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帕金森病患者免疫球蛋白、Th9亚群水平变化及其与IGF-1、S-100B蛋白的相关性
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作者 曹利红 张哲 傅天 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1248-1252,共5页
目的:研究帕金森病(PD)患者免疫球蛋白(IgG、IgA和IgM)、辅助性T细胞亚群Th9水平变化及其与胰岛素生长因子-1(IGF-1)、S-100B蛋白的相关性。方法:选取2020年12月至2022年12月期间在河北省中医院确诊的108例PD患者,将其作为研究组,并根... 目的:研究帕金森病(PD)患者免疫球蛋白(IgG、IgA和IgM)、辅助性T细胞亚群Th9水平变化及其与胰岛素生长因子-1(IGF-1)、S-100B蛋白的相关性。方法:选取2020年12月至2022年12月期间在河北省中医院确诊的108例PD患者,将其作为研究组,并根据患者病变程度分为轻度组(35例)、中度组(44例)和重度组(29例);另选108例健康成人作为对照组。对比研究组和对照组免疫球蛋白和Th9亚群水平,以及轻度组、中度组及重度组免疫球蛋白、Th9亚群、IGF-1和S-100B蛋白水平,采用Pearson相关性分析免疫球蛋白、Th9亚群和IGF-1、S-100B蛋白的相关性。采用Spearman相关性分析PD患者疾病程度和所有差异指标间的相关性。结果:研究组IgM水平较对照组低,且重度组低于中度组,中度组低于轻度组(P<0.05);研究组IgG、IgA、IL-9和Th9亚群水平较对照组高,且重度组高于中度组,中度组高于轻度组(P<0.05)。重度组IGF-1水平低于中度组,中度组低于轻度组;重度组S-100B蛋白水平高于中度组,中度组高于轻度组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,PD患者IgM水平与IGF-1水平呈正相关,与S-100B蛋白水平呈负相关;IgG、IgA、IL-9和Th9亚群水平均与IGF-1水平呈负相关,与S-100B蛋白水平呈正相关(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,PD患者疾病程度与IgM、IGF-1水平呈负相关,与S-100B蛋白、IgG、IgA、IL-9和Th9亚群水平呈正相关(P<0.05)。结论:PD患者IgM水平降低,IgG、IgA、Th9亚群水平升高,且其水平变化与IGF-1、S-100B明显相关,可以用于评估病情的严重程度。 展开更多
关键词 帕金森病 免疫球蛋白 辅助性T细胞亚群 胰岛素生长因子-1 S-100B蛋白
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血清S-100B蛋白、可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1、胶质纤维酸性蛋白检测在新生儿缺血缺氧性脑病病情严重程度中的诊断价值
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作者 耿淑霞 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第1期118-121,共4页
目的:探讨血清S-100B蛋白、可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(sLOX-1)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)与新生儿缺血缺氧性脑病(HIE)病情严重程度的关系。方法:选择80例HIE患儿作为观察组,另选择90例健康新生儿作为对照组,收集所有患儿一... 目的:探讨血清S-100B蛋白、可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(sLOX-1)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)与新生儿缺血缺氧性脑病(HIE)病情严重程度的关系。方法:选择80例HIE患儿作为观察组,另选择90例健康新生儿作为对照组,收集所有患儿一般资料,并检测两组患儿血清S-100B蛋白、sLOX-1、GFAP水平,分析HIE患儿血清S-100B蛋白、sLOX-1、GFAP与病情严重程度的相关性及预后不良的影响因素。结果:对照组血清S-100B蛋白、sLOX-1、GFAP水平低于观察组(均P<0.05)。重度组血清S-100B蛋白、sLOX-1、GFAP水平高于中度组、轻度组和对照组(均P<0.05)。Pearson相关分析显示,疾病严重程度与HIE患儿血清S-100B蛋白、sLOX-1、GFAP水平呈正相关(均P<0.001)。随访预后良好患儿59例,预后不良21例,经多因素Logistic回归分析显示,产程异常、病情重度、S-100B蛋白、sLOX-1、GFAP为影响HIE患儿预后的危险因素(均P<0.05)。结论:HIE患儿病情严重程度和预后与血清S-100B蛋白、sLOX-1、GFAP水平有关,监测其水平变化有利于临床早期完善干预方案改善预后。 展开更多
