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Annona muricata fruit extract protects against diethylnitrosamine-induced hepatocellular cancer in rats 被引量:1
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作者 Subin Varghese Thomas John Paul +4 位作者 Akhila Hosur Shrungeswara Subhankar Biswas Aarti Abhishek Shah Chandrashekar Kodangala Subraya Yogendra Nayak 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2019年第6期272-282,共11页
Objective: To evaluate the anticancer potentials of Annona muricata fruit by in vitro and in vivo methods. Methods: The ethanolic extract of Annona muricata fruit was prepared by Soxhlet extraction method and further ... Objective: To evaluate the anticancer potentials of Annona muricata fruit by in vitro and in vivo methods. Methods: The ethanolic extract of Annona muricata fruit was prepared by Soxhlet extraction method and further fractionated with petroleum ether, ethyl acetate and chloroform. The fractions were tested for cytotoxicity, apoptosis, scratch wound assay, and cell cycle analysis. IC50, apoptotic index and percentage cell migration were determined using HepG2 cells. For the in vivo studies, hepatocellular carcinoma was induced by administering 0.01% diethylnitrosamine(DEN) in drinking water in Wistar rats. In pre-treatment, rats were co-administered 200 mg/kg of fruit extract with DEN for 14 weeks. In post-treatment, the extract was co-administered after 8-weeks of DEN-induction for 14 weeks. Liver function test, haematological test, oxidative stress markers, relative liver weight, number of cancer nodules and histopathological parameters were determined.Results: Annona muricata fruit extract =significantly lowered cell proliferation counts. The chloroform-fraction possessed higher activity (IC50=(53.7±4.3) μg/mL)The chloroform fraction inhibited cell migration, which was significant compared to curcumin. Further investigations regarding the mode of anticancer activity revealed that the chloroform fraction induced apoptosis. The cell cycle analysis indicated that cells were being arrested at G0/G1. In the in vivo studies, the DEN-control group showed a significant decrease in body weights with increased mortality rate, hepatic nodules, and impairment of liver function compared to normal rats. The rats pre-treated and post-treated with the extract showed positive results with