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中心体相关蛋白55、睾丸表达基因14在结直肠癌组织中表达及其临床意义
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作者 郭洁 田春阳 夏永欣 《安徽医药》 CAS 2023年第11期2155-2160,共6页
目的回顾性分析中心体相关蛋白55(CEP55)、睾丸表达基因14(TEX14)在结直肠癌组织中表达及其临床意义。方法选取2015年10月至2016年10月在南阳市中心医院行手术治疗的78例结直肠癌病人癌组织及其癌旁组织为研究对象。利用Ualcan数据库分... 目的回顾性分析中心体相关蛋白55(CEP55)、睾丸表达基因14(TEX14)在结直肠癌组织中表达及其临床意义。方法选取2015年10月至2016年10月在南阳市中心医院行手术治疗的78例结直肠癌病人癌组织及其癌旁组织为研究对象。利用Ualcan数据库分析CEP55和TEX14在结直肠癌组织及癌旁组织中的表达情况;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测CEP55和TEX14 mRNA表达;免疫组化染色法检测CEP55和TEX14蛋白表达;分析CEP55和TEX14蛋白表达与病人临床病理特征的关系;对病人随访5年,使用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,分析CEP55和TEX14蛋白表达与结直肠癌病人5年生存率的关系;使用Cox回归模型分析影响结直肠癌病人预后的因素。结果Ualcan数据库分析结果显示,结直肠癌组织中CEP55和TEX14表达量均明显高于癌旁组织(P<0.05)。结直肠癌组织中CEP55、TEX14 mRNA水平(2.34±0.70比1.00±0.26、1.57±0.44比0.98±0.25)及蛋白阳性表达率均明显高于癌旁组织(P<0.05)。CEP55和TEX14蛋白表达与分化类型、有无淋巴结转移、TNM分期、有无神经浸润、有无肝转移有关(P<0.05)。结直肠癌组织中CEP55蛋白阳性病人生存率为52.73%,明显低于CEP55蛋白阴性病人生存率78.26%(P<0.05);TEX14蛋白阳性病人生存率为52.63%,明显低于TEX14蛋白阴性病人生存率80.95%(P<0.05)。低分化、淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、CEP55蛋白阳性、TEX14蛋白阳性是影响结直肠癌病人5年预后的独立危险因素(P<0.05)。结论CEP55和TEX14在结直肠癌组织中呈高表达,CEP55和TEX14蛋白阳性病人5年生存率低于阴性病人,这些指标的临床意义,值得进一步研究。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 中心体相关蛋白55 睾丸表达基因14
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靶向下调Cep55表达水平对肝癌细胞增殖能力的影响 被引量:6
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作者 张勇 孟凡迪 +3 位作者 张靖垚 付军科 刘昌 吴齐飞 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期45-48,102,共5页
目的通过siRNA干扰技术下调中心体相关蛋白Cep55的表达水平,并检测对肝癌HepG2和Hep3B细胞增殖能力的影响,为原发性肝癌的基因靶向治疗提供理论依据。方法应用Cep55特异性siRNA转染肝癌HepG2和Hep3B细胞,采用Real-time PCR和Western blo... 目的通过siRNA干扰技术下调中心体相关蛋白Cep55的表达水平,并检测对肝癌HepG2和Hep3B细胞增殖能力的影响,为原发性肝癌的基因靶向治疗提供理论依据。方法应用Cep55特异性siRNA转染肝癌HepG2和Hep3B细胞,采用Real-time PCR和Western blot方法分别从mRNA和蛋白质水平检测Cep55siRNA对Cep55基因的干扰效果,MTT法检测下调Cep55表达水平时细胞增殖能力的变化,流式细胞仪检测细胞周期分布变化。结果与阴性对照组比较,干扰siRNA组Cep55的mRNA及蛋白表达水平均出现明显降低(P<0.05);MTT检测结果显示下调Cep55表达水平能够显著抑制肝癌细胞增殖(P<0.05);流式细胞仪检测显示下调Cep55表达水平能够增加G1期细胞的比例,同时降低G2-M期细胞的比例,出现明显的G2期阻滞。结论下调Cep55表达水平能够显著抑制肝癌细胞的增殖能力,并出现G2期阻滞,提示Cep55可能成为原发性肝癌的有效治疗靶点。 展开更多
关键词 中心体相关蛋白Cep55 原发性肝癌 细胞增殖 细胞周期 SIRNA
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14-3-3/HIP-55复合体增强HIP-55蛋白稳定性 被引量:1
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作者 田爱炬 李子健 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期893-897,共5页
目的:用双分子荧光互补及免疫共沉淀技术验证HIP-55与14-3-3在HEK293细胞中存在相互作用,并进一步研究其生物学意义。方法:利用GATEWAY系统构建PDEST-N-Venus-HIP-55WT(野生型),PDEST-N-VenusHIP-55AA(突变体S269A/T291A),PDEST-GST-HIP... 目的:用双分子荧光互补及免疫共沉淀技术验证HIP-55与14-3-3在HEK293细胞中存在相互作用,并进一步研究其生物学意义。方法:利用GATEWAY系统构建PDEST-N-Venus-HIP-55WT(野生型),PDEST-N-VenusHIP-55AA(突变体S269A/T291A),PDEST-GST-HIP-55WT及PDEST-C-Venus-14-3-3τ重组质粒,利用双分子荧光互补及免疫共沉淀技术检测两者的相互作用,同时应用14-3-3蛋白相互作用抑制肽R18和HIP-55蛋白突变体(HIP-55AA突变体S269A/T291A不能与14-3-3相互作用)作为工具研究两者结合后对嘌呤霉素诱导的HIP-55蛋白表达的影响。结果:外源转入的Venus-HIP-55WT、Venus-HIP-55AA及Venus-14-3-3蛋白能够在HEK293细胞中表达;双分子荧光互补实验结果表明HIP-55与14-3-3存在相互作用,HIP-55蛋白的S269/T291位点介导HIP-55与14-3-3的相互作用;免疫共沉淀技术表明内源性HIP-55与14-3-3存在相互作用;进一步研究发现HIP-55与14-3-3复合体增强HIP-55蛋白的稳定性,保护HIP-55不被降解。结论:14-3-3与HIP-55存在相互作用,14-3-3/HIP-55复合体可以促进HIP-55蛋白的稳定性。 展开更多
