川芎嗪-灯盏乙素苷元孪药对脑缺血再灌注损伤模型大鼠的保护作用及机制研究

目的 研究川芎嗪-灯盏乙素苷元孪药(TMSC4)对脑缺血再灌注损伤(CIRI)模型大鼠的保护作用及机制。方法 将105只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、灯盏乙素苷元组(0.7 mmol/kg)、川芎嗪组(0.7 mmol/kg)和TMSC4低、中、高剂量组(0.35、0.7、1.4 mmol/kg),每组15只。假手术组、模型组大鼠灌胃等体积生理盐水,其余各组大鼠灌胃相应药物,每天1次,连续14 d。除假手术组外,其余各组大鼠均采用线栓法建立CIRI模型。大鼠缺血2 h再灌注22 h后,测定大鼠脑指数及脑含水量;检测大鼠血清中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的水平和大脑皮层神经细胞的凋亡情况以及B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化型胱天蛋白酶3(cleaved-caspase-3)蛋白表达水平。结果 与假手术组比较,模型组大鼠脑指数和脑含水量,血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平以及脑组织中MDA水平,神经细胞凋亡率,Bax、cleaved-caspase-3蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);脑组织中SOD、 GSH-Px、CAT水平和Bcl-2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。与模型组比较,各给药组大鼠上述指标水平均显著逆转(P<0.05),且TMSC4中、高剂量组的逆转作用显著优于灯盏乙素苷元组和川芎嗪组(P<0.05)。结论 TMSC4对CIRI模型大鼠具有保护作用,其作用机制可能与减轻炎症反应、氧化应激损伤,抑制神经细胞凋亡有关。

巴戟素补肾健脑作用的神经活动基础

巴戟素是广州中医药大学新近从补肾中药巴戟天中提取的一种糖类单体物。为探讨巴戟素的补肾健脑的神经作用机制， 本实验以大鼠离体海马脑片为标本， 从细胞分子水平上观察巴戟素对大鼠海马脑片缺氧状态下的诱发群锋电位（ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｓｐｉｋｅ， ＰＳ） 和突触传递长时程增强（ｌｏｎｇ ｔｅｒｍ ｐｏｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ ， ＬＴＰ） 的影响。结果观察到巴戟素对脑缺氧损伤具有保护作用， 并能增强脑的记忆功能； 并观察到其作用机制与一氧化氮（ＮＯ） 有一定关系。实验结果从神经活动角度为中医补肾健脑理论增补了现代科学内容，

鲁斯可皂苷元对小鼠脑缺血缺氧的保护作用

目的研究鲁斯可皂苷元(Ruscogenin,Rus)对小鼠脑缺血缺氧的保护作用。方法采用小鼠断头致全脑缺血缺氧模型,通过观察小鼠断头呼吸维持时间,考察鲁斯可皂苷元抗脑缺氧活性及其量效时效关系;采用双侧颈总动脉结扎再灌注模型,考察鲁斯可皂苷元对脑组织含水量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及Na+-K+-ATP酶活性、Ca2+-ATP酶活性等生化指标的影响。结果 Rus 3～27 mg/kg灌胃给药1次,可显著延长小鼠断头后呼吸维持时间;给予Rus 9 mg/kg时,1 h即可明显延长小鼠断头后呼吸维持时间,2 h达到作用高峰,保护作用持续到8 h;Rus可明显降低反复缺血再灌注模型小鼠脑含水量,减少脑组织MDA含量,增加SOD活性、Na+-K+-ATPase活性和Ca2+-ATPase活性。结论 Rus在一定剂量范围内,明显改善小鼠脑缺血缺氧损伤,减轻缺血再灌注导致的脑水肿、氧化损伤和能量代谢障碍,具有起效较快,维持时间较长的作用特点。

