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Rapamycin promotes Schwann cell migration and nerve growth factor secretion 被引量:6
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作者 Fang Liu Haiwei Zhang +3 位作者 Kaiming Zhang Xinyu Wang Shipu Li Yixia Yin 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2014年第6期602-609,共8页
Rapamycin, similar to FKS06, can promote neural regeneration in vitro. We assumed that the mechanisms of action of rapamycin and FK506 in promoting peripheral nerve regeneration were similar. This study compared the e... Rapamycin, similar to FKS06, can promote neural regeneration in vitro. We assumed that the mechanisms of action of rapamycin and FK506 in promoting peripheral nerve regeneration were similar. This study compared the effects of different concentrations of raparnycin and FK506 on Sc hwann cells and investigated effects and mechanisms of rapamycin on improving peripheral nerve regeneration. Results demonstrated that the lowest rapamycin concentration (1.53 nmol/L) more significantly promoted Schwann cell migration than the highest FK506 concentration (100μmol/L). Rapamycin promoted the secretion of nerve growth factors and upregulated growth-associated protein 43 expression in Schwann cells, but did not significantly affect Schwann cell proliferation. Therefore, rapamycin has potential application in peripheral nerve regeneration therapy. 展开更多
关键词 nerve regeneration peripheral nerve injury RAPAMYCIN FK506 Schwann cell cell mi-gration nerve growth factor growth-associated protein 43 NSFC grant neural regeneration
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长链非编码RNA PVT1调控miR-551通过Wnt信号通路对卵巢癌迁移和侵袭的影响 被引量:15
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作者 聂金霞 刘娅 徐明明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期232-238,共7页
目的:探讨长链非编码RNA PVT1在卵巢癌组织中的表达情况及其在卵巢癌细胞迁移和侵袭过程中的作用及机制。方法:q PCR检测卵巢癌和正常卵巢组织及不同卵巢癌细胞中PVT1的表达情况;Transwell侵袭实验和细胞划痕实验分别检测沉默PVT1后卵... 目的:探讨长链非编码RNA PVT1在卵巢癌组织中的表达情况及其在卵巢癌细胞迁移和侵袭过程中的作用及机制。方法:q PCR检测卵巢癌和正常卵巢组织及不同卵巢癌细胞中PVT1的表达情况;Transwell侵袭实验和细胞划痕实验分别检测沉默PVT1后卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的变化;双萤光素酶报告基因检测PVT1与微小RNA(miR)-551的相互作用;Transwell侵袭实验和细胞划痕实验分别检测沉默PVT1后miR-551-inhibitor对卵巢癌细胞侵袭和迁移能力的影响;Western blot法检测沉默PVT1后Wnt信号通路相关蛋白的表达情况。裸鼠皮下成瘤实验检测沉默PVT1对卵巢癌成瘤重量及体积的影响。结果:与正常卵巢组织相比,卵巢瘤组织中PVT1表达明显增高(P<0.05);卵巢癌细胞株ES-2中PVT1表达水平最高(P<0.05);沉默PVT1可以抑制卵巢癌细胞侵袭和迁移能力;PVT1能与miR-551的位点特异性结合;沉默PVT1后,miR-551-inhibitor可以促进卵巢癌细胞侵袭和迁移能力;沉默PVT1后Wnt信号通路蛋白的表达相应下调;与阴性对照组相比,PVT1-siRNA组荷瘤小鼠肿瘤体积和重量都明显减小(P<0.05)。结论:PVT1在卵巢癌发生发展过程中起重要作用,它可以靶向调节miR-551,通过Wnt信号通路调控卵巢癌细胞的侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 长链非编码RNA PVT1 卵巢癌 微小RNA-551 WNT信号通路 细胞迁移 肿瘤侵袭
