Preparation and Chiral Selectivity of BSA-Modified Ceramic Membrane

An affinity-transport system, containing porous ceramic membranes bound with bovine serum albumin （BSA） was used for chiral separation of racemic tryptophan. The preparation of BSA modified ceramic membrane included three steps. Firstly, the membrane was modified with amino group using silanization with an amino silane. Secondly, the amino group modified membrane was bound with aldehyde group using gluteraldehyde. Finally, BSA was covalently bound on the surface of the ceramic membrane. Efficient separation of racemic tryptophan was carded out by performing permeation cell experiments, with BSA modified, porous ceramic membranes.

羰基咪唑法合成牛血清白蛋白键合手性固定相

采用柱上衍生化学法 ,在较短的时间内 ,用羰基咪唑活化的氨丙基硅胶与牛血清白蛋白反应 ,合成出牛血清白蛋白键合手性固定相 .分别考察了流动相 p H值和有机改性剂正丙醇浓度对 D,L-色氨酸的保留因子 k 和分离因子 α的影响 ,并对

牛血清白蛋白手性毛细管整体柱的分离性能

以牛血清白蛋白为手性选择器,基于甲基丙烯酸酯整体柱表面所带环氧基团具有较强反应活性的特征,采用一步法将牛血清白蛋白直接键合到其表面上,制备成牛血清白蛋白手性固定相毛细管整体柱。在毛细管电色谱模式下,进行柱分离性能研究。在-5 kV的分离电压、214 nm紫外检测波长、5 s进样时间1、0 mmol/L磷酸盐流动相分离条件下,成功拆分了4种对映体和手性药物华法令,分析时间均小于15 min,分离度大于1.90,最大达到8.81。

牛血清白蛋白为分离剂超滤拆分色氨酸的机理和模型(Ⅰ)

以牛血清白蛋白(BSA)作为手性选择剂,利用膜超滤法拆分色氨酸(Trp)可以达到良好的手性分离效果。系统地研究了溶液pH值、温度、色氨酸和BSA的初始浓度、超滤压力等因素对分离效果的影响,指出除pH值外,温度对分离效果同样具有显著的影响。并依据pH值和温度对BSA空间结构和色氨酸带电性质的影响规律,定性分析了BSA拆分色氨酸对映体的机理。pH值主要通过影响BSA的空间构象和色氨酸的带电性质影响分离效果,温度则主要通过影响BSA的空间结构影响分离效果。

牛血清白蛋白为分离剂超滤拆分色氨酸的机理和模型(Ⅱ)

为了准确地预测以牛血清白蛋白(BSA)为手性分离剂的色氨酸(Trp)超滤分离效果,在以单一对映体进行大量实验得到相互作用参数的基础上,对BSA与色氨酸对映体3种不同的结合模型进行了检验和对比。结果表明:在7<pH<12的范围内,BSA与色氨酸的结合机理模型为单位点竞争模型。此模型可以对渗透液中D-色氨酸的浓度和分离系数进行较准确的预测。通过对实验数据进行拟合,给出了计算相互作用参数的计算公式。

电场作用下PAN/PS共混膜的特性

以相对分子质量67 000的牛血清蛋白为超滤分离对象,通过测定膜通量、截留率、膜通量衰减程度和恢复率等膜参数,研究了外加直流电场作用下聚丙烯腈/聚砜共混膜的分离性能.结果表明:外加正电场时共混膜的膜通量和截留率都有所提高,在外加+120V/cm的电场时,分别提高了85%和1.1%;在外加+60V/cm的电场时,膜通量由57.14%降低到26.33%;经过"电场自洁净"的共混膜其膜通量的恢复率可达到90%以上.因此,外加电场可改变共混膜的分离性能,提高膜通量、截留率以及抗污染性.

