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用Chelex100法及有机溶剂提取法联合提取DNA扩增STR基因座的比较研究 被引量:17
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作者 刘开会 李兆隆 常彩琴 《中国法医学杂志》 CSCD 2001年第2期84-86,共3页
为了比较不同方法提取DNA扩增STR基因座的成功率 ,本文用Chelex10 0法及Chelex10 0法联合有机溶剂提取法分别提取性犯罪案件 6份血斑及 6份混合斑中精子DNA ,并用PE公司ProfilerPlus系统复合扩增 ,ABI 310型基因分型仪检测。结果表明 ,... 为了比较不同方法提取DNA扩增STR基因座的成功率 ,本文用Chelex10 0法及Chelex10 0法联合有机溶剂提取法分别提取性犯罪案件 6份血斑及 6份混合斑中精子DNA ,并用PE公司ProfilerPlus系统复合扩增 ,ABI 310型基因分型仪检测。结果表明 ,常规采用Chelex10 0法提取血斑及精斑等生物检材DNA作STR基因座检验失败或所检测的位点较少时 ,应对Chelex10 0法提取的DNA上清液再用有机溶剂提取法提取 ,可极大提高DNA检验成功率。采用本文建立的Chelex10 0法联合有机溶剂提取法 ,提高了PCR扩增阳性率 ,对实际检案很有帮助 ;在PCR扩增前应常规进行DNA定量检验 ,否则对于重要检材应进行梯度扩增。 展开更多
关键词 DNA提取 chelex100 有机法 PCR STR 犯罪案件物证检验
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Chelex100法和有机法联合应用检验微量精斑DNA 被引量:7
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作者 裴黎 叶健 +2 位作者 郭燕霞 刘承昌 刘慧群 《法医学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期118-118,共1页
某日一女学生(16岁)在放学回家途中被犯罪分子强奸.现场提取卫生纸1份,在其边缘部位留有少许擦拭状斑迹,据受害人回忆,这是案发时犯罪分子曾用过并弃下的.
关键词 chelex100 有机法 微量精斑 DNA扩增 法医学鉴定 刑事案件
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Chelex100法从贮存食管拉网脱落细胞涂片中提取DNA并作PCR分析的应用和意义
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作者 赵雍凡 张俭荣 +1 位作者 阎齐 陈国第 《四川医学》 CAS 2005年第1期5-7,共3页
目的 探讨从贮存 2 0年的食管拉网脱落细胞涂片的微量细胞中抽提DNA的方法和可行性 ;比较p5 3基因在正常食管上皮和重度不典型增生上皮中的突变差异。方法 利用螯合型离子交换树脂Chelex10 0作为介质 ,一步法从食管拉网脱落细胞中提... 目的 探讨从贮存 2 0年的食管拉网脱落细胞涂片的微量细胞中抽提DNA的方法和可行性 ;比较p5 3基因在正常食管上皮和重度不典型增生上皮中的突变差异。方法 利用螯合型离子交换树脂Chelex10 0作为介质 ,一步法从食管拉网脱落细胞中提取用作PCR分析的DNA ,共提取食管正常上皮与重度不典型增生上皮细胞涂片各 2 4例 ,采用PCR SSCP分析法进行p5 3基因第 7外显子的突变检测。结果 所有 48例标本中微量细胞的DNA抽提均获成功 ;正常食管组p5 3基因第 7外显子均未发生突变 ,重度不典型增生组 5例发生突变 ,其中 3例在 10年、12年、14年后转变为食管癌。结论 Chelex10 0法简便、高效 ,能从微量细胞中抽提DNA ,使对 2 0年前食管拉网细胞涂片进行分子水平的检测成为可能 ;p5 3基因第 7外显子的突变使食管上皮重度不典型增生细胞具有了癌变趋势。 展开更多
关键词 chelex100 食管重度不典型增生 食管拉网脱落细胞涂片 DNA提取
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联合应用chelex100和磁珠法检测霉变皮上衣微量DNA1例 被引量:4
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作者 董林芳 裴黎 +2 位作者 凃政 彭健雄 冯涛 《刑事技术》 2008年第6期68-69,共2页
关键词 DNA检验 chelex100 磁珠法 微量疑难检材
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快速提取细菌DNA方法的研究 被引量:72
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作者 夏涵 府伟灵 +5 位作者 陈鸣 黄庆 赵猛 赵渝徽 王丰 罗阳 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2005年第5期571-573,共3页
