利用多重PCR反应同时筛选番茄Ty-1和cf-5基因

利用同一PCR反应体系同时扩增、筛选分别与番茄抗黄化曲叶病毒病的Ty-1基因和番茄抗叶霉病的cf-5基因紧密连锁的SCAR标记,扩增的特异性片段与单引物扩增片段完全吻合。与Ty-1基因紧密连锁的SCAR1标记为共显性标记,抗感材料均产生398bp的特异片段,纯合和杂合抗病基因型存在TaqI酶切位点,酶切后分别产生了303bp和95bp以及398、303bp和95bp的特异性片段,而感病基因型无此酶切位点,酶切后仍呈现398bp的特异带。与cf-5基因紧密连锁的SCAR2标记扩增后抗感材料均产生960bp的特异片段,用限制性内切酶TaqI酶切后,含cf-5基因的材料产生一条256bp的特异带,而不含cf-5基因的材料产生一条225bp的特异带。

番茄Cf-5基因的SNP分子标记开发

根据已知的叶霉病抗性基因Cf-5基因序列,设计了3对嵌套引物。以4份抗病材料和4份非抗病材料DNA为模板,扩增番茄Cf-5基因并比较了抗感材料Cf-5基因的序列,在580、2 879 bp位点分别有T与C、G与T的碱基替换,设计了等位基因特异引物,获得了稳定的等位基因PCR产物,成功地开发了抗叶霉病基因Cf-5的SNP标记,为培育抗叶霉病番茄品种奠定了基础。

四重PCR技术鉴定番茄Ty-1、Ty-2、Mi和Cf-5基因研究

以番茄为试材,只利用1次PCR反应体系,同时对与番茄黄化曲叶病毒病(Tomatoyellow leaf curl virus)的Ty-1、Ty-2基因、番茄根结线虫病(Root-knot nematode)的Mi基因和番茄叶霉病(Leaf mold)的Cf-5基因紧密连锁的SCAR标记进行了筛选。结果表明:扩增的特异性片段和单引物扩增的片段吻合,即对与Ty-1基因、Ty-2基因、Mi基因和Cf-5基因紧密连锁的片段特异性扩增,所获得的片段大小分别是395、900、750和960bp。经TaqI酶切后所获得的特异性片段大小与前人试验所得大小基本相同,初步证明了四重PCR检测的准确性。该体系可对Ty-1、Ty-2、Mi和Cf-5 4个抗病基因进行同时筛选,在苗期辅助选择。降低了生产成本,节约时间、人力、物力,为分子标记辅助选择育种奠定了基础。

CF-5-Fu-DDP化疗方案对心率、血压影响的检测

探讨醛氢叶酸、5 -氟脲嘧啶、顺铂方案对恶性肿瘤患者血压、心率的影响。方法 患者化疗前 3天每天测血压、心率 ,取平均值作为其基础血压、心率 ;用药后半小时开始及以后每半小时测一次心率及血压 ,共测 12次 (6小时 ) ,每次详细记录。采用t检验法检验。结果 患者用药当天 6小时内与用药前的血压、心率相比无明显差异 ,P均 >0 0 5。此方案在用药全过程中血压保持在 15 46～ 17 33/9.6 0～ 10 .6 6kPa之间 ,心率保持在 73～ 79次 /分之间。结论 CF -5 -Fu -DDP方案只要用药适当 ,对肿瘤患者血压、心率无明显影响。

番茄叶霉病抗性基因Cf-5的CAPS标记建立

番茄是世界上最主要的蔬菜作物之一,叶霉病(Cladosporium fulvum Cooke)的发生和蔓延使保护地番茄生产受到严重影响,培育抗叶霉病的番茄品种是控制该病害最经济有效的方法.本研究根据Cf-5的基因序列设计特异扩增引物,以7个含有不同叶霉病抗病基因的品种为试材,扩增Cf-5基因2 558～3 523bp之间的单拷贝片段,7个材料均获得了约0.96Kb的特异扩增片段.用限制性内切酶Taq I对该片段进行酶切,含Cf-5基因的材料产生了一条256bp的特异片段,而不含Cf-5基因的材料产生一条225bp的特异片段.从而建立了Cf-5基因的共显性CAPS标记.这一研究结果为Cf-5基因的分子标记辅助育种奠定了良好基础.

