microRNA-545抑制宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨microRNA-545(miR-545)在宫颈癌组织及细胞系中的表达情况,并探讨其对宫颈癌Hela细胞生物学行为的影响。方法采用实时定量PCR(q PCR)检测52例宫颈癌组织、30例宫颈上皮内瘤样变(CIN)组织和25例正常宫颈组织石蜡包埋组织中的miR-545表达水平,分析miR-545表达与宫颈癌临床病理特征的关系,并检测其在宫颈癌细胞株Hela、Siha、Ca Ski、C33a及宫颈正常上皮细胞中的表达情况。采用miR-545的特异性过表达载体pc DNA6.2/GW/Em GFP-miR-545转染miR-545表达水平最低的宫颈癌细胞(过表达组),同时设pc DNA6.2/GW/Em GFP-miR空载体组和空白对照组。分析转染后Hela细胞的增殖水平(四甲基偶氮唑盐法)、凋亡情况(流式细胞仪Annexin V/PI双染法)及细胞周期(流式细胞仪PI单染法)。结果宫颈癌组织中miR-545的相对表达量为0.245±0.051,低于CIN组织的0.761±0.073和正常宫颈组织的1.027±0.024,差异有统计学意义(P<0.05),且宫颈癌组织中miR-545水平与临床分期、分化程度及淋巴结转移有关(P<0.05);与宫颈正常上皮细胞相比,宫颈癌细胞的miR-545水平均降低,由高到低依次为Ca Ski、C33a、Siha和Hela细胞;与空载体组和空白对照组相比,转染过表达载体细胞的增殖抑制率、凋亡率及G0/G1期细胞比例均升高,而S、G2/M期细胞比例均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-545在宫颈癌组织和细胞中均为低表达,上调其水平可达到抑制增殖、诱导凋亡和阻滞细胞周期的作用,在宫颈癌防治中具有一定价值。