significant improvement in the parameters that were adversely affected by DEN. In addition, other adverse effects of DEN, such as blood dyscrasias and hepatic endogenous antioxidant, were significantly attenuated by Annona muricata fruit extract.Conclusions: The Annona muricata fruit extract has anticancer activity when tested by in vitro and in vivo hepatocellular cancer models. 展开更多
关键词 HepG2-cells Apoptosis LIVER CANCER ACETOGENINS Rat LIVER CANCER scratch wound assay
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SPARCL1在动脉粥样硬化斑块形成中的作用研究
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作者 程煦 陈心严 +3 位作者 陈婷婷 程筱雯 朱华庆 葛圣林 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第3期473-478,共6页
目的探讨富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白类似蛋白1(SPARCL1)对动脉粥样硬化(AS)斑块形成的影响。方法采用病例对照研究,选取394例AS确诊患者作为病例组,年龄、性别相匹配的394例健康对照者作为对照组。利用酶联免疫吸附试验测定血清SPARCL... 目的探讨富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白类似蛋白1(SPARCL1)对动脉粥样硬化(AS)斑块形成的影响。方法采用病例对照研究,选取394例AS确诊患者作为病例组,年龄、性别相匹配的394例健康对照者作为对照组。利用酶联免疫吸附试验测定血清SPARCL1表达水平;免疫组织化学实验评估SPARCL1蛋白在AS斑块区的表达水平及定位,同时检测AS患者和正常对照人群外周血的中性粒细胞及单核细胞的SPARCL1蛋白表达情况;构建SPARCL1过表达及抑制表达的重组腺病毒载体,以小鼠巨噬细胞(J774A.1)为靶细胞,进行细胞划痕实验观察SPARCL1对细胞迁移的影响。结果AS患者组的血清SPARCL1水平低于健康组(P<0.05);在AS斑块中检测到SPARCL1高表达,且主要表达在泡沫细胞胞浆;AS患者的外周血中性粒细胞及单核细胞SPARCL1表达水平低于正常对照(P<0.05);SPARCL1过表达及抑制表达的重组腺病毒构建成功;抑制SPARCL1表达的J774A.1细胞中的细胞迁移率降低,过表达SPARCL1的J774A.1细胞中的细胞迁移率增加(P<0.05)。结论SPARCL1在AS病变部位泡沫细胞高表达,这可能来自于外周血单核细胞和中性粒细胞的代偿性募集,SPARCL1可能作为血管保护因子参与抑制AS斑块的发生发展。 展开更多
关键词 SPARCL1 动脉粥样硬化 巨噬细胞 SPARCL1重组腺病毒 细胞划痕实验
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盐酸小檗碱对人结肠癌细胞SW480增殖、迁移及侵袭的影响
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作者 尤玲玲 于思柔 +6 位作者 蒋小哲 梁燕凤 郭荣 彭彤 华欣怡 尹茉莉 刘磊 《中国医药科学》 2024年第19期17-20,共4页
目的探究盐酸小檗碱对人结肠癌细胞SW480增殖、迁移和侵袭过程的影响及可能的机制。方法将人结肠癌细胞SW480细胞分成实验组、对照组、空白组,用CCK8法测定不同浓度的盐酸小檗碱对SW480细胞增殖的作用,并计算出盐酸小檗碱不同浓度作用下... 目的探究盐酸小檗碱对人结肠癌细胞SW480增殖、迁移和侵袭过程的影响及可能的机制。方法将人结肠癌细胞SW480细胞分成实验组、对照组、空白组,用CCK8法测定不同浓度的盐酸小檗碱对SW480细胞增殖的作用,并计算出盐酸小檗碱不同浓度作用下SW480细胞的存活率;通过平板克隆形成、细胞划痕、Transwell等实验,明确盐酸小檗碱对SW480的克隆形成、迁移及侵袭的作用。结果盐酸小檗碱能明显地抑制SW480细胞的增殖,并表现出明显的时间和浓度依赖关系;盐酸小檗碱对SW480细胞的克隆形成、迁移及侵袭过程有显著的抑制作用,差异有统计学意义(P<0.05)。结论盐酸小檗碱对细胞SW480的克隆形成、增殖、侵袭和迁移过程均有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 盐酸小檗碱 人结肠癌 CCK8 细胞划痕 TRANSWELL
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肿瘤细胞迁移过程的动态评估方法 被引量:11
4
