土荆芥精油对5种杀虫剂毒力的影响

【目的】研究土荆芥精油对5种杀虫剂毒力的影响,为合理开发利用杂草资源研发环保农药助剂,进而促进害虫持续控制提供依据。【方法】以小菜蛾幼虫为供试昆虫,采用微量点滴法、浸叶法和夹毒法分别测定不同用量土荆芥精油对5种杀虫剂触杀和胃毒作用的影响。【结果】土荆芥精油对敌百虫、氟虫腈和甲氨基阿维菌素苯甲酸盐的触杀毒力表现出较好的增效作用;10 mg/g土荆芥精油对联苯菊酯增效作用最好,增效比可达9.13,而30 mg/g土荆芥精油对联苯菊酯则表现为拮抗作用;土荆芥精油对灭多威均表现为拮抗作用。夹毒法毒力测定结果表明,土荆芥精油对灭多威、氟虫腈、联苯菊酯的胃毒毒力均表现出较好的增效作用;对甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和敌百虫均表现为拮抗作用。浸叶法毒力测定结果表明,土荆芥精油对氟虫腈、联苯菊酯、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和敌百虫胃毒毒力均表现出很好的增效作用,对灭多威表现出拮抗作用。【结论】土荆芥精油对氟虫腈和联苯菊酯(10 mg/g土荆芥精油)均有良好的增效作用,可显著增加其杀虫毒力,是提高杀虫剂药效的优选助剂。

土荆芥挥发油对蚕豆根尖细胞的化感潜力

化感作用是外来植物成功入侵的机制之一。以蚕豆根尖为材料,采用DNA Ladder分析技术和蚕豆根尖微核技术,分析了入侵植物土荆芥挥发油经土壤载体诱导的细胞凋亡以及对细胞的遗传损伤。结果表明:(1)经挥发油处理24 h和48 h,低剂量(<5μL)挥发油对蚕豆根的生长与根尖细胞有丝分裂具有显著的促进作用,但随着处理剂量增大(>5μL)和处理时间延长,根的生长与细胞有丝分裂过程明显受到抑制。(2)挥发油具有诱导染色体畸变的效应,根尖细胞微核率随处理剂量增加和时间延长而增大,但当挥发油剂量大于15μL,这种诱导效应降低。(3)通过DNA Ladder分析,经挥发油处理后根尖细胞发生了凋亡,其中24 h处理组DNA未发生特异性降解,当剂量大于15μL处理48 h和剂量大于10μL处理72 h后,DNA开始发生特异性降解,形成DNA Ladder,表明随着挥发油剂量增大和作用时间延长,细胞凋亡过程加剧。研究结果表明土荆芥释放的挥发性化感物质能以土壤为载体对根细胞产生影响。

土荆芥化感胁迫对玉米幼根抗氧化酶活性和基因表达的影响

为了探讨土荆芥(Chenopodium ambrosioides L.)化感胁迫诱导氧化损伤的机理,以土荆芥入侵地广泛种植的玉米(Zea mays L.)(雅玉26#)为受试材料,在未施加或施加外源抗氧化剂抗坏血酸(AsA)的条件下,研究了土荆芥挥发油及其两种主要成分对伞花素和α-萜品烯对玉米幼根根长以及抗氧化酶(CAT、SOD和POD)活性的影响,并运用实时荧光定量PCR(RT-q PCR)技术分析了土荆芥化感胁迫下3种抗氧化酶基因相对表达量的变化规律。结果表明:在土荆芥挥发油及其两种主要成分的作用下,玉米幼根根长受到影响,其抗氧化酶活性也受到不同程度的抑制。其中,SOD活性受到的抑制效应最为显著。挥发油的两种主要成分中,α-萜品烯对抗氧化酶活性的影响比对伞花素更为明显;各处理组中,玉米幼根的SOD基因(ZmSOD)和POD基因(ZmPOD)的表达均被下调。在挥发油和对伞花素的作用下,CAT基因(ZmCAT)的表达随着处理剂量增加而显著上调。在α-萜品烯作用下,ZmCAT的表达在高处理剂量时明显被下调。整体来看,抗氧化酶活性与其基因的表达量具有显著的相关性;外源AsA缓解了土荆芥化感胁迫对玉米幼根抗氧化酶活性的抑制效应,这种缓解效应随着抗坏血酸浓度的增加而更加显著。以上结果说明,土荆芥挥发油及其两种主要成分诱导玉米幼根内过量积累活性氧(ROS),下调抗氧化酶基因表达,降低抗氧化酶活性,引起了氧化损伤。比较化感综合效应可知,土荆芥挥发油对玉米幼根抗氧化系统的胁迫效应最为明显(0.413),α-萜品烯次之(0.398),对伞花素最弱(0.325)。