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碱性成纤维细胞成长因子、新生小牛血清和肝素对大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响 被引量:15
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作者 石缨 温进坤 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 1998年第3期189-191,共3页
为研究血管平滑肌细胞迁移及其影响因素,建立体外检测血管平滑肌细胞迁移的实验方法,并观察不同浓度的新生小牛血清、碱性成纤维细胞生长因子和肝素作用于血管平滑肌细胞不同时间后对其迁移的影响。结果发现,新生小牛血清和碱性成纤... 为研究血管平滑肌细胞迁移及其影响因素,建立体外检测血管平滑肌细胞迁移的实验方法,并观察不同浓度的新生小牛血清、碱性成纤维细胞生长因子和肝素作用于血管平滑肌细胞不同时间后对其迁移的影响。结果发现,新生小牛血清和碱性成纤维细胞生长因子均可显著促进血管平滑肌细胞迁移(P<0.001或P<0.01);肝素对新生小牛血清诱导的血管平滑肌细胞迁移产生显著抑制作用(P<0.001).三者的作用强度均与浓度呈正相关。提示碱性成纤维细胞生长因子对血管平滑肌细胞具有促增殖作用.而肝素具有抑制血管平滑肌细胞迁移的作用。 展开更多
关键词 血管平滑肌细胞 迁移 肝素 NCS BFGF
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α-倒捻子素对MKN45胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和血管生成的影响及其作用机制 被引量:6
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作者 马林伟 徐红涛 +1 位作者 戴小丽 韩中保 《重庆医科大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第11期1426-1432,共7页
目的:探讨α-倒捻子素对人胃癌细胞MKN45增殖、迁移、侵袭和血管生成的影响及其作用机制。方法:MTS法研究α-倒捻子素对人胃癌细胞MKN45增殖的影响;伤口愈合实验及Transwell实验分别用于研究α-倒捻子素对MKN45细胞体外迁移及侵袭的影响... 目的:探讨α-倒捻子素对人胃癌细胞MKN45增殖、迁移、侵袭和血管生成的影响及其作用机制。方法:MTS法研究α-倒捻子素对人胃癌细胞MKN45增殖的影响;伤口愈合实验及Transwell实验分别用于研究α-倒捻子素对MKN45细胞体外迁移及侵袭的影响;采用大鼠动脉环实验检测α-倒捻子素对MKN45胃癌细胞血管生成的影响;ELISA实验检测α-倒捻子素对MKN45细胞分泌的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)及碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)表达的影响等;Western blot检测α-倒捻子素对基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、神经-钙黏素(N-cadherin)及上皮-钙黏素(E-cadherin)蛋白表达的影响。结果:α-倒捻子素能够明显抑制人胃癌细胞MKN45的增殖,且具有剂量依赖性;α-倒捻子素能够明显抑制MKN45细胞的迁移和侵袭;动脉环实验结果显示α-倒捻子素能够抑制MKN45细胞诱导的血管生成。ELISA结果显示,α-倒捻子素能够抑制VEGF、TNF-α、TGF-β及b FGF的蛋白表达;Western blot结果显示α-倒捻子素能够下调MMP-2、MMP-9及神经-钙黏素的表达,同时上调上皮-钙黏素的表达。结论:α-倒捻子素能够抑制MKN45人胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭和血管生成,其发挥作用可能与以下两方面机制相关:(1)抑制调控肿瘤细胞迁移及血管生成相关蛋白的表达;(2)抑制MKN45细胞的上皮间质转化。 展开更多
关键词 α-倒捻子素 胃癌细胞 增殖 迁移与侵袭 血管生成 分子机制
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加减大黄蛰虫丸抑制视网膜色素上皮细胞增殖、移行及其机制研究 被引量:6
