饱和苯酚-氯仿抽提法与Chelex-100树脂法提取DNA在研究犬STR基因座多态性中的应用比较

在研究犬STR基因座多态性中,比较使用了饱和苯酚-氯仿抽提法和Chelex-100树脂法,两种方法提取的DNA在扩增后的检测结果均能准确地反映实验结果。尽管从平均峰面积和平均峰高值等指标上,利用Chelex-100树脂法提取的DNA质量和扩增后的检测效果较饱和苯酚-氯仿抽提法差,但Chelex-100树脂提取法更为简单快捷,适合在建立警犬STR基因座等位基因数据库中和犬亲缘关系鉴定中广泛使用。

Chelex-100树脂对铅、镉、钠的吸附性能及其应用于原子吸收光谱法测定高盐食品中铅、镉含量

对铅、镉和钠在Chelex-100树脂上于不同pH值的介质中的分配系数(K_d)和吸附容量进行了研究。结果表明:在pH 1～8的介质中Na^+的K_d<3,即在Chelex-100树脂上无吸附;在pH>4的介质中,Pb^(2+)和Cd^(2+)的K_d>10~4,即强吸附于Chelex-100树脂上;而用0.16 mol·L^(-1)硝酸溶液可将吸附于树脂上的Pb^(2+)和Cd^(2+)完全洗脱下来。在此基础上提出了一种Chelex-100树脂分离原子吸收光谱法测定高盐食品中重金属元素含量的方法。方法用于高盐食品分析,加标回收率在93.1%～102%之间,测定值的相对标准偏差(n=5)在0.5%～3.4%之间。

Chelex 100螯合树脂与某些金属离子的发光行为及其分析应用

作者观察到Eu3＋、Tb3＋、Gd3＋、Al3＋、Ga3＋、In3＋、Zr4＋和Hf4＋的二元络合物在水溶液中能够与EDTA型的螯合树脂chelex100形成配位体－金属离子－chelex100的三元络合物，络合物的形成不但改变了它们的光谱性质，而且大大增强了其燐光或荧光强度。利用这一性质，本文制作了测定上述金属离子的流通式光学传感器。实验表明该传感器提高了测定的灵敏度与选择性。

Chelex 100吸附锶离子的理论计算

为探索Chelex 100树脂在微观结构吸附锶离子的作用机理,了解树脂的功能基团单分子在顶位和桥位,双分子在3种桥位与单个锶离子发生作用,以及双分子与2个锶离子的反应行为,采用量子力学分子动力学混合方法(hybrid QM/MM)研究Chelex 100树脂功能分子与锶离子反应的能量。计算7种吸附模型QM原子的电子结构参数,包括偶极距、最高占据轨道能量、最低非占据轨道能量、能隙、Fukui指数和Mulliken电荷布居。计算结果表明:锶离子在Chelex 100树脂分子桥位饱和吸附时相对稳定。

一种适用于梅花鹿源性产品鉴定的微量组织DNA提取方法的建立

为建立一种适宜梅花鹿源性产品分子鉴定的高效、便捷微量组织基因组DNA提取的方法。本研究分别以鲜品梅花鹿茸、风干梅花鹿茸、烘干梅花鹿茸、鲜品梅花鹿鞭、烘干梅花鹿鞭、风干梅花鹿鞭、鲜品梅花鹿肉、干品梅花鹿尾、梅花鹿血为样本,采用Chelex-100树脂溶液和蛋白酶K结合的方法提取基因组DNA,并检测其浓度与纯度;以此DNA为模板,扩增梅花鹿线粒体DNA的Dloop区特异性基因,并对PCR扩增产物进行琼脂糖核酸电泳及测序。结果表明,基于Chelex-100树脂提取法获得的基因组DNA模板浓度为52.57~63.39 ng/μL,A260/A280比值为1.75~1.96;梅花鹿线粒体特异性基因扩增产物电泳条带清晰,且长度准确;扩增产物测序,相似性大于95%。Chelex-100树脂提取法能够提取微量梅花鹿组织样本基因组DNA,且此方法低价、简便,适用于梅花鹿源性产品的真伪鉴定。

Tl(Ⅰ)与Tl(Ⅲ)在UV-H_2O_2体系中的价态转化

建立了chelex-100螯合树脂分离技术与石墨炉原子吸收联用测定水体中Tl(Ⅰ)与Tl(Ⅲ)的方法,分别考察了光化学氧化中pH值、H2O2投加量、光照强度对Tl(Ⅰ)的氧化效果。方法的Tl(Ⅰ)与Tl(Ⅲ)检出量均为0.5μg/L。两者共存时各自加标回收率大于95%。结果表明,在偏酸性环境(pH=3.0),投加适量30%H2O2,光照强度大有利于Tl(Ⅰ)的氧化。当pH=2.91,投加30%H2O2为5 mL,UV照射10min后,Tl(Ⅰ)的转化率达90%。研究表明,光化学氧化可有效转化水体中不易被物理化学法去除的Tl(Ⅰ)和容易被物理吸附、化学沉淀方法去除的Tl(Ⅲ)。

一种改良的人DNA微量快速检验技术

目的探索一种以口腔粘膜脱落细胞为材料的安全、高效、低成本、敏感性高的人DNA微量快速检测方法。方法采用从漱口液或棉签擦拭口腔粘膜获取脱落细胞,应用混合树脂(Chelex100)煮沸沉淀法提取DNA;用PCR分别对线粒体特异性DNA片断和基因组中的特定基因进行扩增检测。结果通过对线粒体DNA中440 bp的非编码片段和染色体基因组中220 bp的乙醛脱氢酶DNA片段进行扩增,结果显示,从漱口液脱落细胞提取的DNA中可以稳定地扩增出上述两种DNA片断。结论建立了一种改良的人口腔粘膜脱落细胞DNA微量快速检验技术。该法取样方便,DNA样品获取量较大,一次取样可同时进行多项线粒体和基因组标志DNA片段的快速PCR检测。

齐兴肉兔和伊拉兔MC4R、GHR基因SNP的检测

为了探索兔黑素皮质素受体-4(MC4R)、生长激素受体(GHR)基因的部分单核苷酸多态性(SNP)及其与不同兔品种生长速度之间的关联,试验采用Chelex 100从齐兴肉兔和伊拉兔(n=60)血中快速提取基因组DNA,用PCR扩增MC4R、GHR基因部分片段并直接测序.结果发现:两品种兔GHR基因检测出1个SNP位点g.63343609 T>G,为同义突变,该位点仅检测到G等位基因;MC4R基因检测出5个SNP且均为同义突变,各个位点的基因型频率在齐兴肉兔和伊拉兔之间存在不同程度的差异.推测MC4R基因的单核苷酸多态性可能与兔的生长速度有关联.