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METTL16通过调节消皮素D介导的细胞焦亡抑制胶质母细胞瘤细胞增殖和侵袭能力的实验研究
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作者 包洪恩 白慧茹 +5 位作者 刘凯 窦长武 姜粉军 高乃康 任佳星 王飞 《中华神经外科杂志》 2024年第10期1056-1064,共9页
目的探讨甲基转移酶样蛋白16(METTL16)对胶质母细胞瘤(GBM)细胞增殖和侵袭能力的影响,并揭示其潜在的分子生物学机制。方法体外培养U87及U251人GBM细胞株,通过转染METTL16过表达载体获得过表达METTL16基因的U87及U251细胞株,并将实验细... 目的探讨甲基转移酶样蛋白16(METTL16)对胶质母细胞瘤(GBM)细胞增殖和侵袭能力的影响,并揭示其潜在的分子生物学机制。方法体外培养U87及U251人GBM细胞株,通过转染METTL16过表达载体获得过表达METTL16基因的U87及U251细胞株,并将实验细胞分为阴性对照(NC)、过表达阴性对照(OE-NC)及METTL16过表达(OE-METTL16)组;实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白质免疫印迹实验(WB)检测METTL16基因过表达情况;CCK-8实验检测过表达METTL16基因对实验细胞株增殖能力的影响;细胞划痕实验及Transwell小室实验检测过表达METTL16对实验细胞株细胞迁移、侵袭能力的影响;流式细胞术检测过表达METTL16对实验细胞株凋亡及细胞周期的影响;WB实验检测过表达METTL16对实验细胞株焦亡标志物蛋白表达水平的影响。结果WB及qPCR实验表明,过表达METTL16基因的实验细胞株构建成功;CCK-8实验显示,与NC、OE-NC组相比,OE-METTL16组实验细胞株的细胞增殖能力均降低(均P<0.05);细胞划痕及Transwell实验表明,在U87、U251实验细胞株中,OE-METTL16组的细胞划痕愈合率及迁移、侵袭细胞数量均低于NC、OE-NC组(均P<0.05);流式细胞术结果显示,与NC、OE-NC组相比,OE-METTL16组实验细胞株细胞凋亡率均增加(均P<0.01)。此外,OE-METTL16组较NC、OE-NC组的G2/M期细胞占比均增加(均P<0.01),过表达METTL16可以诱导实验细胞株的细胞周期在G2/M期停滞。WB实验可见OE-METTL16组实验细胞株中的焦亡相关标志物白细胞介素1β、核因子κB、髓样分化因子88、核苷酸结合寡聚化结构域样受体3、消皮素D(GSDMD)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1的表达水平较NC、OE-NC组均增加(均P<0.05)。结论METTL16可通过调节GSDMD介导的细胞焦亡抑制GBM细胞的增殖、迁移、侵袭;其可作为潜在的靶向分子,为GBM治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 胶质母细胞瘤 细胞增殖 细胞焦亡 细胞侵袭 甲基转移酶样蛋白16 消皮素D
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