作者 胡剑江 雷洪涛 +1 位作者 侯燕鸣 王毅 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期128-131,共4页
目的建立肿瘤细胞迁移过程的多角度、实时动态、定量评估方法。方法建立细胞迁移观测模型,分别加入小檗碱及Rg3培养24h,用活细胞工作站随机选取8个不同观测点,连续观测24h。所取得的数据从迁移面积、距离、单个细胞迁移速度、单位面积... 目的建立肿瘤细胞迁移过程的多角度、实时动态、定量评估方法。方法建立细胞迁移观测模型,分别加入小檗碱及Rg3培养24h,用活细胞工作站随机选取8个不同观测点,连续观测24h。所取得的数据从迁移面积、距离、单个细胞迁移速度、单位面积细胞增殖数量等多角度进行分析。结果该方法可以长时间观察划痕内细胞的迁移过程;小檗碱高、中剂量组(25,12.5μmol·L-1)可抑制A549细胞的迁移过程(P<0.01),且迁移面积、距离、速度及细胞增殖数量4项指标的结果基本一致,人参皂苷Rg3(0.1mmol·L-1)可以在各时间点(6,12,24h)抑制细胞迁移速度(P<0.01),24h可抑制细胞迁移面积及距离(P<0.01),但可促进细胞增殖(P<0.01)。结论该方法灵敏、简便、快速,可广泛应用于细胞迁移过程的动态观察。 展开更多
关键词 细胞迁移 活细胞工作站 细胞划痕 动态观察 小檗碱 RG3
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蚓激酶对胃癌SGC7901细胞增殖抑制和凋亡诱导作用 被引量:5
5
作者 刘丹 杨晓波 +4 位作者 王颖 于丽红 石焱 张英杰 康万军 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期7-11,共5页
目的:探讨蚓激酶(LBK)对胃癌SGC7901细胞的调控作用,并阐明其作用机制。方法:取对数生长期SGC7901细胞,将细胞分为对照组和2、4、8 U·mL^(-1) LBK组。采用MTT法检测不同时间段(24、48和72h)各组SGC7901细胞增殖抑制率,采用细胞划... 目的:探讨蚓激酶(LBK)对胃癌SGC7901细胞的调控作用,并阐明其作用机制。方法:取对数生长期SGC7901细胞,将细胞分为对照组和2、4、8 U·mL^(-1) LBK组。采用MTT法检测不同时间段(24、48和72h)各组SGC7901细胞增殖抑制率,采用细胞划痕实验检测各组SGC7901细胞体外迁移能力,采用流式细胞术检测各组SGC7901细胞凋亡率和不同细胞周期细胞百分率,采用Western blotting法检测各组SGC7901细胞中Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达水平。结果:MTT检测,与对照组比较,作用24、48和72h后不同剂量LBK组SGC7901细胞增殖抑制率明显升高(P<0.01)。细胞划痕实验,与对照组比较,4和8U·mL^(-1)LBK组SGC7901细胞划痕距离明显增加(P<0.01)。流式细胞术检测,与对照组比较,4和8U·mL^(-1) LBK组SGC7901细胞凋亡率明显升高(P<0.01),G1期和S期细胞百分率明显降低(P<0.01),G2期细胞百分率明显升高(P<0.01)。Western blotting法检测,与对照组比较,8U·mL^(-1) LBK组SGC7901细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),Bax和caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:LBK可抑制胃癌细胞株SGC7901增殖和迁移能力,且能够诱导细胞凋亡,其可能的机制是通过调节Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白表达水平来实现的。 展开更多
关键词 蚓激酶 SGC7901细胞 细胞划痕实验 细胞凋亡 细胞周期
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膜联蛋白A5低表达对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响 被引量:12
6
作者 王小杰 杨艳杰 +3 位作者 田焕娜 梁秀军 陈龙 李欣 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期487-492,共6页
目的探讨膜联蛋白A5(ANXA5)低表达对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响。方法将细胞分为干扰组、阴性对照组、转染试剂对照组和空白对照组,采用脂质体转染法将siRNA转染干扰组HeLa细胞,在转染72h后采用RT-PCR和Western blotting检测各组... 目的探讨膜联蛋白A5(ANXA5)低表达对人宫颈癌HeLa细胞迁移和侵袭的影响。方法将细胞分为干扰组、阴性对照组、转染试剂对照组和空白对照组,采用脂质体转染法将siRNA转染干扰组HeLa细胞,在转染72h后采用RT-PCR和Western blotting检测各组ANXA5的表达以鉴定抑制效率;细胞划痕实验检测各组HeLa细胞的迁移能力;Transwell实验检测各组HeLa细胞的侵袭能力;RT-PCR和Western blotting分别检测ANXA5低表达对E-钙黏蛋白(E-cadherin)和基质金属蛋白酶(MMP)-9 mRNA及蛋白表达的影响。结果干扰组ANXA5蛋白及mRNA的表达均明显低于阴性对照组(P<0.05);其表达均被显著抑制,干扰组细胞的迁移及侵袭能力比阴性对照组明显增强(P<0.05),E-cadherin mRNA及蛋白的表达显著低于阴性对照组(P<0.05);干扰组MMP-9mRNA及蛋白的表达均显著高于阴性对照组(P<0.05)。结论靶向ANXA5的siRNA可有效抑制ANXA5的表达,且ANXA5低表达可能通过影响E-cadherin和MMP-9的表达来促进HeLa细胞的迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 膜联蛋白A5 HELA 迁移性 侵袭性 细胞划痕实验 Transwell实验