奥沙利铂联合亚叶酸钙及5-氟尿嘧啶治疗晚期大肠癌的临床观察

目的：观察奥沙利铂（L—OHP）联合亚叶酸钙（CF）及5-氟尿嘧啶（5-Fu）治疗晚期大肠癌的疗效及不良反应。方法：将我院2002年10月～2005年10月收治的65例晚期大肠癌，随机分为A组和B组，A组：奥沙利铂130mg／m^2静脉滴注2小时，第1天；亚叶酸钙200mg／m^2持续静滴24小时，第1～5天；5-氟尿嘧啶500mg／m^2持续静滴24小时，第1～5天；每3周重复。B组：羟基喜树碱（HCPT）8mg／m^2静脉滴注，第1～5天；亚叶酸钙200mg／m^2，静脉滴注2小时，第1～5天；5-氟尿嘧啶500mg／m^2持续静滴24小时，第1～5天，每3周重复。所有病例均接受2周期化疗。结果：A组：CR2例，PR12例，SD11例，DD8例，总有效率42．4％，B组CR1例，PR5例，SD16例，PD10例，总有效率18．8％，A组的主要不良反应是周围神经炎及恶心呕吐、骨髓抑制。结论：奥沙利铂联合亚叶酸钙及5-氟尿嘧啶疗效优于羟基喜树碱、亚叶酸钙、5-氟尿嘧啶联合化疗，不良反应轻，值得临床推广。

大剂量甲酰四氢叶酸钙合并5-氟尿嘧啶对表达多药耐药基因的晚期腺癌患者的疗效分析

目的:为使已产生耐药的晚期腺癌患者取得更好的化疗效果。方法:选取18例经病理证实的晚期腺癌患者(胃癌7例,结直肠癌11例),且此18例患者均为经RT-PCR方法证实多药耐药基因(MDR1)表达阳性的患者,采用大剂量甲酰四氢叶酸(CF)200mg/m^2/d合并5-Fu 500mg/m^2/d静脉注射,每日一次,连用5日为一周期,观察其临床治疗效果。结果:18例中,17例可评价疗效,7例胃癌患者中,1例部分缓解(PR),2例轻度缓解(MR),4例病情稳定(SD)。10例结直肠癌有2例PR,3例MR,3例SD,病情进展(PD)2例。主要毒副作用有恶心呕吐、口腔炎、白细胞下降、脱发等,但大多在Ⅰ～Ⅱ级,绝大多数患者可以耐受。结论:大剂量CF合并5-FU对已产生耐药的晚期胃肠腺癌患者仍有较好的疗效,且患者基本能够耐受。

醛氢叶酸合并5-Fu、DDP方案治疗晚期鼻咽癌80例近期疗效分析

目的：寻求治疗晚期复发、转移鼻咽癌安全、有效的化疗方案。方法：用ＣＦ－ＦＰ和ＦＰ方案治疗晚期复发、转移的鼻咽癌各４０例。结果：有效率分别为７５％和５２５％，ＣＲ率分别为５％和０，ＣＦ－ＦＰ组中大剂量和中剂量ＣＦ各２０例，有效率分别为８０％和７０％，既往ＦＰ治疗失败或复发者仍有５７８９％的有效率，ＣＦ－ＦＰ组白细胞下降、呕吐、口腔溃疡略高于ＦＰ组，结论：中剂量ＣＦ－ＦＰ为治疗晚期复发、转移鼻咽癌安全、有效的化疗方案。

健脾益气、补肾填精方联合奥沙利铂+CF/5-FU方案治疗大肠癌的疗效观察

目的 总结探讨健脾益气、补肾填精方联合奥沙利铂＋CF/5-FU方案治疗大肠癌的疗效观察.方法 选择2014年1月-2015年12月期间在浙江省嘉兴市第一医院接受治疗的80例大肠癌患者为研究对象,随机分为观察组和对照组各40例,其中对照组给予奥沙利铂＋CF/5-FU进行治疗,观察组在对照组治疗基础上应用健脾益气、补肾填精方治疗,观察2组治疗前后血清肿瘤标志物、临床症状及生活状态、变化,记录不良反应情况. 结果 观察组有效率82.50%,明显高于对照组62.50%;治疗后观察组的QOL评分（37.8±5.6）明显高于对照组（33.5±3.1）;观察组不良反应发生率30.00%,明显低于对照组52.50%,组间差异有统计学意义（P〈0.05）. 结论 健脾益气、补肾填精方联合奥沙利铂＋CF/5-FU方案治疗大肠癌效果显著,能有效改善临床症状和提高患者生活质量.