川芎嗪对大鼠脑急性缺血缺氧损伤的保护作用

利用脑片技术、电镜及检测自由基代谢指标，从离体与整体、功能与形态结构结合上，观察了川芎嗪对大鼠不完全性脑缺血的影响。结果表明，川芎嗪可以提高海马脑片的耐缺氧能力，并呈量效关系；能抑制神经突触传递和脑细胞过度兴奋，有效地防止缺氧对脑细胞造成的不可逆性损伤；对脑缺血大鼠大脑皮层的超微结构有显著保护作用；能减少大鼠缺血脑组织中血清脂质过氧化物（ＬＰＯ）的生成，增加血清超氧化物岐化酶（ＳＯＤ）和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ＿Ｐｘ）的含量。由此可见，川芎嗪对大鼠急性脑缺血缺氧损伤具有保护作用。

毛冬青甲素对脑细胞缺氧损伤的保护及其机制的实验研究

以刺激海马脑片ＣＡ３区ｓｃｈａｆｅｒ侧支诱发ＣＡ１区的电位变化为指标，观察脑片在缺氧、复氧过程中群锋电位（ＰＳ）的变化，研究毛冬青甲素（ＩＡ）对其影响及谷氨酸（Ｇｌｕ）在其中所起的作用。实验结果表明，ＩＡ能明显延长ＰＳ幅值在缺氧时开始减小和消失的时间；明显降低缺氧损伤电位出现率和提高复氧后ＰＳ的恢复率；明显对抗Ｇｌｕ对ＰＳ幅值的抑制性影响。提示ＩＡ对大鼠海马脑片缺氧损伤具有明显保护作用，其作用机制与对抗Ｇｌｕ的神经毒性作用有密切关系。

苦菜总黄酮对小鼠脑缺血缺氧保护作用的实验研究

目的研究苦菜总黄酮对小鼠脑缺血缺氧的保护作用。方法采用小鼠断头、结扎双侧颈总动脉等脑缺血缺氧模型,观察苦菜总黄酮对脑缺血缺氧小鼠存活时间、断头小鼠喘息时间及脑毛细血管通透的影响;TBA法、NBT法测定小鼠脑缺血缺氧后脑组织MDA含量和SOD活性。结果苦菜总黄酮能显著延长小鼠存活时间、喘息时间,能显著降低缺血缺氧小鼠脑毛细血管的通透性,能显著降低脑组织MDA含量,能显著提高脑组织SOD活性。结论苦菜总黄酮对小鼠脑缺血缺氧有显著的保护作用,其作用机制可能与提高SOD活性,降低MDA含量有关。

龟板对局灶性脑缺血后神经干细胞的作用

【目的】探讨补肾中药龟板对局灶性脑缺血后神经干细胞的作用。【方法】采用大脑中动脉线栓法造成局灶性脑缺血大鼠模型 ,应用免疫组织化学技术检测神经上皮干细胞蛋白 (Nestin)的表达 ,观察龟板对脑缺血后神经上皮干细胞蛋白的影响。【结果】龟板可降低神经病评分和增强脑缺血后Nestin表达。【结论】提示补肾中药龟板可减轻神经损伤症状和对局灶性脑缺血后神经干细胞有促进增殖作用。

脑脉Ⅱ号对脑细胞缺氧损伤的保护作用

将５７片大鼠离体海马脑片分为用药组（Ⅱ１、Ⅱ２、Ⅱ３）和对照组。结果显示，脑脉Ⅱ号能增大海马脑片ＣＡ１区锥体细胞层诱发的群锋电位（ＰｏｐｕｌａｔｉｏｎＳｐｉｔｅ，ＰＳ）幅值；延长缺氧引起的ＰＳ开始减小和消失时间；减少缺氧损伤电位（ＨＩＰ）出现率；增加复氧后ＰＳ的恢复率，并呈一定的量效关系。提示：脑脉Ⅱ号能提高脑细胞的突触传递功能，提高脑细胞的耐缺氧能力。

