火焰原子吸收光谱法对三尖杉中六种微量元素的测定

目的运用火焰原子吸收光谱法直接测定了三尖杉中Fe，Cu，Mg，Ca，Mn，Zn6种微量元素。方法用浓硝酸微波消解样品，采用标准曲线法测定。结果所测定的三尖杉中含有丰富的人体必需微量元素，采用此方法回收率在96．5％～110．0％之间。结论方法简单、准确，结果令人满意。

海南粗榧扦插与生根试验研究

采用不同基质、不同药剂、不同浓度水平及不同季节对海南粗榧进行扦插生根试验．结果表明，海南粗榧半木栓化枝条可扦插成活；最佳的扦插基质为椰糠；IBA为生根的最好药剂，浓度以1500mg／L最理想；秋季扦插比春季成活率高；侧枝扦插生根率较直生枝高，且发根快．

三尖杉苗木生长和形态种源差异

利用来自11个省区25个三尖杉种源在福建明溪和浙江安吉两试验点开展苗期测定,研究种子、苗木形态与生长性状的种源差异。方差分析结果显示:来自不同产地的三尖杉,其种子、苗木形态与生长性状差异显著。试验观测到,来自东南部地区的三尖杉种源种子较长,苗高生长量较大,分枝稀少,而中西部地区的三尖杉种源种子较短,苗高生长量较小,分枝较多。三尖杉可明显地区分为长叶和短叶两种类型,东南部的种源多为长叶类型,而中西部地区的种源多为短叶类型,间有长叶类型分布。长叶类型三尖杉种源的种长、苗高和分枝数分别为短叶类型种源的116.8%、156.2%和1.54%。相关分析发现,较之于北部的长叶类型三尖杉种源,来自于南部的长叶类型种源苗高生长量较大,地径有增大的趋势;短叶类型三尖杉种源的苗木高径生长没有明显的纬向变异模式,其地径生长与产地经度存在一定程度的正相关。

海南粗榧幼苗种群构件结构与环境因子的多元分析

以构件理论为基础，运用灰色关联度分析技术对分布于海南岛5个地区的海南粗拉幼苗种群构件结构及与环境因子之间的关系进行了分析结果表明：①一级枝叶系统是海南粗榧幼苗种群构件结构的主要组成部分，二级枝叶系统等构件指标较为保守；②土壤湿度、土壤质地、群落透光度强烈影响海南粗极幼苗种群的生长，有效磷含量、海拔的作用较小；③土壤中有效钾含量对其生长的影响强于氮、磷的作用在对珍稀濒危物种海南粗榧幼苗种群的保护中，无论是就地还是迁地，应严格保证该种的阴湿生态环境及适当的土壤质地．

环境因子对海南粗榧幼苗种群构件结构的生态效应

以构件理论为基础，运用灰色关联度分析技术，对海南粗榧幼苗种群构件结构与环境因子间的关联度进行了分析．结果表明：一级枝叶系统、当年生枝叶系统受环境影响较大，而二级枝叶系统对于环境变化的反应较为保守；海南粗榧对土壤湿度、土壤中直径０．２５～１ｍｍ的砂粒含量和群落透光度的变化反应敏感，而受土壤中有效磷含量的影响较小，其余环境因子对海南粗榧幼苗种群的影响介于上述因子之间，对该物种的保护要严格保证它所需要的阴湿生态环境．

海南粗榧愈伤组织增殖及褐变现象研究

本文通过测定海南粗榧愈伤组织的生长速率、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)和多酚含量,探究外植体、培养基、抗褐变剂及激素对粗榧愈伤组织生长和褐变的影响。结果表明:叶片外植体诱导产生的愈伤组织褐变率比茎段外植体低;培养基添加0.5g·L-1聚乙烯吡咯烷酮(PVP)有良好的抗褐变效果。愈伤组织最佳增殖培养基为MS+萘乙酸(NAA)4mg·L-1+激动素(KT)0.1mg·L-1+蔗糖30g·L-1+卡拉胶6g·L-1+PVP0.5g·L-1。

海南粗榧树皮内生真菌的初步鉴定

从采自中国海南和泰国的海南粗榧(Cephalataxus mannii Hook.f)树皮样品中分离得到213株内生真菌,依据菌落形态和显微特征对其中142株进行初步的种属鉴定。结果显示,它们分属34个属,未知属37株。其中,采自海南的样品中内生真菌分属13属,未知属13株;采自泰国的样品中内生真菌分属27属,未知属24株,表明不同地区的海南粗榧内生真菌类群存在一定差异。海南产海南粗榧内生真菌的优势种群为根霉属(Rhizopusspp.)和青霉属(Penicillium spp.),泰国产海南粗榧内生真菌的优势种群为酵母属(Saccharomyces spp.)和毛霉属(Mucor spp.)。

海南粗榧外植体灭菌方法研究

以海南粗榧(Cephalotaxus mannii Hk.f.)的枝条、叶为外植体进行愈伤组织诱导,采用升汞、次氯酸钠与臭氧为消毒剂,探讨不同灭菌方法对海南粗榧外植体污染和细胞活性的影响。结果表明,以升汞与臭氧复合处理的灭菌方法最佳,最佳灭菌条件为:75%酒精灭菌1 min,臭氧灭菌30 min,再用0.1%HgCl2溶液灭菌10 min。在此条件下,外植体污染率5%,愈伤组织诱导率95%,外植体细胞活力比对照提高38%。