CF/5-Fu联合化疗配合中药治疗晚期大肠癌33例疗效观察

目的 观察化疗配合健脾和胃、益气养血中药治疗晚期大肠癌的疗效。方法 33例晚期大肠癌患者 ,均以甲酰四氢叶酸钙 (CF)与 5 氟脲嘧啶 ( 5 Fu)联合化疗加健脾和胃、益气养血中药治疗。结果 完全缓解 (CR) 5例 ( 1 5 .1 5 % ) ,部分缓解 (PR) 7例 ( 2 1 .2 1 % ) ,稳定 (SD) 1 3例 ( 39.39% ) ,进展 (PD) 8例 ( 2 4 .2 4 % )。总发生率恶心、呕吐 2 4 .2 4 % ,腹痛 6.0 6% ,腹泻 2 1 .2 1 % ,口腔溃疡 9.0 9% ,丙氨酸氨基转移酶 (ALT)升高 9.0 9% ,白细胞减少 30 .30 % ,脱发 9.0 9%。结论 CF 5 Fu配合健脾和胃、益气养血中药治疗大肠癌 ,与文献报道单纯CF 5 Fu方案疗效相仿 ,但毒性反应较小。该化疗方案可增敏减毒。

“理虚解郁方”对慢性疲劳综合征患者皮质醇及5-羟色胺的影响

目的:观察理虚解郁方对CFS患者CORT、5-HT的影响,探讨其与CFS症状的相关性及"理虚解郁方"的作用机制。方法:将66例CFS患者随机分为中药治疗组和西药对照组,观察治疗前后患者疲劳评定量表评分及外周血CORT、5-HT水平的变化。结果:中药效果较西药对照组疗效更显著(P<0.05)。中药组皮质醇较治疗前降低、5-HT水平较治疗前升高,具统计学意义(P<0.05)。结论:"理虚解郁方"能缓解CFS患者精神神经及躯体症状,促进疲劳状态的恢复,其机制可能与调节HPA轴及5-HT水平有关。

伊立替康联合5-Fu/CF治疗晚期结直肠癌的临床受益分析

背景与目的:伊立替康(CPT-11)是喜树碱类抗癌药物,为DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂。它通过CyP3A酶氧化成无活性代谢物(包括APC),并通过羟酸酯酶-2(CES-2)活化成SN-38。CPT-11具有良好的抗结直肠癌的活性。本文评价CPT-11联合5-FU/CF方案治疗晚期结直肠癌的临床受益、客观疗效和毒副反应。方法:用CPT-11联合5-FU/CF方案治疗晚期结直肠癌患者32例,包括19例患者采用CPT-11联合5-FU/CF 2周方案治疗;13例患者采用CPT-11联合5-FU/CF 3周方案治疗。结果:可评价疗效者30例,其中完全缓解(CR)2例,部分缓解(PR)11例,RR占43.3%,稳定(SD)14例,占46.7%,进展(PD)3例。临床受益率为83.3%,疼痛缓解率83.3%。中位肿瘤进展时间7.2月,中位生存期13.8月。主要副反应为迟发性腹泻和中性粒细胞减少,未出现治疗相关性死亡。结论:CPT-11联合5-FU/CF方案治疗晚期结直肠癌患者有效,临床缓解率高,明显减轻患者的痛苦,提高患者的生存质量,毒副作用患者能够耐受。因此,可作为晚期结直肠癌的一线或二线治疗方案。