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体外培养大鼠星形胶质细胞划伤模型 被引量:8
7
作者 师忠芳 韩明 +2 位作者 徐立新 董丽萍 袁芳 《中国康复理论与实践》 CSCD 2007年第12期1132-1133,共2页
目的复制体外培养大鼠星形胶质细胞划伤模型。方法利用传至第2代的体外培养的大鼠星形胶质细胞进行细胞划伤实验。分别于划伤前10min、划伤后1、3、6、12、24h观察细胞形态变化,并取培养上清液进行乳酸脱氢酶活性测定。结果细胞划伤后... 目的复制体外培养大鼠星形胶质细胞划伤模型。方法利用传至第2代的体外培养的大鼠星形胶质细胞进行细胞划伤实验。分别于划伤前10min、划伤后1、3、6、12、24h观察细胞形态变化,并取培养上清液进行乳酸脱氢酶活性测定。结果细胞划伤后划痕两侧边缘整齐,随时间推移细胞突起逐渐向划痕区延伸,且划痕区出现星形胶质细胞。细胞划伤后乳酸脱氢酶漏出量短时间内迅速增加,之后各时间点持续增加(P<0.05),且均高于相应时间点的对照组(P<0.05)。结论细胞形态变化及培养上清液中乳酸脱氢酶漏出量证实体外培养大鼠星形胶质细胞划伤模型复制成功。 展开更多
关键词 星形胶质细胞 细胞培养 划伤模型 乳酸脱氢酶
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生长因子基因在兔软骨细胞损伤模型中表达 被引量:2
8
作者 赵海洋 马子君 +1 位作者 任俊丽 陈传好 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期154-157,174,F0003,共6页
目的:探测生长因子基因在兔关节软骨细胞损伤后不同时间点的表达变化.方法:通过机械划伤制备关节软骨细胞损伤模型,观察软骨细胞在划伤后的形态变化.采用实时荧光定量PCR技术检测软骨细胞在划伤前和划伤后1、3、7d4个时间点的血管内... 目的:探测生长因子基因在兔关节软骨细胞损伤后不同时间点的表达变化.方法:通过机械划伤制备关节软骨细胞损伤模型,观察软骨细胞在划伤后的形态变化.采用实时荧光定量PCR技术检测软骨细胞在划伤前和划伤后1、3、7d4个时间点的血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维生长因子(bFGF)、转化生长因子-β1 (TGF-β1)、胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)和Ⅱ型胶原基因mRNA表达.结果:细胞划伤后划痕两侧细胞逐渐向划痕区生长和融合.VEGF和bFGF基因在细胞划伤后呈明显低水平表达,而TGF-β1、IGF-Ⅰ和Ⅱ型胶原基因却呈现较高表达水平.VEGF基因在细胞损伤第3天的表达达高峰后开始下降,而bFGF、TGF-β1及Ⅱ型胶原基因在损伤的第1天表达明显降低,随后呈现升高的趋势.IGF-Ⅰ基因在损伤初期表达变化平稳,在损伤第3天后出现明显升高趋势.结论:bFGF、TGF-β1、VEGF、IGF-Ⅰ和Ⅱ型胶原基因细胞损伤后的表达存在差异性,这为调节关节软骨内源性生长因子基因表达治疗关节软骨损伤提供实验依据. 展开更多
关键词 软骨细胞 细胞培养 划伤模型 生长因子
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脊髓康含药血清对脂多糖诱导的小胶质细胞迁移功能的影响 被引量:2
9
作者 郭杨 苑文超 +4 位作者 潘娅岚 马勇 徐桂华 王磊 刘家欢 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2882-2885,共4页
目的观察中药复方脊髄康(JSK)含药血清对脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞迁移功能的影响。方法采用摇床法提取原代小肢质细胞进行培养、鉴定;制备JSK含药血清;将小肢质细胞分为空白血清组、LPS组、JSK低、中、高剤量组、黄芪甲苷(AS-IV)组... 目的观察中药复方脊髄康(JSK)含药血清对脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞迁移功能的影响。方法采用摇床法提取原代小肢质细胞进行培养、鉴定;制备JSK含药血清;将小肢质细胞分为空白血清组、LPS组、JSK低、中、高剤量组、黄芪甲苷(AS-IV)组;选取细胞划痕实验、Transweil小室迁移实验、鬼笔环肽免疫荧光实验对LPS诱导后的原代小胶质细胞的迁移功能进行检测。结果空白血清组、JSK低、中、高剂量组、AS-IV组小胶质细胞的迁移能力均低于LPS组(P<0.01);JSK高刑量组、AS-IV组小肢质细胞的迁移能力均低于JSK低、中剂量组(P<0.05);JSK高剂量组与AS-IV组相比无明显差异(P>0.05)。结论中药复方脊髓康(JSK)含药血清对LPS诱导的小胶质细胞迁移功能具有一定的抑制作用,从抑制小肢质细胞迁移的角度为中医药治疗脊敌损伤提供一定的依据。 展开更多
