肠复康诱导人结肠癌HT-29裸小鼠移植瘤细胞凋亡的机制

目的探讨肠复康诱导人结肠癌HT-29裸小鼠移植瘤细胞凋亡的机制。方法建立人结肠癌HT-29癌细胞株裸小鼠皮下移植瘤模型,用电子天平测量移植瘤的质量,苏木精伊红(HE)染色计数凋亡细胞数,免疫组化染色结合图像分析系统半定量检测移植瘤细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax、半胱天冬酶3(caspase-3)的积分光密度(IOD),同时计算Bcl-2/Bax IOD比值,并使用逐步引入剔出模型进行单因素和多因素线性回归分析。结果与模型组比,肠复康组和西药组均使移植瘤瘤体质量量明显减轻(P<0.05或0.01),凋亡细胞数明显增多(P均<0.01),同时能显著增高瘤细胞iNOS、Bax及caspase-3蛋白的含量(P<0.05或0.01),显著降低瘤细胞Bcl-2/Bax比值(P<0.05或0.01);单因素回归分析显示,瘤细胞iNOS、Bcl-2、Bax及caspase-3含量和Bcl-2/Bax比值与移植瘤凋亡细胞数有关;多因素回归分析显示,移植瘤凋亡细胞数与瘤体质量呈明显负相关(r=-0.775,P<0.01),瘤细胞iNOS及Bax蛋白含量与移植瘤凋亡细胞数呈明显正相关(r=0.771,P<0.01,r=0.763,P<0.01)。结论肠复康能诱导人结肠癌HT-29裸小鼠移植瘤细胞凋亡,其机制之一可能是促进NO的生成,通过线粒体凋亡途径激活caspase-3,导致瘤细胞凋亡。

肠复康方治疗放射性肠炎湿热蕴结证临床观察

目的观察肠复康方治疗放射性肠炎湿热蕴结证的临床疗效。方法将116例急性放射性肠炎湿热蕴结证患者随机分为观察组和对照组各58例。观察组予肠复康方口服,对照组服用黄连素及蒙脱石散,同时两组患者均予钠钾镁钙葡萄糖溶液静脉滴注。疗程均为2周。观察两组患者治疗后临床症状、肠黏膜状况及大便常规+潜血等方面的改善情况。结果观察组在改善患者临床症状、肠黏膜状况及大便常规+潜血等方面疗效均优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论肠复康方对急性放射性肠炎湿热蕴结证有较好的疗效。

肠复康对人大肠癌HT-29细胞增殖的影响及作用机制研究

目的 研究中药复方肠复康对人大肠癌细胞增殖的影响及探讨其作用机制。方法 建立人大肠癌HT 2 9裸鼠移植瘤模型。设立肠复康低、中、高剂量组和空白组。给药 8周后比较瘤重、抑瘤率及病理变化。免疫组化染色结合图像分析系统半定量检测移植瘤Ki 6 7阳性细胞数和血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)的积分光密度。 结果 肠复康低、中、高剂量组抑瘤率分别为33.13%、4 7.2 6 %、6 6 .0 1%。肠复康各组移植瘤细胞核数量较少 ,细胞及细胞核形态更加规则。肠复康各组Ki 6 7阳性细胞数及VEGF表达均低于空白组。结论 肠复康具有抗人大肠癌HT 2 9裸鼠移植瘤细胞增殖的作用 ,其机理可能与促进癌细胞分化及抑制VEGF的表达有关。

肠复康对人大肠癌HT-29裸鼠移植瘤侵袭转移的影响

目的 :研究肠复康对人大肠癌侵袭转移的影响。方法 :建立人大肠癌HT 2 9裸鼠移植瘤模型 ,给药 8周后处死裸鼠 ,取下瘤体并行CD3 4、TIMP 2、uPA免疫组化染色。采用图象系统定量检测并比较各组微血管密度MVD值及TIMP 2、uPA表达情况。结果 :肠复康各组移植瘤MVD值及uPA表达均低于对照组 ,TIMP 2表达量均高于对照组。结论 :肠复康可能具有抑制人大肠癌HT 2