关键词 HIP-55蛋白 14-3-3蛋白质类 蛋白质相互作用
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CEP55蛋白在原发性肝细胞癌组织中的表达与临床特征及预后的相关性分析 被引量:1
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作者 董雪莲 王建宇 邹小云 《标记免疫分析与临床》 CAS 2021年第11期1898-1904,1945,共8页
目的分析中心体蛋白55(CEP55)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达与临床特征及预后的相关性,为揭示肝癌诊断和治疗的新目标和策略提供依据。方法基于TCGA-LIHC数据库分析CEP55在HCC和相应的正常组织中的表达差异,并进一步分析其与生存预后的... 目的分析中心体蛋白55(CEP55)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达与临床特征及预后的相关性,为揭示肝癌诊断和治疗的新目标和策略提供依据。方法基于TCGA-LIHC数据库分析CEP55在HCC和相应的正常组织中的表达差异,并进一步分析其与生存预后的关系。纳入185例于2015年4月至2016年7月在我院肝胆外科完成了肝切除术的HCC患者,对手术切除的肿瘤组织和癌旁组织(距离肿瘤边缘>5.0cm)制作组织蜡块。采用免疫组织化学染色法检测组织CEP55蛋白表达,分析CEP55表达与HCC患者不同临床特征的关系。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,并使用Log-rank分析CEP55表达与预后的相关性。采用Logistic回归模型分析影响原发性肝癌患者预后的危险因素。结果基于TCGA-LIHC数据库,418例肝癌组织中CEP55基因拷贝数明显高于癌旁正常组织(P<0.05),且根据每组CEP55表达水平的中位数值将患者分为两组。与LIHC队列中的低表达组相比,CEP55高表达组的总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)明显缩短(Log-Rank检验,P<0.05)。CEP55蛋白的表达与患者血管有无浸润、肿瘤直径、BCLC分期、T分期、N分期、分化程度、AFP水平有关(P<0.05)。随访5年,CEP55蛋白高表达组和低表达组患者5年OS分别为64.9%(63/97)、84.0%(74/88)(Log-Rankχ^(2)=10.192,P=0.001);5年PFS分别为54.6%(53/97)、69.3%(61/88)(Log-Rankχ^(2)=5.750,P=0.016)。经单因素和多因素Logistic回归分析,肿瘤组织CEP55高表达是影响患者预后的独立危险因素之一(P<0.05)。结论CEP55蛋白在HCC组织中普遍呈高表达,其与患者预后不良有关,可作为肝癌早期诊断或潜在治疗靶点的分子生物学指标。 展开更多
关键词 中心体蛋白55 肝细胞癌 预后
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HIP-55介导胞内信号转导的分子机制研究 被引量:1
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作者 陈星卉 韩峰 卢应梅 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1655-1659,共5页
HIP-55(HPK1-interacting protein of 55 ku,又名DBNL,SH3P7,mAbp1)是一种与HPK-1相结合分子量为55 ku,由多个具有蛋白相互作用结构域构成的接头蛋白。其N端含有肌动蛋白结合结构域C端具有SH3结构域。HIP-55能够通过细胞内信号转导调控... HIP-55(HPK1-interacting protein of 55 ku,又名DBNL,SH3P7,mAbp1)是一种与HPK-1相结合分子量为55 ku,由多个具有蛋白相互作用结构域构成的接头蛋白。其N端含有肌动蛋白结合结构域C端具有SH3结构域。HIP-55能够通过细胞内信号转导调控细胞内吞、迁移、骨架重排等生物功能并且在多种疾病病理生理过程中发挥重要作用。该文将对HIP-55蛋白生物学功能及其胞内信号转导通路参与疾病病理过程分子机制进行综述。 展开更多
关键词 HIP-55 接头蛋白 肌动蛋白 SH3结构域 胞内信号转导 分子机制
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中心体相关蛋白55在肿瘤发生发展中的研究进展 被引量:1
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作者 曹蒙 乐张慧 王焱 《医学综述》 CAS 2022年第6期1091-1096,共6页
中心体相关蛋白55(CEP55)可调节细胞质分裂过程,且是其中关键的调节因子。CEP55不仅在正常细胞中发挥作用,还可导致某些遗传疾病的发生,但具体机制仍需进一步研究验证。此外,CEP55还是一个促瘤因子,参与多种实体及血液肿瘤的发生发展,... 中心体相关蛋白55(CEP55)可调节细胞质分裂过程,且是其中关键的调节因子。CEP55不仅在正常细胞中发挥作用,还可导致某些遗传疾病的发生,但具体机制仍需进一步研究验证。此外,CEP55还是一个促瘤因子,参与多种实体及血液肿瘤的发生发展,并影响肿瘤细胞的增殖、凋亡、侵袭以及转移等生物学行为,因此有可能成为肿瘤治疗靶点及预后评估指标。目前关于CEP55在肿瘤发生发展中的研究涉及信号通路、表观遗传学等方面,因此,进一步研究CEP55在恶性肿瘤中的作用及机制有助于理解恶性肿瘤的生物学特征,对肿瘤的诊治具有重要意义。 展开更多
关键词 肿瘤 中心体相关蛋白55 细胞分裂 信号通路 表观遗传
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慢病毒介导siRNA干扰CEP55表达对卵巢癌细胞生物学行为的影响 被引量:1