东莨菪碱干预治疗新生儿缺氧缺血性脑病临床预后分析

目的：观察东莨菪碱干预治疗新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)的临床预后。方法：跟踪观察使用东莨菪碱的114例HIE患儿(干预组)和未使用东莨菪碱的85例惠儿(对照组)的行为神经测定(NBNA)评分、智商(IQ)和发育商数(DQ)。结果：NBNA测定4-6d龄后干预组明显高于非干预组。这种差距一直保持至3个月；IQ测定中、重度HIE惠儿分别在6个月、12个月仍有显著差异；DQ测定两组大运动和精细运动在4周有显著性差异。两组适应能力及语言的差异无显著性；两组社交能力在16周开始差异有显著性。结论：东莨菪碱干预疗法可以使HIE惠儿脑组织及脑功能在前6个月得到充分改善，减少了HIE后遗症。

石菖蒲冰片对神经细胞缺氧性损伤的保护作用

[目的]探讨石菖蒲、冰片对缺氧损伤神经细胞的保护作用。[方法]在缺氧培养条件下造成大鼠神经细胞损伤,测定空白对照组、模型对照组、石菖蒲挥发油组、冰片组、冰片+石菖蒲挥发油(低、中、高配比)组神经元细胞数、神经细胞支配面积。[结果]石菖蒲挥发油、冰片、冰片+挥发油(低、中、高配比)给药组神经细胞支配面积和神经元细胞数高于空白对照组和模型对照组。[结论]石菖蒲、冰片对缺氧诱导的大鼠神经细胞损伤具有保护作用。

(E)-3-(4-(2-(二甲氨基)乙氧基)-3-甲氧苯基)丙烯酸对大鼠局灶性脑缺血的保护作用及机制

目的:研究(E)-3-(4-(2-(二甲氨基)乙氧基)-3-甲氧苯基)丙烯酸(DEAAA)对大鼠局灶性脑缺血的保护作用及作用机制。方法:建立大鼠大脑中动脉阻塞模型(MCAO),以奥扎格雷为阳性对照组,观察DEAAA各剂量组(30、18、10.8mg/kg)对脑缺血大鼠神经行为、脑含水量、脑梗死面积、脑组织生化指标和脑组织病理变化的影响。结果:DEAAA(30、18mg/kg)可显著降低脑水肿程度,减少脑梗死面积(P<0.05和P<0.01vs缺血模型组),并增加MCAO大鼠脑组织超氧化物歧化酶含量、升高乳酸脱氢酶活力并且降低丙二醛水平(P<0.05和P<0.01vs缺血模型组),明显改善大鼠神经行为(P<0.05和P<0.01vs缺血模型组),改善脑组织神经细胞缺血后的病理改变。结论:DEAAA对脑缺血大鼠有保护作用,其机制可能与抗氧化、提高自由基清除能力、增强脑组织抵抗缺氧能力有关。

中药合剂神经生长液的促神经生长作用

目的观察中药合剂神经生长液对神经元生长的促进作用,为神经生长液用于治疗神经损伤、促进损伤神经修复提供实验依据。方法新生大鼠背根神经节无血清培养,在基础培养液中加入神经生长液,观察实验组与空白对照组背根神经节细胞生长状况和突起生长的长度。胎鼠大脑皮质神经元无血清培养,在基础培养液中加入神经生长液,采用3-(4,5-dimethylthiaz-2-y1)-2,5-dijohenyltetrazoliumbromide(MTT)法,观察实验组、神经生长因子(阳性对照)、空白对照组大脑皮质神经元的生长状态。结果与对照组相比,实验组背根神经节细胞突起生长明显,突起长度(314±43)μm显著大于对照组(76±26)μm(F=313.69,P<0.01);与对照组相比,神经生长因子、神经生长液均可显著提高无血清培养条件下大脑皮质神经元对MTT的代谢率(F=82.54,P均<0.01),且存在明显的剂量效应关系。结论神经生长液在体外可促进背根神经节和大脑皮质神经元生长。

