口蹄疫病毒O型全自动磁微粒CLIA抗体定量检测方法的建立

【背景】口蹄疫(foot and mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒引起的一种急性、热性、烈性传染病,疫苗接种是预防临床口蹄疫的有效措施。免疫抗体水平监测则是评估疫苗免疫效果、制定免疫程序的重要依据,是免疫工作和疫情防控必不可少的关键环节,因此建立高效、快速、全自动的抗体检测方法具有重要意义。【目的】基于磁微粒(micromagnetic particles,MPs)化学发光免疫分析技术(CLIA),建立一种新型、全自动、可定量的口蹄疫病毒O型抗体检测方法,为口蹄疫免疫监测和疫情防控提供技术支撑。【方法】使用纳米材料磁微粒为固相载体和分离载体包被捕获抗体,用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)标记检测抗体,经过条件优化建立了一种新型磁微粒CLIA检测方法(magnetic particle chemiluminescence immunoassay,MP-CLIA)。本方法首先加入磁微粒-兔抗偶联物(magnetic particle-polyclonal antibodies,MPs-p Abs)、待测样本、口蹄疫病毒O型抗原,37℃孵育;再加入适量酶标抗体(ALP-p Abs),37℃孵育;最后加入化学发光底物AMPPD,检测相对发光强度(relative light unit,RLU)。研究通过检测标准品拟合标准曲线,并应用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)确定检测方法的判定标准;利用质控样本进行方法学评价,同时检测田间样本,并和液相阻断ELISA(LPB-ELISA)比对,验证临床检测效果。【结果】优化后最佳反应条件为磁微粒浓度0.25 mg·m L^(-1)、口蹄疫病毒O型抗原1﹕1000稀释、酶标抗体1﹕2000稀释、加样量20μL。整个检测过程均在全自动化学发光免疫分析仪中完成,反应时间20 min,在抗体含量0—1280 U(效价0—1﹕2048)范围内标准曲线R2>0.99,可进行定量检测。该方法敏感性为94.66%;特异性为97.10%,检测口蹄疫A型、Asia I型血清型特异性为97.14%,与塞内卡病毒(SVV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、牛流行热病毒(BEFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、羊痘病毒(QRFV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)抗体阳性血清无交叉反应;重复检测变异系数CV值<10%;田间样本检测结果与LPB-ELISA符合率为94.69%,定量结果相关系数R2为0.8473,P<0.0001,相关性显著。【结论】建立的MP-CLIA方法耗时短、操作简便,配套国产全自动化学发光仪,可进行全自动化检测,是一种新型、高效的口蹄疫病毒O型抗体定量检测方法,本方法对应的试剂盒已经完成中试生产和临床检测试验,在全国不同区域试用效果较好,具有较高的临床应用价值。

基于改进遗传算法的CLIA运行调度优化

针对化学发光免疫分析仪的运行调度优化问题,以最小化最长完工时间为优化目标,提出了一种改进的遗传算法。在传统遗传算法的基础上,引进了一种基于工件排列的编码方法;采用轮盘赌选择策略保留了种群多样性;利用POX交叉算子优化了交叉结果;对于解码算法的改进,通过加入自适应模块等待算法,解决了设备运行时出现的工件阻塞问题。结果表明,改进的遗传算法可以更合理安排多种工件的检测顺序,有效提高CLIA的运行效率,缩短检测的总时长,具有自动化程度高的优点。

CLIA与TPPA检测对梅毒诊断的价值

评估化学发光免疫分析法(CLIA)和梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)在梅毒诊断中的效果。方法 选取30例梅毒患者(A组)、30例非梅毒患者(B组)和30名健康体检者(对照组)。所有参与者均接受CLIA和TPPA检测,比较三组的检测结果。结果 A组中,梅毒潜伏期CLIA阳性率为75.0%,TPPA阳性率为100.0%;梅毒Ⅰ期 CLIA阳性率为100.0%,TPPA阳性率为100.0%;梅毒Ⅱ期 CLIA阳性率为100.0%,TPPA阳性率为100.0%。B组中,CLIA阳性率为3.3%,TPPA阳性率为0%;对照组中,CLIA阳性率为0%,TPPA阳性率为0%。A组的CLIA和TPPA阳性率显著高于B组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 CLIA和TPPA均可用于梅毒诊断。对于潜伏期梅毒,CLIA的检出率略低于TPPA;对于Ⅰ期和Ⅱ期梅毒,两者无显著差异。同时,CLIA存在一定的假阳性率。