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作者 陈春莹 程丽琴 付艳霞 《中南医学科学杂志》 CAS 2018年第4期358-361,364,共5页
本文通过慢病毒介导siRNA干扰卵巢癌SKOV3细胞中心体相关蛋白55(CEP55)表达,以观察其对细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移等生物学行为的影响。实验分为CEP55组(转染CEP55 siRNA慢病毒)、阴性对照组(转染不含CEP55 siRNA的慢病毒)和空白对照组... 本文通过慢病毒介导siRNA干扰卵巢癌SKOV3细胞中心体相关蛋白55(CEP55)表达,以观察其对细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移等生物学行为的影响。实验分为CEP55组(转染CEP55 siRNA慢病毒)、阴性对照组(转染不含CEP55 siRNA的慢病毒)和空白对照组(不处理)。结果显示:CEP55 siRNA慢病毒转染效率为(89.4±4.7)%,CEP55组CEP55的mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.05),第12、24、36、48、72 h时的OD(570)值显著降低(P<0.05),细胞凋亡率[(23.7±6.9)%]显著增加(P<0.05),穿膜细胞数目[(11.3±4.1)/个]明显减少(P<0.05),细胞迁移距离[(245.8±33.7)μm]明显减小(P<0.05)。提示慢病毒介导siRNA干扰CEP55表达可显著抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖、促进其凋亡、降低其侵袭和迁移能力。 展开更多
关键词 慢病毒 中心体相关蛋白55 卵巢癌 生物学行为
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Inhibitory Effects of Cypermethrin on Interactions of the Androgen Receptor with Coactivators ARA70 and ARA55
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作者 DING Zhen SHEN Jun Yu +6 位作者 HONG Jia Wei ZHANG Rui LI Zheng WANG Qi ZHANG Jin Peng ZHANG Mei Rong XU Li Chun 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2020年第3期158-164,共7页
Objective The purpose of this study was to investigate the anti-androgenic mechanism of cypermethrin involving coactivators.Methods Mammalian two-hybrid assays were performed to study the effects of cypermethrin on in... Objective The purpose of this study was to investigate the anti-androgenic mechanism of cypermethrin involving coactivators.Methods Mammalian two-hybrid assays were performed to study the effects of cypermethrin on interactions of the androgen receptor(AR)with the coactivators androgen receptor-associated protein70(ARA70)and androgen receptor-associated protein 55(ARA55).Results The results showed that AR–ARA70 and AR–ARA55 interactions were remarkably enhanced by dihydrotestosterone(DHT,P≤0.05).Cypermethrin inhibited DHT-induced AR–ARA70 and AR–ARA55 interactions significantly(P≤0.05).Conclusion The study indicates that cypermethrin exhibits inhibitory effects on AR transcription associated with repression of AR–ARA70 and AR–ARA55 interactions in a ligand-dependent manner.The data show novel anti-androgenic mechanisms of cypermethrin that contribute to male reproductive toxicology. 展开更多
关键词 CYPERMETHRIN ANDROGEN receptor signaling ANDROGEN receptor-associated protein 70 ANDROGEN receptor-associated protein 55
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Intracellular Transport of HIV-1 Matrix Protein Associated with Viral RNA
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作者 Anatoliy I. Gozhenko Valentina A. Divocha +2 位作者 Galina K. Vorkunova Alissa G. Bukrinskaya Sergey I. Lupandin 《World Journal of AIDS》 2013年第1期33-35,共3页
