百草枯中毒患者脑脊液中NSE和S-100β的变化及意义

目的:探讨急性百草枯中毒患者脑脊液中神经元特异性烯醇化酶(NSE)和S-100β蛋白(S-1O0β)水平变化及其临床意义。方法:检测36例急性百草枯中毒患者脑脊液中NSE和S-100β水平的变化,与20例对照组比较分析。结果:中毒组脑脊液中NSE和S-l00β的水平均显著高于对照组(均P<0.01);死亡组脑脊液中NSE和S-l00β的含量均明显高于存活组(P<0.01或P<0.05)。结论:脑脊液中NSE和S-100β水平的变化,可作为评估急性百草枯中毒患者脑组织损伤及其严重程度的临床指标。

烫伤大鼠室旁核和触液神经元中胆囊收缩素的变化

目的明确胆囊收缩素在烫伤应激中的确切作用。方法在大鼠清醒状态下给予标准的２５％Ⅲ度皮肤烫伤，伤后２４ｈ杀动物，用免疫细胞化学ＡＢＣ法显示ＰＶＮ和ＣＳＦ－ＣＮｓ的ＣＣＫ阳性神经元，结果用显微图像分析技术处理。结果（１）烫伤大鼠ＰＶＮ代表平面ＣＣＫ神经元的总面积增大，免疫染色无明显变化。（２）正中隆起（ｍｅｄｉｎｅｍｉｎｅｎｃｅ，ＭＥ）的ＣＣＫ免疫染色阳性纤维的面积密度无显著性差异而免疫染色减弱。（３）烫伤大鼠第三脑室室管膜内ＣＣＫ免疫染色阳性的ＣＳＦ－ＣＮｓ数量、面积和免疫染色强度均高于对照组。结论烫伤应激使ＣＣＫ在胞体的合成和末梢的释放均增加。烫伤后大量ＣＳＦ－ＣＮｓ的出现为ＣＣＫ释放入脑脊液提供了一条新的途径。

慢性吗啡依赖和戒断对大鼠远位触液神经元环腺苷酸反应元件结合蛋白表达的影响

目的研究慢性吗啡依赖和戒断大鼠远位触液神经元环腺苷酸反应元件结合蛋白(pCREB)表达的变化。方法雄性SD大鼠24只,随机分为3组(n=8):空白对照组、慢性吗啡依赖组、慢性吗啡戒断组。采用侧脑室注射CB-HRP和CB-HRP/pCREB免疫组织化学双重标记技术,观察大鼠远位触液神经元pCREB表达的变化。结果慢性吗啡依赖、戒断后,远位触液神经元出现CREB蛋白激活,两组CB-HRP/pCREB双标的神经元数量分别为223.0±61.5和213.0±50.6;与空白对照组相比较,磷酸化的CREB出现表达上调(P<0.01)。吗啡依赖组和戒断组的CB-HRP双标神经元的数量相比,差异无显著性(P>0.05)。结论远位触液神经元通过上调磷酸化CREB的表达参与吗啡依赖和戒断的形成。

大鼠第三脑室及中脑水管多巴胺能触液神经元的分布

目的 观察大鼠第三脑室、中脑水管及中缝背核内多巴胺能触液神经元的分布情况。方法 应用 CB逆行追踪、TH免疫组织化学和CB/TH免疫荧光双重标记技术, 观察多巴胺能触液神经元在间脑及中脑内的分布情况。结果 TH免疫阳性触液神经元分布在第三脑室尾侧部和中脑水管全程的腹侧室管膜上及室管膜内, 其胞体呈倒置梨形、圆形或椭圆形、多角形和梭形; 在中缝背核内可见少量 CB/TH免疫荧光双重标记的远位触液神经元; 另在正中隆起部位 TH免疫阳性神经末梢含量丰富。结论 大鼠第三脑室、中脑水管及中缝背核内存在多巴胺能触液神经元, 其在脑-脑脊液之间的信息传递中有着重要的作用。

触液核NGF/ERK信号通路参与CCI大鼠神经病理性疼痛

目的:观察神经生长因子(nerve growth factor, NGF)在坐骨神经慢性压迫性损伤(chronic constriction injury, CCI)大鼠触液核的表达以及拮抗触液核NGF对CCI大鼠痛行为学和触液核p-ERK表达的影响。方法:侧脑室注射CB-HRP逆行示踪触液核,结合免疫荧光双标观察正常大鼠是否表达NGF和p-ERK。第一步:SPF级雄性SD大鼠,体重200~300 g,按数字表法随机分为5组(每组6只):sham组,CCI 1、3、7、14天组。术前1天、术后1天、3天、7天、14天测定机械痛阈(mechanical withdrawal threshold, MWT)和热痛阈(thermal withdrawal latency, TWL)后处死并取触液核进行Western Blot观察NGF和p-ERK的表达变化情况。第二步:将SD大鼠随机分为6组(n=6):CCI+NGF抗体组、CCI+PBS组、CCI+对照抗体组、sham+NGF抗体组、sham+PBS组、sham+对照抗体组。CCI大鼠术后第6天在立体定位仪下侧脑室分别注射NGF抗体、PBS及对照抗体,测定MWT和TWL后处死并取触液核进行Western Blot观察p-ERK的表达变化情况。结果:正常大鼠触液核表达NGF和p-ERK,CCI组大鼠的MWT和TWL明显低于sham组,侧脑室注射NGF抗体后CCI+NGF抗体组大鼠的痛阈较CCI+PBS组和CCI+对照抗体组明显提高,并且其p-ERK表达较其他两组明显降低。结论:触液核NGF/ERK信号通路可能参与了大鼠神经病理性疼痛,侧脑室注射NGF抗体可能通过拮抗触液核NGF/ERK信号通路减轻大鼠神经病理性疼痛。

斑马鱼神经底板处神经元的分布及特征

神经底板(floor plate,FP)位于神经管腹侧中线区,存在多种神经细胞类型,是调控神经管分化及维持体轴生长的重要信号中心。目前,对神经底板处神经元细胞的类型及分布研究并不深入。本研究以斑马鱼(Danio rerio)为模式动物,结合多种神经细胞的转基因品系,分析了斑马鱼幼鱼中神经底板细胞群的排列图式。研究发现,foxj1a、sox2、clusterin和gfap等多个基因在内侧中央底板(medial floor plate,MFP)单排细胞中表达。Kolmer-Agduhr神经元KAʼ与KA”又称为脑脊液接触神经元,定位在MFP附近,其中KA”神经元表达foxj1a和pkd2l1基因,与表达Gfap蛋白、Olig2蛋白或Sox2蛋白的阳性细胞间隔性插入MFP细胞腹侧间隙中。KAʼ神经元位于KA”背侧,表达foxj1a、pkd2l1和olig2基因,并与Sox2^(+)或Olig2^(+)阳性细胞间隔分布于MFP细胞胞体的两侧。药物处理实验结果表明:抑制Notch信号影响神经底板的发育,导致神经底板细胞排布异常,并引起幼鱼出现体轴上弯表型。本研究初步阐释了斑马鱼幼鱼早期神经底板处各种细胞类型的分布及定位特征,发现Notch信号对神经底板发育的重要调控作用。