进行产AmpC酶初筛试验,三维试验进行产AmpC酶确证试验,并对两者进行比较,药敏试验采用K-B法。结果在62株作AmpC酶检测鲍氏不动杆菌中,头孢西丁三相试验和三维试验两种方法检出率为38.7%和25.8%;与三维试验比较,头孢西丁三相试验敏感度为87.5%,准确度为80.6%,特异度为78.3%,AmpC酶阳性株均呈多药耐药,其对多种抗菌药物的耐药率明显高于AmpC酶阴性株。结论临床实验室对鲍氏不动杆菌建立AmpC酶检测初筛制度,对控制鲍氏不动杆菌多耐药株出现具有积极意义。