土荆芥挥发油的化学成分及抗菌活性研究

【目的】研究陕西土荆芥挥发油的化学成分及对15个临床消毒常见菌株的抗菌性能,为土荆芥天然消毒杀菌产品的开发利用提供科学依据。【方法】采用水蒸汽蒸馏法提取土荆芥挥发油,GC-MS测定其化学成分,分别用连续2倍梯度液体稀释法、液体转染法测定最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。【结果】从陕西土荆芥挥发油中共检测到16种化学成分,并鉴定出了其中的15种成分,主要化学成分有p-伞花烃(29.95%)、驱蛔素(22.97%)、冰片烯(20.74%)、α-松油烯(17.67%);在临床消毒常见的15种菌种中,土荆芥挥发油除对绿脓假单胞菌CMCC10211株无抑制作用外,对炭疽芽胞杆菌CMCC63001、白假丝酵母菌CMCC850216、乙型溶血性链球菌CMCC32210等其他14株标准菌株均有较好的抑制作用。【结论】陕西土荆芥挥发油的主要化学成分为p-伞花烃、驱蛔素、冰片烯和α-松油烯;土荆芥挥发油具有广谱抗菌作用,对临床消毒常见的致病菌有较强的抑制和灭活作用。

土荆芥挥发油化感作用的初步研究

运用以MS为培养基建立的组织培养法研究了土荆芥挥发油对黄瓜((Cucumis sativusL.)、绿豆(Phaseolus radiatusL.)、油菜(Brassica campestrisL.)、莴苣(Lactuca sativaL.)和小麦(Triticum aestivumL.)等5种受体植物种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明:土荆芥挥发油对5种受体植物的幼苗生长均具有显著的抑制效应(P(0.01),小麦、油菜、莴苣、绿豆、黄瓜的平均苗高分别为对照组的42.45%,50.97%,79.98%,61.30%和37.84%,平均根长为对照组的25.77%,37.73%。74.89%,60.06%和52.40%;除了对黄瓜和绿豆种子萌发影响不显著外,对小麦、油菜、莴苣的种子萌发具有延迟萌发和抑制萌发的效应。小麦、油菜、莴苣的种子平均萌发率仅为对照组的25.97%,25.39%,32.82%,平均萌发速度仅为对照组的34.33%,46.04%,19.63%;5种受体植物中对土荆芥挥发油的化感作用敏感程度依次为小麦、油菜、黄瓜、绿豆、莴苣。