肠复康方治疗宫颈癌放疗后湿热蕴结下焦型放射性肠炎32例临床观察

目的:观察肠复康方治疗宫颈癌放疗后湿热蕴结下焦型放射性肠炎的临床疗效。方法:将64例宫颈癌放疗后湿热蕴结下焦型放射性肠炎患者随机分为治疗组和对照组,每组32例。治疗组予肠复康方口服;对照组服用思密达(蒙脱石散)口服。两组疗程均为2周,观察比较两组临床疗效。结果:治疗组在改善患者临床症状、大便常规+潜血、肠黏膜状况及生活质量等方面疗效均优于对照组,差异有统计学的意义(P<0.05)。结论:肠复康方治疗宫颈癌放疗后湿热蕴结下焦型放射性肠炎有较好疗效。

肠复康诱导人大肠癌HT29裸小鼠移植瘤细胞分化的研究

目的 探讨肠复康诱导人大肠癌HT2 9裸小鼠移植瘤细胞分化的作用。方法 建立人大肠癌HT2 9裸小鼠皮下移植瘤模型 ,用电子天平测量移植瘤的质量 ,苏木精—伊红染色观察瘤组织细胞的形态结构 ,结合图像分析系统半定量检测瘤细胞核分裂数及其形态计量学改变 ,并使用逐步引入剔出模型进行多元线性回归分析。结果 与模型组比 ,肠复康组和西药组均使移植瘤瘤体质量明显减轻 (P <0 .0 5或 0 .0 0 1) ,瘤组织细胞异型性降低 ,核分裂数、核仁面积 /核面积明显减少 (P <0 .0 0 1) ,且肠复康组的作用比西药组更为明显 (P <0 .0 0 1) ;同时 ,肠复康组瘤细胞核平均灰度明显降低 (P <0 .0 0 1) ,细胞核形状因子增高 (P <0 .0 5 ) ,西药组以上改变不明显 (P >0 .0 5 )。回归分析结果 ,移植瘤质量与瘤细胞核平均灰度和核分裂数呈明显正相关。结论 肠复康能抑制人大肠癌HT2 9裸小鼠移植瘤的增殖 ,其机制之一可能是逆转瘤细胞的异型性 ,诱导瘤细胞的重新分化。

肠复康方对急性放射性肠炎大鼠小肠黏膜细胞凋亡基因的影响

目的探讨肠复康方对急性放射性肠炎大鼠一般情况及小肠黏膜相关细胞凋亡基因的影响。方法以X线直线加速器给予实验大鼠全腹照射,建立急性放射性肠炎大鼠模型。将实验大鼠随机分成正常对照组,模型对照组,肠复康方低、中、高剂量组。模型复制成功后,肠复康各剂量组给予10mL/kg灌胃,低、中、高剂量组剂量换算后分别含生药15.75、31.50、63.00g/kg,模型对照组、正常对照组同时予等量生理盐水,连续30d灌胃。期间观察大鼠精神状态、摄食进水、排便情况及体质量变化,处死后取相应部位的小肠用免疫组化及Western blot方法检测黏膜上皮细胞中凋亡基因Caspase-3、Bax、Bcl-2的表达。结果肠复康方干预大鼠的精神状态、饮食进水、排便情况较模型对照组改善;与模型对照组比较,肠复康方干预大鼠体质量显著增加,以中剂量组效优(P<0.05)。肠复康方低、中、高剂量组小肠黏膜的凋亡基因Caspase-3、Bax和Bax/Bcl-2表达较模型对照组显著下调、Bcl-2显著上调(P<0.05),中剂量效优。结论肠复康方具有改善急性放射性肠炎大鼠一般情况及抑制其细胞凋亡作用,以中剂量效优,其机制可能与下调小肠黏膜上皮凋亡基因Caspase-3、Bax表达及上调Bcl-2的表达,抑制细胞凋亡有关。