脑醒喷鼻剂治疗急性缺血性中风66例

[目的]探讨脑醒喷鼻剂(活血开窍方)治疗急性缺血性中风(acute ischemic stroke,AIS)的临床疗效及其药理作用机制。[方法]采用随机对照双盲观察法将100例AIS患者分为2组,脑醒喷鼻剂组(治疗组)66例,尼莫通组(对照组)34例。观察脑醒喷鼻剂的临床疗效及其对血液流变学与自由基的影响。[结果]治疗组和对照组的总有效率分剐为90.9％和88.2％,显效率分别为72.7％和58.8％,两组比较差异均元显著性(P>0.05)。实验结果显示脑醒喷鼻剂能降低血粘度和红细胞压积,抑制红细胞和血小板聚集;提高超氧化物歧化酶(SOD)、谷光甘肽过氧化物酶(GSH—Px)活性。[结论]脑醒喷鼻剂治疗AIS疗效肯定(与尼莫通相当)。并显示该方能改善AIS患者血液流变性,改善脑的循环灌注,缓解脑缺血;促进自由基清除,减轻自由基损伤,保护脑细胞。

奥拉西坦联合配伍丹参多酚酸盐治疗老年脑梗死的合理用药疗效分析

目的:研究奥拉西坦与丹参多酚酸盐联合应用于老年脑梗死患者的疗效及安全性,并对其合理用药进行探讨。方法:选取本院2012年3月-2013年3月老年医学科收治的71例老年脑梗死患者设为对照组;2013年4月-2014年5月本院老年医学科住院治疗的70例老年脑梗死患者设为治疗组。对照组予以奥拉西坦药物治疗,治疗组在对照组的基础上联用注射用丹参多酚酸盐,两组均以14 d为一个疗程。结果:治疗组神经功能缺损评分较对照组有所改善(P<0.05),药物不良反应发生率两组比较差异无统计学意义。结论:奥拉西坦与丹参多酚酸盐联合应用对于老年脑梗死患者恢复期疗效较好,可显著改善患者的神经功能缺损,提高日常生活能力。

石菖蒲加冰片对脑皮质神经细胞保护作用及其伍用配比的研究

目的 观察石菖蒲加冰片不同配比对新生大鼠脑皮质神经细胞的保护作用,从而筛选出较佳配比。方法 培养脑皮质神经细胞,造缺氧模型,观察给药组与对照组的bcl-2、bax、caspase-3、白细胞介素-6(IL-6)等指标及原位细胞凋亡情况。结果 药物组能降低促凋亡基因caspase-3、bax的表达;而提高抑制凋亡基因bcl-2的表达,减少脑皮质神经细胞凋亡;减少IL-6的生成。石菖蒲加冰片不同配比明显比单纯石菖蒲挥发油组和单纯冰片组的作用效果好,其中高、中、低配比组之间比较,高配比组作用效果最好。结论 石菖蒲加冰片能减少脑皮质神经细胞凋亡,对脑皮质神经细胞有保护作用,尤以高配比组(冰片:挥发油=2:1.46)作用更明显,为较佳配伍。

宁痫汤对戊四唑致痫大鼠脑内氨基酸类神经递质含量的影响

【目的】探讨以升清降浊法组成的中药复方宁痫汤对实验性癫痫大鼠脑内氨基酸类神经递质含量的影响。【方法】以戊四哇(PTZ)诱导SD大鼠癫痫模型,观察中药复方宁痫汤(由升降散合温胆汤化裁组成)的抗痫效应,采用氨基酸分析法测定大鼠海马、皮层组织γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)的含量,并与正常组、模型组以及西药(苯巴比妥)组相对照。【结果】低剂量宁痫汤和西药苯巴比妥均能改善癫痫模型大鼠的惊厥行为(P<0.05),均能升高癫痫模型海马和皮层中GABA含量、同时降低其Glu含量(与模型组比较,P<0.05或P<0.01),并且两组的作用基本相仿(P>0.05),而高剂量宁痫汤的作用则比西药组差(P<0.05)。【结论】宁痫汤对癫痫发作有拮抗作用,其作用机制可能与调节脑内GABA、Glu水平,从而改善脑神经元兴奋--抑制平衡失调有关。