目的:研究快速、有效可以应用于压电基因传感器对病原微生物的快速检测的DNA的提取方法。方法:采用沸水浴法,酚、氯仿法,chelex1 0 0法和试剂盒法提取金黄色葡萄球菌ATCC2 5 92 3、铜绿假单胞菌ATCC 2 785 3和大肠杆菌ATCC 2 5 92 2的DN... 目的:研究快速、有效可以应用于压电基因传感器对病原微生物的快速检测的DNA的提取方法。方法:采用沸水浴法,酚、氯仿法,chelex1 0 0法和试剂盒法提取金黄色葡萄球菌ATCC2 5 92 3、铜绿假单胞菌ATCC 2 785 3和大肠杆菌ATCC 2 5 92 2的DNA对产物进行纯度和产量测定,并对1 6SrDNA区域利用通用引物进行扩增。初步应用自行研制的压电基因传感器检测金黄色葡萄球菌ATCC2 5 92 3的PCR产物。结果:除沸水浴法,其他3种方法均能抽提出3种细菌的DNA与1 0 0法和酚、氯仿法抽提产物的纯度和产量差异无显著性(P >0 .0 5 ) ,但chelex1 0 0法操作更为简单、成本低;试剂盒法抽提出的产物纯度和产量明显高于酚、氯仿法、chelex1 0 0法P <0 . 0 5 ) ,但成本高,操作繁琐。结论:chelex1 0 0法操作简便、省时、成本低,适宜用于压电传感器样本的预处理。 展开更多
关键词 细菌DNA chelex100 快速提取 压电基因传感器 金黄色葡萄球菌 16SrDNA 铜绿假单胞菌 试剂盒法 病原微生物 PCR产物 压电传感器 氯仿法 提取方法 快速检测 大肠杆菌 通用引物 初步应用 水浴法 产量 纯度 抽提 显著性 操作
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咀嚼后的口香糖中DNA的提取方法 被引量:1
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作者 张大安 周毅 +1 位作者 李万水 严红 《刑事技术》 2004年第z1期70-71,共2页
  在案件的现场勘查中,经常可以发现、提取到咀嚼后的口香糖[1].例如盗窃案件中,犯罪分子常常利用口香糖开锁,故在锁眼及地面上均可留有咀嚼后的口香糖.这类检材的DNA提取一般采用酚氯仿(有机)抽提或Chelex100加纯化的方法[2-3].……
关键词 口香糖 DNA STR chelex100
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以Chelex 100为介质检测儿童恶性淋巴系统肿瘤IgH和TCR基因重排
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作者 步嵘 王耀平 林梓 《数理医药学杂志》 1998年第4期311-312,共2页
应用PCR技术检测50例儿童恶性淋巴系统肿瘤IgH和TCR基因重排,了解儿童患者重排特点,以便选择恰当的组合用于MRD检测。
关键词 chelex100肿瘤 淋巴系统 基因重排 PCR
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一种改良的人DNA微量快速检验技术 被引量:2
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作者 孙海汐 蔡金挺 +1 位作者 朱琳楠 孙成新 《中国实验诊断学》 2007年第6期788-790,共3页
目的探索一种以口腔粘膜脱落细胞为材料的安全、高效、低成本、敏感性高的人DNA微量快速检测方法。方法采用从漱口液或棉签擦拭口腔粘膜获取脱落细胞,应用混合树脂(Chelex100)煮沸沉淀法提取DNA;用PCR分别对线粒体特异性DNA片断和基因... 目的探索一种以口腔粘膜脱落细胞为材料的安全、高效、低成本、敏感性高的人DNA微量快速检测方法。方法采用从漱口液或棉签擦拭口腔粘膜获取脱落细胞,应用混合树脂(Chelex100)煮沸沉淀法提取DNA;用PCR分别对线粒体特异性DNA片断和基因组中的特定基因进行扩增检测。结果通过对线粒体DNA中440 bp的非编码片段和染色体基因组中220 bp的乙醛脱氢酶DNA片段进行扩增,结果显示,从漱口液脱落细胞提取的DNA中可以稳定地扩增出上述两种DNA片断。结论建立了一种改良的人口腔粘膜脱落细胞DNA微量快速检验技术。该法取样方便,DNA样品获取量较大,一次取样可同时进行多项线粒体和基因组标志DNA片段的快速PCR检测。 展开更多
关键词 DNA 漱口液 chelex100树脂 聚合酶链式反应 快速检验
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齐兴肉兔和伊拉兔MC4R、GHR基因SNP的检测
9
作者 刘兰 俞成浩 +5 位作者 邝良德 黄林 金素钰 杜倩男 周凡莉 郑玉才 《西南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2019年第6期587-591,共5页
为了探索兔黑素皮质素受体-4(MC4R)、生长激素受体(GHR)基因的部分单核苷酸多态性(SNP)及其与不同兔品种生长速度之间的关联,试验采用Chelex 100从齐兴肉兔和伊拉兔(n=60)血中快速提取基因组DNA,用PCR扩增MC4R、GHR基因部分片段并直接测... 为了探索兔黑素皮质素受体-4(MC4R)、生长激素受体(GHR)基因的部分单核苷酸多态性(SNP)及其与不同兔品种生长速度之间的关联,试验采用Chelex 100从齐兴肉兔和伊拉兔(n=60)血中快速提取基因组DNA,用PCR扩增MC4R、GHR基因部分片段并直接测序.结果发现:两品种兔GHR基因检测出1个SNP位点g.63343609 T>G,为同义突变,该位点仅检测到G等位基因;MC4R基因检测出5个SNP且均为同义突变,各个位点的基因型频率在齐兴肉兔和伊拉兔之间存在不同程度的差异.推测MC4R基因的单核苷酸多态性可能与兔的生长速度有关联. 展开更多
