补肾纳气中药对COPD大鼠膈肌细胞形态及相关肌细胞特异性microRNA下游指标的影响

目的探讨全真一气汤的作用机制及横膈在肾不纳气证形成中的意义。方法将80只SD大鼠按照随机数字表法分为六组,正常组(A组)10只、慢性阻塞性肺疾病(COPD)肾不纳气证组(B组)60只[模型组(B_(1)组)15只、中药实验组(B_(2)组)15只、中药对照组(B_(3)组)15只、西药对照组(B_(4)组)15只]及COPD非肾不纳气证组(C组)10只,A组、B_(1)组大鼠给予氯化钠,B_(2)组给予全真一气汤,B_(3)组给予六君子汤,B_(4)组给予氨茶碱片,共60 d。HE染色观察A组、B_(1)组及C组的肺、膈肌病理形态,实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测各组microRNA-1(以下简写为“miR-1”)、组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助因子1α(PGC-1α)表达,Western blot(WB)法检测以上指标的蛋白含量。结果B_(1)组膈肌纤维细胞排列紊乱、变形、间隙增宽,且重于C组。qPCR结果显示,其他各组miR-1表达皆低于A组(P<0.05),且B_(2)组、B_(4)组低于B_(1)组(P<0.05),B_(2)组低于B_(3)组(P<0.05);B_(2)组、B_(3)组和B_(4)组HDAC4表达高于B_(1)组,且B_(2)组HDAC4、PGC-1α表达皆高于B_(3)组(P<0.01),B_(1)组与C组HDAC4、PGC-1α表达差异均有统计学意义。WB结果显示,B_(2)组HDAC4蛋白表达高于B_(1)组和B_(3)组,PGC-1α蛋白表达高于B_(1)组、C组及B_(3)组、B_(4)组,C组PGC-1α蛋白表达高于B_(1)组。结论膈肌参与肾不纳气证的形成,全真一气汤可通过下调miR-1,影响HDAC4、PGC-1α的蛋白表达,改善COPD膈肌损伤。

多孔结构导电性能拓扑优化设计与实验验证

针对结构电导率受构型影响、导电性能难以准确评估等问题,提出一种多孔结构导电性能拓扑优化设计与实验验证方法。首先,研究了基于静电场理论的三维数值均匀化方法,实现了对三维多孔结构等效导电属性的评价。其次,基于变密度拓扑优化方法,以体积分数为约束条件,结合均匀化理论建立了微观尺度下多孔结构电导率最大化拓扑优化模型。然后,采用伴随变量法对目标函数进行了灵敏度分析,通过优化准则算法进行了求解,实现了不同初始结构设计和体积分数下多孔结构拓扑优化设计。最后,通过有限元分析和实验进一步验证了多孔结构的等效导电属性。结果表明:本文方法可有效优化多孔结构导电性能。

消癌平对SGC-7901胃癌细胞的作用及机制的实验研究

目的 探讨消癌平治疗胃癌的肿瘤细胞抑制作用的机制。方法 1.观察不同浓度消癌平对SGC 790 1胃癌细胞的抑制率并进行体外抑制试验 ;2 .取对数生长期的SGC 790 1细胞 ,浓缩体积到 1ml,先后加入纤维蛋白原和凝血酶工作液使之形成细胞凝块 ,并将其切成等体积小块 ,将瘤体置于昆明种水鼠肾囊下。移植后次日开始采用消癌平 0 .4,0 .6 ,0 .8ml/kg浓度腹腔内注射 ,连续 7d。注射后第 8天处死小鼠 ,于显微镜下测量肿瘤的各径 ,以计算肿瘤体积和肿瘤抑制率 ,探讨对人胃癌SGC 790 1细胞生长的抑制作用 ;3.采用流质细胞仪观察消癌平对人体胃癌SGC 790 1细胞株的抑制机制。结果 1.体外抑制试验 :消癌平 5 0 ,40 ,30 ,2 0 ,10mg/ml浓度时对SGC 790 1胃癌细胞的抑制率为 10 0 % ,5 9 % ,2 9% ,19%和 15 % ,与空白对照组差异明显。其高浓度的抑制率与HCPT(98% )相仿 ,药物作用 7d后的IC50 为 2 1mg/ml。 2 .昆明种水鼠胃癌细胞株移植后 ,采用的消癌平为 0 .4,0 .6,0 .8ml/kg ,腹腔内注射的肿瘤抑制率为 5 0 % ,5 3% ,71%。Logit法计算消癌平对荷瘤小鼠的ED50 为 0 .44 /kg ,t检验表明各用药剂量组的抑瘤率与空白对照组比较有显著差异 ,高剂量时消癌平的抑瘤率 (71% )与阳性对照组5 Fu的抑瘤率 (76% )相似。