HIV-1 matrix protein (MA) is a multifunctional structural protein localized on N terminus of Gag precursor p55. MA participates in HIV-1 assembly as membranotropic part of Gag precursor as well as an individual protei... HIV-1 matrix protein (MA) is a multifunctional structural protein localized on N terminus of Gag precursor p55. MA participates in HIV-1 assembly as membranotropic part of Gag precursor as well as an individual protein spliced from Gag early in infection. MA is found in the nuclei of infected cells and in plasma membrane, the site of virus assembly, in association with viral genome RNA. MA mutated variant M4 which contains two changed amino acids in N-terminal regions is also associated with viral RNA, but it is localized in the nuclear and cytoskeleton fractions but not in the plasma membrane suggesting that the mutant is deprived of membranotropic signal and “sticks” in the nuclei an d cytoskeleton, its previous location sites. These data allow suggesting that MA involved into transmission of viral RNA is transported to plasma membrane by cytoskeleton. 展开更多
关键词 HIV-1 Matrix protein GAG PRECURSOR P55 CYTOSKELETON VIRAL RNA Transport of VIRAL Complex Plasma Membranes Cell Fractionatiomn
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结直肠癌组织中CEP55的表达与临床病理特征及预后的关系
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作者 陈伟丽 史利斌 +5 位作者 王艳 祖喆 高文侠 刘尧 王建桥 于倩 《结直肠肛门外科》 2024年第2期186-190,201,共6页
目的探讨中心体相关蛋白55(CEP55)在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征及预后的关系。方法选取2017年8月至2020年8月在唐山市中医医院确诊为结直肠癌并进行手术治疗的126例患者作为研究对象,收集结直肠癌患者术中切除的结直肠癌... 目的探讨中心体相关蛋白55(CEP55)在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征及预后的关系。方法选取2017年8月至2020年8月在唐山市中医医院确诊为结直肠癌并进行手术治疗的126例患者作为研究对象,收集结直肠癌患者术中切除的结直肠癌组织及癌旁组织(距离癌组织>2 cm)标本各126例。通过qPCR、免疫组化实验检测结直肠癌组织及癌旁组织中CEP55的表达,分析结直肠癌组织中CEP55的表达与临床病理特征的关系,采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,并分析结直肠癌组织中CEP55的表达与患者3年总生存率之间的关系。结果结直肠癌组织中CEP55 m RNA的表达高于癌旁组织【(1.0±0.2)vs.(0.6±0.1)】,差异有统计学意义(P<0.001)。免疫组化结果显示,CEP55在结直肠癌组织中的表达高于癌旁组织,结直肠癌组织中CEP55高表达比例高于癌旁组织(P<0.001)。结直肠癌组织中CEP55的表达与TNM分期有关(P<0.05),与性别、年龄、肿瘤分化程度、肿瘤最大直径、淋巴结转移、肿瘤位置、肿瘤浸润深度无关(P>0.05)。Ⅲ+Ⅳ期结直肠癌患者组织中CEP55的表达评分高于Ⅰ+Ⅱ期结直肠癌患者(P<0.001)。CEP55高表达的结直肠癌患者3年总生存率低于CEP55低表达的结直肠癌患者(70.3%vs.88.6%),差异有统计学意义(Log-rankχ^(2)=4.715,P=0.031)。结论CEP55在结直肠癌组织中高表达,与TNM分期有关,可能可以作为结直肠癌的潜在预后生物标志物。 展开更多
关键词 结直肠癌 中心体相关蛋白55 临床病理特征 预后
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新型大麻制剂O-1602和大麻二酚对DSS诱导的小鼠结肠炎的抗炎作用及其机制 被引量:4
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作者 冯雅静 李永渝 +4 位作者 林旭红 李琨 余良英 曹明华 徐菁 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1441-1447,共7页