关键词 脊髓康 含药血清 小胶质细胞 迁移 划痕实验 Transwell小室迁移实验 鬼笔环肽免疫荧光实验
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基于线阵CCD的手机屏幕瑕疵检测器的设计 被引量:3
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作者 董恒平 刘增元 +1 位作者 易阳 薛斌 《电子测量技术》 2012年第8期90-93,97,共5页
以改善手机屏幕质量传统人工检测方法的稳定性和可靠性为目的,制作了1款基于线阵CCD的手机屏幕划痕类瑕疵检测器。采用CCD相机和单稳态触发器为核心器件对信号采集、信号处理和功能模块电路进行了设计,可单独提取出划痕信号并将其整形... 以改善手机屏幕质量传统人工检测方法的稳定性和可靠性为目的,制作了1款基于线阵CCD的手机屏幕划痕类瑕疵检测器。采用CCD相机和单稳态触发器为核心器件对信号采集、信号处理和功能模块电路进行了设计,可单独提取出划痕信号并将其整形为矩形脉冲。基于此,可以对手机屏幕表面3cm×3cm区域内,宽度≥0.08mm的划痕进行快速识别并报警,并能实现对0~9以内,最小间距达0.5mm的划痕数目进行准确分辨和实时统计。该检测器可应用于手机生产流水线,实现对手机屏幕质量的在线实时、高效检测。 展开更多
关键词 线阵CCD 手机屏幕 划痕检测
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U0126对黑素瘤细胞A375侵袭的抑制作用 被引量:1
11
作者 陈办成 姚勇丰 +6 位作者 杨媛慧 钟绮丽 邵勇 张杰 叶庭路 胡小平 于波 《中国麻风皮肤病杂志》 2013年第2期88-91,共4页
目的:评价U0126对人黑素瘤细胞A375侵袭的抑制作用。方法:人黑素瘤A375细胞在6孔细胞培养板中培养,加U0126处理过夜,然后通过观察A375细胞的细胞形态、细胞移动及细胞侵袭判断U0126对A375细胞的抑制。蛋白电泳试验检测U0126对黑素瘤细胞... 目的:评价U0126对人黑素瘤细胞A375侵袭的抑制作用。方法:人黑素瘤A375细胞在6孔细胞培养板中培养,加U0126处理过夜,然后通过观察A375细胞的细胞形态、细胞移动及细胞侵袭判断U0126对A375细胞的抑制。蛋白电泳试验检测U0126对黑素瘤细胞A375的ERK1/2蛋白磷酸化的影响。结果:U0126诱导A375细胞产生肌动蛋白(actin)张力丝,导致细胞形态改变;A375细胞的移动和细胞侵袭被抑制。结论:U0126可能通过抑制黑素瘤的ERK1/2蛋白的磷酸化从而抑制人黑素瘤细胞A375的侵袭。 展开更多
关键词 U0126 黑素瘤细胞 侵袭 细胞划痕试验 细胞侵袭试验
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小檗碱对喉癌细胞克隆、转移及Toll样受体4蛋白的作用 被引量:3
12
作者 李娜 张颖 +3 位作者 李芳园 焦培英 张义 王文娟 《世界中医药》 CAS 2022年第20期2867-2872,共6页
目的:研究不同浓度小檗碱对喉癌细胞克隆、转移及Toll样受体4蛋白的影响与表达。方法:将喉癌细胞分为空白对照组、5μmol/L小檗碱干预组、10μmol/L小檗碱干预组、20μmol/L小檗碱干预组。蛋白质印迹法检测Toll样受体4、Toll样受体2蛋... 目的:研究不同浓度小檗碱对喉癌细胞克隆、转移及Toll样受体4蛋白的影响与表达。方法:将喉癌细胞分为空白对照组、5μmol/L小檗碱干预组、10μmol/L小檗碱干预组、20μmol/L小檗碱干预组。蛋白质印迹法检测Toll样受体4、Toll样受体2蛋白水平;噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移情况;流式法检测细胞凋亡。结果:在24 h时,空白对照组的细胞克隆形成能力与5μmol/L小檗碱干预组相似(P>0.05),空白对照组的细胞克隆能力较10μmol/L小檗碱干预组、20μmol/L小檗碱干预组高(P<0.05);在48 h和72 h时,与空白对照组比较,其他加入小檗碱进行干预的3组细胞克隆形成率均有明显下降(P<0.05)。且20μmol/L小檗碱干预组的克隆形成率明显低于10μmol/L小檗碱干预组、5μmol/L小檗碱干预组(P<0.05);与空白对照组比较,5μmol/L小檗碱干预组、10 mol/L小檗碱干预组、20μmol/L小檗碱干预组细胞中Toll样受体2及Toll样受体4蛋白表达降低(P<0.05),与5μmol/L小檗碱干预组、10μmol/L小檗碱干预组比较,20μmol/L小檗碱干预组Toll样受体2及Toll样受体4蛋白下降(P<0.05);与空白对照组比较,5μmol/L小檗碱干预组、10μmol/L小檗碱干预组、L4组细胞增殖率、划痕距离降低,凋亡率升高(P<0.01);与5μmol/L小檗碱干预组、10μmol/L小檗碱干预组比较,20μmol/L小檗碱干预组细胞的增殖率、划痕距离降低,凋亡率升高(P<0.05)。结论:不同浓度小檗碱均可降低喉癌细胞克隆、增殖及迁移能力,其作用机制可能通过抑制Toll样受体2、Toll样受体4蛋白活性从而促进喉癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 小檗碱 喉癌细胞 克隆 增殖 划痕试验 凋亡 TOLL样受体4