解毒活血复方对人结肠癌LoVo细胞裸鼠移植瘤血管生成及VEGF、MMP-2表达的影响

目的:观察解毒活血复方(肠复康,CFK)对人结肠癌Lo Vo细胞裸鼠移植瘤血管生成的抑制作用,并探讨其对STAT3、p STAT3及VEGF、MMP-2表达的影响。方法:采用裸鼠结肠癌原位种植转移模型,将荷瘤鼠50只随机分为5组,每组10只,种植后第1周开始,分别给予生理盐水(模型组)、5-FU(5-FU组)、CFK低剂量(CFK低剂量组)、CFK高剂量(CFK高剂量组)、5-FU与CFK联合应用(CFK+5-FU组),1次/d,共用4周。种植后第5周末处死动物,测量原位肿瘤瘤质、抑瘤率,免疫组化检测各组结肠癌组织中肿瘤微血管密度(MVD),Western blot法检测STAT3、p STAT3、VEGF和MMP-2蛋白表达。结果:高剂量组及CFK+5-FU组平均瘤质均显著低于模型组(P<0.05);CFK高剂量组、CFK+5-FU组平均瘤质均低于5-FU组(P<0.05);CFK高、低剂量组、CFK+5-FU组MVD均明显低于模型组和5-FU组,差异均有统计学意义(P<0.01);CFK高剂量组、5-FU组肿瘤组织中STAT3、p STAT3、VEGF及MMP-2蛋白的表达水平均低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:解毒活血复方(CFK)可通过干预STAT3磷酸化,下调VEGF、MMP-2蛋白表达,从而抑制人结肠癌Lo Vo细胞裸鼠移植瘤血管生成。

肠复康肛滴治疗胸腹部术后肠麻痹86例临床观察

目的观察肠复康肛滴液治疗胸腹部术后肠麻痹的临床疗效。方法选择胸腹部术后肠麻痹患者146例,随机分为治疗组86例,对照组60例;治疗组用肠复康肛滴,对照组用新斯的明、吗丁啉分别肌注和口服。结果治疗组在促进患者肠鸣音出现时间、复常时间及肛门排气、排便出现时间等方面,明显优于对照组(P<0.01);治疗组在腹胀、呕吐、腹痛等肠麻痹症状的起效时间、消失时间及3d内症状消除率等方面亦明显优于对照组(P<0.05或0.01)。结论肠复康肛滴对胸腹部术后肠麻痹具有良好的治疗作用,其临床疗效优于新斯的明及吗丁啉。

肠复康对人大肠癌HT-29细胞凋亡的影响

目的:研究中药复方肠复康对人大肠癌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:建立人大肠癌 HT-29裸鼠移植瘤模型,设立肠复康低、中、高剂量组和空白对照组、5-氟脲嘧啶(5-FU)+甲酰四氢叶酸钙(CF)对照组,各组裸鼠8只,给药8周后处死裸鼠,瘤体称重,末端原位标记 TUNEL 法检测凋亡指数,并分别行半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、Bax、Bcl-2免疫组化染色,图像分析系统定量检测并比较该3种物质表达情况。结果:肠复康各组瘤重小于空白对照组,而凋亡指数均高于空白对照组和5-FU+CF 组,其中高剂量组显著较高(与空白对照组和5-FU+CF 组比较,P<0.01)。肠复康各组移植瘤 Caspase-3表达及 Bax、Bcl-2表达的相对比率(Bax/Bcl-2)均高于空白对照组。结论:肠复康具有诱导人大肠癌 HT-29裸鼠移植瘤细胞凋亡的作用,其机制可能与促进移植瘤 Caspase-3表达及增大 Bax/Bcl-2表达比率有关。

HPLC-ELSD法测定肠腑康胶囊A中黄芪甲苷的含量

目的建立HPLC-ELSD法测定肠腑康胶囊A中黄芪甲苷含量。方法色谱柱:Welch UltimateXB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相:乙腈-水(38∶62);流速:1.0 ml/min;柱温:30℃,漂移管温度83℃,氮气作为载气,流速:2.5 ml/min。结果肠腑康胶囊A中黄芪甲苷为1.48~8.40μg时,峰面积对数与进样量质量对数呈良好的线性关系,平均回收率为102.81%,RSD为3.51%。结论建立的方法具有操作简单、准确度高、专属性强等优点,可以用于肠腑康胶囊A中黄芪甲苷的含量测定。

