细胞视黄酸结合蛋白Ⅱ在乳腺癌中的表达及临床意义

目的 利用Oncomine基因数据库分析CRABPⅡ基因在乳腺癌中的表达及对乳腺癌患者生存的意义。方法 通过Oncomine、Kaplan-Meier Plotter和癌症细胞系百科全书分析CRABPⅡ基因在各类乳腺癌组织中的表达和基因差异表达,并进行Meta分析和乳腺癌患者预后生存分析。结果 Oncomine数据库检索CRABPⅡ基因有438项不同种类结果。50项研究的表达有统计学差异,其中39项研究显示表达增高,11项研究显示表达降低,共有研究样本量653例;癌症细胞系百科全书显示CRABPⅡ基因在乳腺癌细胞系中的表达水平最明显;Kaplan-Meier Plotter数据库检索结果表明CRABPⅡ高表达导致患者的总生存预后不良( P =0.0035);与低表达组相比,CRABPⅡ高表达组乳腺癌患者的总生存时间显著降低( P <0.05);同时,CRABPⅡ的高表达也是luminal A型乳腺癌预后不良的重要因素。结论 通过深入挖掘Oncomine等数据库中CRABPⅡ基因芯片信息,证实CRABPⅡ在乳腺癌组织与细胞中高表达,且与乳腺癌患者生存预后不良相关,为临床乳腺癌的治疗及基因靶向药物的研制提供重要依据。

斜纹夜蛾视黄酸结合蛋白(Slcrabp)基因的克隆、表达及功能

视黄酸结合蛋白(Cellular retinoic acid binding protein,CRABP)属于胞内脂质结合蛋白超基因家族,参与了许多生理活动,如细胞分化、组织重建和信号转导等,但其在昆虫中肠的作用尚不明确。研究从斜纹夜蛾Spodoptera litura中肠基因表达序列标签(EST)文库中克隆获得一个编码Slcrabp的全长c DNA,该c DNA由396个核苷酸组成,编码132个氨基酸。预测CRABP蛋白质的空间结构与脂肪酸结合蛋白非常相似,含一个由10个反平行的β折叠和2个α螺旋形成的配体结合中心结构域。Sl CRABP基因具有4个外显子,与脊椎动物crabp基因类似。RT-PCR检测表明,在转录水平上,Slcrabp在6龄幼虫中肠的各个时期均有较高表达。Western blot分析结果显示,Sl CRABP蛋白分布广泛,在中肠、脂肪体、精巢等组织上大量表达。在中肠,其表达峰值出现在预蛹期。利用荧光标记物质8-苯胺基-1-萘磺酸(1,8-ANS)分析了重组Sl CRABP蛋白与不同底物的亲和力,发现Sl CRABP与不饱和长链脂肪酸有较高结合活性,如花生四烯酸钠、亚麻酸、油酸钠和油酸,但与视黄酸、视黄醇的结合力却很弱或几乎不结合,暗示斜纹夜蛾Sl CRABP功能与同家族脂肪酸结合蛋白(FABP)性质相似。对6龄幼虫进行饥饿处理,结果显示经过经24 h和48 h饥饿处理后,虫体中肠Sl CRABP蛋白质的表达量有显著上升,暗示Sl CRABP可能参与了斜纹夜蛾体内脂类的转运过程。

细胞内Retinoid结合蛋白mRNA水平在生精过程中的周期性变化

目的 研究大鼠睾丸细胞内视黄醇结合蛋白 - (CRBP- )及细胞内视黄酸结合蛋白 - (CRABP- ) m RNA水平与曲细精管生精上皮周期的相关关系。 方法 分别以地高辛标记的大鼠 CRBP- 及 CRABP- c DNA探针在 SD大鼠睾丸冰冻切片上进行原位杂交 ,应用激光密度扫描系统对阳性信号进行定量。 结果 CRBP- 及 CRABP- m RNA在支持细胞 (sertoli cell,SC)中表达。CRBP- m RNA ～ 期处于高水平 , ～ 期达到高峰 ,至 期骤然下降 , ～ 期为低水平 ,其中 ～ 期最低 ,仅为高峰时期的 2 8%。CRABP- m RNA ～ 期为低水平 , ～ 期水平增加 1倍以上 ,其中 ～ 期达到高峰 ,随后缓慢下降。 结论 SC可合成 CRBP- 、CRABP- ,且合成量具有与生精周期相伴的周期性变化。总的来说 ～ 期合成量较高 ,生精周期后期 CRBP- 、CRABP- 的高表达提示它们在圆形精子向长形精子转变的过程中发挥作用。CRBP- ～ 期的峰值显示它对于次级精母细胞减数分裂的完成、新一轮生精周期的开始起着非常重要的作用。总之 。

IGFs系统成分在维甲酸诱导的马蹄内翻足畸形中的作用

应用全反式维甲酸 (AllTransRetinoicAcid ,ATRA)构建Wistar大鼠先天性马蹄内翻足畸形 (CongenitalCrossfoot,CCF)动物模型 ,以ATRA和雌激素 (雌二醇 )分别或联合作用于MC 3T3 E1细胞株 ,应用Northern印迹杂交、RT PCR和流式细胞仪检测CCF胎鼠的头盖骨组织和MC 3T3 E1细胞中胰岛素样生长因子 Ⅱ (IGF Ⅱ )和胰岛素样生长因子结合蛋白 6 (IGFBP 6 )mRNA的表达以及细胞周期及增殖状态。研究发现 ,10 0～ 14 0mg/kg浓度的ATRA可以诱导大鼠骨骼畸形发育并产生CCF ;IGFs家族基因中IGF Ⅱ和IGFBP

中枢神经系统胶质母细胞瘤重组人脂肪酸结合蛋白-5、细胞维甲酸结合蛋白-Ⅱ表达及维甲酸疗效研究

目的检测人体中枢神经系统胶质母细胞瘤中脂肪酸结合蛋白-5（FABP-5）、细胞维甲酸结合蛋白-Ⅱ（CRABP-Ⅱ）表达，评估维甲酸对细胞增殖的抑制作用。方法随机性选取96例中枢神经系统胶质母细胞瘤病例，提取胶质母细胞瘤细胞悬液后给予加入维甲酸储存液，经组织免疫荧光化学检测分析FABP-5、CRABP-Ⅱ表达评估临床疗效。结果选取研究标本中，FABP-5阳性表达者为45例（＋，46．88％），而CRABP-Ⅱ的阳性表达者为41例（＋，42．71％）；经维甲酸处理后，在TG-905细胞中FABP-5表达明显下降，CRABP-Ⅱ则表达明显上升，而在U87MG细胞中FABP-5表达轻度上升，CRABP．Ⅱ则表达个别细胞增强。结论经选取胶质母细胞瘤病理样本进行临床研究证实，在胶质母细胞瘤组织中有较高的FABP-5、CRABP-Ⅱ表达，且个体间差异有统计学意义（P〈0．05），经加入维甲酸后显示耐药细胞中FABP-5表达均明显增高，而在敏感细胞中CRABP-Ⅱ表达明显上升，这表明维甲酸可经FABP-5信号通路抑制瘤体组织细胞生长、促进分化及凋亡。