关键词 S-100B蛋白 可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1 胶质纤维酸性蛋白 新生儿缺血缺氧性脑病 相关性 预后
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miR-361-3p通过靶向S100A6抑制甲状腺癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的机制
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作者 姜岩松 赵志国 +2 位作者 张冰心 杨强 白吉明 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期940-944,共5页
目的探讨miR-361-3p通过靶向S100A6抑制甲状腺癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的机制。方法运用逆转录定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测甲状腺癌组织、细胞中miR-361-3p表达水平;脂质体法将miR-con组(转染miRcon)、miR-361-3p组(转染miR... 目的探讨miR-361-3p通过靶向S100A6抑制甲状腺癌细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的机制。方法运用逆转录定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测甲状腺癌组织、细胞中miR-361-3p表达水平;脂质体法将miR-con组(转染miRcon)、miR-361-3p组(转染miR-361-3p)、si-con组(转染si-con)、si-L型氨基酸转运蛋白(S100A6)组(转染si-S100A6)、miR-361-3p+pcDNA组(共转染miR-361-3p和pcDNA)、miR-361-3p+pcDNA-S100A6组(共转染miR-361-3p和pcDNA-S100A6)转染至CAL-62细胞。细胞计数试剂盒(CCK)8、5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EDU)法检测细胞增殖情况;划痕实验、Transwell小室实验检测细胞迁移侵袭能力;Western印迹检测S100A6蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验检测细胞荧光活性。结果与癌旁组织、Nthy-ori 3-1相比,癌组织、癌细胞(TPC-1、SW579、CAL-62)中miR-361-3p表达均显著降低(P<0.05)。过表达miR-361-3p后,细胞增殖显著降低,EDU阳性率显著降低,划痕抑制率显著升高,迁移侵袭能力显著降低(P<0.05)。miR-361-3p显著抑制野生型S100A6细胞的荧光活性,并负向调控S100A6蛋白,二者在癌组织中表达呈显著负相关(r=-0.627,P<0.05)。敲减S100A6具有与过表达miR-361-3p相似的作用,过表达S100A6部分逆转miR-361-3p增殖、迁移侵袭抑制作用。结论miR-361-3p可抑制甲状腺癌细胞的增殖、迁移侵袭,产生这种作用的机制与靶向S100A6有关。 展开更多
关键词 甲状腺癌 miR-361-3p S100A6 增殖 迁移 侵袭
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S100β、IL-6、hs-CRP联合检测明显提高急性创伤性颅脑损伤诊断的灵敏性
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作者 聂晓改 彭传梅 +2 位作者 张云芳 涂坤 王娇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第11期1580-1585,共6页
目的通过联合检测方法,寻找急性创伤性颅脑损伤(TBI)诊断更灵敏的生物标志物,为临床提供确切的诊断、治疗、监测指标。方法收集2022年10月至2023年6月由昆明市延安医院急诊创伤中心收住的急性TBI患者共156例,并纳入正常及骨折对照组,收... 目的通过联合检测方法,寻找急性创伤性颅脑损伤(TBI)诊断更灵敏的生物标志物,为临床提供确切的诊断、治疗、监测指标。方法收集2022年10月至2023年6月由昆明市延安医院急诊创伤中心收住的急性TBI患者共156例,并纳入正常及骨折对照组,收集监测入组患者外周血标本,检测S100β、IL-6并收集患者入院即刻hs-CRP等临床资料,并进行统计学分析。结果急性TBI患者外周血S100β、IL-6、hs-CRP水平明显升高,诊断急性TBI的ROC曲线下面积分布为0.944、0.915、0.897,三个指标联合检测ROC曲线下面积高达0.975。Person相关分析发现三个指标之间呈正相关,尤其S100β和IL-6之间相关系数达0.715。二元logistic回归分析发现,S100β、IL-6、hs-CRP是急性TBI的独立危险因素。结论S100β、IL-6、hs-CRP联合检测可以有效提高急性TBI诊断的灵敏性,S100β与IL-6相互促进可能加重炎症机制导致的继发性颅脑损伤,尽早针对性治疗,可能改善预后。 展开更多