通脉养心丸中心肌保护活性物质的筛选

目的：基于细胞模型以及高效液相色谱—质谱联用技术对通脉养心丸中心肌保护活性物质进行筛选研究。方法：利用高效液相制备技术对通脉养心丸进行制备分离，然后采用过氧化氢氧化损伤H9 c2大鼠心肌细胞模型对通脉养心丸活性组分进行筛选。利用高效液相色谱—质谱联用技术对活性组分进行分析，通过查阅文献和根据化合物裂解规律，鉴定推断出可能的活性化合物。结果：发现通脉养心丸中10个组分具有明显的心肌保护活性，考察了其中5个组分的半数有效浓度并发现其呈现良好的量效关系。从这5个组分中推断出11个可能的活性化合物，包含甘草酸、甘草香豆素、甘草利酮、Glyasperin A等。结论：筛选出通脉养心丸中心肌保护活性物质，有望为中药复方制剂活性物质筛选研究提供借鉴。

安宫牛黄丸对脑梗塞造型大鼠血清乳酸脱氢酶同工酶的影响

目的研究生理、病理状态下安宫牛黄丸对机体作用的不同特点,从复方配伍减毒的角度探讨复方中朱砂、雄黄的药理作用机制。方法将SD大鼠随机分成正常组、正常+安宫牛黄丸组、脑梗塞造型组(光化学诱导大鼠大脑中动脉闭塞)、脑梗塞造型+安宫牛黄丸组。采用琼脂糖凝胶电泳法测定正常组和脑梗塞造型组大鼠不给药和给药(剂量为0.13g/kg)后7d的血清中乳酸脱氢酶同工酶LDH1～5含量。结果与正常对照组比较,脑梗塞造型组大鼠血清LDH1、LDH2含量明显升高(P<0.01);正常+安宫牛黄丸组大鼠血清LDH1～3含量均显著升高(P<0.001)。与造型组比较,造型+安宫牛黄丸组大鼠血清LDH3显著升高(P<0.01)。结论在正常生理状态下较长时间服用安宫牛黄丸后,对心肌、肾、红细胞、脾等有一定的损伤作用,而在局灶性脑梗塞病理状态下安宫牛黄丸对机体的损伤作用比在正常生理状态下小,显示安宫牛黄丸在生理、病理状态下对机体的作用方式和途径可能存在差异。

半胱氨酰白三烯受体1拮抗剂孟鲁司特对缺血性损伤后神经元形态的作用

目的:观察半胱氨酰白三烯受体1拮抗剂孟鲁司特对原代神经元缺血性损伤后形态变化的作用。方法:在不同浓度孟鲁司特存在条件下,以缺氧缺糖(OGD)2 h和再灌(R)24 h(OGD/R)诱导大鼠原代神经元及皮层混合培养细胞的神经元损伤;以免疫染色法检测神经元数量、胞体大小、胞体总神经突起数量、一级神经突起数量、长度及其分支数量等指标,观察神经元形态的变化。结果:OGD/R可明显减少神经元的数量,显著改变神经元的形态。而孟鲁司特(0.0001～1μmol/L)能减轻单独神经元培养中OGD/R诱导的神经元数量减少,抑制一级神经突起分支数量增加;在混合培养中,孟鲁司特(0.0001～0.1μmol/L)增加OGD/R后一级神经突的长度,减少神经突起数量以及一级神经突起分支数量。结论:半胱氨酰白三烯受体1拮抗剂孟鲁司特对大鼠原代神经元缺血性损伤有保护作用。

甲基莲心碱纳米脂质体对小鼠脑缺氧以及脑栓塞的疗效观察

目的研究甲基莲心碱（Nef）纳米脂质体（NefNL）对小鼠脑缺氧及脑栓塞的治疗作用。方法用亚硝酸钠制造小鼠脑缺氧模型,诱导剂制造小鼠脑栓塞模型。观察NefNL对这两种小鼠病模的治疗效果,并与生理盐水组、同剂量Nef注射液组、普通Nef脂质体组进行比较。结果与生理盐水组相比,Nef3种制剂均能显著延长小鼠亚硝酸钠中毒后的存活时间,提高小鼠对抗脑栓塞的能力（P〈0.05）;与Nef注射液组、普通Nef脂质体组相比,NefNL的治疗效果均有明显提高（P〈0.05）。结论 NefNL对小鼠脑缺氧以及脑栓塞有明显的预防保护作用。