吸低氧混合气后循环内皮细胞数目及形态学的变化

在吸１０．５％的低氧混合气１５ｍｉｎ前后，观察了６０名战斗机飞行员循环内皮细胞数目的变化和形态学的改变，结果实验前的数目为１．０３±０．４８（个／μｌ）；实验后为３．７３±０．５７（个／μｌ），发生了明显的改变。并观察到实验后年轻内皮细胞的脱落明显增多，与飞行员生活的习惯有一定的相关性。结果表明：在急性呼吸低氧以后对血管内皮细胞造成一定的损害。这可以用来解释飞行员的职业病。

二氮嗪预先给药对大鼠心肌微血管内皮细胞缺氧复氧时NF-κB mRNA和fractalkine mRNA表达的影响

目的 探讨二氮嗪预先给药对大鼠心肌微血管内皮细胞缺氧复氧时NF-κB mRNA和fractalkine（FKN）mRNA表达的影响.方法 培养SD大鼠心肌微血管内皮细胞,以1×106个/ml的密度接种于96孔板（100μl/孔）或培养皿（2 ml/皿）,随机分为4组（n=24）.正常对照组（C组）不作任何处理,缺氧复氧组（H/R组）、二氮嗪预先给药组（DZ组）、二氮嗪预先给药＋线粒体ATP敏感性钾通道阻断剂5-羟葵酸组（DZ＋5-HD组）均进行缺氧2 h、复氧2 h.DZ组和DZ＋5-HD组在缺氧前2 h分别加入100 μmol/L二氮嗪、100 μmol/L二氮嗪＋100μmol/L 5-羟葵酸.于复氧2 h时测定细胞活力、细胞凋亡率、NF-κB mRNA和FKN mRNA表达水平.结果 与C组比较,H/R组细胞活力降低,细胞凋亡率升高,NF-κB mRNA和FKN mRNA表达上调（P＜0.01）;与H/R组比较,DZ组细胞活力升高,细胞凋亡率降低,NF-κB mRNA和FKN mRNA表达下调（P＜0.05）;5-羟葵酸可抑制二氮嗪预先给药导致的上述改变（P＜0.05）.结论 二氮嗪预先给药可下调NF-κB和FKN表达,从而减轻大鼠心肌微血管内皮细胞缺氧复氧损伤,其机制与激活线粒体ATP敏感性钾通道有关.

二氮嗪预先给药对大鼠心肌微血管内皮细胞缺氧复氧时缺氧诱导因子-1α mRNA和p53mRNA表达的影响

目的 探讨二氮嚓预先给药对大鼠心肌微血管内皮细胞缺氧复氧时缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）mRNA和p53 mRNA表达的影响.方法 培养SD大鼠心肌微血管内皮细胞,以1×106/ml的密度接种于96孔板（100μl/孔）或培养皿（2 ml/皿）,采用随机数字表法,将其随机分为4组（n=24）：正常对照组（C组）不作任何处理,缺氧复氧组（H/R组）、二氮嗪预先给药组（DZ组）、二氮嗪预先给药＋线粒体ATP敏感性钾通道阻断剂5-羟葵酸组（DZ＋5-HD组）均进行缺氧2 h复氧2 h.DZ组和DZ＋5-HD组在缺氧前2 h分别加入100μmol/L二氮嗪、100μmol/L二氮嗪＋100μmol/L 5-羟葵酸.于复氧2h时测定细胞活力、细胞凋亡率、HIF-1α mRNA和p53 mRNA表达水平.结果 与C组比较,H/R组细胞活力降低,细胞凋亡率升高,HIF-1αmRNA和p53 mRNA表达上调（P＜0.01）;与H/R组比较,DZ组细胞活力升高,细胞凋亡率降低,HIF-1αmRNA表达上调,p53 mRNA表达下调（P＜0.05或0.01）;5-羟葵酸可抑制二氮嗪预先给药导致的上述改变（P＜0.05）.结论 二氮嗪预先给药可上调HIF-1和下调p53表达,从而减轻大鼠心肌微血管内皮细胞缺氧复氧损伤,其机制与激活线粒体ATP敏感性钾通道有关.

S100A4/Mts1在低氧诱导肺动脉平滑肌增殖中的作用机制

目的探讨S100A4/Mtsl在低氧诱导肺动脉平滑肌增殖中的作用机制。方法大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)分为对低氧刺激组及AG490干预组;免疫荧光分别检测常氧组、低氧刺激组及AG490干预组RPASMCs细胞S100A4/Mtsl的表达情况,Westernblot分别检测三组细胞的S100A4/Mtsl、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达。结果低氧0hS100A4/Mtsl在胞浆中极少表达,低氧刺激后胞浆及胞核中明显表达;S100A4/Mtsl、p-JAK2、p-STAT3蛋白在低氧刺激8h比低氧刺激0h表达明显升高(P<0.05),AG490干预低氧刺激8h组三种蛋白的表达较低氧刺激8h组显著下降(P<0.05)。结论低氧刺激下S100A4/Mtsl基因在PAMSCs增殖中发挥重要作用,并且可被AG490抑制。

线粒体分裂在大鼠海马神经元缺氧复氧损伤中的作用

目的 评价线粒体分裂在大鼠海马神经元缺氧复氧损伤中的作用.方法 原代培养Wistar大鼠海马神经元,采用随机数字表法分为5组（n=60）：正常组（N组）不进行任何处理;赋形剂组（V组）加入二甲基亚砜（DMSO）孵育40 min,终浓度＜0.1％;缺氧复氧组（H/R组）采用氧糖剥夺法制备大鼠海马神经元缺氧复氧损伤模型,缺氧6h,复氧20 h.缺氧复氧＋赋形剂组（H/R＋V组）于缺氧前40 min加入DMSO,终浓度＜0.1％;线粒体分裂抑制剂组（M组）于缺氧前40 min加入50mmol/L线粒体分裂抑制剂Mdivi-1（溶于DMSO,DMSO浓度＜0.1％）.采用Mito Tracker染色法观察线粒体形态,Western blot法检测线粒体分裂蛋白（Drp1）、线粒体融合蛋白（Mfn2）、过氧化物酶体增殖物受体γ辅激活因子（PGC-1α）、核呼吸因子-1（NRF-1）和线粒体转录因子A（TFAM）的表达水平,多功能酶标仪和荧光显微镜检测线粒体活性氧（ROS）水平,用流式细胞仪测定细胞凋亡率.结果 与N组比较,H/R组Drp1、PGC-1α、NRF-1及TFAM表达水平、ROS含量和细胞凋亡率升高,Mfn2表达下调（P＜0.05）;与H/R组比较,M组Drp1表达水平、ROS含量和细胞凋亡率降低,Mfn2、PGC-1α 、NRF-1和TFAM表达上调（P＜0.05）.结论 线粒体分裂参与了大鼠海马神经元缺氧复氧损伤的过程.