细胞力学实验技术研究

本文介绍了近年来现代生物力学领域内 ,细胞力学研究过程中所采用的各种实验技术 .并根椐实验方法的不同将其大致归纳为四类 :单个细胞加载实验技术 ,细胞介质间接及流变学加载实验技术 ,细胞基底应变加载技术 ,细胞分子学加载技术 .并指出细胞乃至分子的力学实验技术的进展将对细胞生物力学的发展起着决定性的作用 。

对细胞施加力学作用的实验方法

对细胞施加力学作用的实验方法有很多种,但大多是对体内、体外环境中某一力学因素的模拟。按照所模拟力的来源不同,分为模拟体内力学环境的实验方法和模拟体外力学环境的实验方法两类。模拟体内力学环境的实验方法主要有:流动剪切力法、静水压法、圆周应力法、基底拉伸法;模拟体外力学环境的实验方法主要有:微重力细胞培养法、离心力场法、气体加压法、声波刺激法、微光束辐照法。另外,还有一类用于研究单细胞力学特性的实验方法,主要有微管吸吮法、原子力显微镜悬臂刺激法、磁珠扭转法和光钳法。本文针对这些主要的实验方法进行综述。

趋化因子MCP-1mRNA在实验性自身免疫性脑脊髓炎中的表达及IFN-β1b的影响

目的 研究多发性硬化 ( MS)患者趋化因子单核细胞趋化蛋白 ( MCP-1 ) m RNA在实验性自身免疫性脑脊髓炎 ( EAE)中的表达 ;经鼻黏膜给予 IFN-β1 b对 EAE趋化因子表达的影响。方法 运用同种鼠脊髓匀浆诱导EAE动物模型 ,主动免疫动物后通过鼻黏膜给 IFN-β1 b或 PBS连续 7d,于免疫后 8、1 2、1 8d用免疫组化法、原位杂交法检测其脑、脊髓组织及脾脏中 MCP-1的表达。结果 主动免疫 1 2 d,EAE进入症状高峰期 ,脑和脊髓组织以及脾淋巴细胞中 MCP-1高表达 ,与 8及 1 2 d组相比差异有显著性 ,IFN-β 1 b组 MCP-1表达受到明显抑制 ,以 1 2 d组最为明显 ,与 EAE组相比差异有显著性。结论 MCP-1与 EAE的发病密切相关 ,外周表达早于组织 ,鼻服 IFN-β1 b可抑制外周淋巴细胞 MCP-1表达 ,减少中枢神经系统内炎性细胞浸润 ,使 EAE发病明显减轻。

大气CO_2浓度增加对生物组织结构与功能的可能影响──Ⅰ─模拟CO_2实验技术以及细胞、叶片和个体生长对CO_2的响应

本文系统综述了大气ＣＯ２浓度增加对植物和生态系统影响的实验技术方法和细胞、叶片和个体水平对ＣＯ２反应的最新研究成果。包括细胞水平上酶的变化；叶片水平的生理反应；个体水平的生长、碳氮分配及相互作用。