目的:研究新型大麻类制剂O-1602和大麻二酚(CBD)对硫酸葡聚糖钠(DSS)诱导的小鼠实验性结肠炎的抗炎作用,并通过测定p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的活化程度,探讨其可能的作用机制。方法:对C57BL/6小鼠给予含4%DSS的饮用水连续饮用7 d,... 目的:研究新型大麻类制剂O-1602和大麻二酚(CBD)对硫酸葡聚糖钠(DSS)诱导的小鼠实验性结肠炎的抗炎作用,并通过测定p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的活化程度,探讨其可能的作用机制。方法:对C57BL/6小鼠给予含4%DSS的饮用水连续饮用7 d,建立实验性结肠炎模型。造模期间分别给小鼠腹腔注射O-1602(5 mg/kg)、CBD(1 mg/kg)或p38 MAPK抑制剂SB203580(5μmol/kg)。造模结束后用结肠炎评分系统对各组结肠炎局部情况进行评估;同时检测血浆中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子1(CINC-1)的水平(ELISA法),以及肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性,以评价各处理组结肠炎的炎症反应情况;采用Western blotting法检测结肠组织p38及p-p38蛋白表达水平;免疫组化方法检测结肠G蛋白偶联受体55(GPR55)的表达。结果:O-1602和CBD能够改善小鼠实验性结肠炎的病理损害,降低血浆TNF-α、IL-6和CINC-1的水平以及肺组织MPO的活性(P<0.05);O-1602、CBD以及SB203580处理组结肠组织,p38磷酸化程度较结肠炎组显著降低(P<0.05);免疫组化提示小鼠结肠GPR55受体表达较少,主要分布在黏膜下层,结肠炎时GPR55表达变化不明显。结论:GPR55在小鼠结肠有较少表达,揭示O-1602和CBD能够减轻DSS诱导的小鼠结肠炎炎症反应,其作用机制可能与抑制p38 MAPK信号通路有关。 展开更多
关键词 炎症性肠病 大麻素类 P38 MAPK信号通路 G蛋白偶联受体55
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转双Bt基因巨霸杨外源基因表达及抗虫性检测 被引量:5
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作者 赵洁 杜沙沙 +2 位作者 邱彤 杨敏生 王进茂 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期47-51,共5页
为提高转基因杨树中Bt基因的表达效率并扩大抗虫谱,以同时转入Cry1Ac和Cry3A基因的转双Bt基因巨霸杨(Populus deltocdes‘55/56’×P.deltocdes‘2KEN8’)株系1年生苗为材料,对外源基因的表达和抗虫性进行检测。经PCR检测,证明目的... 为提高转基因杨树中Bt基因的表达效率并扩大抗虫谱,以同时转入Cry1Ac和Cry3A基因的转双Bt基因巨霸杨(Populus deltocdes‘55/56’×P.deltocdes‘2KEN8’)株系1年生苗为材料,对外源基因的表达和抗虫性进行检测。经PCR检测,证明目的基因已被整合到巨霸杨基因组中。利用荧光定量PCR和ELISA技术检测了4个转基因株系叶片中Bt基因的转录丰度和毒蛋白表达量。结果表明:不同株系间Bt基因的转录丰度存在显著差异,Cry3A基因的转录丰度显著高于Cry1Ac基因的转录丰度;2种Bt毒蛋白表达量在各株系间存在显著差异,Cry3A毒蛋白质量分数均显著高于Cry1Ac毒蛋白质量分数。各株系对鳞翅目害虫美国白蛾(Hyphantria cunea)幼虫抗虫效果不明显,且无显著差异;对鞘翅目害虫柳蓝叶甲(Plagiodera versicolora)表现出极高抗虫效果,且均显著高于转单基因Cry3A 741杨高抗株系CC84,不同株系间存在显著差异。 展开更多
关键词 巨霸杨 双Bt基因 转录丰度 毒蛋白 抗虫性
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新型大麻制剂O-1602和大麻二酚对LPS导致的啮齿动物小肠运动紊乱的影响 被引量:1
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作者 林旭红 李永渝 +5 位作者 冯雅静 曹明华 徐菁 李琨 冯佳燕 余良英 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1082-1090,共9页
目的:通过离体及在体实验,观测2种新型大麻类制剂O-1602和大麻二酚(CBD)对脂多糖(LPS)诱导的啮齿动物小肠运动紊乱的影响,并探讨其可能的机制。方法:LPS腹腔注射复制小鼠小肠运动紊乱模型,碳末悬液灌胃评估小肠排推功能,Western blottin... 目的:通过离体及在体实验,观测2种新型大麻类制剂O-1602和大麻二酚(CBD)对脂多糖(LPS)诱导的啮齿动物小肠运动紊乱的影响,并探讨其可能的机制。方法:LPS腹腔注射复制小鼠小肠运动紊乱模型,碳末悬液灌胃评估小肠排推功能,Western blotting测定回肠G蛋白偶联受体55(GPR55)的表达,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平。LPS与大鼠、小鼠回肠肌条共孵育制备离体动力紊乱模型,应用器官浴槽采集自发性以及10 Hz电刺激时收缩活动的变化;细胞内微电极技术记录平滑肌细胞膜电位变化;定磷法测定平滑肌组织Ca2+-ATP酶(Ca2+-ATPase)活性变化。结果:在体实验:LPS引起动物明显的炎症表现及小肠运动紊乱(P<0.01),CBD改善小肠运动(P<0.05),并降低IL-6水平(P<0.01)和GPR55表达(P<0.01)。离体实验:O-1602和CBD在体外选择性逆转LPS诱导的平滑肌自发性及电刺激时的收缩紊乱(P<0.05或P<0.01),但二者不影响生理及病理状态下平滑肌细胞膜电位水平,CBD预处理降低LPS诱导的平滑肌组织Ca2+-ATPase活性升高的效应(P<0.05)。结论:在体内CBD通过减轻炎症程度,降低GPR55表达水平,改善LPS导致的小肠运动紊乱;在体外O-1602和CBD可一定程度逆转LPS导致的大、小鼠小肠运动功能紊乱,其机制不是通过改变平滑肌细胞膜电位实现的,而可能与其调节平滑肌组织Ca2+-ATPase活性有关。 展开更多
关键词 O-1602 大麻二酚 脂多糖类 G蛋白偶联受体55
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CD-1遗传背景小鼠EAE模型:遗传背景对临床表现的影响
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作者 王松 顾冰洁 +5 位作者 张璐 李冠宇 杨晓帆 王慧娟 胡刚 季晓辉 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期771-778,共8页