海南粗榧生物生态学特性初步研究

海南粗榧(Cephalotaxus mannii Hook.f.)主产海南,是生产抗癌药物三尖杉酯碱(harringtonine)及高三尖杉酯碱(homoharringtonine)的主要原料。开发利用已有10多年的历史,由于发现该植物的药用价值时,其资源蕴藏量已经很少,经过10多年的开发利用,现已成罕见树种,为国家二级保护植物。进行生物学生态学特性以及繁殖技术研究,可为就地保护、迁地保护及建立原料生产基地提供基础资料。

三尖杉内生真菌的季节动态和组织分布研究

目的研究不同季节药用植物三尖杉(Cephalotaxus fortunei Hook.f.)不同组织部位内生真菌的种类组成、数量和分布规律的差异。方法采用组织分离法分离出春、夏、秋、冬4次采样的三尖杉叶片、枝条和树皮中的内生真菌,根据形态分型后进行分子鉴定。结果从4次采样的3个组织部位中共分离得到内生真菌1 851株。根据培养特征共划分为77个形态型,分子鉴定为70个分类单元。研究表明,季节和组织对内生真菌定殖率、分离率和种类组成均有明显的影响,但是季节的影响远大于组织的影响。结论三尖杉内生真菌具有丰富的生物多样性,结合内生真菌丰度和多样性指数综合分析,春季为获得较多种类的内生真菌的最佳取样时间。

珍稀濒危植物海南粗榧保育群落植被生物多样性研究

采用样地调查法对海南霸王岭国家级自然保护区海南粗榧保育群落植被生物多样性进行研究,结果表明,霸王岭的海南粗榧群落生物多样性指数较高,虽然不同样方中的乔木层、灌木草本层的生物多样性指数都表现出极显著差异,但同一样方中乔木层和灌木草本层生物多样性指数相差不大;保育群落中的优势种主要有红紫麻(Oreocnide rubescens)、野芭蕉(Musa wilsonii)、药用狗牙花(Ervatamia officinalis)等;保育区内海南粗榧成年和幼体植株生长情况较好。

台湾三尖杉碱绝对构型研究

从高山三尖杉(Cephalotaxus fortunei Hook.f.var.alpina Li)的枝叶中分离得到了台湾三尖杉碱(wilsonine)。通过X-衍射方法,确定了其绝对构型。

火焰原子吸收光谱法对红豆杉和三尖杉中六种金属元素的测定

目的：本文运用火焰原子吸收光谱法直接测定了红豆杉和三尖杉中Fe、Cu、Mg、Ca、Mn、Zn6种微量元素。方法：用浓硝酸微波消解样品,采用标准曲线法测定。结果：所测定的三尖杉中含有丰富的人体必需金属元素,采用此方法回收率在95.0%~110.0%之间。结论：本方法简单、准确,结果令人满意。

三尖杉化学成分的分离与鉴定

目的研究三尖杉的化学成分,以期分离得到具有活性的新天然产物。方法采用体积分数为95%的乙醇提取三尖杉,萃取得到乙酸乙酯层,并采用硅胶柱色谱法、Sephadex LH-20凝胶柱色谱法和制备HPLC法对其化学成分进行分离与纯化,并根据理化性质、NMR等波谱数据对化合物进行结构鉴定。结果分离得到6个化合物,分别鉴定为20-羟基蜕皮激素(20-hydroxyecdysone,1)、罗汉松甾酮(makisterone A,2)、7,8-二氢-20羟基蜕皮激素(7,8-dihydro-20-hydroxyecdysone,3)、5,4'-二羟基-7-甲氧基-8-O-β-D-葡萄糖黄酮苷(5,4'-dihydroxy-7-methoxy-8-O-β-D-glucosyl-flavone,4)、5-O-β-D-葡萄糖芹黄素(apigenin-5-O-β-D-glucoside,5)、3-O-β-L-鼠李糖槲皮素(quercetin-3-O-β-Lrhamnopyranosid,6)。结论 6个化合物均为首次从三尖杉中分离得到。

三尖杉的育苗技术

针对三尖杉种子休眠期长、发芽率极低(仅10%) 的问题，经近10年的试验研究，初步掌握了三尖杉种子的采收加工和播种育苗技术。以此 为基础，从采收及种子处理、种子层积催芽、播种育苗、育苗期的管护措施等方面，详细介 绍了三尖杉的育苗技术。

色氨酸及其衍生物对海南粗榧悬浮细胞合成三尖杉酯类碱的影响

目的研究L-色氨酸及其衍生物5-甲基-DL-色氨酸(5-MT)对海南粗榧悬浮细胞生长及三尖杉酯类碱合成的影响。方法在细胞培养第15天,向海南粗榧悬浮培养物中添加一定量的L-色氨酸或5-MT,测定细胞生长、产物量以及代谢途径中关键酶的活力。结果 L-色氨酸与5-MT都能促进三尖杉酯类碱的合成。添加5 mg/L 5-MT时,产物量最高(2.944 mg/L);添加10 mg/L L-色氨酸和5 mg/L 5-MT后,三尖杉酯类碱产量分别是对照(1.343 mg/L)的1.947、2.192倍;而悬浮细胞生物量分别比对照(2.406 g/L)降低了9.35%、18.04%。同时,3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖-7-磷酸合成酶活性分别比对照(0.67 U/mg)降低了12.4%、5.57%;苯丙氨酸解氨酶活性分别比对照(78.21 U/mg)增加了37.72%、28.02%;酚类物质积累比对照(0.36mg/mL)增加了19.14%、9.61%。结论 L-色氨酸及其衍生物5-MT能抑制代谢支路,促进代谢流向产物三尖杉酯类碱的方向。