OPCs移植对EAE大鼠脊髓有髓神经纤维髓鞘形态及MBP表达的影响

目的观察少突胶质前体细胞(OPCs)移植对实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠脊髓有髓神经纤维髓鞘形态的影响。方法选择30只健康大鼠随机分为正常组、模型对照组、治疗组,每组10只。正常组正常饲养,模型对照组、治疗组采用大鼠脊髓匀浆与完全弗氏佐剂混合做抗原单点皮下注射造模,造模后1周治疗组由尾静脉注入OPCs悬液,模型对照组注入同等剂量生理盐水,连续测量大鼠体重的改变,将各组大鼠心脏灌注处死,取脊髓制成切片,用髓鞘碱性蛋白(MBP)免疫组化染色并观察。结果造模后1周模型对照组与治疗组大鼠体重均下降。移植后,治疗组大鼠体重下降有所缓解;与正常组比较,模型对照组大鼠运动功能评分降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型对照组比较,治疗组运动评分升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型对照组比较,治疗组MBP免疫组化阳性的髓鞘数量增多。结论 OPCs移植可促进脱髓鞘模型大鼠运动功能和脊髓髓鞘的修复。

四君子加川牛膝方对大鼠下肢难愈性创面血小板衍化生长因子表达的影响

目的:观察四君子加川牛膝方对大鼠下肢难愈性创面血小板衍化生长因子(PDGF)表达的影响。方法:建立SD大鼠右下肢难愈性创面模型,采用随机的方法,分成四君子方组、生理盐水组、四君子加川牛膝方组、川牛膝方组,各组分别给予生理盐水及相应中药灌胃处理。在创面愈合过程中(造模后的第7天、第14天),取创面新生肉芽组织及血液,应用Elisa等检测技术,观察血小板源性生长因子(PDGF)水平变化。结果:造模后第7天PDGF的表达,四君子汤组与四君子加川牛膝方组均明显高于生理盐水组(P<0.05);川牛膝方组与生理盐水组比较,差异无统计学意义(P>0.05),四君子加川牛膝方组与四君子汤组比较,差异无统计学意义(P>0.05);检测造模后第14天PDGF的表达,各组间均无统计学差异(P>0.05)。结论:四君子加川牛膝方可上调PDGF的合成和分泌,促进成纤维细胞的增殖,这可能为其促进肉芽组织增生及创面愈合的作用机制之一。

低周反复荷载下蜂窝式钢框架梁柱节点性能试验研究

为研究蜂窝式钢框架梁柱节点的抗震性能,进行6榀框架边节点的低周反复荷载试验。当轴压比u=0.25和扩张比K=1.5时,在考虑梁上第一个开孔位置与其腹板高度之比d/ht和柱上第一个开孔位置与其腹板高度之比e/hc等控制参数的影响下,对其节点的受力过程、破坏模式、滞回曲线、骨架曲线、延性性能等因素进行研究与分析。研究表明:焊接质量是防止节点脆性破坏的首要保证。明显的焊接缺陷容易导致裂缝过早扩展,从而降低节点延性和耗能能力;与原型钢相比,梁柱腹板开孔扩高后,节点受弯承载力和转动刚度均有较大程度提高,梁端荷载-位移关系的滞回曲线饱满、稳定,刚度退化不明显,具有较好的耗能能力;扩张比一定的情况下,d/ht对节点抗震性能的影响要比e/hc显著,并且控制d/ht可以有效地将塑性铰外移到距节点域较远的梁截面上,大大缓解节点处的高三轴应力状态,降低连接焊缝发生脆性破坏的可能性,改善节点延性性能。

癌痛消诱导大鼠移植性肝癌细胞凋亡的实验研究

目的:研究癌痛消颗粒对大鼠移植性肝癌的抑瘤作用以及对肿瘤细胞凋亡的影响,探讨该药抗肝癌作用的机理。方法:采用walker-256瘤株建立SD大鼠的移植性肝癌的模型,分为癌痛消高、中、低剂量组,5-Fu组,蒸馏水组,连续用药14天。停药24h,处死大鼠,取出瘤块,称重,计算抑瘤率,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:癌痛消低、中、高治疗组均有抑瘤作用,抑瘤率分别为12.4%、32.4%、45.7%;癌痛消低、中、高剂量组均可诱导肝癌细胞凋亡,与蒸馏水组比较,癌痛消高、中剂量组差异均具有显著性意义;癌痛消高、中剂量组能改善模型大鼠体重变化。癌痛消各剂量组较蒸馏水组和5-FU组,一般情况较好,症状较轻。结论:癌痛消能改善移植性肝癌大鼠的生存质量,抑制大鼠移植性肝癌细胞生长,其作用机制可能与诱导肝癌细胞凋亡有关,其作用强度可能与剂量呈正相关。

