高效液相色谱法检测猪肉中替米考星残留量不确定度评定

本研究依据“农业部1025号公告-10-2008”《动物性食品中替米考星残留检测高效液相色谱法》,对猪肉中替米考星的残留量进行了测量不确定度评定。共涉及对照溶液配制、样品称量、样品溶液制备以及仪器峰面积、样品回收率5个评定分量,结果显示:检测替米考星的相对标准不确定度分量依次为3.09×10^(-2)、5.78×10^(-3)、4.00×10^(-3)、2.31×10^(-2)和1.34×10^(-2),其中对照溶液配制、仪器峰面积、回收率不确定度分量对合成不确定度的贡献较高。兽药替米考星在猪肉样品中的检测结果在95%的置信限(k=2)内可表示为:71.6±5.92μg/kg(k=2)。不确定度评定结果为系统评价高效液相色谱法检测猪肉中替米考星残留结果的准确程度和方法的可靠性提供依据。

家禽肌肉组织中硝基咪唑类药物残留高效液相色谱检测法研究

建立了检测家禽肌肉组织中甲硝唑、洛硝哒唑、二甲硝咪唑残留的高效液相色谱法。样品经乙酸乙酯振荡提取 ,浓缩 ,盐酸溶解残渣 ,己烷萃取除去脂肪。氢氧化钠调节溶液到pH 4 .8～ 5 .2 ,过C18小柱 ,甲醇洗脱 ,SpherisorbC18柱分离 ,32 0nm处检测。流动相为醋酸缓冲液 乙腈 (85∶15 ,v/v)。甲硝唑、洛硝哒唑和二甲硝咪唑检测限分别为 0 .5、1.0和 1.0ng·g-1。肉鸡肌肉组织中添加 6 .0ng·g-1水平回收率分别为 :甲硝唑 89.8% ,洛硝哒唑81.7% ,二甲硝咪唑 86 .6 %。此方法具有定性合理 ,检测限低 ,分析快速 ,准确等特点。

高效液相色谱检测动物肌肉组织中7种喹诺酮类药物的残留

本研究建立了同时检测动物肌肉组织中环丙沙星、单诺沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、二氟沙星、恶喹酸、氟甲喹7种喹诺酮类药物的HPLC-FLD检测方法.动物组织样品用磷酸盐水溶液提取,HLB固相萃取柱净化,采用甲酸水溶液-乙腈体系作为流动相,梯度洗脱,程序波长荧光检测器检测.方法的线性范围为0.3～100 μg/L,相关系数（r）大于0.9989;检出限为0.1～0.3 μg/kg,定量限为0.3～1.0 μg/kg;7种喹诺酮类药物在鸡肉和猪肉的平均回收率分别为70.4%～102.1%和79.6%～105.8%;相对标准偏差分别为1.1%～8.9%和1.3%～9.3%.

高效液相色谱-荧光-紫外法测定动物肌肉组织中多类药物残留

建立了同时检测动物肌肉组织中9种喹诺酮类药物、7种磺胺类药物和甲氧苄啶的高效液相色谱检测方法。动物肌肉组织样品用磷酸盐缓冲液提取,HLB固相萃取柱净化,洗脱液用氮气吹至近干,磷酸盐缓冲液复溶,以甲酸水溶液-乙腈体系为流动相,梯度洗脱,荧光-紫外检测器串联测定。本方法的线性良好,相关系数r>0.9987;平均回收率为70.6%～103.4%,相对标准偏差为1.2%～11.4%;荧光检测器测定喹诺酮类药物的检出限为0.04～0.4μg/kg;紫外检测器测定磺胺类药物和甲氧苄啶的检出限为3.5μg/kg。本方法具有简便、通用性强的特点,适用于动物肌肉组织中上述药物的常规残留检测。

高效液相色谱法检测鸡肉中氟喹诺酮类药物残留量前处理方法的优化

【目的】建立一种用高效液相色谱法快速检测鸡肉组织中5种氟喹诺酮类药物（诺氟沙星、环丙沙星、达氟沙星、恩诺沙星、沙拉沙星）残留量的方法．【方法】样品的提取液由乙腈与三氯乙酸溶液（质量分数2％）按体积比1∶3的比例混合而成，流动相为乙腈-磷酸/三乙胺溶液（0.02 mol· L-1），荧光激发波长280 nm，发射波长450 nm．【结果和结论】添加低、中、高浓度水平时，回收率为84.71％～99.66％，变异系数为0.20％～4.34％．该方法检测诺氟沙星、环丙沙星和恩诺沙星的残留定量限为10μg · kg-1，达氟沙星的残留定量限为2μg · kg-1，沙拉沙星的残留定量限为20μg · kg-1．此法操作简单、实用，灵敏度高，可以满足鸡肉食品中氟喹诺酮类药物残留检测的需要．