关键词 创伤性颅脑损伤 炎症 S100Β 白细胞介素-6
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手足口病患儿外周血TLR3、s100β蛋白、IL-6的表达水平及其与病情和预后的相关性
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作者 冯晓靖 袁艳 王芳 《海南医学》 CAS 2024年第10期1446-1451,共6页
目的检测手足口病(HFMD)患儿外周血Toll样受体3(TLR3)、中枢神经特异性蛋白100β(S100β)和白细胞介素-6(IL-6)的表达水平,并探讨其与患儿病情和预后的关系。方法选择2019年1月至2023年1月郑州大学附属儿童医院、河南省儿童医院、郑州... 目的检测手足口病(HFMD)患儿外周血Toll样受体3(TLR3)、中枢神经特异性蛋白100β(S100β)和白细胞介素-6(IL-6)的表达水平,并探讨其与患儿病情和预后的关系。方法选择2019年1月至2023年1月郑州大学附属儿童医院、河南省儿童医院、郑州儿童医院收治的142例HFMD患儿作为观察组,依据患儿病情严重程度(轻症组与重症组)、年龄(低龄组与高龄组)和预后(良好组与不良组)进行分组,另选取87例同期健康儿童作为对照组。比较不同病情严重程度患儿与健康儿童的外周血TLR3、s100β、IL-6水平,比较观察组患儿入院不同时间、不同病情严重程度患儿入院不同时间、不同年龄患儿入院不同时间以及不同预后患儿入院不同时间的外周血TLR3、s100β、IL-6水平。结果重症组患儿的外周血TLR3、s100β、IL-6表达水平分别为1.20±0.36、(14.41±3.53)μg/L、(14.98±4.37)U/m,明显高于轻症组的0.84±0.31、(3.12±1.01)μg/L、(10.73±3.05)U/m和对照组的0.68±0.19、(1.31±0.17)μg/L、(8.95±2.36)U/m,轻症患儿的外周血TLR3、s100β、IL-6表达水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组患儿入院1 d的外周血TLR3、s100β、IL-6表达水平明显低于入院5 d、7 d,入院7 d的外周血TLR3、s100β、IL-6表达水平明显低于入院5d时,差异均有统计学意义(P<0.05);重症组患儿入院1d、5d、7d的外周血TLR3、s100β、IL-6表达水平明显高于轻症组,差异均有统计学意义(P<0.05);低龄组患儿入院1 d、5 d、7 d的外周血TLR3、s100β、IL-6表达水平明显高于高龄组,差异均有统计学意义(P<0.05);预后良好组患儿入院1 d、7 d的外周血TLR3表达水平分别为0.97±0.31、1.90±0.55,明显低于预后不良组的1.90±0.18、2.46±0.74,入院1 d、5 d、7 d的外周血s100β、IL-6表达水平分别为(8.17±2.31)μg/L、(32.98±10.08)μg/L、(27.27±7.66)μg/L、(12.65±4.09)U/mL、(17.41±4.06)U/mL、(14.39±4.35)U/mL,明显低于预后不良组的(13.83±1.55)μg/L、(63.53±12.31)μg/L、(49.28±10.15)μg/L、(17.03±3.51)U/mL、(22.27±2.48)U/mL、(20.35±4.58)U/mL,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论HFMD患儿外周血TLR3、s100β、IL-6水平升高,且与病情严重程度、发病年龄以及预后有一定的关联性,临床监测以上指标变化,可提示病情严重程度、预测预后。 展开更多
关键词 手足口病 外周血Toll样受体3 中枢神经特异性蛋白100β 白细胞介素-6 病情 预后 相关性
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调神解郁针法结合康复训练治疗卒中后抑郁的疗效及对S100β、5-HT的影响
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作者 张晓丽 邵运禄 张光彩 《中文科技期刊数据库(引文版)医药卫生》 2024年第1期0061-0064,共4页
探究调神解郁针法结合康复训练治疗脑卒中后抑郁(PSD)的疗效及对S100钙结合蛋白β(S100β)、5-羟色胺(5-HT)的影响。方法 随机将海南省中医院2021年11月-2023年3月接收的PSD患者60例分为两组,各30例。将实施基础治疗的患者纳入对照组,... 探究调神解郁针法结合康复训练治疗脑卒中后抑郁(PSD)的疗效及对S100钙结合蛋白β(S100β)、5-羟色胺(5-HT)的影响。方法 随机将海南省中医院2021年11月-2023年3月接收的PSD患者60例分为两组,各30例。将实施基础治疗的患者纳入对照组,将实施基础治疗+调神解郁针法+康复训练的患者纳入观察组。比较两组治疗效果。结果 治疗4周,观察组总有效率较对照组高(P<0.05)。两组治疗4周汉密尔顿抑郁量表24项(HAMD-24)评分、血清S100β降低,观察组较低,改良Barthel指数(ADL)评分、5-HT升高,观察组较高(P<0.05)。结论 调神解郁针法结合康复训练治疗PSD效果显著,可改善其血清S100β及5-HT水平,减轻其抑郁症状,提高日常生活能力。 展开更多