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作者 罗旭昇 吴星伟 顾青 《中国中医眼科杂志》 2009年第5期249-254,共6页
目的观察加减大黄蛰虫丸对人视网膜色素上皮(RPE)细胞(CRL-2302)增殖、移行以及表达血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)的影响,了解其干预RPE细胞参与脉络膜新生血管(CNV)形成的途径及初步机制。方法MTS比色法观察加减大... 目的观察加减大黄蛰虫丸对人视网膜色素上皮(RPE)细胞(CRL-2302)增殖、移行以及表达血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶2(MMP-2)的影响,了解其干预RPE细胞参与脉络膜新生血管(CNV)形成的途径及初步机制。方法MTS比色法观察加减大黄蛰虫丸对VEGF诱导的CRL-2302细胞增殖的影响;Transwell小室检测加减大黄蛰虫丸对CRL-2302细胞移行的影响;WesternBlot和实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法,分别检测加减大黄蛰虫丸对CRL-2302细胞表达VEGF、基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白和mRNA的影响。结果MTS法显示,0.05、0.1和0.2g/ml浓度的加减大黄蛰虫丸对VEGF诱导的CRL-2302细胞增殖具有抑制作用;Transwell小室实验显示,加减大黄蛰虫丸浓度为0、12.5、25和50mg/ml时CRL-2302细胞移行数分别为198.33±19.86、121.67±14.05、62.33±11.24和18.67±4.51;50、100mg/ml浓度的加减大黄蛰虫丸具有抑制CRL-2302细胞VEGF、MMP-2蛋白和mRNA表达的作用,200mg/ml浓度的加减大黄蛰虫丸具有抑制CRL-2302细胞VEGF、MMP-2蛋白和MMP-2mRNA表达的作用。结论加减大黄蛰虫丸可能通过抑制CRL-2302细胞增殖、移行的途径抑制其参与CNV形成,其机理可能与抑制CRL-2302细胞VEGF、MMP-2的表达有关。 展开更多
关键词 大黄蛰虫丸 视网膜色素上皮细胞 增殖 移行 脉络膜新生血管 血管内皮生长因子 基质金属蛋白酶2
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高迁移率族蛋白1对多形核白细胞黏附和游出肺毛细血管内皮细胞的影响及其机制 被引量:1
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作者 杨智勇 陶京 +3 位作者 周峰 熊炯忻 吴河水 王春友 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第22期2403-2407,共5页
目的:探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)对多形核白细胞(PMN)黏附和游出肺毛细血管内皮细胞(PCEC)的影响机制.方法:分离培养大鼠PMN和PCEC,分别加入0,10,100,1000和10 000μg/L浓度的rHMGB1与PCEC单层培养.记录PMN黏附率.在Bovden小室迁移模... 目的:探讨高迁移率族蛋白1(HMGB1)对多形核白细胞(PMN)黏附和游出肺毛细血管内皮细胞(PCEC)的影响机制.方法:分离培养大鼠PMN和PCEC,分别加入0,10,100,1000和10 000μg/L浓度的rHMGB1与PCEC单层培养.记录PMN黏附率.在Bovden小室迁移模型中加入上述浓度的rHMGB1,观察PMN穿过PCEC的迁移率.将PMN与100μg/L的rHMGB1孵育,流式细胞仪检测其表面CD11a/CD18和CD11b/CD18的表达率.结果:随着rHMGB1浓度的增加,PMN的粘附率(2.5%±0.5%,5.1%±0.9%,10.7%±1.7%,14.6%±2.6%,25.4%±4.3%)和穿过PCEC的游出率(0%,1.1%±013%,613%±1.2%,12.4%±2.7%,14.2%±3.1%)逐渐增加,但对向下室的迁移率无影响,州MGB1可明显增加PMN表面CD11a/CD18和CD11b/CD18表达的阳性率(均P<0.05)。结论:HMGB1通过上调CD11a/CD18和CD11b/CD18的表达增加PMN对PCEC的黏附率和游出率。 展开更多
关键词 高迁移率族蛋白1 多形核白细胞 肺毛细血管内皮细胞 黏附 游出 CD11/CD18 流式细胞仪
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TGF-β_1对人输尿管平滑肌细胞增殖和迁移及α-SMA表达的影响 被引量:3
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作者 徐桂彬 余涵 +7 位作者 陈丽 罗亚楠 马猛 王林杰 何永忠 彭晔 李逊 朱晓琴 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期656-660,共5页