肠复康方对急性放射性肠炎大鼠一般情况及小肠黏膜组织形态学的影响

目的:探讨肠复康方对急性放射性肠炎大鼠一般情况及小肠黏膜组织形态学的影响。方法:以X线直线加速器给予实验大鼠全腹照射(DT9.0 Gy),建立急性放射性肠炎大鼠模型。实验大鼠随机分成正常对照组、模型对照组、肠复康方低、中、高剂量组。造模成功后连续灌胃30 d,观察对比大鼠精神状态、摄食进水、排便情况及体质量变化,处死后取相应部位的小肠用HE染色法在光学显微镜下观察肠黏膜上皮的组织形态学改变。结果:造模成功后肠复康方低、中、高剂量组大鼠精神状态、饮食进水、排便情况均优于模型对照组;肠复康方中剂量组大鼠体质量高于模型对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。肠复康方低、中、高剂量组大鼠小肠黏膜组织形态学改变程度低于模型对照组,肠复康方中剂量组黏膜组织形态学改变程度与模型对照组、肠复康方低剂量组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);肠复康方低剂量组黏膜组织形态学改变程度与高剂量组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:肠复康方可改善急性放射性肠炎大鼠一般情况,具有修复小肠黏膜组织形态学改变的作用。

肠复康方对大肠癌细胞多药耐药的逆转作用机制研究

目的:通过血清药理学(serum pharmacology)及分子生物学(molecular biology)原理探讨肠复康方对大肠多药耐药逆转机理。方法:采用蛋白质印迹法(Western Blot)的实验方法检测多药耐药相关蛋白(multidrug resistanceassociated protein) P-gp、LRP、MRP1及COX-2的表达。结果:肠复康方能够使相关蛋白P-gp、LRP、MRP1及COX-2的表达发生明显的下降,差异有统计学意义(P <0. 01)。结论:肠复康在相当程度上会促使P-gp、LRP、MRP1、COX-2的表达呈下调的趋势,考虑可能与大肠癌多药耐药的逆转机理有一定的联系。

肠复康合剂对裸鼠移植性人结肠癌血管生成的抑制作用

目的 :探讨肠复康合剂对裸鼠移植性人结肠癌 HT- 2 9血管生成的机制。方法 :将 2 4只裸小鼠随机分为模型组、肠复康组及西药组 ,每组 8只。各组分别于建立人结肠癌 HT- 2 9癌细胞株裸小鼠皮下移植瘤模型后 6 d给予相应药物 ,免疫组化染色结合图像分析系统半定量检测移植瘤组织微血管密度 (MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)及其受体 (FL K- 1)、内皮抑素 (ES)的积分光密度 (IOD) ,计算 VEGF/ES比值 ,并使用逐步引入剔出模型进行单因素和多因素线性回归分析。结果 :与模型组相比 ,肠复康组可使移植瘤 MVD、VEGF、FL K- 1及 VEGF/ES比值显著降低 (P <0 .0 1) ,同时使 ES含量明显增高 (P <0 .0 1) ;西药组可明显降低瘤组织 VEGF、FL K- 1含量 (P<0 .0 1) ,但不能使移植瘤 MVD、ES和 VEGF/ES比值减少 (P >0 .0 5 )。单因素回归分析显示 ,瘤组织 VEGF、ES和 VEGF/ES比值与移植瘤 MVD相关 ,多因素回归分析显示 ,移植瘤 MVD与 VEGF/ES比值呈明显正相关 (r=0 .76 2 ,P <0 .0 1)。结论 :肠复康合剂能抑制人结肠癌 HT- 2 9裸鼠移植瘤血管生成 ,其机制可能是降低瘤组织VEGF/ES比值。