草酸铂与时间调节5-氟脲嘧啶/亚叶酸钙治疗转移性结直肠癌疗效

目的:观察草酸铂(L-OHP)与时间调节5-氟脲嘧啶/亚叶酸钙(5-Fu/CF)治疗发生转移的结直肠癌疗效。方 法:对同周期经病理组织学或细胞学证实发生转移的结直肠腺癌44例,随机分为试验组和对照组,采用静脉多通道的时间编 程泵给药。试验组采用时辰化疗方法,L -OHP150mg/m2在用药第1天10时至16时给药,持续6小时静脉滴注,CF100mg/ m2d1～5,5-Fu500mg/m2d1～5,用药时间在每天22时15分至次日9时45分连续静脉滴注给药。对照组用药L-OHP150mg/m2 每日上午9时～12时静滴,CF100mg/m2d1～5,5-Fu500mg/m2d1～5,持续静脉滴注24小时。两组化疗前均给予恩丹西酮8mg 或格拉司琼3mg静注预防性止吐药。21天为1周期。在每个治疗周期开始前记录前1周期的毒性,并根据WHO标准分级。 每6个治疗周期后根据WHO标准评定疗效及毒副反应。结果:试验组22例,总有效率(CR+PR)54.5%。对照组22例,总 有效率(CR+PR)31.8%。两组疗效相比,有显著性差异(P<0.01)。毒副反应:外周静脉炎,试验组13.6%,对照组45.5%; 周围神经毒性,试验组36.4%,对照组81.8%,两组结果统计学处理有显著性差异(P<0.01);骨髓抑制、胃肠道反应、口腔溃 疡、脱发,两组结果无显著性差异(P>0.05);未见肝肾功、心功能损害。结论:草酸铂与时间调节5-Fu/CF治疗发生转移的结 直肠癌?

草酸铂加CF/5-FU48小时持续静脉滴注双周疗法治疗晚期胃癌83例疗效分析

目的:观察草酸铂(L-OHP)与CF/5-FU48小时持续静脉滴注双周疗法治疗晚期胃癌疗效及不良反应。方法:经病理证实的83例晚期胃癌患者随机分为治疗组和对照组。治疗方案:治疗组用L-OHP加CF/5-FU;对照组用VP16加CF/5-FU,两组均2周为1周期。结果:经过2个周期化疗,治疗组有效率(CR+PR)57.5%比对照组有效率34.9%高,两组比较差异有统计学意义(#2=4.2702,P=0.0388)。治疗中无疾病进展及治疗相关死亡,胃肠道反应及骨髓抑制均为轻中度,无显著性差异。神经毒性治疗组明显低于对照组,两组差异有统计学意义(P<0.01)。结论:L-OHP加CF/5-FU48小时持续静脉滴注双周疗法治疗晚期胃癌疗效高,不良反应轻,有希望成为最有效的治疗方案。

5-氟脲嘧啶和甲酰四氢叶酸钙联合治疗肝转移瘤的疗效评价

目的:探讨5-氟脲嘧啶(5-Fu)和甲酰四氢叶酸钙(CF)经肝动脉持续性灌注治疗肝转移瘤的临床疗效.方法:对68例无外科手术指征的肝转移瘤患者(其原发病灶均已做根除术),采取经皮股动脉或左锁骨下动脉肝动脉内植入药盒,术后经药盒每个月连续5d持续灌注5-Fu500mg/m2、CF100mg/m2及地塞米松10mg(d1～d5),并选择顺铂、丝裂霉素、表阿霉素、环磷酰胺联合化疗.结果:总有效率(完全缓解+部分缓解)为47.1%.肿瘤负荷＜25%者的有效率为60%(34.3%,P＜0.05).在随访的54例中,中位生存期为15.2个月,1年、2年生存率分别为61.1%和35.2%.来源于胃肠癌肝转移者疗效较好,其中位生存期为17.6个月,1年、2年生存率分别为68.4%和39.5%.全组无严重毒副作用或并发症,胃肠道及肝胆毒性较低.结论:经药盒肝动脉持续性灌注5-Fu、CF及地塞米松是治疗肝转移瘤较好的药物,可明显提高疗效,改善患者的生存质量.

开普拓联合奥沙利铂及5-氟尿嘧啶治疗晚期胃肠道癌疗效观察

目的：观察开普拓（CPT-11），奥沙利铂（L-OHP），亚叶酸钙（CF），5-氟尿嘧啶（5-FU）联合治疗晚期胃肠道癌的疗效和毒副反应。方法：采用CPT-11 120mg／m^2静滴，第1、15天；L-OHP 65mg／m^2静滴，第2、16天；CF100mg静滴，第1天-3天；5-FU 300mg／m^2静注，第1天-3天，（静脉微泵推注72小时）。28天～周期，3—6周期判定疗效。结果：36例患者中完全缓解（CR）2例（5．5％），部分缓解（PR）8例（22．2％），稳定（SD）22例（61．1％），进展（PD）2例（11．1％），总有效率27．8％。临床受益率88．9％，中位疾病进展6个月，中位生存期17个月。毒副反应主要以骨髓抑制，胃肠道反应，脱发为主，其中白细胞减少77．8％，胃肠道反应72．2％，脱发100％，光化疗相关死亡。结论：开普拓联合奥沙利铂及5-氟尿嘧啶治疗晚期胃肠道癌疗效肯定，临床受益明显，毒副反应能耐受，值得进一步试用。

