欧矢车菊根HPLC指纹图谱的建立及化学模式识别分析

目的建立欧矢车菊根的高效液相(High performance liquid phase,HPLC)指纹图谱,结合化学模式识别法进行分析,建立多指标成分含量的测定方法。方法采用WondaSil C 18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)为流动相梯度洗脱,流速1 mL/min,检测波长为290 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立15批欧矢车菊根药材的HPLC指纹图谱并分析相似度,通过对照品比对指认,确定化学成分并进行含量测定,使用SPSS 26.0和SIMCA-P 14.1软件进行聚类分析(Hierarchical calcluster analysis,HCA)、主成分分析(Principal component analysis,PCA)分析和正交偏最小二乘判别分析(Orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)分析,对不同批次样品进行质量评价。结果建立了15批欧矢车菊根HPLC指纹图谱共匹配出20个共有峰,通过对照品比对指认出绿原酸(11号峰)、咖啡酸(13号峰)、异绿原酸A(19号峰)。建立了绿原酸和异绿原酸A含量测定方法;指纹图谱相似度范围为0.601~0.983;HCA将15批欧矢车菊根分为2类;PCA得到4个主成分的累积方差贡献率为85.260%;OPLS-DA表明绿原酸和异绿原酸A是影响欧矢车菊根药材质量的差异性标志物。结论指纹图谱结合化学模式识别技术可快速筛选出欧矢车菊根药材的差异性特征成分,为欧矢车菊根药材的质量控制及标准制定提供了理论依据。

欧矢车菊根不同极性萃取部位体外抗氧化活性及其总黄酮的微乳薄层研究

目的研究欧矢车菊(Centaurea Behen L.)根不同极性萃取物的体外抗氧化活性,并通过紫外分光光度法测量其中总黄酮含量,建立了欧矢车菊根总黄酮的最佳微乳薄层条件。方法采用1,1-二苯代苦味酰基(DPPH)自由基清除法、清除超氧阴离子(O-2·)自由基法、ABTS自由基清除法和铁离子还原能力测定法,测定欧矢车菊根不同极性萃取物的体外抗氧化活性,并与阳性对照进行比较与评价。同时采用紫外分光光度法,以芦丁为对照品,测定有效部位的总黄酮含量;以十二烷基硫酸钠(SDS)、正丁醇、正庚烷,水微乳液等作为展开剂,通过聚酰胺薄层层析,定性分析欧矢车菊根药材中总黄酮类成分,应用均匀设计,以色谱分离函数COF为统计指标,考察了微乳配比因素对分离效果的影响。结果不同极性萃取部位对DPPH和ABTS自由基均有清除能力并呈明显的量效关系,其中乙酸乙酯部位的清除能力最强,接近于对照品维生素C;欧矢车菊根不同极性部位都对超氧阴离子(O-2·)具有较弱的除能力;以上不同极性萃取部位均有Fe3+还原能力,除乙酸乙酯部位,其余4个部位的还原能力没有太大差异,当浓度达1mg/mL时,乙酸乙酯萃取部位的还原能力接近于同浓度下维生素C的还原能力。结论欧矢车菊根药材不同极性萃取部位均具有一定的抗氧化活性,其中乙酸乙酯部位抗氧化能力最显著,而且乙酸乙酯部位中总黄酮含量为最高。筛选出十二烷基硫酸钠(SDS):正丁醇=33:57,含水量75%(O/W型)微乳液为适宜的展开剂。本研究为欧矢车菊根有效成分的深入研究提供理论依据。

银杏根皮化学成分研究(I)

目的研究银杏Ginkgo biloba根皮的化学成分。方法采用多种柱色谱分离纯化,通过理化常数测定和波谱分析鉴定化合物结构。结果从银杏根皮中分离得到13个化合物,其中脂肪酸类4个:棕榈酸(1)、硬脂酸(2)、山嵛酸(3)、木蜡酸(4);脂肪醇类1个:正二十七烷醇(5);甾体类2个:β-谷甾醇(6)、胡萝卜苷(7);黄酮类2个:芫花素(8)、芹菜素(9);萜内酯类4个:白果内酯(10)、银杏内酯A(11)、银杏内酯B(12)、银杏内酯C(13)。结论化合物1～9为首次从银杏根皮中分离得到,其中化合物3～5为首次从该植物中分离得到,该研究为银杏根皮资源的综合利用奠定了基础。