CLIA、RPR、TPPA检测血清中梅毒螺旋体抗体的价值分析

目的 分析化学发光免疫测定法(CLIA)、快速血清反应素试验(RPR)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)检测血清中梅毒螺旋体抗体的结果。方法 100例疑似梅毒患者血清样本为研究对象,均采用CLIA、RPR、TPPA进行检测,并以重组免疫印迹法(RIBA)检测结果为金标准,分析三种检测方式的检测结果 ,并比较三种检测方式的诊断效能。结果 CLIA检出阳性59例,阴性41例。RPR检出阳性73例,阴性27例。TPPA检出阳性59例,阴性41例。CLIA诊断准确率为69.00%(69/100),敏感度为68.92%(51/74),特异度为69.23%(18/26);RPR诊断准确率为97.00%(97/100),敏感度为97.30%(72/74),特异度为96.15%(25/26);TPPA诊断准确率为77.00%(77/100),敏感度为74.32%(55/74),特异度为84.62%(22/26)。RPR的诊断准确率、敏感度显著高于CLIA、TPPA(P<0.05);RPR的特异度高于CLIA(P<0.05);CLIA与TPPA的诊断准确率、敏感度、特异度差异较小(P>0.05)。结论 RPR在梅毒螺旋体抗体的临床诊断中具有更佳的诊断准确率,可为梅毒患者的治疗提供可靠的诊疗依据。

CLIA法检测性激素六项用于女性生殖内分泌疾病诊断中的临床价值

目的研究化学发光免疫测定(Chemiluminescent Immunoassay,CLIA)法检测性激素六项用于女性生殖内分泌疾病诊断中的临床价值。方法选取2021年2月—2023年2月于连云港市赣榆区妇幼保健院就诊的41例女性生殖内分泌疾病患者为观察组,并选取同时期41例女性健康体检者为对照组。采用CLIA法检测性激素六项,比较两组的性激素水平,并分析观察组在不同月经周期的性激素水平变化情况。结果观察组的卵泡生成素(Follicle Stimulating Hormone,FSH)、促黄体生成素(Luteinizing Hormone,LH)、泌乳素(Prolactin,PRL)、睾酮(Testosterone,T)水平分别为(22.15±3.21)mIU/mL、(47.32±4.36)mIU/mL、(185.36±3.51)ng/mL、(0.79±0.11)ng/mL,高于对照组的(13.50±2.17)mIU/mL、(6.27±1.54)mIU/mL、(13.22±2.62)ng/mL、(0.24±0.04)ng/mL,雌二醇(Estradiol,E2)、孕酮(Progesterone,P)水平分别为(10.43±2.35)pg/mL、(0.05±0.01)ng/mL,低于对照组的(22.22±4.64)pg/mL、(0.33±0.05)ng/mL,差异有统计学意义(t=14.295、56.845、251.651、30.088、14.515、35.161,P均<0.001)。观察组在不同月经周期,其性激素水平呈周期性变化,FSH、LH在卵泡期较低,前者在排卵期略微提高,但差异无统计学意义(P>0.05),而后者则有明显升高趋势,两者在黄体期则明显下降,差异有统计学意义(P均<0.05);PRL、T、P水平呈上升趋势,差异有统计学意义(P均<0.05);E2水平随着卵泡的发育不断升高,黄体期迅速降低,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论CLIA法检测性激素六项用于女性生殖内分泌疾病诊断具有明显作用,可为临床治疗提供一定的指导作用。

甲状腺肿瘤免疫检测中应用CLIA测定法的价值分析

目的 探究化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA)测定法在甲状腺肿瘤免疫检测中应用价值。方法 非随机选取2022年1月—2023年12月淄博市博山区计划生育服务中心区妇幼保健院收治的100例疑似甲状腺肿瘤患者为研究对象,以病理诊断为金标准,分析CLIA测定法的检验效能。结果 100例疑似甲状腺肿瘤患者中,病理组织学检查发现阳性70例,阴性30例。通过受试者工作特征曲线分析及Kappa一致性检验发现,CLIA测定法检出真阳性63例、假阳性2例、真阴性28例、假阴性7例,Kappa值0.795CLIA测定法的曲线下面积为0.917。结论 CLIA测定法检测效能较高,可作为甲状腺肿瘤免疫检测的方式。