目的探讨外源性转化生长因子-β_1(transforming growth factor-β_1,TGF-β_1)对人输尿管平滑肌细胞(USMCs)生物学功能的影响。方法取正常的输尿管平滑肌细胞分为4组:1对照组;2TGF-β_1组(10μg/L TGF-β_1处理);3TGF-β_1拮抗剂组(30... 目的探讨外源性转化生长因子-β_1(transforming growth factor-β_1,TGF-β_1)对人输尿管平滑肌细胞(USMCs)生物学功能的影响。方法取正常的输尿管平滑肌细胞分为4组:1对照组;2TGF-β_1组(10μg/L TGF-β_1处理);3TGF-β_1拮抗剂组(30μmol/L SB-431542处理);4TGF-β_1+TGF-β_1拮抗剂组(10μg/L TGF-β_1+30μmol/L SB-431542处理)。MTT法检测各组输尿管平滑肌细胞在处理0、24、48、72h的增殖情况;细胞划痕实验检测各组输尿管平滑肌细胞处理24h、48h时的迁移能力;各组细胞处理48h后分别应用RT-qPCR和Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达变化。结果MTT实验显示与对照组相比,TGF-β_1处理24h后USMCs增殖率增加(P<0.05),处理48h、72h后增殖最明显(P<0.01),拮抗剂组细胞生长明显受抑制(P<0.05或P<0.01),TGF-β_1联合SB-431542共同处理细胞后其增殖活性与对照组相比无明显差异;细胞划痕实验显示TGF-β_1组与对照组相比,各时间点细胞迁移距离明显增加(P<0.01),拮抗剂组24h和48h细胞迁移距离与对照组相比明显减小(P<0.01),TGF-β_1联合拮抗剂处理组迁移距离与对照组相比差异无统计学意义;RT-qPCR和Western blot结果显示:与对照组相比,经TGF-β_1处理组α-SMA mRNA和蛋白的表达明显增加(均P<0.01),TGF-β_1拮抗剂则明显下调α-SMA mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。结论 TGF-β_1能够明显上调输尿管平滑肌细胞中α-SMA mRNA和蛋白的表达,并能增强细胞增殖和迁移的生物活性,拮抗TGF-β_1信号路径可明显对α-SMA的表达及细胞增殖和迁移产生抑制效应。 展开更多
关键词 输尿管平滑肌细胞 转化生长因子β_1 Α-平滑肌肌动蛋白 增殖 迁移
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沉默OGFR基因对非小细胞肺癌A549细胞株增殖、迁移和侵袭能力的影响
8
作者 石硕 陈铭伍 《老年医学研究》 2022年第1期14-17,共4页
目的探讨沉默OGFR基因对非小细胞肺癌A549细胞株增殖、迁移和侵袭的影响。方法取A549细胞株,分为对照组、实验组,分别转染si-NC阴性对照、OGFR特异性的小干扰RNA。采用RT-qPCR和Westernblotting法分别检测细胞中的OGFRmRNA和蛋白,采用CC... 目的探讨沉默OGFR基因对非小细胞肺癌A549细胞株增殖、迁移和侵袭的影响。方法取A549细胞株,分为对照组、实验组,分别转染si-NC阴性对照、OGFR特异性的小干扰RNA。采用RT-qPCR和Westernblotting法分别检测细胞中的OGFRmRNA和蛋白,采用CCK-8实验检测细胞增殖能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力,平板克隆形成实验检测细胞集落形成能力。结果与对照组相比,实验组OGFRmRNA及蛋白相对表达量低,培养24、48、72 h细胞增殖OD值均低,穿膜细胞数少,细胞迁移率低,克隆形成细胞集落数少(P均<0.05)。结论沉默OGFR基因可降低A549细胞株OGFR基因mRNA和蛋白质的表达,在体外减弱了其增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 阿片生长因子受体 非小细胞肺癌 A549细胞株 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭
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CYP2U1基因沉默对人膀胱癌J82细胞增殖、凋亡、迁移能力的影响
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作者 赵小磊 赵振华 +1 位作者 常俊锴 李松 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第13期1750-1753,共4页
目的观察细胞色素P4502U1(CYP2U1)基因沉默对人膀胱癌J82细胞增殖、凋亡、迁移能力的影响。方法脂质体转染法转染至J82细胞,qRT-PCR、Western-blot检测CYP2U1、p53、caspase-3、Bcl-2的表达。MTT、划痕试验、流氏细胞技术分别检测各组... 目的观察细胞色素P4502U1(CYP2U1)基因沉默对人膀胱癌J82细胞增殖、凋亡、迁移能力的影响。方法脂质体转染法转染至J82细胞,qRT-PCR、Western-blot检测CYP2U1、p53、caspase-3、Bcl-2的表达。MTT、划痕试验、流氏细胞技术分别检测各组细胞增殖、迁移、凋亡情况。结果 CYP2U1基因沉默后CYP2U1在人膀胱癌J82细胞中表达减少(P <0.05)。沉默CYP2U1基因可提高人膀胱癌J82细胞的增殖和迁移,抑制凋亡,促进Bcl-2的表达,抑制p53、caspase-3的表达(P <0.05)。结论 CYP2U1基因沉默能促进人膀胱癌J82细胞的增殖和迁移,抑制其凋亡,可能与下调p53、caspase-3、上调Bcl-2 mRNA及蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 细胞色素P4502U1 人膀胱癌J82细胞 增殖 凋亡 迁移