NOD小鼠CD4^+CD25^+调节性T细胞功能变化研究

目的:观察NOD小鼠CD4+CD25+调节性T细胞的功能变化。方法:流式细胞仪分析NOD小鼠胰腺引流淋巴结(PLN)CD4+CD25+T细胞频率,CD4+CD25+T细胞中FoxP3+细胞的比例,CD4+CD25+FoxP3+T细胞的FoxP3平均荧光强度(MFI);检测CD4+CD25+调节性T细胞的抑制功能。结果:在不同的年龄阶段,CD4+CD25+调节性T细胞数量未发生明显变化,而随时间的推移,CD4+CD25+调节性T细胞中FoxP3表达水平降低,CD4+CD25+调节性T细胞的功能也下降。结论:CD4+CD25+调节性T细胞的抑制功能降低可能是NOD小鼠糖尿病发作的根本原因。

马钱子总生物碱对家兔实验性变态反应性神经炎细胞免疫机制影响的研究

目的通过马钱子总生物碱对实验性变态反应性神经炎(EAN)家兔淋巴细胞转化影响的实验研究,初步探讨马钱子总生物碱对家兔实验性变态反应性神经炎治疗作用的细胞免疫机制。方法应用牛坐骨神经提取的MBP(髓鞘碱性蛋白)免疫家兔建立EAN动物模型,应用国际分级标准和临床评分对发病家兔进行临床评定。采用MTT法测取家兔脾脏淋巴细胞增殖率,获取淋巴细胞转化率。结果通过统计学处理,体内外实验均表明该药能够明显降低家兔T淋巴细胞转化率(P<0.05)。结论马钱子总生物碱调节亢进的T淋巴细胞反应性,降低增值能力,可能是该药治疗GBS机理之一。

数字病理切片在细胞病理实验教学中的应用初探

细胞病理学是临床病理专业学生重要的专业课,在形态学研究和临床病理诊断中都有着重要的地位。本文通过对数字病理切片在细胞病理实验教学中应用的教学总结,旨在说明细胞病理教学改革的方向和方法,并通过本课题的研究说明数字病理切片及病理质控系统在病理教学中的重要性。

PBL教学法应用于医学细胞生物学实验教学探讨

作为一种在国内外医学院校被广泛采用的教学方法，PBL教学法正日益显示出它的潜力和优势。将PBL教学法运用于医学细胞生物学实验教学中，能提高学生的学习主动性，调动学生积极性，挖掘其参与意识与求知欲望，发挥其主观能动性，同时能促进教师教学技巧的提高。

脱氢表雄酮对实验性自身免疫性神经炎大鼠细胞免疫的影响

目的:探讨脱氢表雄酮(DHEA)对实验性自身免疫性神经炎(EAN)大鼠细胞免疫反应的影响。方法:21只Lewis大鼠随机分为DHEA 0.5mg治疗组、2mg治疗组和对照组,治疗组于注射牛周围神经髓磷脂(BPM)抗原乳剂后第5天开始每日皮下注射DHEA,对照组皮下注射相同体积的DHEA溶媒。疾病高峰期检查坐骨神经IFN-γ、TNF-α阳性反应细胞,检测引流淋巴结和脾脏单个核细胞增殖反应,检测培养上清TNF-α、IFN-γ、IL-10含量。结果:两种剂量DHEA治疗组均能减少坐骨神经IFN-γ、TNF-α阳性反应细胞数目(P<0.05),抑制BPM刺激T淋巴细胞增殖(P<0.05),降低培养上清中IFN-γ、TNF-α水平(P<0.05)。各组间IL-10水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:DHEA可抑制EAN大鼠自身反应性T淋巴细胞增殖和促炎性细胞因子过度表达,抑制细胞免疫反应。