Clinical value of chemiluminescence method for detection of antinuclear antibody profiles

BACKGROUND Antinuclear antibodies(ANAs)are crucial in diagnosing autoimmune diseases,mainly systemic lupus erythematosus(SLE).This study aimed to compare the performance of chemiluminescence assay(CLIA)and line immunoassay(LIA)in detecting ANAs in patients with autoimmune diseases,evaluate their diagnostic accuracy for SLE,and develop a novel diagnostic model using CLIA-detected antibodies for SLE.Specimens from patients with autoimmune diseases and physical examination specimens were collected to parallel detect specific antibodies.Individual antibodies'diagnostic performance and a model combining multiple antibodies were assessed.The findings provide valuable insights into improving the diagnosis of SLE through innovative approaches.AIM To compare the performance of CLIA and LIA in detecting ANAs in patients with autoimmune diseases,assess their accuracy for SLE,and develop a novel diagnostic model using CLIA-detected antibodies for SLE.METHODS Specimens have been obtained from 270 patients with clinically diagnosed autoimmune disorders,as well as 130 physical examination specimens.After that,parallel detection of anti-double-stranded DNA(dsDNA)antibody,anti-histone(Histone)antibody,anti-nucleosome(Nuc)antibody,anti-Smith(Sm)antibody,anti-ribosomal P protein(Rib-P)antibody,anti-sicca syndrome A(Ro60)antibody,anti-sicca syndrome A(Ro52)antibody,anti-sicca syndrome(SSB)antibody,anticentromere protein B(Cenp-B)antibody,anti-DNA topoisomerase 1(Scl-70)antibody,anti-histidyl tRNA synthetase(Jo-1)antibody,and anti-mitochondrial M2(AMA-M2)antibody was performed using CLIA and LIA.The detection rates,compliance rates,and diagnostic performance for SLE were compared between the two methodologies,followed by developing a novel diagnostic model for SLE.RESULTS CLIA and LIA exhibited essentially comparable detection rates for anti-dsDNA antibody,anti-Histone antibody,anti-Nuc antibody,anti-Sm antibody,anti-Rib-P antibody,anti-Ro60 antibody,anti-Ro52 antibody,anti-SSB antibody,anti-Cenp-B antibody,anti-DNAScl-70 antibody,anti-Jo-1 antibody and anti-AMA-M2 antibody(P>0.05).The two methods displayed identical results for the detection of anti-dsDNA antibody,anti-Histone antibody,anti-Nuc antibody,anti-Sm antibody,anti-Ro60 antibody,anti-Ro52 antibody,anti-SSB antibody,anti-Cenp-B antibody,anti-Scl-70 antibody,and anti-AMA-M2 antibody(Kappa>0.7,P<0.05),but showed a moderate agreement for the detection of anti-Rib-P antibody and anti-Jo-1 antibody(Kappa=0.671 and 0.665;P<0.05).In addition,the diagnostic performance of these antibodies detected by both methods was similar for SLE.The diagnostic model's area under the curve values,sensitivity,and specificity,including an anti-dsDNA antibody and an anti-Ro60 antibody detected by CLIA,were 0.997,0.962,and 0.978,respectively.These values were higher than the diagnostic performance of individual antibodies.CONCLUSION CLIA and LIA demonstrated excellent overall consistency in detecting ANA profiles.A diagnostic model based on CLIA-detected antibodies can successfully contribute to developing a novel technique for detecting SLE.