肠复康对人结肠癌细胞HT-29增殖及浸润转移的影响

[目的 ]探讨肠复康中药对人结肠癌细胞HT 2 9增殖及浸润转移影响的分子机制。 [方法 ]采用体外培养 ,应用免疫组化方法 ,检测其对核增殖抗原Ki 6 7、金属基质蛋白酶 (MMP2 )及其相应组织抑制物 (TIMP2 )表达的影响。 [结果 ]经中药血清处理过的HT 2 9细胞表现出增殖受抑 ,MMP2 表达减少及TIMP2 分泌增加 ,且其表达与中药血清浓度有量效关系 ,以 30 %血清组效果最明显。 [结论 ]中药肠复康通过抑制Ki 6 7的表达及影响MMP2 、TIMP2 的相互平衡来影响结肠癌细胞的增殖及浸润转移。

肠腑康胶囊对大鼠脾虚型溃疡性结肠炎作用实验研究

目的:研究不同提取方法及给药途径的肠腑康胶囊对大鼠脾虚型溃疡性结肠炎(Ulcerative Uolitis,UC)的作用。方法:采用灌服番泻叶浸剂加直肠注入2,4,6-三硝基苯磺酸复制脾虚型溃疡性结肠炎模型,灌胃给药或者灌胃给药加直肠给药,观察其对脾虚型溃疡性结肠炎的治疗作用。结果:造模后各组大鼠陆续出现脾虚症状并有大鼠死亡;模型组结肠重量及体重结肠比显著升高,大鼠溃疡数增加,大鼠粪便异常的动物数显著增加,肠黏膜可见溃疡,可见"陷窝脓肿"、"陷窝溃疡"形成,炎症程度较重,可见肠黏膜和黏膜下组织大量炎细胞浸润。给药组给药后,症状明显得到改善,各给药组体重在给药10天及15天后,较造模组增长明显加快,肠腑康胶囊口服+直肠组结肠重量及体重结肠比显著降低;肠腑康胶囊分别提取组体重结肠比显著降低;肠腑康胶囊灌胃+直肠给药组和分别提取灌胃组肠内溃疡个数明显减少;肠腑康胶囊灌胃+直肠给药组和肠腑康胶囊分别提取灌胃组大鼠粪便异常的动物数显著减少。病理组织学检查:口服+直肠组、分别提取组、混合提取组、补脾益肠丸组可显著提高溃疡愈合评分,提示本品对溃疡性结肠炎有较好的治疗作用,肠腑康胶囊给药途径口服+直肠组的作用优于其他两个给药途径和提取方法。结论:肠腑康胶囊(4.8g/kg)对大鼠脾虚型溃疡性结肠炎有较好的治疗作用,不同给药途径和提取方法的肠腑康胶囊对大鼠脾虚型溃疡性结肠炎的影响不同,其中口服+直肠明显优于其他2个给药途径及方法。

肠复康方对急性放射性肠炎大鼠一般情况及小肠黏膜炎性因子的影响

[目的]探讨肠复康方对急性放射性肠炎大鼠一般情况及小肠黏膜相关炎性因子的影响。[方法]以X线直线加速器给予实验大鼠全腹照射(DT9.0Gy),建立急性放射性肠炎大鼠模型。实验大鼠随机分成正常对照组(NC)、模型对照组(MC)、肠复康方低剂量治疗组(CFKD-LG)、肠复康方中剂量治疗组(CFKD-MG)、肠复康方高剂量治疗组(CFKD-HG)。造模成功后连续30d灌胃,期间观察对比大鼠精神状态、摄食进水、排便情况及体质量变化,处死后取相应部位的小肠用RT-PCR方法检测黏膜上皮细胞中炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表达。[结果]造模成功后肠复康方低、中、高剂量组精神状态、饮食进水、排便情况较模型对照组好;与模型对照组比较,肠复康方低、中、高剂量组大鼠体质量显著增加,肠复康方中剂量组效优(P<0.01)。肠复康方低、中、高剂量组小肠黏膜的炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA较模型对照组显著下调(P<0.01)。[结论]肠复康方低、中、高剂量组通过下调小肠黏膜上皮细胞中炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表达,改善小肠黏膜的炎症反应,促进急性放射性肠炎受损小肠黏膜的修复,以中剂量效优。