土荆芥挥发性化感物质对蚕豆叶表皮保卫细胞的影响

化感作用是外来植物土荆芥(Chenopodium ambrosioides)成功入侵的机制之一。为了探讨土荆芥挥发油的化感作用机制,该文以蚕豆(Vicia faba)叶的下表皮为材料,将表皮条孵育在分别含土荆芥挥发油、α-萜品烯和对伞花素的MES[2-(N-morpholino)ethanesulfonic acid]缓冲液中,25℃下光照培养30 min,采用吖啶橙/溴乙锭(AO/EB)双荧光染色法和Feulgen染色法,研究土荆芥挥发油、α-萜品烯和对伞花素对保卫细胞活性和细胞核形态的影响。结果表明:在土荆芥挥发油、α-萜品烯和对伞花素的作用下,蚕豆气孔保卫细胞活性降低,细胞核出现固缩、畸形或降解等细胞凋亡特征。随着处理剂量增加,保卫细胞活性显著下降,核异常率显著增加,表明土荆芥挥发油、α-萜品烯和对伞花素均对蚕豆保卫细胞具有细胞毒性,其中,挥发油毒性最大,α-萜品烯的毒性次之,对伞花素的毒性最小;Caspase抑制剂Z-VAD-FMK可缓解挥发油、α-萜品烯和对伞花素对保卫细胞的毒性,提高细胞活性,这种缓解效应随着抑制剂浓度的增加而增大。由此可见,土荆芥挥发油、α-萜品烯和对伞花素诱导蚕豆保卫细胞发生了Caspase依赖性的细胞凋亡。

福建省不同产地及不同生育期土荆芥精油化学成分的比较

采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS),对来源于福建省不同产地(福州新店镇、平潭县城关、连城县城关)以及不同生育期(苗期、生长期、果熟期)土荆芥(Chenopodium ambrosioides L.)地上部分精油的化学成分及其相对含量进行了比较分析。结果表明,福州新店镇、平潭县城关和连城县城关产土荆芥精油的主要化学成分(相对含量0.04%以上)分别有12、11和27种,3个产地的共有成分为11种;福州新店镇产土荆芥精油中相对含量较高的成分有对-聚伞花素(49.60%)、α-松油烯(26.81%)和异驱蛔素(8.16%)等,平潭县城关产精油中相对含量排在前3位的成分也为对-聚伞花素(47.25%)、α-松油烯(27.27%)和异驱蛔素(8.82%),连城县城关产精油中相对含量较高的成分有对-聚伞花素(36.33%)、2,5-二甲基-3-己炔-2,5-二醇(20.03%)、α-松油烯(12.71%)和异驱蛔素(3.07%)等。苗期、生长期和果熟期土荆芥精油的主要成分分别有17、12和12种,3个时期的共有成分为10种;苗期精油中相对含量较高的成分有对-聚伞花素(49.75%)、异驱蛔素(10.77%)、1-(1,3-二甲基-3-环己烯-1-基)乙酮(8.08%)和2,5-二甲基-3-己炔-2,5-二醇(7.79%)等;生长期精油中相对含量较高的成分有对-聚伞花素(49.60%)、α-松油烯(26.81%)和异驱蛔素(8.16%)等;果熟期精油中相对含量较高的成分有对-聚伞花素(43.65%)、α-松油烯(24.09%)和异驱蛔素(19.12%)等。研究结果显示,产地的地理环境和土荆芥的生育期对福建产土荆芥地上部分精油的化学成分及其相对含量均有一定的影响。

入侵杂草土荆芥挥发油抗皮肤真菌活性的初步研究

通过2倍稀释法和熏蒸法检测了入侵杂草土荆芥挥发油对常见3种皮肤真菌羊毛状小孢子菌（Microsporum canis）、絮状表皮癣菌（Epidermophyton floccosum）、红色毛癣菌（Trichophyton rubrum）的抑菌效果。结果表明：土荆芥挥发油对这3种皮肤真菌最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）分别为1~2和4~8 mL.L-1,除了对这3种真菌有直接的抑菌外,土荆芥挥发油还表现出熏蒸的间接抑制作用。为进一步开发利用土荆芥资源提供了科学的依据。

土荆芥中挥发油的气相色谱-质谱分析

目的:用气相色谱-质谱法对土荆芥挥发油进行成分分析。方法:采用水蒸气蒸馏法从土荆芥中提取挥发油,然后经毛细管色谱柱进行分离,用归一化法计算含量。结果:从挥发油中共鉴定出12个化合物,占挥发油总量的96.91%。主要成分:α-松油烯(11.75%)、冰片烯(42.63%)、1-甲基-4-(1-甲基乙基)苯(21.84%)、驱蛔素(18.36%)烯类组分含量较高。结论:本法可靠,可用于测定从土荆芥中提取的挥发油。本实验首次发现福建产土荆芥中有冰片烯,且驱蛔素含量高于其他地产土荆芥.该方法为土荆芥质量评价提供有效手段.