CLIA与ELISA用于艾滋病病毒抗体检验中的临床价值

探究在艾滋病病毒(HIV)抗体检验中,应用化学发光免疫法(CLIA)与酶联免疫吸附法(ELISA)的临床价值。方法 本次研究收集了2021年7月至2022年4月期间在本医院接受HIV 检测的1500份血液样本,均采用CLIA与ELISA方法对HIV抗体进行检测。统计CLIA与ELISA检测的阳性率,同时以经HIV确认中心检测确认的阳性样本为标准,统计CLIA与ELISA检测结果与确认结果的符合情况。结果 在1500份样本中,采用CLIA方法检测HIV抗体的阳性率为0.67%,采用ELISA方法检测的阳性率为0.80%,两种方法在检测HIV抗体阳性率方面差异无统计学意义(P > 0.05)。这1500份样本中,共有9个样本被HIV确认中心确认为阳性。CLIA检测的S/CO(sample/cut off)值处于80.00 ~220.00的阳性样本与确认结果的符合率高;CLIA的S/CO值越大,与确认结果的符合率越高。ELISA检测的OD/CO值在9.00 ~ 12.00区间的阳性样本与确认结果的符合率高;ELISA 的OD/CO值越高,与确认结果的符合率越高。结论 在HIV抗体检验中,选择应用CLIA与ELISA检测方法均具有较高的检验符合率,临床中可依据实际情况进行选择。

马赫数10条件下冲压发动机内氢气燃烧特性试验

针对高马赫数超燃冲压发动机面临的高效燃烧组织挑战,本文提出了一种凹腔后缘激波强化的高马赫数超声速燃烧组织技术,并设计了一套燃烧室采用双侧对称布置凹腔结构的三维发动机试验模型。采用OH*基化学发光光谱诊断与壁面测压相结合的试验手段,在自由活塞驱动激波风洞的名义Ma=10流场中,对凹腔上游横向氢气射流的燃烧特性进行了研究,并讨论了模拟流场的重复性,给出了氢气燃烧演化特征、火焰稳定结构及释热特性。不同车次的总压等流场参数表明试验流场具有较高的重复性,可保障氢气燃烧特性的可复现性。通过观察试验过程中OH*基动态发光特征发现,在高焓激波风洞发动机试验中采用燃料提前喷注的方法使发动机流道在空气主流到来之前充盈大量的氢气,进而在主流到达发动机内的瞬间形成所谓“激波管流动-燃烧”效应,使来流空气与氢气接触面发生自点火与剧烈燃烧,产生显著不同于发动机正常工作情况下的点火与燃烧机制,但随着主流趋于平稳,“激波管流动-燃烧”效应消失,在高总温气流的自点火效应与凹腔后缘的X型激波耦合作用下,火焰稳定在凹腔上游近壁面区的氢气射流尾迹区和凹腔后缘附近的全流场中。通过分析壁面压力分布特征发现,凹腔后缘的X型激波实现了燃烧的强化与火焰的稳定,并获得了最显著的释热压升。这些结果表明高马赫数冲压发动机可利用凹腔后缘X型激波强化燃烧和稳定火焰。

HBV、HCV、HIV血筛多中心研究免疫学灰区的核酸检测分析与临床特征研究

目的分析化学发光灰区标本的临床特征及核酸检测对化学发光灰区标本结果判断的指导性意义。方法收集2021年7月—12月全国不同地区的5家综合医院入院患者术前/输血前血源性传播疾病样本检测结果,对化学发光灰区检测结果的标本进行核酸检测结果及临床特征分析。结果5723例样本中总计检出HBV免疫灰区样本28例(占比0.49%),HCV灰区样本20例(占比0.35%)。经核酸检测验证,28例HBV灰区样本中,15例HBV样本核酸检测为阳性(占比53.5%),其HBcAb也均为阳性;13例HBV样本核酸检测为阴性(占比46.5%),其中HBcAb阳性4例。HBV与HCV免疫检测灰区在临床各个科室均有发现,出现HBV灰区样本最多的前三科室为骨科、妇科、泌尿科,灰区样本核酸验证假阳性最多的临床科室为妇科与骨科。HCV灰区样本最多的前三科室为泌尿、肾内、外科,且均为假阳性。HBV灰区样本患者临床诊断结果有35.7%(10/28)为肿瘤类疾病,HCV灰区样本患者临床诊断结果有40%(8/20)为肿瘤类疾病。结论化学发光法容易造成假阳性结果,应注意复检验证,且设置灰区并非必要。灰区样本可见于多个临床科室,具有一定的临床分布特征。核酸检测可以提高检测灵敏度并且更大限度保证结果的准确性,能够验证免疫检测灰区。