牛血清白蛋白手性柱直接拆分亚叶酸钙消旋体

目的 :建立牛血清白蛋白手性柱直接拆分亚叶酸钙消旋体的方法。方法 :采用高效液相色谱法 ,使用 EC15 0 / 4RESOLVOSIL BSA- 7(15 0 mm× 4 mm)手性色谱柱 ,0 .2 0 mol/ L、p H5 .0磷酸盐缓冲液为流动相 ,对亚叶酸钙消旋体进行拆分 ,考察了流动相缓冲液浓度、p H值以及柱温对拆分效果的影响。结果 :流动相的缓冲液浓度、p H和柱温对亚叶酸钙对映体的容量因子 k′,以及分离度 Rs,均有较大影响。左旋亚叶酸钙和右旋亚叶酸钙分别在18.5 min和 2 2 .6 min出峰 ,分离度 Rs=1.4 9。结论 :用本方法可以成功拆分亚叶酸钙对映体。

牛血清白蛋白修饰电色谱整体柱的微波辅助合成研究

借助微波辅助合成技术制备有机聚合物整体柱,对反应体系中各组分的配比进行优化,并采用扫描电子显微镜和红外光谱对聚合效果进行表征。然后利用氨基和环氧基之间的开环反应,将牛血清白蛋白修饰于整体柱表面,并将其应用于异丙肾上腺素的手性分离。实验结果表明,在一定的电泳条件下对异丙肾上腺素实现了基线分离,分离度达到7.73。

牛血清白蛋白键合的液相手性整体柱制备及其蛋白柱载量的研究

蛋白质柱载量的测定对优化蛋白质类手性整体柱的制备条件具有重要意义。采用热引发原位聚合方法制备了聚甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)-乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)液相整体柱,而后采用环氧法直接键合手性选择剂牛血清白蛋白(BSA),制得高效液相手性整体柱,并且建立考马斯亮蓝(CBB)法测定手性整体柱上的蛋白柱载量。结果显示,BSA最大的柱载量为11.90 mg/g,此时致孔剂组成为环己醇-十二烷醇(65∶35)。将制备的高效液相手性整体柱用于色氨酸和华法林的拆分,色氨酸的两个对映异构体达到基线分离。高效液相手性整体柱的蛋白柱载量与手性拆分的效果呈现正相关。

流动相的pH值和离子强度对牛血清蛋白高效液相色谱手性柱分离性能的影响

利用羰基咪唑-柱上衍生法制得牛血清蛋白(BSA)生物手性柱,并研究它在高效液相色谱中对3种对映异构体(色氨酸、匹多莫德及4-苯基-1,3-恶唑烷-2-硫酮(L-苯))的手性分离性能。实验结果表明:随着pH值从5.0上升到7.0,由于L-色氨酸与BSA有固定的作用位点,使得其保留值随着pH值的增加而大幅增大。而D-色氨酸与BSA无固定作用位点,其保留值随pH变化基本不变,分离度由1.15上升到8.91,增加了6.8倍;酸性样品匹多莫德与BSA主要是静电作用,与色氨酸相反,其对映体的保留值随着pH的增加逐渐减小,分离度逐渐下降,pH 7.0时为单峰,pH 5.0时Rs=1.27;中性样品L-苯的分离度随着pH值的增加有小幅增大。随着离子强度的减小,3对对映体的保留都增强,分离度增大,增加的幅度依次为色氨酸>匹多莫德>L-苯。

埃索美拉唑及其光学异构体的亲和毛细管电泳手性拆分

以牛血清白蛋白为手性添加剂,建立埃索美拉唑对映体杂质检查的亲和毛细管电泳方法,并采用荧光光谱、圆二色光谱法,通过研究埃索美拉唑及光学异构体与牛血清白蛋白作用的热力学参数、焓熵驱动过程及蛋白构象变化对其拆分机理进行探讨。建立的电泳分离条件为：未涂层石英毛细管柱（50 cm×50μm,有效长度41.5 cm）,以pH 8.0的20mmol/L磷酸二氢钠-磷酸氢二钠缓冲液（含250μmol/L牛血清白蛋白和7%正丙醇）作为运行缓冲液,正向运行电压30kV,柱温25℃,检测波长302 nm,压力进样（5 kPa,5 s）。在优化的实验条件下,埃索美拉唑与其对映体的分离度大于1.8,对映体杂质的最低检测限和定量限分别为0.8和2.0μg/mL,在2-20μg/mL浓度范围内线性关系良好;平均回收率为100.4%,RSD小于2.0%。该方法可用于埃索美拉唑原料药的对映体杂质检查。

酶法获得的多肽库用于新型手性固定相的制备

采用胰蛋白酶酶解牛血清白蛋白,将制备的酶解液超滤,得到相对分子质量小于6 000的小分子多肽库。应用羰基咪唑法将该多肽库键合至多孔硅胶,得到一种新型手性固定相。应用该新型手性固定相成功地拆分了两种氨基酸对映体。