长春瑞滨联合顺铂、亚叶酸钙／5-氟脲嘧啶治疗晚期食管癌

目的：观察长春瑞滨（NVB）联合亚叶酸钙（CF）、5－氟脲嘧啶（5－Fu）和顺铂（DDP）方案治疗晚期食管癌的近期疗效和毒性反应。方法：NVB25mg／m^2静脉注入，第1、8天给药；CF200mg静滴，第2天～6天给药；5－Fu500mg／m^2静滴6小时，第2天～6天给药；DDP35mg／m^2静滴，第2天～4天给药。28天为一个周期，完成2周期化疗后评价疗效。结果：23例晚期食管癌患者中，完全缓解2例（8．7％），部分缓解10例（43．5％），总有效率为52．2％。毒副反应主要是骨髓抑制、胃肠道反应、静脉炎。结论：NVB联合DDP、CF及5－Fu方案治疗晚期食管癌疗效较好，毒副反应可以耐受，是一个较好的联合化疗方案。

基于PXA255的嵌入式系统无线局域网终端设计

给出了WinCE下PXA255嵌入式系统无线局域网终端设计总体方案,概括介绍系统的硬件平台结构和采用的WinCE操作系统及其定制,在此基础上重点介绍了系统CF无线网卡接口设计及驱动的实现。最后使用同步工具和注册表编辑器,通过导出无线网卡驱动安装后的主要文件并将其编译进内核,实现了无线网卡驱动的永久保存和插卡自动识别,解决了设计中普遍存在的系统掉电后需重新安装驱动的技术难题。

多西紫杉醇联合草酸铂和5-氟尿嘧啶治疗晚期耐药性胃癌

目的观察多西紫杉醇(DOC)联合草酸铂(L-OHP)和5-氟尿嘧啶(5-FU)方案治疗进展期胃癌一线方案失败的疗效及毒副作用。方法采用DOC75mg/m2,第1天;L-OHP100～130mg/m2;醛氢叶酸0.2/m2第1、2天;5-FU500mg第1、2天;5-FU2.0/m2微量泵持续静脉滴注48h,21d为1个周期,连用3个周期进行评价。共治疗37例进展期胃癌患者。结果37例患者均可评价,获得CR0例,PR11例(29.73%),SD13例(35.14%);PD13例(35.14%):临床受益率(CBR)为78.38%%。与药物相关的不良反应依次为:Ⅱ～Ⅲ度白细胞减少26例(70.27%);Ⅱ～Ⅲ度血小板减少14例(37.84%);Ⅱ～Ⅲ度恶心、呕吐21例(56.76%);Ⅱ～Ⅲ度腹泻19例(51.35%);Ⅰ～Ⅱ度神经毒性反应22例(59.46%)。结论DOC、L-OHP和5-FU联合方案治疗进展期耐药性胃癌患者有效,毒副反应少,患者临床受益。

羟僖联合顺铂/5-氟尿嘧啶/亚叶酸钙治疗晚期胃癌

目的观察羟僖(HCPT)、顺铂(DDP)、5氟尿嘧啶(5Fu)、亚叶酸钙(CF)(HDLF)治疗晚期胃癌的近期疗效及毒副反应。方法28例晚期胃癌病人接受羟僖7mg/m2,d1～5;CF100mg/d,d1～5;5FU500mg/m2,d15;DDP20mg/m2,d1～4。对照组除不用羟僖外,其余治疗同治疗组(DLF)。21天为1周期,连用2周期。结果治疗组有效率60.71%,对照组有效率32.14%,两组有显著差别。治疗组骨髓抑制显著高于对照组。结论HDLF治疗晚期胃癌疗效较高,不良反应可耐受。