化学发光免疫分析法测定患者血浆伏立康唑浓度的验证与评价

目的:验证并评价化学发光免疫分析法(CLIA)用于伏立康唑血药浓度的测定。方法:(1)验证CLIA法,进行检测限、重复性、线性、准确度及精密度5个方面的验证;(2)评价CLIA法,收集2023年1—2月该院进行伏立康唑血药浓度监测的113例患者的血浆样本,分别用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)和CLIA法进行检测,采用配对t检验、组内相关系数(ICC)、Passing-Bablok回归和Bland-Altman分析比较两种方法的相关性及一致性。结果:经验证,CLIA法用于测定伏立康唑血药浓度符合分析技术要求,方法稳定可靠。CLIA法检测的血浆伏立康唑平均浓度为(3.843±2.056)μg/mL,高于UPLC-MS/MS法测得的(3.399±1.959)μg/mL,差异有统计学意义(P<0.01)。两种方法测定结果的ICC为0.932(P<0.001);Passing-Bablok回归方程为Y=0.0834+1.099 X(R=0.956,n=113),方程斜率为1.099(95%CI=1.030~1.161),截距为0.0834(95%CI=-0.062~0.251),两种方法测定值之间存在良好的线性相关关系。Bland-Altman分析显示,两种方法的平均偏差为0.442μg/mL(95%CI=0.331~0.558μg/mL),平均偏差百分比为14.49%(95%CI=11.47%~17.51%),一致性尚可接受。结论:CLIA法稳定可靠、操作简便、检测效率高,更适用于临床样本检测。CLIA法与UPLC-MS/MS法测定的结果相关性良好,一致性尚可,CLIA法可作为UPLC-MS/MS法的潜在替代方法用于临床检测伏立康唑血药浓度。

基于SiO_(2)纳米颗粒的无标记化学发光氯霉素适体传感器

经由食物链长期摄入氯霉素残留物会给人体带来各种危害和疾病。因此,建立快速、准确且高灵敏的食品中氯霉素检测方法具有重要意义。采用溶胶-凝胶法制备了表面氨基化的SiO_(2)纳米颗粒,并用X射线衍射、透射电镜和红外光谱对其进行了表征。然后,利用酰胺键和碱基互补配对作用在SiO_(2)纳米颗粒表面依次组装互补DNA链和氯霉素适配体,成功构建了无标记化学发光氯霉素适配体传感器。该传感器制备简便,其中的氯霉素适配体既可作为生物识别元件,又可与苯甲酰甲醛反应产生化学发光信号,无需标记信号分子。该传感器的氯霉素检出限为3.26×10^(-9) mol·L^(-1),且选择性较好。将该传感器应用于实际样品中进行加标,回收率在94.67%~103.00%之间,表明该适体传感器可用于食品中氯霉素的检测。

高灵敏化学发光法特异性检测人血清促甲状腺激素方法的建立

目的 通过双位点夹心化学发光免疫分析原理,建立一种高灵敏度测定人血清促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone, TSH)的化学发光免疫分析方法。方法 将样本与预包被有抗促甲状腺激素(TSH)抗体的超顺磁珠,以及抗TSH-碱性磷酸结合物添加到反应管中共孵育,待测样本中的TSH通过夹心法与磁珠和抗TSH-碱性磷酸结合物与形成双位点复合物。与磁珠结合的复合物吸附到磁场上,用缓冲液洗去未结合的物质。加入发光底物3-(2-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3-磷氧酰)-苯基-1,2-二氧环乙烷二钠盐[3-(2-spiroadamantane)-4-methoxy-4-(3-phosphoryloxy)-phenyl-1,2-dioxetane, AMPPD],测定相对光子强度(RLU),通过标准曲线计算待测样本中TSH的浓度。结果 本研究建立的TSH检测方法,最低检测限为0.003μIU/mL,批内CV小于1%,总CV小于3%,正确度样本实测值与靶值之间相对偏差均在±12.5%范围内,线性范围为0.005~100μIU/mL且相关系数(r)高于0.9900。开封稳定性试验的相对偏差<10%。结论 该方法检测血清TSH浓度具有灵敏度高、准确性好、线性范围广、稳定性强的优点,各项指标均达到临床检测要求,可以推广使用。