关键词 齐兴肉兔 伊拉兔 MC4R GHR chelex100树脂 单核苷酸多态性
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Chelex 100树脂固相萃取-电感耦合等离子体原子发射光谱法测定高氯高盐废水中6种重金属元素 被引量:6
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作者 程龙军 彭娟 +3 位作者 吉飞 郑晓凤 马千里 温炎燊 《理化检验(化学分册)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期252-257,共6页
用Chelex 100树脂固相萃取法分离高氯高盐废水中的铜、铅、锌、镍、镉和锰等6种目标元素,用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)优化固相萃取条件,用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)测定目标元素的含量。高氯高盐废水样品经硝酸消... 用Chelex 100树脂固相萃取法分离高氯高盐废水中的铜、铅、锌、镍、镉和锰等6种目标元素,用电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)优化固相萃取条件,用电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-AES)测定目标元素的含量。高氯高盐废水样品经硝酸消解后,用乙酸盐缓冲溶液(pH 6.5)定容。预先填充好Chelex树脂的固相萃取小柱,用0.5 mol·L^(-1)乙酸铵溶液活化,以1 mL·min^(-1)速率加入样品溶液10 mL后,用0.5 mol·L^(-1)乙酸铵溶液和水淋洗柱子,用5%(体积分数)硝酸溶液以1 mL·min^(-1)速率洗脱柱子,收集10 mL洗脱液,在检测波长214.439,257.610,231.604,206.200,327.395,220.353 nm处测定其中镉、锰、镍、锌、铜、铅含量。结果显示:目标元素标准曲线的线性范围为0.1~10.0 mg·L^(-1),检出限(3s)为4.0×10^(-4)~3.0×10^(-2)mg·L^(-1)。对含氯化钠废水、含氯化铵废水、含氯化钠和氯化铵的废水进行加标回收试验,目标元素的检出量在1.600 mg·L^(-1)以下,回收率为92.2%~102%,测定值的相对标准偏差(n=9)为0.50%~3.5%。 展开更多
关键词 Chelex 100树脂固相萃取 电感耦合等离子体原子发射光谱法 高氯高盐废水
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A Simple,Efficient and Rapid Method for Good Quality DNA Extraction from Rice Grains 被引量:2
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作者 Abu Ashfaqur SAJIB Mohammad Ashraful Islam BHUIYA Roksana HUQUE 《Rice science》 SCIE CSCD 2017年第2期119-122,共4页
An efficient and good DNA extraction protocol should be simple, affordable and yield enough DNA with high quality. Rice(Oryza sativa L.) DNA extraction methods often use seedlings or leaves rather than the grains and ... An efficient and good DNA extraction protocol should be simple, affordable and yield enough DNA with high quality. Rice(Oryza sativa L.) DNA extraction methods often use seedlings or leaves rather than the grains and tend to be time-consuming, involve multiple steps, and use hazardous chemicals and expensive enzymes. Rice grains offer several benefits over seedlings and leaves as a source of DNA for genetic analysis. However, these benefits are underutilized because the bulk of a rice grain is made up of starch. It is particularly important, but difficult to get rid of the starch while extracting DNA from rice grains. This co-precipitated polysaccharide is a known inhibitor of DNA polymerase activity in polymerase chain reaction(PCR). We describe here a very simple and highly affordable Chelex~?