超高效液相色谱-串联质谱法测定动物肌肉组织和鸡蛋中残留的11种甾体激素类药物

建立了采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定猪、牛、羊和鸡肌肉组织及鸡蛋中睾酮、甲基睾酮、黄体酮、群勃龙、勃地龙、诺龙、美雄酮、司坦唑醇、丙酸诺龙、丙酸睾酮及苯丙酸诺龙等11种甾体激素多残留的分析方法。试样在碱性条件下用叔丁基甲醚提取,冷冻离心脱脂净化,以乙腈和甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,反相液相色谱分离。采用电喷雾离子化、多反应监测方式(MRM),对11种甾体激素同时进行定性定量测定。动物肌肉和鲜蛋中睾酮、甲基睾酮、勃地龙、美雄酮及司坦唑醇的检出限为0.3μg/kg,群勃龙、诺龙、黄体酮、丙酸诺龙、丙酸睾酮及苯丙酸诺龙的检出限为0.4μg/kg。在动物组织及鸡蛋中添加1,2及10μg/kg水平的药物回收试验中,睾酮、甲基睾酮、勃地龙、美雄酮及司坦唑醇的回收率均在62.3%～105%之间,相对标准偏差为0.5%～15%;群勃龙、诺龙、黄体酮、丙酸诺龙、丙酸睾酮及苯丙酸诺龙的回收率大于50.0%,相对标准偏差小于16%。11种甾体激素在1～100μg/L范围内,线性关系良好,相关系数都大于0.99。该方法的样品前处理简单、快速,测定灵敏、准确,选择性好,可满足动物源食品中甾体激素类药物多残留的同时测定。

液相色谱-电喷雾串联质谱法同时检测鸡组织中5种抗病毒类药物的残留量

建立了鸡组织中抗病毒类药物多残留检测的液相色谱-电喷雾串联质谱法(LC-ESI-MS/MS)。采用三氯乙酸-乙腈溶液提取鸡组织中的金刚烷胺、金刚乙胺、美金刚、咪喹莫特和吗啉胍,离心过滤后经强阳离子交换柱(SCX)净化,色谱柱Xamide(100 mm×2.1 mm,5μm)分离,多反应监测(MRM)正离子扫描方式进行质谱检测。结果表明,鸡组织与鸡肝中5种药物的检出限为0.06～0.30μg/kg,定量限为0.2～1.0μg/kg。当5种药物的添加水平为0.2～10.0μg/kg时,在鸡肉中的平均回收率为72.3%～94.2%,相对标准偏差(RSD)(n=6)为3.5%～11.3%;在鸡肝中的平均回收率为70.8%～92.7%,RSD(n=6)为5.3%～12.6%。该方法选择性好,抗干扰能力强,可作为鸡肉和鸡肝中抗病毒药物残留检测的确证方法。

超高效液相色谱-串联质谱法检测鸡肉和鸡肝中抗病毒药物利巴韦林残留

为研究禁用抗病毒药物利巴韦林在鸡组织中的残留规律,对京红蛋鸡以30 mg/kg体质量剂量连续口服灌喂,在不同的时间点采集鸡肉和鸡肝样品,以超高效液相色谱-串联质谱法检测利巴韦林含量。对鸡肉、鸡肝中利巴韦林检测的方法学考察表明,鸡肉中利巴韦林检测方法线性相关系数R^2>0.99,检出限为1.20μg/kg,质量浓度范围为5.0~200μg/L;鸡肝中利巴韦林检测方法线性相关系数R^2>0.98,检出限为1.54μg/kg,质量浓度范围为10.0~500μg/L;高、中、低3种添加水平下回收率为83.5%~120.6%,精密度(相对标准偏差)为0.7%~9.1%,满足残留分析方法要求。利巴韦林口服灌喂蛋鸡后被迅速代谢吸收,在鸡肝中代谢消除较快,残留时间短,最长检出时间为24 h,即超过24 h不再有检出,鸡肉中利巴韦林消除速率相对较慢,残留时间较长,最长检出时间为60 h,在两种组织中均不发生蓄积现象。