目的:制作不同基因背景小鼠自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)模型,比较不同遗传背景小鼠发病、神经功能评分和病理变化的差异。方法:用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗原(MOG35-55)免疫C57BL/6和CD-1基因... 目的:制作不同基因背景小鼠自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)模型,比较不同遗传背景小鼠发病、神经功能评分和病理变化的差异。方法:用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗原(MOG35-55)免疫C57BL/6和CD-1基因背景小鼠,用完全弗氏佐剂作为抗原载体,并在不同时间点用精制百日咳毒素增强免疫效果,建立自身免疫性脑脊髓炎模型;记录小鼠发病时间与表现,每天进行神经功能评分,并取其脑和脊髓组织进行病理学检查和以CD4、IL-17为靶标的免疫组化染色。结果:C57BL/6组小鼠发病高峰期出现于初次免疫后17~25 d,表现典型的拖尾、单侧或双侧后肢瘫痪等改变,神经功能评分在3分左右;CD-1组小鼠发病高峰期较C57BL/6组推迟,出现于免疫后35~40 d,可见相似的拖尾及偏瘫表现,神经功能评分在2.8分左右。病理检查可见C57BL/6模型小鼠脑、脊髓出现炎症性细胞浸润,而CD-1小鼠的炎性改变相对较轻、且主要出现于脊髓;罗克沙尔固蓝染色法鉴定显示,模型小鼠脑脊髓组织出现脱髓鞘病变,以C57BL/6小鼠更为严重。免疫组织化学法显示2种模型小鼠发病高峰期均存在不同程度的CD4+及IL-17+炎性细胞的浸润。结论:不同的遗传背景对EAE模型发病、临床表现和病理改变有明显影响;CD-1小鼠亦可运用于制作慢性迁延性EAE模型,更符合人类多发性硬化的特点。 展开更多
关键词 实验性自身免疫性脑脊髓炎 CD-1小鼠 C57BL 6小鼠 胶质细胞髓鞘少突糖蛋白(MOG35-55)
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In vivo Studies on the Roles of Tic55-Related Proteins in Chloroplast Protein Import in Arabidopsis thaliana 被引量:2
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作者 Patrik Boij Ramesh Patel +2 位作者 Christel Garcia Paul Jarvis Henrik Aronsson 《Molecular Plant》 SCIE CAS CSCD 2009年第6期1397-1409,共13页
The TicS5 (Translocon at the inner envelope membrane of chloroplasts, 55 kDa) protein was identified in pea as a putative regulator, possibly linking chloroplast protein import to the redox state of the photosynthet... The TicS5 (Translocon at the inner envelope membrane of chloroplasts, 55 kDa) protein was identified in pea as a putative regulator, possibly linking chloroplast protein import to the redox state of the photosynthetic machinery. Two Tic55 homologs have been proposed to exist in Arabidopsis: atTic55-11 and AtPTC52 (Protochlorophyllide-dependent Trans- Iocon Component, 52 kDa; has also been called atTic55-1V). Our phylogenetic analysis shows that attic55-11 is an ortholog of psTic55 from pea (Pisum sativurn), and that AtPTC52 is a more distant homolog of the two. AtPTC52 was included in this study to rule out possible functional links between the proteins in Arabidopsis. No detectable mutant phenotypes were found in two independent T-DNA knockout mutant plant lines for each Arabidopsis protein, when compared with wild- type: visible appearance, chlorophyll content, photosynthetic performance, and chloroplast protein import, for example, were all normal. Both wild-type and tic55-11 mutant chloroplasts exhibited deficient protein import when treated with diethylpyrocarbonate, indicating that Tic55 is not the sole target of this reagent in relation to protein import. Furthermore, ptc52 mutant chloroplasts were not defective with respect to pPORA import, which was previously reported to involve PTC52 in barley. Thus, we conclude that atTic55-11 and AtPTC52 are not strictly required for functional protein import in Arabidopsis. 展开更多
关键词 ARABIDOPSIS CHLOROPLAST IMPORT protein targeting Tic55.