关键词 卒中后抑郁 调神解郁针法 康复训练 S100钙结合蛋白β 5-羟色胺
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中重度颅脑创伤患者血清STC1 S100B和NETRIN-1的表达及对预后的预测价值
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作者 叶俊伟 施丹娜 《中国实用神经疾病杂志》 2024年第1期31-36,共6页
目的探讨斯钙素抗体-1(STC1)、S100钙结合蛋白B(S100B)、轴突生长诱向因子-1(NETRIN-1)在中重度创伤性颅脑损伤(TBI)术后患者血清中的表达水平及预测预后的价值。方法收集74例TBI患者及40名健康者的血清样本,使用q RT-PCR检测健康者与TB... 目的探讨斯钙素抗体-1(STC1)、S100钙结合蛋白B(S100B)、轴突生长诱向因子-1(NETRIN-1)在中重度创伤性颅脑损伤(TBI)术后患者血清中的表达水平及预测预后的价值。方法收集74例TBI患者及40名健康者的血清样本,使用q RT-PCR检测健康者与TBI患者术前及术后第1天、第3天、第5天、第7天的血清STC1、S100B、NETRIN-1表达水平。收集TBI患者的一般临床资料,使用扩展版格拉斯哥结局量表(EGOS)评估患者预后,根据EGOS评分将患者分为预后良好组(EGOS≥5分,n=40)及预后不良组(EGOS<5分,n=34)。分析TBI患者术后血清STC1、S100B、NETRIN-1表达水平与预后的关系。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析STC1、S100B、NETRIN-1表达水平对患者预后的预测价值,多因素Logistic分析评估引起TBI患者预后不良的因素。结果q RT-PCR分析显示,与健康者相比,TBI患者术前血清STC1、S100B水平升高,NETRIN-1水平降低,术后血清STC1、S100B水平降低,NETRIN-1水平升高(P<0.05)。TBI患者术后第1、3、5、7天血清STC1、S100B水平逐渐降低,NETRIN-1水平逐渐升高,术后第5天最显著(P<0.05)。与术后第5天预后良好组患者相比,预后不良组患者血清STC1、S100B水平显著升高,NETRIN-1水平显著降低(P<0.05)。皮尔逊相关性分析显示术后第5天TBI患者血清STC1、S100B水平与APACHEⅡ评分呈正比,NETRIN-1水平与APACHEⅡ评分呈反比(P<0.05)。ROC曲线分析发现术后第5天血清STC1、S100B、NETRIN-1水平对TBI患者预后具有预测价值,多因素Logistic回归分析显示仅STC1水平与患者预后相关(P<0.05)。结论STC1、S100B、NETRIN-1在TBI患者血清中表达水平异常,对TBI患者预后分析具有较高价值。 展开更多
关键词 颅脑损伤 斯钙素抗体-1 S100钙结合蛋白B 轴突生长诱向因子-1 预后 预测价值
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金银花多酚粗提物调控miR-100-5p参与非小细胞肺癌细胞NCI-H1299侵袭迁移
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作者 申兴勇 白爽 +2 位作者 李新涛 李亚红 王孝彬 《河北医学》 2024年第1期23-28,共6页
目的:探讨金银花多酚粗对非小细胞肺癌NCI-H1299细胞恶性生物学行为的影响及分子机制。方法:将非小细胞肺癌NCI-H1299细胞分为NC组、紫杉醇组、金银花多酚粗提物低、中、高剂量组、miR-100-5p组、miR-NC组、anti-miR-100-5p+高剂量组、a... 目的:探讨金银花多酚粗对非小细胞肺癌NCI-H1299细胞恶性生物学行为的影响及分子机制。方法:将非小细胞肺癌NCI-H1299细胞分为NC组、紫杉醇组、金银花多酚粗提物低、中、高剂量组、miR-100-5p组、miR-NC组、anti-miR-100-5p+高剂量组、anti-miR-NC+高剂量组;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移和侵袭;蛋白质印迹法检测E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin和Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-100-5p表达水平。结果:不同浓度金银花多酚粗提物处理后,NCI-H1299细胞活性降低,细胞迁移和侵袭数量减少,E-Cadherin、miR-100-5p表达水平升高,N-Cadherin、Vimentin表达水平降低(P<0.05)。过表达miR-100-5p后,NCI-H1299细胞活性升高,细胞迁移[(226±20.03)个]和侵袭数量[(171±15.03)个]增加,E-Cadherin表达水平(0.34±0.03)降低,N-Cadherin(0.88±0.08)、Vimentin表达水平(0.95±0.09)升高(P<0.05)。下调miR-100-5p可逆转金银花多酚粗提物对NCI-H1299细胞增殖、迁移侵袭及Wnt/β-catenin通路的影响。结论:金银花多酚粗提物可能通过上调miR-100-5p表达,抑制Wnt/β-catenin通路活化,进而抑制非小细胞肺癌NCI-H1299细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 金银花多酚粗提物 非小细胞肺癌 miR-100-5p WNT/Β-CATENIN信号通路 增殖 迁移 侵袭