鸡肉中氯羟吡啶的高效液相色谱法测定

确定了鸡肉中氯羟吡啶残留量的高效液相色谱分析方法.样品中的氯羟吡啶经乙腈提取,碱性氧化铝SPE柱纯化后,旋转蒸干,用流动相溶解残渣,过膜后进样;色谱柱采用Waters Symmetry C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),磷酸盐缓冲液(pH 7.0)-乙腈(体积比90:10)为流动相,流速为1.0 ml/min,检测波长为270nm,柱温为25℃,进样量50 μl;鸡肉中氯羟吡啶的定量限为0.01 mg/kg;氯羟吡啶的测定在0.025～0.500μg/ml范围内具有良好的线性关系,平均回收率在80.6%以上,变异系数小于7.5%.

液相色谱-四极杆/离子阱质谱同时确证和测定肌肉中16种同化甾体激素残留

采用液相色谱-四极杆/离子阱质谱(LC-Q/Trap-MS)建立了肌肉中16种同化甾体激素类物质(ASs)残留的同时确证及测定方法。肌肉中的ASs采用乙腈超声辅助提取,正己烷脱脂,氨基固相萃取柱净化,CAPCELL PAK C18MGⅢ柱(150 mm×2.0 mm,5.0μm)分离,0.1%(v/v)甲酸-乙腈溶液和0.1%(v/v)甲酸-5 mmol/L甲酸铵水溶液为流动相梯度洗脱;预设定多反应监测(sMRM)-信息依赖性采集(IDA)-增强子离子扫描(EPI)模式检测,在线EPI谱库确证,内标法定量。结果表明,16种ASs在线性范围内线性关系良好(r≥0.999);定量限(LOQ,S/N≥10)为0.029～0.36μg/kg;3个添加水平(0.5、2.0和20μg/kg)下的回收率为89.9%～118%;相对标准偏差(RSD)为6.3%～16.2%。该方法准确灵敏,一次性完成16种ASs的确证和测定,可有效用于肌肉组织中ASs残留的监测分析。

高效液相色谱荧光检测法检测鸡肉中甲砜霉素残留

研究建立了用高效液相色谱荧光法检测鸡肉中甲砜霉素残留的方法。鸡肉经丙酮、二氯甲烷提取,饱和正己烷脱脂,氮吹仪吹干浓缩后,以乙腈？磷酸二氢钠溶液（0.01 mol/L,含0.005 mol/L十二烷基硫酸钠和0.1%三乙胺）（32∶68,V/V）为流动相,流速为1.0 mL/min,荧光检测激发波长为225 nm,发射波长为290 nm。甲砜霉素在0.01~1.75 mg/L浓度范围内,本方法线性关系良好,相关系数为0.9991。当甲砜霉素添加水平为5~500μg/kg时,该方法平均回收率为79.49%~89.71%,相对标准偏差为4.96%~9.61%;日内相对标准偏差为5.68%~7.47%;日间相对标准偏差为8.89%~11.32%。甲砜霉素检测限为1.5μg/kg（S/N=3）,定量限5μg/kg（S/N=10）。所建立的方法简便、快速、灵敏度高,适用于鸡肉中甲砜霉素残留的高灵敏度检测。

超高效液相色谱法测定鸡肉中氯羟吡啶和磺胺类药物残留的方法研究

为同时测定鸡肉中氯羟吡啶和9种磺胺类药物残留量,通过建立样品处理技术,优化目标化合物色谱条件,建立了一种超高效液相色谱(UPLC)法。样品用乙腈提取后,经RP18色谱柱分离,外标法定量,样品检测氯羟吡啶和9种磺胺类药物时间仅需3.9 min,在10~1 000 ng/m L浓度范围内呈良好线性关系,相关系数均大于0.999;在10、50、200μg/kg 3个添加水平回收率为69.0%~95.6%,相对标准偏差≤7.98%;检测限为3.0μg/kg,定量下限为10.0μg/kg。该方法简便、快速、灵敏度高,重现性好,可用于鸡肉组织中氯羟吡啶和9种磺胺类药物的快速定量检测。

