来源于红球菌胆固醇氧化酶ChOG的异源表达、纯化及催化反应结构分析

胆固醇氧化酶是胆固醇代谢过程中的关键酶,临床上用胆固醇氧化酶作为检测血清胆固醇含量的应用潜力巨大。将来源于红球菌Rhodococcus ruber的胆固醇氧化酶Ch OG,分别转化到大肠杆菌宿主BL21(DE3)和Rosetta(DE3)中,在不同条件下进行诱导表达,结果表明:BL21(DE3)菌株在诱导温度为16℃、IPTG浓度为0.1 mmol/L时,Ch OG可溶性表达量最高(0.49 mg/ml)。Ch OG的最适反应温度为30℃,最适反应p H为7.5。最适反应条件下,酶活性达到8.0 U/mg。利用TLC、HPLC对Ch OG催化产物胆甾-4-烯-3-酮进行了鉴定分析。三维结构及定点突变分析表明Glu406及Arg408、Glu261在进行胆固醇C3羟基的脱氢、质子传递,以及底物异构化方面发挥着重要作用。

探析萨迦班智达和班钦释迦却丹诗作“nga brgyad ma”关系

藏族文学史上先后出现了两篇“nga brgyad ma”(ང་བརྒྱད་མ)体诗歌,即13世纪萨迦班智达和15世纪班钦释迦却丹所写诗作。本文围绕两篇诗歌之创作背景及作者,对两篇诗歌的艺术风格及二者之间的关系进行了探讨。