细胞融合法制备抗人CD3-抗人IgMμ链双特异性抗体

目的制备抗人CD3-抗人IgMμ链双特异性抗体(Bispecificantibody,BsAb)的细胞株,并对建株的杂交-杂交瘤的稳定性及活性进行鉴定。方法将抗人CD3单克隆抗体细胞株采用8-AG诱变成HAT敏感杂交瘤细胞株,再通过FuGENETM6转染含neo基因质粒pCDaA3,制备成具有双标记杂交瘤αCD3HATS G418R亚系,与抗人IgMμ链单克隆抗体细胞株融合,通过ELISA法及流式细胞仪筛选,制备分泌BsAb的细胞株。结果融合6次,共接种1080孔,共得5株抗CD3-抗IgM杂交-杂交瘤。经亚克隆后,其中2株体外连续传代培养2月仍保持良好的分泌BsAb功能。结论采取细胞融合法可成功制备分泌BsAb的杂交-杂交瘤,其稳定性及效价与亲本杂交瘤相似。

自制电致细胞融合仪的初步应用

应用自制电致细胞融合仪,在显微镜直视下,可观察到小鼠胸腺细咆时伊红染料的电渗入效应、在电极间各类细胞的电介质电泳现象以及植物原生质体间的电融合过程.小鼠脾细胞和骨髓瘤FO细胞电融合后,转移至HAT培养基继续培养后,有细胞克隆形成,此系电融合致杂交瘤形成的可靠依据.以上结果表明,自制电融合仪能满足细胞工程研完的基本要求.