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慢病毒转导敲低Smad7表达对大鼠原代心肌成纤维细胞增殖、迁移、细胞表型分化和Ⅰ型胶原蛋白表达的影响 被引量:1
13
作者 罗红 高歌 +3 位作者 张光琼 刘欢 杨红宇 沈祥春 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期578-584,共7页
目的探讨Smad7敲低后对原代心肌成纤维细胞增殖、迁移、胶原分泌和细胞表型转化的影响。方法原代培养10只SD大鼠乳鼠的心肌成纤维细胞,免疫组织化学染色鉴定细胞。采用慢病毒转染方法敲低心肌成纤维细胞Smad7的表达,Western blotting验... 目的探讨Smad7敲低后对原代心肌成纤维细胞增殖、迁移、胶原分泌和细胞表型转化的影响。方法原代培养10只SD大鼠乳鼠的心肌成纤维细胞,免疫组织化学染色鉴定细胞。采用慢病毒转染方法敲低心肌成纤维细胞Smad7的表达,Western blotting验证Smad7蛋白敲低效率,实时无标记细胞仪检测心肌成纤维细胞的增殖情况,细胞划痕实验检测细胞的迁移情况,Western blotting检测Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)和细胞表型转化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况。结果成功培养心肌成纤维细胞,并进行细胞鉴定。慢病毒转染的心肌成纤维细胞感染复数(MOI)值为100,转染后88.33%的细胞表达绿色荧光蛋白,慢病毒敲低组Smad7的蛋白表达明显下调(P<0.05)。慢病毒敲低Smad7后细胞增殖明显下降(P<0.01),细胞迁移率明显减少(P<0.01)。与对照组相比,慢病毒敲低组细胞ColⅠ表达明显下降(P<0.01),α-SMA表达明显升高(P<0.01)。结论Smad7表达敲低后,心肌成纤维细胞的细胞功能发生明显改变,这些改变可能与Smad7下调导致心肌纤维化程度加重有关。 展开更多
关键词 心肌成纤维细胞 慢病毒沉默 SMAD7 α-平滑肌肌动蛋白 Ⅰ型胶原蛋白 实时无标记细胞分析术 细胞划痕实验 大鼠
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干细胞关键转录因子Oct4在人膀胱癌组织的表达及其对5637细胞生物学特性调节 被引量:1
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作者 帖鹏 梁亮 +4 位作者 杜双宽 任伟 孙羿 程永毅 徐永刚 《临床和实验医学杂志》 2016年第19期1865-1868,共4页
目的研究干细胞关键转录因子Oct4在人膀胱癌组织中的表达及对5 637细胞生物学的影响,为临床治疗提供依据。方法选取2015年1月至2016年1月74例膀胱癌组织、32例癌旁组织以及24例正常膀胱癌组织病理标本。采用免疫组化法检测标本中的Oct4... 目的研究干细胞关键转录因子Oct4在人膀胱癌组织中的表达及对5 637细胞生物学的影响,为临床治疗提供依据。方法选取2015年1月至2016年1月74例膀胱癌组织、32例癌旁组织以及24例正常膀胱癌组织病理标本。采用免疫组化法检测标本中的Oct4表达;体外培养膀胱肿瘤细胞,采用MTT法检测siRNA敲除Oct4后对与细胞增殖作用的影响;采用细胞划痕及Transwell试验测定细胞迁移、侵袭能力的影响;分析干细胞关键转录因子Oct4在人膀胱癌组织中的表达及对5 637细胞生物学的影响。结果人膀胱癌组织中12例Oct4蛋白检测阴性,62例Oct4蛋白检测阳性,阳性率为83.78%,显著高于膀胱癌组织的21.87%(P<0.05);正常组织中Oct4蛋白阳性率为16.67%,三种不同细胞组织Oct4蛋白阳性率比较差异具有统计学意义(P<0.05)。膀胱癌组织Oct4蛋白表达在不同临床分期中无统计学意义(P>0.05);膀胱癌组织Oct4蛋白表达在不同病理分级、淋巴结转移中差异具有统计学意义(P<0.05);病理分级越高、淋巴结转移,Oct4蛋白表达越高;免疫组化结果显示:膀胱癌组织中Oct4蛋白表达阳性率为83.78%,膀胱癌旁组织Oct4蛋白表达阳性率为21.87%;正常组织Oct4蛋白表达阳性率为16.67%。三种不同的细胞进行划痕试验2 h后进行观察:结果显示:Oct4-siRNA转染后细胞迁移显著减弱,而其他细胞大量迁入划痕区域。结论 Oct4的表达与人膀胱癌的分级、淋巴结转移关系密切,但是不同临床分期差异不具有统计学意义;Oct4高表达在膀胱癌的发生、发生中发挥重要作用,能抑制膀胱癌细胞系Oct4基因表达,抑制肿瘤细胞增殖,细胞细胞凋亡,具有较高的临床应用价值。 展开更多
关键词 肿瘤干细胞 转录因子 OCT4 细胞系 侵袭能力 划痕试验
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还原氧化石墨烯对人原代成纤维细胞的毒性研究 被引量:2