土荆芥精油对菜青虫毒杀、拒食和生长抑制作用的研究

采用室内生物测定方法，研究土荆芥（Chenopodium ambrosioides L．）精油对菜青虫（Pieris rapae L．）的触杀、熏蒸、拒食和生长抑制作用。结果表明，土荆芥精油对菜青虫1～5龄幼虫的触杀毒力大小顺序依次为3龄〉2龄〉1龄〉4龄和5龄，对菜青虫3龄幼虫的熏蒸作用的致死中浓度（LC50）明显高于1龄幼虫，对4龄幼虫明显高于1龄和2龄幼虫，但对1龄和2龄、2龄与3龄、3龄与4龄幼虫的熏蒸效果没有明显差异；对4龄幼虫拒食作用的测定结果表明，菜青虫拒食率随着土荆芥精油浓度升高而升高，处理后48h的拒食中浓度（AFC50）明显高于处理后24h；土荆芥精油对菜青虫4龄幼虫生长发育有明显的抑制作用，蛹重和化蛹率均随着土荆芥精油浓度升高而显著下降，蛹重比率的抑制中浓度（EC50）为200．6466μg·g^-1，化蛹率的EC50为126．4382μg·g^-1。

土荆芥挥发油化感胁迫对土壤胞外酶活性和微生物多样性的影响

入侵植物释放的化感物质可改变土壤理化性状和微生物群落结构,通过与土壤微生物的互作抑制本土植物生长。为了进一步诠释土荆芥化感作用机制,采用温室培养瓶法,探讨了其挥发油对土壤胞外酶活性和微生物多样性的影响。结果表明:土荆芥挥发油不同程度降低了脲酶、酸性磷酸酶、蔗糖酶和硝酸还原酶的活性(P<0.05);较高剂量的挥发油处理组显著促进了过氧化氢酶活性(P<0.05)。处理初期挥发油对土壤胞外酶活性影响较大,但随着处理时间延长,其影响逐渐减弱;处理16 d后,较高剂量(20μL和50μL)的挥发油处理组细菌数量显著高于对照(P<0.05)。挥发油对土壤放线菌数量的影响表现为低剂量促进,高剂量抑制的效应;PCR-DGGE分析表明,随着挥发油处理剂量增加和处理时间延长,土壤中细菌和真菌的Shannonwiener多样性指数和丰富度指数均增大。结论:土荆芥挥发油可改变土壤微生物群落结构和胞外酶活性,增加土壤微生物多样性。

土荆芥挥发油诱导人肝癌SMMC-7721细胞Caspase依赖性凋亡

目的:探讨土荆芥挥发油对人肝癌SMMC-7721细胞和人正常肝LO2细胞的抑制作用及体外抗肿瘤机制。方法:MTT法检测细胞增殖;碘化丙啶(PI)单染流式细胞仪分析细胞周期;显微镜下观察细胞形态变化及凋亡效应;Annexin V-PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:土荆芥挥发油对细胞增殖的抑制作用均呈浓度和时间依赖性(P<0.05),24、48、72 h处理其对SMMC-7721细胞的IC50均小于LO2细胞(P<0.05);土荆芥挥发油阻滞SMMC-7721细胞周期于G0/G1期;形态学观察表明细胞皱缩,粘附性降低;细胞核着橘红色,呈固缩状等晚期凋亡特征;细胞凋亡率呈浓度依赖性升高(P<0.05),加入Caspase抑制剂,土荆芥挥发油100μg/m L组晚期凋亡率显著降低(P<0.01)。结论:土荆芥挥发油能抑制人肝癌SMMC-7721细胞生长,其机制可能与阻滞细胞周期,诱导细胞发生Caspase依赖性凋亡有关。