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长链非编码RNA-LncRNA小核仁RNA宿主基因14对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响 被引量:7
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作者 刘淳 林顺欢 +7 位作者 贾筠 关灵 郑锐年 林钦雄 刘克军 袁惠玲 叶伟标 廖玉婷 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第19期2987-2992,共6页
目的探讨长链非编码RNA(long non coding RNAs,LncRNAs) LncRNA小核仁RNA宿主基因14(small nucleolar RNA host gene 14,SNHG14)在乳腺癌组织中的表达水平,及其对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响和潜在机制。方法收集于2018年1月至2019年1... 目的探讨长链非编码RNA(long non coding RNAs,LncRNAs) LncRNA小核仁RNA宿主基因14(small nucleolar RNA host gene 14,SNHG14)在乳腺癌组织中的表达水平,及其对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响和潜在机制。方法收集于2018年1月至2019年1月于我院行手术治疗的乳腺癌组织和癌旁组织共40例,对比乳腺癌组织和癌旁组织LncRNA SNHG14的表达水平,分析不同乳腺癌细胞系的LncRNA SNHG14表达水平。敲低SNHG14的表达水平后,采用CCK 8检测CAL51细胞的活力,采用Transwell实验检测细胞侵袭和迁移,进一步预测和验证SNHG14的结合miRNA和潜在机制。结果乳腺癌组织和细胞系的SNHG14表达水平显著增高,敲低SNHG14后抑制CAL51细胞的增殖、侵袭和迁移能力,SNHG14潜在与miR 144靶向结合,miR 144低表达与乳腺癌预后不良相关。抑制SNHG14后CAL51细胞的miR 144表达显著下降,而中心体蛋白55(centrosomal protein 55,CEP55)的表达显著升高。结论LncRNA SNHG14在乳腺癌组织和细胞中高表达,LncRNA SNHG14可通过miR 144/CEP55信号轴从而促进乳腺癌细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 LncRNA小核仁RNA宿主基因14 长链非编码RNA MIR 144 乳腺癌 中心体蛋白55
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CEP55通过H3K9三甲基化对膀胱癌细胞增殖能力的影响
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作者 高义胜 张成云 +5 位作者 高磊 车峰远 张英豪 陆通 王志明 刘杰 《中华内分泌外科杂志》 CAS 2023年第6期716-719,共4页
目的探索中心体蛋白55(centrosome protein 55,CEP55)对膀胱癌细胞增殖能力的影响及相关分子机制。方法利用蛋白免疫印迹检测正常膀胱组织细胞(SV-HUC-1)与膀胱癌细胞(T24)CEP55、H3K9 me3的表达量。将膀胱癌细胞T24分为实验组和对照组... 目的探索中心体蛋白55(centrosome protein 55,CEP55)对膀胱癌细胞增殖能力的影响及相关分子机制。方法利用蛋白免疫印迹检测正常膀胱组织细胞(SV-HUC-1)与膀胱癌细胞(T24)CEP55、H3K9 me3的表达量。将膀胱癌细胞T24分为实验组和对照组,实验组细胞转染siRNA-CEP55,对照组细胞转染siRNA-MOCK。利用蛋白免疫印迹实验检测各组细胞CEP55、H3K9、H3K9me3的表达量,利用CCK8实验检测各组细胞的增殖能力。结果蛋白免疫印迹实验结果表明,膀胱癌T24细胞CEP55表达量为0.83±0.15,H3K9me3表达量为1.01±0.19。膀胱上皮SV-HUC-1细胞CEP55表达量为0.35±0.09,H3K9me3表达量为0.44±0.10,膀胱癌细胞CEP55、H3K9me3的表达均高于正常膀胱细胞(均P<0.05)。siRNA-CEP55成功降低膀胱癌细胞T24 CEP55的表达。实验组T24细胞吸光度为1.109±0.105,明显低于对照组细胞的2.208±0.104,CEP55低表达会降低T24细胞的增殖能力(P<0.05)。蛋白免疫印迹结果显示实验组T24细胞H3K9变化不明显,H3K9me3表达(P<0.05)明显下降。结论CEP55能通过降低H3K9的三甲基化来抑制膀胱癌细胞的增殖能力。 展开更多
关键词 膀胱癌 中心体蛋白55 H3K9 甲基化
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Identification and validation of novel loci associated with wheat quality through a genome-wide association study
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作者 PU Zhi-en YE Xue-ling +11 位作者 LI Yang SHI Bing-xin GUO Zhu DAI Shou-fen MA Jian LIU Ze-hou JIANG Yun-feng LI Wei JIANG Qian-tao CHEN Guo-yue WEI Yu-ming ZHENG You-liang 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2022年第11期3131-3147,共17页
Understanding the genetic basis of quality-related traits contributes to the improvement of grain protein concentration(GPC),grain starch concentration(GSC),and wet gluten concentration(WGC)in wheat.In this study,a ge... Understanding the genetic basis of quality-related traits contributes to the improvement of grain protein concentration(GPC),grain starch concentration(GSC),and wet gluten concentration(WGC)in wheat.In this study,a genome-wide association study(GWAS)based on a mixed linear model(MLM)was performed on 236 wheat accessions,including 160 cultivars and 76 landraces,using a 55K single nucleotide polymorphism(SNP)array in multiple environments.A total of 12 stable QTL/SNPs that control different quality traits in this populations