15
作者 付翔 李明新 +1 位作者 彭驰伟 王凯旋 《化学与生物工程》 CAS 2021年第2期49-52,共4页
通过氧化石墨烯制备还原氧化石墨烯,采用透射电子显微镜对其进行表征,并将其作用于人原代成纤维细胞,通过CCK8法细胞活性检测和细胞划痕实验研究还原氧化石墨烯对人原代成纤维细胞的毒性。结果表明:与氧化石墨烯相比,还原氧化石墨烯颜... 通过氧化石墨烯制备还原氧化石墨烯,采用透射电子显微镜对其进行表征,并将其作用于人原代成纤维细胞,通过CCK8法细胞活性检测和细胞划痕实验研究还原氧化石墨烯对人原代成纤维细胞的毒性。结果表明:与氧化石墨烯相比,还原氧化石墨烯颜色变深,粉末变细,具有明显的薄层和褶皱结构;CCK8法细胞活性检测结果显示5μg·mL^-1是还原氧化石墨烯对人原代成纤维细胞的安全浓度;细胞划痕实验结果显示还原氧化石墨烯浓度小于5μg·mL^-1时对人原代成纤维细胞的愈合没有影响。 展开更多
关键词 还原氧化石墨烯 人原代成纤维细胞 细胞划痕实验 细胞毒性
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熟地黄和生地黄配伍的四物汤抗过敏作用的研究 被引量:36
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作者 戴岳 詹亚玲 +1 位作者 毕培曦 陈耀邦 《中医药学刊》 2002年第5期596-597,603,共3页
目的 :观察熟地 (黄 )和生地 (黄 )配伍的四物汤对实验性变态反应的影响 ,比较其作用差异。方法 :以compound4 8/80诱导小鼠过敏性休克、皮肤搔抓反应及大鼠腹腔肥大细胞释放组胺 ,分别测定 1h内的死亡率、10min内的搔抓次数及组胺的释... 目的 :观察熟地 (黄 )和生地 (黄 )配伍的四物汤对实验性变态反应的影响 ,比较其作用差异。方法 :以compound4 8/80诱导小鼠过敏性休克、皮肤搔抓反应及大鼠腹腔肥大细胞释放组胺 ,分别测定 1h内的死亡率、10min内的搔抓次数及组胺的释放量和残留量 (荧光法 ) ;以氯化钴诱导小鼠耳廓迟发型超敏反应 ,测定耳廓肿胀度。结果 :熟地配伍的四物汤(5 0 0mg/kg)显著抑制compound4 8/80所致小鼠过敏性休克 ,而生地配伍的四物汤无明显影响 ;熟地和生地配伍的四物汤(5 0 0mg/kg)均明显抑制compound4 8/80诱导的小鼠搔抓反应及氯化钴所致小鼠迟发型超敏反应 ,前者的作用强于后者 ;体外试验中 ,熟地或生地配伍的四物汤 (10 0~ 4 0 0 μg/ml)抑制compound4 8/80诱导的大鼠肥大细胞释放组胺 ,前者的作用强于后者 ,熟地提取物减少组胺释放 ,而生地提取物无明显作用。结论 :熟地配伍的四物汤对肥大细胞依赖性速发型变态反应及T淋巴细胞依赖性迟发型变态反应的抑制作用均强于生地配伍的四物汤 ,熟地和生地作用的差异可能是其主要原因。 展开更多
关键词 熟地黄 生地黄 四物汤 过敏性休克 搔痒 肥大细胞 迟发型变态反应
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2甲-氧基雌二醇-RGD肽缀合物的合成及其抗血管生成作用(英文)
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作者 辛敏行 向华 +3 位作者 司文博 赵维 肖红 尤启冬 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期198-205,共8页
以2-甲氧基雌二醇为先导物,将其3位和17位通过连接基团与RGD肽偶联,合成了一系列2甲-氧基雌二醇-RGD肽缀合物,其中13个化合物未见文献报道,结构经IR,MS及1H NMR确证,并采用细胞迁移划痕试验初步测定了6个目标缀合物的抗血管生成活性。... 以2-甲氧基雌二醇为先导物,将其3位和17位通过连接基团与RGD肽偶联,合成了一系列2甲-氧基雌二醇-RGD肽缀合物,其中13个化合物未见文献报道,结构经IR,MS及1H NMR确证,并采用细胞迁移划痕试验初步测定了6个目标缀合物的抗血管生成活性。结果显示,化合物26c表现出较强的活性,强于先导物2甲-氧基雌二醇,从而证明了其潜在的抗血管生成作用。 展开更多
关键词 2甲-氧基雌二醇 RGD肽缀合物 抗血管生成作用 细胞迁移划痕试验
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基于体外实验探讨补阳还五汤对血管新生的影响 被引量:5
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作者 庞晓丽 刘建卫 +2 位作者 李虎虎 杨琳 王青龙 《中西医结合心脑血管病杂志》 2020年第13期2067-2071,共5页
目的基于体外实验探讨补阳还五汤对血管新生的影响。方法体外培养鼠胸主动脉段,给予补阳还五汤载药血清干预评估其对血管新生的影响;体外培养人脑微血管内皮细胞(HBMECs),给予补阳还五汤载药血清干预,采用细胞计数8(CCK-8)、划痕迁移法... 目的基于体外实验探讨补阳还五汤对血管新生的影响。方法体外培养鼠胸主动脉段,给予补阳还五汤载药血清干预评估其对血管新生的影响;体外培养人脑微血管内皮细胞(HBMECs),给予补阳还五汤载药血清干预,采用细胞计数8(CCK-8)、划痕迁移法和三维细胞培养法评估补阳还五汤对内皮细胞增殖、迁移和成管的影响;采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对血管生成因子进行检测,分析补阳还五汤对促血管新生相关因子表达的影响。结果各组血管段均可观察到新生血管生成,与对照组比较,补阳还五汤干预后存活的新生血管数量明显增多;体外内皮细胞干预结果显示,补阳还五汤可促进HBMECs的增殖、迁移和成管,促进血管内皮生长因子(VEGF)表达。结论补阳还五汤具有促进血管新生的作用,该作用可能与上调VEGF表达有关。 展开更多