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持续高表达CXC趋化因子受体-4重组慢病毒颗粒的包装鉴定及细胞迁移 被引量:1
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作者 王奇 冯世庆 +4 位作者 孔晓红 刘畅 张彬 张亮 张衍军 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期605-608,共4页
目的观察持续高表达CXC趋化因子受体_4(CXCR4)慢病毒颗粒在细胞迁移的作用。方法从大鼠大脑组织提取总RNA,逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)得到大鼠cDNA文库,以cDNA为模板,经过PCR获得CXCR4基因,测序正确后连接到pCDHl一MCS—EFl... 目的观察持续高表达CXC趋化因子受体_4(CXCR4)慢病毒颗粒在细胞迁移的作用。方法从大鼠大脑组织提取总RNA,逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)得到大鼠cDNA文库,以cDNA为模板,经过PCR获得CXCR4基因,测序正确后连接到pCDHl一MCS—EFl一copGFP(慢病毒载体质粒),与第3代慢病毒其余辅助质粒pMDLG/pRRE、pRsv.Rev及pVSV.G按照1:4:1:1共转染293T细胞包装慢病毒,超离慢病毒,测定病毒滴度,感染Hela细胞72h与14d后,分别观察Hela细胞荧光,实时定量聚合酶链反应(Real—timepcn)测定Hela细胞表达大鼠CXCR4mRNA含量,Transwell小室观察细胞迁移。结果测序CXCR4基因序列正确,并成功连接到pCDHl.MCS—EFl.copGFP,利用第3代慢病毒包装系统成功包装慢病毒,经超离慢病毒颗粒,流式细胞仪测定慢病毒滴度为7.89×10^5,持续观察Hela细胞荧光强度,Real.timePCR检测结果示Hela细胞表达大鼠CXCR4mRNA水平显著升高(72h为78.29倍,至14d为58.93倍),Transwell小室观察到高表达CXCR4的慢病毒颗粒感染组细胞迁移多(P〈0.05)。结论高效感染力并持续高表达CXCR4的慢病毒颗粒可持续促进细胞迁移,并有基质细胞衍生因子.1d(SDF一10L)浓度依赖性。 展开更多
关键词 CXC趋化因子受体-4 基质细胞衍生因子-1a 慢病毒 细胞迁移
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高压电场对A549肺癌细胞株转移潜能影响研究
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作者 卢强 黄立军 +3 位作者 韩勇 闫小龙 张新伟 李小飞 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2014年第1期16-19,共4页
目的:研究不同强度的体外高压电场对肺癌细胞系A549细胞的黏附、迁移及侵袭等能力的影响。方法:选择处于生长周期的A549细胞,实验组共分为7个亚组,分别施加500~2 500V/cm的高压电场,对照组未施加电场处理。经生长抑制实验、黏附实验、... 目的:研究不同强度的体外高压电场对肺癌细胞系A549细胞的黏附、迁移及侵袭等能力的影响。方法:选择处于生长周期的A549细胞,实验组共分为7个亚组,分别施加500~2 500V/cm的高压电场,对照组未施加电场处理。经生长抑制实验、黏附实验、侵袭及转移实验检验不同强度高压电场对A549细胞的影响。结果:1)细胞黏附能力:实验组各亚组的黏附细胞数明显少于对照组,实验组各亚组与对照组、实验组各亚组之间差异有统计学意义,P<0.001。2)细胞迁移能力:电场强度为500V/cm的实验亚组与对照组比较,差异无统计学意义,P=0.089;电场强度≥750V/cm的各实验亚组之间、及其与对照组比较,差异有统计学意义,P<0.001。3)细胞侵袭能力:电场强度为500和750V/cm的实验亚组与对照组比较,差异无统计学意义,P=0.181;电场强度≥1 000V/cm的实验亚组与对照组间比较,差异有统计学意义,P<0.001;电场强度为1 000~1 250V/cm的实验亚组和1 500~2 000V/cm实验亚组间比较,差异有统计学意义,P<0.001。结论:体外高压电场可以明显抑制A549细胞的黏附、迁移和侵袭等能力;随着电场强度的增加,肿瘤细胞的抑制程度也随之增加。 展开更多
关键词 肺肿瘤 高压电场 不可逆电穿孔 A549细胞 黏附能力 迁移能力 肿瘤侵润
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