-100 based DNA extraction method from rice grains. It does not require any hazardous chemicals or enzymes. This method reproducibly extracts DNA with good purity indices(A_(260)/A_(230) and A_(260)/A_(280) values), but requires only a few steps. 展开更多
关键词 DNA extraction RICE GRAIN Chelex■-100
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以Chelex 100为介质抽提DNA 被引量:8
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作者 步嵘 王耀平 叶元康 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期379-380,共2页
关键词 chelex100 介质 DNA 血红蛋白
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生物检材DNA碱性裂解提取法的优化与改良 被引量:6
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作者 李爱强 赵兴春 +4 位作者 张艳霞 赵丽 王华 王项华 宋金平 《中国法医学杂志》 CSCD 北大核心 2011年第4期301-304,共4页
目的通过对DNA碱性裂解提取法进行优化和改进,建立一种操作更简便、检验快速、结果更可靠的生物检材DNA提取方法。方法以抗凝血作为检验样本,通过改变提取试剂的浓度、pH值、保存时间及孵化样本的温度、时间等条件,观测对检验结果峰值... 目的通过对DNA碱性裂解提取法进行优化和改进,建立一种操作更简便、检验快速、结果更可靠的生物检材DNA提取方法。方法以抗凝血作为检验样本,通过改变提取试剂的浓度、pH值、保存时间及孵化样本的温度、时间等条件,观测对检验结果峰值的影响,以确定提取试剂最佳条件,DNA提取物最佳保存条件。通过用改良后的碱性裂解法及Chelex100法同时提取不同量的抗凝血样本、各类法医生物检材,用不同厂家的DNA试剂盒扩增,对碱性裂解法的灵敏度、适应性和适用性进行评估。结果改良后的碱性裂解法只需将生物检材用NaOH(0.25mol/L)99℃孵化8min,振荡后加入TrisHCl(0.05mol/L,pH=6.5)中和液,离心后直接扩增检测。DNA提取物于-20℃冰箱可长期保存。对于毛发及精斑类检材优于Chelex100法。DNA提取物适用于现有各种DNA试剂盒扩增检测,其灵敏度与Chelex100法相似。结论改良后的碱性裂解法,操作简便、检验快速、结果可靠,可适合于法庭科学的检案与建库。 展开更多
关键词 法医物证学 碱性裂解法 DNA提取 chelex100
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微量体表脱落上皮细胞的DNA检验 被引量:2
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作者 张幼芳 李佑英 《法律与医学杂志》 2003年第2期110-112,共3页
目的 建立微量体表脱落上皮细胞的DNA检验方法。 方法 采用Chelex -10 0法提取DNA ,以Microcon -10 0纯化柱纯化浓缩DNA ,用ProfilerPlus试剂盒PCR扩增后用 3 10基因分析仪检测。 结果  10种常见粘附有体表脱落上皮细胞的样本 10 0... 目的 建立微量体表脱落上皮细胞的DNA检验方法。 方法 采用Chelex -10 0法提取DNA ,以Microcon -10 0纯化柱纯化浓缩DNA ,用ProfilerPlus试剂盒PCR扩增后用 3 10基因分析仪检测。 结果  10种常见粘附有体表脱落上皮细胞的样本 10 0个 ,其中 7种 70个样本成功检测到 10个STR位点的分型 ,检出率为 10 0 % ,其余 3种样本检出率分别为 5 0 %、2 0 %、10 % ,将该方法应用于 2例实际检案 ,取得满意效果。 结论 所建立方法稳定可靠 ,易于操作 ,适用于多种检材 。 展开更多
关键词 体表脱落上皮细胞 DNA检验 Chelex—100法 ProfilerPlus试剂盒 PCR扩增 310基因分析仪
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