猪肉中磺胺二甲基嘧啶残留量的高效液相色谱法测定

猪肉中的磺胺二甲基嘧啶用乙腈提取,正己烷萃取,浓缩,过Sep-Pak碱性氧化铝B柱,洗脱液经减压干燥,再经流动相溶解,在270 nm检测波长处,用紫外检测器高效液相色谱仪检测。结果表明,猪肉中的磺胺二甲基嘧啶平均回收率达到90%以上,相对偏差小于10%,最低检测浓度为5μg/kg。该方法具有操作简便、快速、精密度高、回收率高、重现性较好、检测限低等优点。

反相高效液相色谱法检测鲫鱼肌肉中伊维菌素

以鲫鱼肌肉为材料,建立了一种简便、准确的反相高效液相色谱法,用于鱼肉中伊维菌素的药物残留检测和药代动力学研究。鲫鱼肌肉中的伊维菌素用乙酸乙酯提取,离心后的上清液于45℃下氮气吹干,残渣用甲醇-水(4∶1,V/V)混合液溶解,正己烷去脂,离心后取下清液,进样20μL进行HPLC分析。本方法考察了提取剂、柱温和流动相的影响,确定了以乙酸乙酯为提取剂,柱温25℃和甲醇-水(90∶10,V/V)为流动相的优化条件。方法线性范围为0.025～2.50μg/g,相关系数r=0.9997,检出限为11ng/g。批内RSD为1.0%～5.8%,日间RSD为1.0%～7.7%,相对回收率(99.8±4.1)%,绝对回收率为(95.9±3.9)%。本方法具有操作简便,结果准确可靠的特点。

虾肌肉中氟苯尼考和氟苯尼考胺残留的高效液相色谱检测方法研究

建立了虾肌肉中氟苯尼考和氟苯尼考胺残留的高效液相色谱检测法。以水和丙酮为提取溶液，Oasis MCX固相萃取柱净化，采用Inertsil ODS-3（5μm，250mm×4．6mmi．d．）反相色谱柱，以比例为68：32的A液（0．02mol／L戊烷磺酸钠-0．025mol／L磷酸钠溶液，pH3．85）与B液（含0．1％三乙胺的甲醇溶液）为流动相，在225nm处检测。氟苯尼考和氟苯尼考胺在10～1000μg／kg浓度范围内，线性关系良好；添加浓度为50、100、200、500μg／kg时，回收率在75．8％～85．9％，日内变异系数在2．4％～4．5％，日间变异系数在4．0％～5．8％；方法的检测限为10μg／kg，定量限为30μg／kg。本方法灵敏、准确、简便、快速，适于虾肌肉中氟苯尼考和氟苯尼考胺残留的同时检测。

用HPLC法测定动物肌肉中的磺胺类药物

七种动物肌肉组织中残留的磺胺间甲氧嘧啶(SMM)、磺胺地索辛(SDM)、磺胺二甲氧嘧啶(SM2)、磺胺甲恶唑(SMZ)、磺胺喹恶啉(SQ)经乙腈提取,正己烷分配,再经碱性氧化铝SPE柱净化后,用高效液相色谱-紫外检测法测定。该方法的最低检测限为2μg/kg,最低检出限为10μg/kg,回收率为60%～110%,批内变异系数小于15%,批间变异系数小于20%。

高效液相色谱法测定动物性食品中辛硫磷残留量的研究

建立了高效液相色谱法测定猪、牛、羊、鸡的肝脏和肌肉组织中的辛硫磷残留量的检测方法。样品经乙酸乙酯提取,经C18固相萃取柱净化,80%乙腈-水溶液定容,以65%乙腈-水溶液为流动相,经高效液相色谱仪测定,外标法定量。结果表明：辛硫磷标准溶液在50~2 000μg/L范围内呈良好的线性关系,R2均为0.999 9,方法检出限为10μg/kg,最低定量限为20μg/kg,在20、50、100μg/kg添加水平上,辛硫磷的添加回收率为70%~120%,批内、批间RSD均小于20%。该残留检测技术具有简便、灵敏、定性定量准确、可靠等优点,满足动物性食品安全检测的要求。

高效液相色谱法测定牛肌肉中庆大霉素残留的研究

本研究建立一种简捷、快速的高效液相色谱法测定牛肌肉组织中庆大霉素的残留。样品经50%三氯乙酸沉淀蛋白,上清液过MCX固相萃取小柱,洗脱液氮气吹干,经FMOC-Cl柱前衍生化,正己烷脱脂,用荧光检测器检测,激发波长260nm,发射波长315nm。该法对牛肌肉组织中庆大霉素的检测限(LOD)为25μg·kg-1,定量限(LOQ)为50μg·kg-1,在50、100、500μg·kg-1添加水平回收率为80.4%～82.8%,批内变异系数为3.4%～6.8%,批间变异系数为5.5%～8.1%。本方法可对牛肉样品中庆大霉素残留进行分析。