条件性免疫反应治疗胶原性关节炎的免疫学机制探讨

目的探讨条件免疫反应治疗胶原性关节炎(CIA)免疫学机制。方法建立大鼠CIA模型。将模型大鼠分为5组:条件免疫反应(CIR)组:以樟脑气味为条件刺激;甲氨蝶呤(MTX)+泼尼松(Pred)为非条件刺激,两者结合7次(7d)后可建立条件免疫反应,然后每日再现条件刺激,每周条件刺激与非条件刺激结合1次,共4周。MTX+Pred组:MTX+Pred治疗4周。MTX+Pred减量组:MTX+Pred治疗,7d内每天1次,7d后每周1次,共4周。单纯闻樟脑气味组:单纯闻樟脑气味4周。空白对照组:安慰剂治疗4周。用流式细胞技术检测大鼠外周血CD4+T淋巴细胞活化(表达CD71)状态,免疫散射比浊法检测大鼠外周血IgG、IgA、IgM、C3、C4、C反应蛋白(CRP)水平,免疫组织化学检测CD68(巨噬细胞标志)及肿瘤坏死因子(TNF)-α在滑膜组织的表达。结果CIR组与MTX+Pred组大鼠治疗2周后外周血活化的CD4+T淋巴细胞明显低于其他各组(P<0.01);4周后血清IgG、CRP水平降低,滑膜组织中CD68及TNF-α表达均明显低于单纯闻樟脑气味组、MTX+Pred减量组及空白对照组(P均<0.01)。结论以樟脑气味为条件刺激,以泼尼松和甲氨蝶呤联合免疫抑制作用为非条件刺激,通过强化训练,建立的条件免疫抑制反应可以通过调节机体的细胞免疫与体液免疫功能,抑制免疫细胞异常活化,降低自身抗体及炎性细胞因子水平,

锦红片对实验性急性胆道感染大鼠血清细胞因子IL-6和IL-2含量的影响

为探讨锦红片 (红藤、蒲公英、生大黄等组成 )对急性胆道感染的作用机理 ,将SD大鼠结扎胆总管 ,并向管内注入致病性大肠杆菌制成急性胆道感染模型 ,于造模前一天开始灌胃 1%锦红片悬液 ,连续 6天 ,在造模第三天和第五天各抽取腹腔静脉血 ,分别采用放射免疫法和ELISA法检测血清细胞因子IL -6及IL -2含量。结果 :造模第三天时与模型组比较 ,锦红片组IL -6含量显著降低 (P <0 .0 5 ) ,IL -2含量显著升高 (P <0 .0 1) ,与庆大霉素组比较则均无差异 ;造模第五天时的总体趋势与第三天时相同。

蜂窝钢柱抗震性能试验研究

为了研究蜂窝钢柱的抗震性能，对4根蜂窝钢柱及1根原型钢实腹钢柱试件进行了低周反复加载试验，以揭示蜂窝钢柱的破坏机理、孔口应力分布规律、耗能能力、延性、强度和刚度退化等。试件考虑了蜂窝孔形、加劲肋的设置与否及设置部位等影响参数。试验研究结果表明：蜂窝钢柱的承载力及刚度大于扩张前的原型钢实腹柱，破坏时试件的延性在2.92~4.03之间，表现出良好的变形性能；通过合理设置横向加劲肋，可以提高蜂窝钢柱的承载力、刚度及耗能能力，并防止柱腹板的局部屈曲；蜂窝钢柱由于在腹板上开孔形成受力薄弱区域，容易造成累积损伤，强度和刚度退化的幅度要略大于原实腹型钢柱。研究结果可为蜂窝型钢的进一步推广应用及理论研究提供参考。

数字化进退针装置在显微注射中的应用实验

针对显微注射中微注射针刺膜速度慢和定位精度差等问题,研制了一种基于惯性力与摩擦力交替作用的细胞工程用数字化进退针装置。利用该装置搭建了数字化显微注射实验系统。以昆明系小鼠为实验动物,对其卵母细胞进行了数字化显微注射实验研究。以细胞变形率和刺膜效率为评价指标,分析了数字化进退针装置驱动电压和频率等参数对实验效率的影响,通过实验优化了其控制参数。结果表明,小鼠卵母细胞数字化显微注射具有高的实验效率,达149枚/h。实验证实,数字化进退针装置满足细胞显微注射的要求。