in at least two environments under stripe rust stress were identified.Among these 12,three,seven and two QTLs associated with GPC,GSC and WGC were characterized,respectively,and they were located on chromosomes(chr)1B,1D,2A,2B,2D,3B,3D,5D,and 7D with the phenotypic variation explained(PVE)ranging from 4.2 to 10.7%.Compared with the previously reported QTLs/genes,five QTLs(QGsc.sicau-1BL,QGsc.sicau-1DS,QGsc.sicau-2DL.1,QGsc.sicau-2DL.2,and QWgc.sicau-5DL)were potentially novel.KASP markers for the SNPs AX-108770574 and AX-108791420 on chr5D associated with wet gluten concentration were successfully developed.The phenotypes of the cultivars containing the A-allele in AX-108770574and the T-allele in AX-108791420 were extremely significantly(P<0.01)higher than those of the landraces containing the G-or C-allele with respect to the wet gluten concentration in each of the environments.The KASP markers developed and validated in this study could be utilized in molecular breeding aimed at improving the quality of wheat. 展开更多
关键词 CULTIVARS LANDRACES grain protein concentration(GPC) grain starch concentration(GSC) wet gluten concentration(WGC) 55K SNP VALIDATION
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人55型腺病毒Fiber Knob蛋白原核表达、纯化及活性检测
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作者 陈楠 吴同鑫 +5 位作者 章汝 李晓月 顾欣雨 唐香平 李云 易永祥 《生物技术》 CAS 2023年第5期544-550,共7页
[目的]构建Fiber Knob原核表达载体,在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中诱导其表达,纯化具有良好生物活性的Fiber Knob重组蛋白。[方法]从人55型腺病毒(HAdV-55)中通过PCR扩增目的基因片段Fiber Knob,将该片段与原核表达载体pET15... [目的]构建Fiber Knob原核表达载体,在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中诱导其表达,纯化具有良好生物活性的Fiber Knob重组蛋白。[方法]从人55型腺病毒(HAdV-55)中通过PCR扩增目的基因片段Fiber Knob,将该片段与原核表达载体pET15b-His连接,构建重组原核表达质粒pET15b-Fiber Knob-His,转化大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达目的蛋白,通过镍柱亲和层析对目的蛋白进行纯化,SDS-PAGE和Western Blotting检测目的蛋白的表达与纯度。ELISA检测目的蛋白的生物学活性。[结果]重组表达质粒经双酶切和测序鉴定证明构建正确。重组蛋白主要以包涵体形式存在,上清中也有少量表达,重组蛋白相对分子质量约为25 kDa且纯度95%以上,ELISA结果显示制备的Fiber Knob蛋白与CD46胞外域蛋白之间存在直接的相互作用,并且这种相互作用是剂量依赖性的。[结论]成功构建了原核表达质粒pET15b-Fiber Knob-His,在大肠杆菌中成功诱导表达了Fiber Knob蛋白,纯化的Fiber Knob蛋白具有明显结合CD46胞外域蛋白的生物学活性,为其单克隆抗体的制备及人55型腺病毒新的细胞受体的发现奠定了基础。 展开更多
关键词 Fiber Knob蛋白 55型腺病毒 原核表达 纯化 活性检测
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孤儿G蛋白偶联受体55在糖尿病性胃轻瘫小鼠发病中的作用 被引量:3
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作者 林旭红 魏丹丹 +6 位作者 王慧超 王斌 白春洋 王亚强 李国恩 李荟苹 任学群 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期332-340,共9页
本文旨在探讨孤儿G蛋白偶联受体55(GPR55)在糖尿病性胃轻瘫(diabetic gastroparesis,DG)小鼠发病中的作用。采用链脲菌素(streptozotocin,STZ,65 mg/kg)腹腔注射制备小鼠DG模型。观察造模后小鼠体重及血糖含量变化,同时测定胃电图和酚... 本文旨在探讨孤儿G蛋白偶联受体55(GPR55)在糖尿病性胃轻瘫(diabetic gastroparesis,DG)小鼠发病中的作用。采用链脲菌素(streptozotocin,STZ,65 mg/kg)腹腔注射制备小鼠DG模型。观察造模后小鼠体重及血糖含量变化,同时测定胃电图和酚红排空功能,用放射免疫分析法测定血浆胃动素(motilin,MTL)、胃泌素(gastrin,GAS)、血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)、生长抑素(somatostatin,SS)水平,用Real-time PCR和Western blot测定胃组织GPR55表达,用免疫组织化学法观察胃组织GPR55分布,并观察GPR55激动剂溶血磷脂酰肌醇(lysophosphatidylinositol,LPI)对DG的治疗作用。结果显示,STZ组小鼠血糖于STZ注射后第4周末升至(26.6±1.2)mmol/L,体重明显减轻,胃电图慢波振幅下降,胃排空能力明显降低,而腹腔注射LPI可逆转STZ导致的上述变化;STZ小鼠血浆中MTL、GAS明显低于对照组(P<0.01),而SS、VIP明显升高(P<0.01),LPI可拮抗STZ对四种激素的影响;GPR55存在于正常小鼠胃组织,在DG时其表达明显上调,LPI不影响正常小鼠GPR55表达和分布,但可拮抗STZ对GPR55表达和分布的影响。以上结果提示,GPR55参与调节DG胃运动,可以作为DG治疗的新靶点;GPR55激动剂LPI对STZ导致的DG小鼠有保护作用,该作用机制与GPR55表达的改变、胃肠激素的调整有关。 展开更多
关键词 G蛋白偶联受体55 糖尿病性胃轻瘫 溶血磷脂酰肌醇
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