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胎膜早破宫内感染产妇脐血和羊水中miR-182、TNF-α、S100B预测早产儿脑损伤价值
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作者 黄立新 张淑艳 +4 位作者 孙志敏 陈晓 杨月 沈文娟 李春玲 《中国计划生育学杂志》 2024年第4期943-947,共5页
目的:探究胎膜早破宫内感染产妇脐血和羊水中微小核糖核酸182(miR-182)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及S100钙结合蛋白B(S100B)预测早产儿脑损伤的临床价值。方法:选取2021年6月-2023年6月在本院分娩的104例胎膜早破宫内感染产妇临床资料,... 目的:探究胎膜早破宫内感染产妇脐血和羊水中微小核糖核酸182(miR-182)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及S100钙结合蛋白B(S100B)预测早产儿脑损伤的临床价值。方法:选取2021年6月-2023年6月在本院分娩的104例胎膜早破宫内感染产妇临床资料,分娩的早产儿胎龄均<34周,行头部影像学检查,根据是否发生脑损伤将产妇分为脑损伤组(n=36)与非脑脑损伤组(n=68)。检测并比较两组脐血和羊水中miR-182、TNF-α、S100B蛋白水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线评价胎膜早破宫内感染产妇脐血和羊水miR-182、TNF-α及S100B蛋白对早产儿脑损伤的预测价值。结果:脑损伤组脐血miR-182、TNF-α、S100B蛋白水平均高于非脑损伤组,羊水miR-182、TNF-α均高于非脑损伤组(均P<0.05),羊水中S100B蛋白水平两组无差异(P>0.05)。ROC曲线分析,脐血miR-182、TNF-α、S100B蛋白预测早产儿脑损伤的曲线下面积(AUC)分别为0.816、0.748、0.697,灵敏度分别为72.2%、66.7%、55.6%,特异度分别为83.8%、77.9%、88.2%;羊水miR-182、TNF-α、S100B蛋白预测早产儿脑损伤的AUC分别为0.713、0.689、0.594,灵敏度分别为63.9%、55.6%、30.6%,特异度分别为86.8%、85.3%、86.8%。结论:胎膜早破宫内感染产妇脐血和羊水中miR-182、TNF-α、S100B蛋白预测其早产儿脑损伤均有一定价值。 展开更多
关键词 胎膜早破 宫内感染 脐血 羊水 微小核糖核酸182 肿瘤坏死因子-α S100B蛋白 早产儿脑损伤 预测
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Chelex-100快速提取放线菌DNA作为PCR扩增模板 被引量:102
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作者 周双清 黄小龙 +2 位作者 黄东益 胡新文 陈吉良 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期123-125,共3页
旨在建立有效扩增16S rRNA基因序列的放线菌DNA快速提取的方法。采用Chelex-100法提取放线菌DNA,使用PCR扩增16S rRNA基因序列评价提取核酸的质量。结果显示,Chelex-100法能够在10 min之内从放线菌中快速提取DNA,所提取的DNA可以直接用... 旨在建立有效扩增16S rRNA基因序列的放线菌DNA快速提取的方法。采用Chelex-100法提取放线菌DNA,使用PCR扩增16S rRNA基因序列评价提取核酸的质量。结果显示,Chelex-100法能够在10 min之内从放线菌中快速提取DNA,所提取的DNA可以直接用于PCR扩增反应,PCR扩增产物电泳条带清晰,符合理论预期结果。因此,Chelex-100法提取放线菌DNA可以作为16S rRNA基因序列PCR扩增的模板,该方法具有经济、简便、快速的特点,适合于放线菌菌株大规模地筛选和分类鉴定。 展开更多
关键词 chelex-100 放线菌 DNA提取 PCR 16S RRNA
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改良Chelex-100法和CTAB法用于转基因抗草甘膦大豆检测效果的比较 被引量:12