关键词 补阳还五汤 血管新生 血管内皮生长因子 人脑微血管内皮细胞 细胞计数8 划痕迁移法
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白芍总苷对喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭、迁移及PI3K/Akt/GSK3β信号通路的影响 被引量:2
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作者 周晓红 杨雪 +2 位作者 连蕾 冯志星 要兆旭 《标记免疫分析与临床》 CAS 2022年第2期236-241,共6页
目的研究白芍总苷(TGP)对喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,并初步探究磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合成酶激酶3β(GSK3β)信号通路在此过程中的作用。方法体外培养喉癌Hep-2细胞,设对照组、25μg/mL TGP组、50... 目的研究白芍总苷(TGP)对喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,并初步探究磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合成酶激酶3β(GSK3β)信号通路在此过程中的作用。方法体外培养喉癌Hep-2细胞,设对照组、25μg/mL TGP组、50μg/mL TGP组、100μg/mL TGP组,采用不同浓度TGP(0、25、50、100μg/mL)作用后,分别采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)、Transwell法、划痕实验检测喉癌Hep-2细胞增殖活力、侵袭能力、迁移能力,蛋白免疫印迹法检测喉癌Hep-2细胞中PI3K/Akt/GSK3β信号通路相关蛋白表达水平。结果与对照组相比,25、50、100μg/mL TGP组喉癌Hep-2细胞增殖活力、侵袭能力、划痕闭合率和磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化GSK3β(p-GSK3β)蛋白表达水平显著降低(P<0.05),均呈现浓度依赖性(P<0.05)。结论TGP能够抑制喉癌Hep-2细胞增殖、侵袭、迁移,其机制可能与抑制PI3K/Akt/GSK3β信号通路表达有关。 展开更多
关键词 白芍总苷 喉癌HEP-2细胞 增殖活力 侵袭能力 划痕闭合率 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/糖原合成酶激酶3β信号通路
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硫酸酯化天麻多糖抗脑胶质瘤活性的研究 被引量:7
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作者 章柏钰 谭珺 +2 位作者 郭咸希 刘刚 周本宏 《中国药师》 CAS 2020年第2期227-231,共5页
目的:研究硫酸酯化天麻多糖(sulfated gastrodia elata polysaccharides,GEPs)抗脑胶质瘤的活性。方法:将大鼠脑胶质瘤细胞(C6)实验分为空白对照组和GEPs各剂量组(0.10,0.25,0.50,1.00,1.50 mg·ml^-1),采用CCK-8法检测细胞存活率,... 目的:研究硫酸酯化天麻多糖(sulfated gastrodia elata polysaccharides,GEPs)抗脑胶质瘤的活性。方法:将大鼠脑胶质瘤细胞(C6)实验分为空白对照组和GEPs各剂量组(0.10,0.25,0.50,1.00,1.50 mg·ml^-1),采用CCK-8法检测细胞存活率,并观察细胞形态变化;采用DAPI荧光染色法观察细胞凋亡形态;采用划痕实验检测不同浓度GEPs对细胞迁移能力的影响。结果:GEPs各剂量组作用于C6胶质瘤细胞24 h和48 h时可显著降低细胞生存率(P<0.05),并呈浓度依赖性(P<0.01)。倒置显微镜下可见,随着GEPs浓度的上升,C6细胞体积变小,细胞间隙变大,失去原有的细胞形态,并且贴壁不良,产生大量漂浮物。DAPI染色观察到C6细胞数量明显锐减,细胞核缩小,凋亡的细胞明显增多。细胞划痕实验表明,GEPs各剂量组作用于C6细胞24 h后,愈合率逐渐下降,并呈浓度依赖性(P<0.05)。结论:硫酸酯化天麻多糖能显著抑制神经胶质瘤细胞生长的活性,并可有效抑制神经胶质瘤细胞的迁移。 展开更多
关键词 天麻多糖 硫酸酯化 抗脑胶质瘤 细胞划痕实验 迁移
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