免疫层析技术及化学发光免疫分析在梅毒检测中的应用价值比较

目的探究免疫层析技术及化学发光免疫分析在梅毒检测中的应用价值。方法选取2020年9月至2021年9月南昌市第一医院接收的100例住院及门诊患者作为研究对象,所有患者均采用化学发光免疫分析、免疫层析技术检测血清标本,以梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)检验结果为金标准,比较不同检测方法的阳性检出率、准确度、特异度、灵敏度、阴性预测值与阳性预测值。结果TPPA检测结果检出阳性13例,化学发光免疫分析法检出阳性12例,免疫层析技术检出阳性13例。免疫层析技术检测准确度高于化学发光免疫分析,差异有统计学意义(P<0.05);两种检测方法特异度、灵敏度、阴性预测值、阳性预测值比较差异无统计学意义。两种检测方法阳性检出率结果均显示,年龄<40岁、40~65岁患者阳性检出率低于年龄>65岁患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论免疫层析技术检测梅毒具有更高的检测效能,值得临床推广应用。

基于化学发光酶免疫分析法检测花生过敏原Ara h 2

Ara h 2是花生主要过敏原之一,为开发食物中Ara h 2过敏原成分的快速检测方法,减少因误食导致花生过敏事件的发生,该研究采用鼠源单克隆抗体作为捕获抗体、兔源多克隆抗体作为检测抗体,通过棋盘法优化抗体工作浓度,建立了一种检测花生过敏原Ara h 2的间接双抗夹心化学发光酶免疫分析法,并对该方法的灵敏度、准确度、精密度和特异性进行评价。该方法的检出限为1.085 ng/mL,线性范围为3.12~200 ng/mL,添加回收率为78.30%~94.39%,批内和批间变异系数均小于10%,且特异性良好,与其他常见食物过敏原无交叉反应。该方法与相同抗体所建立的间接双抗夹心酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)方法相比,在灵敏度上表现出一定优势。该研究开发的化学发光酶免疫分析法可对花生食品生产过程中和消费前的Ara h 2过敏原成分检测提供可靠的技术支持。

基于(金刚烷)-1,2-二氧环丁烷结构的化学发光探针检测生物酶的研究进展

目前,在生理条件下基于(金刚烷)-1,2-二氧环丁烷结构的化学发光性能大幅提升,其化学发光方法检测各类小分子和生物大分子获得了广泛关注。利用该结构获得的化学发光探针具有无需外源激发光源、没有生物背景信号干扰、无光损伤、光漂白和高灵敏度等优点。本文综述了近几年来基于(金刚烷)-1,2-二氧环丁烷结构的化学发光检测生物酶的研究进展,并讨论了该化学发光平台在生物检测方面潜在的挑战和前景。

女性雄性激素质谱多指标检测在多囊卵巢综合征诊断中的应用

目的探讨液相色谱串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)法在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者中高雄激素血症(hyperandrogenemia,HA)检出率,探讨不同种类雄激素在PCOS中的诊断价值。方法纳入2023年1月至2023年12月于首都医科大学附属北京妇产医院妇科内分泌门诊就诊合并雄激素过多临床表现的PCOS患者100例为试验组,同期就诊的健康备孕人群100例为对照组。LC-MS/MS法检测总睾酮(total testosterone,TT)、游离睾酮(free testosterone,FT)、生物活性睾酮(bioavailable testosterone,BIO-T)、雄烯二酮(androstenedione,A2)、17羟孕酮、双氢睾酮、脱氢表雄酮、硫酸脱氢表雄酮、性激素结合球蛋白指标,绘制受试者工作特征曲线,计算曲线下面积(area under curve,AUC),评价各雄激素水平对PCOS的诊断效能,化学发光免疫法(chemiluminescence immunoassay,CLIA)和LC-MS/MS 2种方法比较TT检测水平的诊断价值以及对HA的检出率。结果与对照组相比,试验组TT、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、LH/卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)、抗苗勒管激素、空腹胰岛素、稳态模型的胰岛素抵抗指数均明显升高(P<0.05),FT的AUC诊断灵敏度最高为86.4%(P<0.05,95%CI:0.815~0.912),其次为TT的AUC为84.4%(P<0.05,95%CI:0.812~0.909)、BIO-T的AUC为82.2%(P<0.05,95%CI:0.792~0.896)、A2的AUC为84.2%(P<0.05,95%CI:0.790~0.895)。与CILA法相比,利用LC-MS/MS法检测TT诊断PCOS的灵敏度更高(AUC 0.891 vs 0.841),且对于合并雄激素过多临床征象的PCOS患者HA检出率明显高于CLIA法(P<0.05)。结论LC-MS/MS法对多种雄激素指标检测灵敏度高、准确性好,FT对于高雄激素临床表现的PCOS诊断价值最高,且该法可提高PCOS的检出率,实现HA的早期筛查,更适合临床推广应用。