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作者 王永 兰青阔 +3 位作者 张莉 赵新 朱珠 程奕 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期898-901,共4页
以转基因抗草甘膦大豆为研究材料,分别采用改良Chelex-100法和常规CTAB法提取基因组DNA,以提取DNA的浓度和纯度,同时以PCR扩增大豆的内源基因(lectin)及外源特异性序列(CaMV35S,nos,Cp4-epsps)的效果对两种方法进行比较和评价。结果表明... 以转基因抗草甘膦大豆为研究材料,分别采用改良Chelex-100法和常规CTAB法提取基因组DNA,以提取DNA的浓度和纯度,同时以PCR扩增大豆的内源基因(lectin)及外源特异性序列(CaMV35S,nos,Cp4-epsps)的效果对两种方法进行比较和评价。结果表明:虽然改良Chelex-100法DNA提取纯度不高,但是提取效率与常规CTAB法相当,而且改良Chelex-100法能够快速在1 h之内从大豆中提取DNA,所提取的DNA可以直接用于PCR扩增反应,PCR扩增产物电泳条带清晰。因此,改良Chelex-100法可以替代CTAB法提取DNA用于转基因检测,该方法具有经济、简便、快速的特点。 展开更多
关键词 chelex-100 CTAB法 DNA 转基因检测
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Chelex-100提取生物检材DNA实时PCR定量研究 被引量:16
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作者 杨电 刘超 +4 位作者 李越 陈玲 胡慧英 李红霞 陈向红 《中国法医学杂志》 CSCD 2008年第1期29-31,共3页
目的研究Chelex-100法提取的生物检材DNA用量与复合STR分型成功率的关系。方法113份各种生物检材采用Chelex-100法提取DNA,应用Quantifiler人类DNA定量试剂盒在ABI 7500荧光定量PCR仪上进行实时PCR定量,同时用Identifiler复合扩增系统... 目的研究Chelex-100法提取的生物检材DNA用量与复合STR分型成功率的关系。方法113份各种生物检材采用Chelex-100法提取DNA,应用Quantifiler人类DNA定量试剂盒在ABI 7500荧光定量PCR仪上进行实时PCR定量,同时用Identifiler复合扩增系统在ABI 3100遗传分析仪上对这些DNA样品进行STR分型。结果各种生物检材提取的DNA浓度分别为:37份滤纸、纱布血痕0.042~5.28ng/μl,16份口腔拭子1.15—4.21ng/μl,18份烟头0.016~1.46ng/μl,10份肋软骨0.531—14.40ng/μl,8份肌肉5.75—24.80ng/μl,7份指甲0.788—11.50ng/μl,17份精斑0.79~99.50ng/μl。在建立的8μl扩增体系中,根据上述结果,调整用于复合STR扩增的DNA模板量在0.5—3ng之间,大部分样品可获得完全的STR分型。结论Chelex-100法提取的检材DNA模板用量在0.5—3ng之间可得到有效STR扩增,浓度为0.5ng/μl以上的DNA样品,用小体积模板(1μl)比大体积(3μl)模板扩增效果好。 展开更多
关键词 法医物证学 实时定量PCR chelex-100 DNA定量 复合STR扩增
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Chelex-100快速提取动物源饲料DNA方法的建立 被引量:12
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作者 赵秀玲 闻伟刚 +2 位作者 余旭平 胡群 黄绍棠 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2004年第1期82-85,共4页
为防止疯牛病疫区反刍动物源性饲料传入我国,非常有必要对贸易往来中的肉骨粉品种来源进行鉴定。本文建立了一种利用Chelex-100快速提取动物源性饲料DNA的方法,用于反刍动物源性饲料的PCR扩增分析。结果显示该方法与GuSCN法、SDS法同样... 为防止疯牛病疫区反刍动物源性饲料传入我国,非常有必要对贸易往来中的肉骨粉品种来源进行鉴定。本文建立了一种利用Chelex-100快速提取动物源性饲料DNA的方法,用于反刍动物源性饲料的PCR扩增分析。结果显示该方法与GuSCN法、SDS法同样理想,从而实现了对进境饲料的快速检定的要求。该方法检测灵敏度达到牛成分含量为0.1%的水平,具有简单、快捷、灵敏度高的优点。 展开更多
关键词 chelex-100 动物源饲料 DNA PCR 检测方法 灵敏度 反刍动物肉骨粉
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一种改进的Chelex-100法提取单头螨DNA 被引量:11
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作者 邹志文 张素卿 +3 位作者 辛天蓉 杨小强 杨登录 夏斌 《南昌大学学报(理科版)》 CAS 北大核心 2011年第6期564-567,共4页