HPLC-MS/MS法测定猪肌肉、肝脏及肾脏中双氯芬酸钠残留量

建立了HPLC-MS/MS方法检测猪肌肉、肝脏及肾脏3种组织中非甾体抗炎药双氯芬酸钠的残留量.样品处理以萘普生为内标,先经乙酸乙酯液液提取,后经甲醇沉淀,Eclipse Plus C18柱（100 mm×2.1 mm×3.5 μm）等度洗脱.在负离子模式下,采用ESI电离源选择性反应监测模式（SRM）对双氯芬酸及萘普生进行检测.结果表明：在0.5～100 μg/kg浓度范围内,双氯芬酸钠在猪肌肉、肝脏及肾脏组织中的线性关系均良好,相关系数均大于0.99,各组织中的准确度RE及精密度CV均小于15％.该方法快速、有效、可靠,可应用于市场出售的猪肌肉、肝脏及肾脏中双氯芬酸钠残留量的检测.

饲粮添加酵母培养物对小尾寒羊屠宰性能及肌内氨基酸和功能成分的影响

[目的]研究饲粮添加酵母培养物对小尾寒羊屠宰性能及肌内氨基酸和功能成分的影响。[方法]选取体重相近[(17.5±1.2)kg]且健康的3月龄小尾寒羊40只,随机分为对照组(CON组,n=20)和酵母培养物添加组(YSD组,n=20);CON组饲喂基础饲粮,YSD组基础饲粮中添加1%酵母培养物。饲喂试验100 d,其中,预饲期10 d,正饲期90 d;饲喂试验结束后,每组选取10只试验羊屠宰,测定宰前活重、胴体重、胴体脂肪含量(GR值)、背最长肌pH值,计算屠宰率;取背最长肌、背阔肌、股二头肌、肋间肌样本,利用超高效液相色谱串联三重四极杆质谱(UPLC-QqQ-MS)技术,对肌内19种氨基酸和3种功能成分进行定量分析。[结果]屠宰性能方面,与CON组相比,YSD组宰前活重、胴体重和屠宰率无显著(P>0.05)变化;YSD组GR值显著(P<0.01)降低,肌肉pH值显著(P<0.05)提高。肌内氨基酸方面,与CON组相比,YSD组背最长肌苏氨酸(Thr)、赖氨酸(Lys)、羟脯氨酸(Hyp)、甘氨酸(Gly)含量以及必需氨基酸总含量(EAA)显著(P<0.01)提高,天冬酰胺(Asn)、丝氨酸(Ser)、谷氨酰胺(Gln)含量以及非必需氨基酸总含量(NEAA)显著(P<0.05)提高;YSD组背阔肌组氨酸(His)、谷氨酰胺(Gln)含量显著(P<0.01)提高,苯丙氨酸(Phe)、缬氨酸(Val)、赖氨酸(Lys)含量显著(P<0.05)提高,丝氨酸(Ser)含量显著(P<0.05)降低;YSD组股二头肌组氨酸(His)含量显著(P<0.01)提高,缬氨酸(Val)、瓜氨酸(Cit)、酪氨酸(Tyr)含量显著(P<0.05)提高;YSD组背阔肌和股二头肌必需氨基酸总含量(EAA)、非必需氨基酸总含量(NEAA)、风味氨基酸总含量(FAA)均显著(P<0.05)提高;YSD组小尾寒羊肋间肌谷氨酸(Glu)含量以及必需氨基酸总含量(EAA)、非必需氨基酸总含量(NEAA)、风味氨基酸总含量(FAA)、呈味氨基酸总含量(DAA)显著(P<0.05)提高,8种必需氨基酸、10种非必需氨基酸含量无显著(P>0.05)变化。肌内功能成分方面,与CON组相比,YSD组背最长肌和背阔肌的左旋肉碱含量显著(P<0.01)提高,肋间肌的左旋肉碱含量显著(P<0.05)提高,背最长肌的肌苷酸含量显著(P<0.01)提高。[结论]饲粮添加1%酵母培养物具有降低小尾寒羊胴体脂肪含量、提高肌内氨基酸和功能成分含量的作用。