国产全自动化学发光免疫分析仪推广可行性分析及检验科对其发展的建议与期待研究

目的探究国产全自动化学发光免疫分析仪推广的可行性。方法选取2023年7—10月广西中医药大学第一附属医院的40份静脉血标本为研究对象,采用国产迈瑞CL-6000i全自动化学发光免疫分析仪和进口雅培i2000SR全自动化学发光免疫分析仪检测标本中的心肌肌钙蛋白I(Cardiac Troponin I,cTnI),使用变异系数(Coefficient of Variation,CV)计算仪器精密度,根据检测数据计算相关性回归方程。结果cTnI高低两个水平的批内CV分别小于各自的1/4允许总误差(Total Error Allowed,TEa),批间CV也同样分别小于各自的1/3TEa。在cTnI测定的线性范围内,两种检测系统相关性回归分析方程为Y=0.9658X±0.1495,R2为0.983。结论两套检测系统cTnI检测结果具有较好的一致性,国产迈瑞全自动化学发光免疫分析仪检测cTnI能够满足临床需要,适于临床实验室使用。

罗氏cobas e801免疫分析仪检测血清抗缪勒管激素的性能验证

目的:对罗氏cobas e801免疫分析仪检测血清抗缪勒管激素(AMH)进行性能验证,评估其是否能够满足临床需求。方法:参照美国临床和实验室标准协会文件,对罗氏cobas e801免疫分析仪检测血清AMH的精密度、准确度、线性范围、携带污染率进行性能验证。结果:罗氏cobas e801免疫分析仪检测低值、高值AMH的批内精密度变异系数分别为4.8%、3.7%,批间精密度变异系数分别为3.5%、5.1%,符合厂家要求临床应用批内精密度、批间精密度<10%的标准。室间质评5个样品检测结果与靶值进行比对,相对偏倚分别为0.81%、-0.22%、0.85%、-2.73%、1.77%,符合厂家准确性相对偏倚的要求范围±10%。AMH的携带污染率为0.39%,符合厂家≤2.0%的要求。AMH的线性回归方程为Y=0.980 9X+0.658 8,斜率a为0.980 9,R2为0.996,结果符合厂家要求,a值1±0.05,R2值≥0.95。结论:罗氏cobas e801免疫分析仪检测AMH的精密度、准确度、携带污染率、线性范围均通过验证,检测结果准确可靠,可以满足临床的需求。

甲状旁腺激素化学发光免疫分析试剂盒的开发及临床应用

目的用双抗体夹心法建立人血清甲状旁腺激素的化学发光免疫测定方法。方法反应模式为生物素化的甲状旁腺激素抗体和吖啶酯标记的甲状旁腺抗体和样本中的抗原形成“三明治”复合物,通过加入发光底物读取信号值来计算待测物浓度,并且分析解决钩状效应的方法。结果建立了人血清甲状旁腺激素的双抗体夹心化学发光免疫测定方法,所建立的方法具有良好的分析性能和热稳定性。采用四参数方程建立测定甲状旁腺激素的标准曲线。空白限为0.2 pg/mL,批内精密度为4.07%~7.17%,批间精密度为3.30%~8.91%,回收率为91%~109%。加速稳定性试验显示,试剂在37℃表现出良好的稳定性。当甲状旁腺激素浓度为40000 pg/mL时,未观察到钩状效应。用所建立的方法与贝克曼库尔特UniCel DxI 800免疫分析系统同时测试207份血清样本,进行比对分析,线性回归方程为y=0.986x+0.5594,相关系数(r^(2))为0.9739,结果具有很好的一致性。结论本研究的试剂盒检测结果与临床结果符合较好,试剂盒可以应用于临床辅助诊断。