提供了一种改进的Chelex-100法从单头螨中提取DNA,通过充分研磨以及反复冻融从单头螨得到的DNA可直接用于PCR。实验结果表明:与酚-氯仿法相比,此方法提取单头螨的DNA效果理想,操作简单,稳定性好;以3种不同类群螨为验证样,表明Chelex-10... 提供了一种改进的Chelex-100法从单头螨中提取DNA,通过充分研磨以及反复冻融从单头螨得到的DNA可直接用于PCR。实验结果表明:与酚-氯仿法相比,此方法提取单头螨的DNA效果理想,操作简单,稳定性好;以3种不同类群螨为验证样,表明Chelex-100法可广泛用于各种螨的单头螨DNA提取;对于70%的酒精和奥氏螨保存液分别保存的个体,以及永久玻片标本,运用此方法均可提取出DNA,其中酒精保存标本提取效果最好;所提取的DNA在-20℃条件下可做长期保存。实验证明,改进的Chelex-100法是一种获取螨类等微小动物基因的较好方法。 展开更多
关键词 chelex-100 单头螨 DNA提取 PCR
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Chelex-100法提取滤纸血痕DNA影响因素的比较 被引量:9
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作者 巴华杰 刘冰泉 +2 位作者 马骏 朱爱华 林子清 《法医学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期347-348,共2页
目的改进滤纸血痕DNA提取方法,建立更简便、廉价,适合当前DNA建库需要的提取方法。方法将752份滤纸血痕分成四组,分别按照四种不同的Chelex-100法进行DNA提取并进行比较研究;63份新鲜血痕分别按照两种方法提取并进行对比研究。结果对于... 目的改进滤纸血痕DNA提取方法,建立更简便、廉价,适合当前DNA建库需要的提取方法。方法将752份滤纸血痕分成四组,分别按照四种不同的Chelex-100法进行DNA提取并进行比较研究;63份新鲜血痕分别按照两种方法提取并进行对比研究。结果对于陈旧滤纸血痕,四种提取方法的检测成功率无显著差异(P>0.05);对于新鲜血痕,两种提取方法的检测成功率有显著差异(P<0.05)。结论对于建库陈旧滤纸血痕样本的DNA提取可采用不加纯水处理,直接加入Chelex-100的方法进行。 展开更多
关键词 滤纸血痕 Chlex-100 DNA提取 比较研究
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Chelex-100快速提取用于转基因检测DNA模板的研究 被引量:11
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作者 王永 张莉 +2 位作者 兰青阔 赵新 程奕 《生物技术通报》 CAS CSCD 2008年第2期143-145,共3页
目的:建立从转基因作物中快速提取DNA的方法。方法:采用Chelex-100法提取抗草甘膦大豆和非转基因大豆、转基因抗虫玉米Bt176和非转基因玉米中的DNA,使用PCR扩增大豆和玉米的内源基因(Lectin,zSSIIb)及外源特异性序列(CaMV35S,Bt176)评... 目的:建立从转基因作物中快速提取DNA的方法。方法:采用Chelex-100法提取抗草甘膦大豆和非转基因大豆、转基因抗虫玉米Bt176和非转基因玉米中的DNA,使用PCR扩增大豆和玉米的内源基因(Lectin,zSSIIb)及外源特异性序列(CaMV35S,Bt176)评价提取核酸的质量。结果:Chelex-100法能够快速在1h之内从大豆和玉米中提取DNA,所提取的DNA可以直接用于PCR扩增反应,PCR扩增产物电泳条带清晰,转基因抗草甘膦大豆样品和转基因抗虫玉米Bt176检测均出现强阳性结果。结论:Chelex-100法提取DNA可以作为转基因检测的模板,该方法具有经济、简便、快速的特点,适合于转基因检测工作。 展开更多
关键词 chelex-100 DNA提取PCR CnMV35S Bt176
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改良Chelex-100法快速提取转基因农产品DNA 被引量:6
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作者 蔡翠霞 肖维威 +4 位作者 康文杰 周琳华 吴永彬 郑远金 马文丽 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期210-214,共5页
旨在建立一种从转基因农产品中快速提取DNA的方法。分别采用改良Chelex-100法和常规CTAB法提取转基因大豆GTS40-3-2基因组DNA,测其浓度和纯度,PCR扩增其内源基因(Lectin)、启动子(CaMV35S)和品系特异性序列,对两种方法进行比较和评价,... 旨在建立一种从转基因农产品中快速提取DNA的方法。分别采用改良Chelex-100法和常规CTAB法提取转基因大豆GTS40-3-2基因组DNA,测其浓度和纯度,PCR扩增其内源基因(Lectin)、启动子(CaMV35S)和品系特异性序列,对两种方法进行比较和评价,并研究两种方法提取的DNA在-20℃下保存一个月内的检测效果,以及改良Chelex-100法在玉米、小麦和水稻等其他转基因农产品的应用效果。结果表明,改良Chelex-100法能够快速在1.5 h之内从样品中提取DNA,所提取的DNA直接用于PCR扩增反应,产物电泳条带清晰明亮。两种方法提取的DNA在-20℃下保存一个月内的检测效果未见明显差别。该方法在玉米、小麦和水稻等转基因农产品的应用效果稳定。因此,改良Chelex-100法提取的DNA可以作为PCR扩增模板用于转基因农产品检测。该方法具有经济、简便、快速、安全的特点,适合转基因农产品大规模筛选和鉴别。 展开更多
关键词 chelex-100 CTAB法 DNA提取 PCR
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PCR-RFLP中Chelex-100制备DNA模板的方法建立及其条件优化 被引量:8
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作者 欧阳刚 胡文娟 +4 位作者 姚品芳 王红 陈思礼 王朝元 李劲 《中南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2009年第1期38-41,共4页
目的:建立一种快速、可靠、经济的DNA纯化技术用于分子流行病学调查及群体遗传学的研究.方法:根据MMP3基因外显子2中rs679620的SNP区域(-Lys45Glu-)设计引物,采用Chelex-100法从微量全血中提取人基因组DNA,利用PCR-RFLP对其进行检测,观... 目的:建立一种快速、可靠、经济的DNA纯化技术用于分子流行病学调查及群体遗传学的研究.方法:根据MMP3基因外显子2中rs679620的SNP区域(-Lys45Glu-)设计引物,采用Chelex-100法从微量全血中提取人基因组DNA,利用PCR-RFLP对其进行检测,观察基因分型结果.结果表明:取10μL全血,加入200μL 5%Chelex-100溶液,56℃水浴保温30 min后,100℃水浴8 min,离心取上清为最佳用于PCR的DNA模板提取条件.经PCR扩增及酶切验证,其DNA条带特异、清晰,适用于基因分型.结论:提取人基因组DNA的Chelex-100法所需血样微量、操作简单、快速、可靠、经济,特别适合于大量样本的DNA提取,可用于人群分子流行病学调查及群体遗传学的研究. 展开更多
关键词 chelex-100 基因组DNA提取 基因分型
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Chelex-100法从颊粘膜拭子提取DNA进行基因型分析的研究 被引量:4
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作者 张源明 钟良军 +2 位作者 陈晓涛 南晓红 朱子彤 《新疆医科大学学报》 CAS 2003年第5期430-431,共2页
目的 :探讨采用Chelex 10 0法从颊粘膜拭子提取DNA这一方法的有效性和可靠性。 方法 :用棉签刮取 130例个体口腔颊粘膜脱落细胞 ,采用Chelex 10 0法从颊粘膜拭子中提取DNA ,采用SSP PCR及PCR PFLP法对其进行检测 ,观察结果的有效性和可... 目的 :探讨采用Chelex 10 0法从颊粘膜拭子提取DNA这一方法的有效性和可靠性。 方法 :用棉签刮取 130例个体口腔颊粘膜脱落细胞 ,采用Chelex 10 0法从颊粘膜拭子中提取DNA ,采用SSP PCR及PCR PFLP法对其进行检测 ,观察结果的有效性和可靠性。 结果 :所有样本中都获得成功。电泳结果显示 ,PCR扩增及酶切的靶带清晰 ,无非特异性杂带 ,扩增结果重复性好。 结论 :采用Chelex 10 0法从颊粘膜拭子提取DNA ,方法稳定可靠 ,可以用于基因型检测。 展开更多
关键词 chelex-100 颊粘膜拭子 DNA 基因型 质量控制
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饱和苯酚-氯仿抽提法与Chelex-100树脂法提取DNA在研究犬STR基因座多态性中的应用比较 被引量:4
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作者 王海生 张文平 +5 位作者 王祥 李孟华 康远方 刘榜 李奎 陈家琳 《湖北农业科学》 北大核心 2002年第6期107-110,共4页
在研究犬STR基因座多态性中,比较使用了饱和苯酚-氯仿抽提法和Chelex-100树脂法,两种方法提取的DNA在扩增后的检测结果均能准确地反映实验结果。尽管从平均峰面积和平均峰高值等指标上,利用Chelex-100树脂法提取的DNA质量和扩增后的检... 在研究犬STR基因座多态性中,比较使用了饱和苯酚-氯仿抽提法和Chelex-100树脂法,两种方法提取的DNA在扩增后的检测结果均能准确地反映实验结果。尽管从平均峰面积和平均峰高值等指标上,利用Chelex-100树脂法提取的DNA质量和扩增后的检测效果较饱和苯酚-氯仿抽提法差,但Chelex-100树脂提取法更为简单快捷,适合在建立警犬STR基因座等位基因数据库中和犬亲缘关系鉴定中广泛使用。 展开更多
关键词 饱和苯酚-氯仿抽提法 chelex-100树脂法 提取 DNA STR基因座多态性 应用 比较
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