土荆芥挥发油对豌豆根边缘细胞的诱导和胁迫作用

为探讨化感胁迫对根边缘细胞的诱导效应,实验采用悬空气培养法培养豌豆(Pisum sativum L.)露白种子,在保留根边缘细胞和去除根边缘细胞状态下,选取相对根长、根边缘细胞数量及死亡率、果胶甲基酯酶(PME)等指标研究了豌豆根边缘细胞对不同剂量土荆芥挥发油化感作用的响应。结果表明:1)与对照相比,随着挥发油处理剂量增加,根的伸长被显著抑制(P<0.05)。2)每个处理时间内,随着土荆芥挥发油剂量增加,根边缘细胞数量整体表现出先增加后减少的趋势,在低剂量2μL处理中达极大值。3)土荆芥挥发油诱导豌豆根边缘细胞死亡,随着处理时间的延长和处理剂量的增加,这种毒害效应程度加剧,除去边缘细胞实验组中10μL挥发油处理24 h时,根边缘细胞死亡率达到100%。在较低剂量挥发油作用下,保留根边缘细胞组的根边缘细胞死亡率高于去除根边缘细胞组,而在高剂量挥发油处理情况则相反。4)在同一处理时间,随挥发油剂量增加,各处理组PME活性持续升高,去处边缘细胞组处理24 h后不同剂量处理皆显著高于对照,而根边缘细胞数量总体表现先增加后减少。综合以上结果,保留根边缘细胞的根尖根边缘细胞的数量减少量较少,说明根边缘细胞能缓解土荆芥挥发油的化感胁迫;去除根边缘细胞组的PME活性升高较多,表明土荆芥化感胁迫诱导了根边缘细胞的产生。

土荆芥挥发油化感作用下根边缘细胞对豌豆根尖的保护效应

采用悬空气培养法,通过保留根边缘细胞和去除根边缘细胞2种处理方法,研究了在土荆芥挥发油作用下根边缘细胞对豌豆根尖的保护效应.结果表明,土荆芥挥发油抑制了豌豆幼根的生长,在去除根边缘细胞的情况下这种抑制效应更加明显;与对照相比,根尖丙二醛(MDA)含量和超氧岐化酶(SOD)活性明显增加,过氧化物酶(POD)活性和过氧化氢酶(CAT)活性明显下降.这些结果与挥发油剂量呈正相关.去除根边缘细胞的根尖与保留根边缘细胞的根尖相比,MDA含量较高,SOD活性较低,POD活性和CAT活性下降幅度更大.上述结果说明,根边缘细胞对根尖具有一定的保护效应.

不同产地土荆芥挥发油GC指纹图谱研究

采用水蒸气蒸馏法提取了12个产地土荆芥的挥发油,通过GC法分析其成分。运用中药色谱指纹图谱相似度建立共有模式,以相关度评价图谱的相似性,以共有峰与对照峰的比值对各产地土荆芥药材挥发油进行聚类分析。结果表明:12个产地的土荆芥药材的挥发油气相色谱指纹图谱有17个共有峰,其中气相色谱指纹图谱的相似度在0.85以上的有11个,12个产地的土荆芥药材的挥发油可通过系统聚类归为两类,不同产地土荆芥药材的挥发油相似度较高。该方法简便,所得挥发油中各成分分离度高,建立的指纹图谱重现性好,可作为土荆芥药材挥发油的质量控制方法之一。

土荆芥挥发油及其2个主要成分对玉米种子活力和根毛发育的化感效应初探

采用培养瓶滤纸法研究土荆芥挥发油及其主要成分对伞花素(cymene)和α-萜品烯(α-terpinene)对玉米种子活力和根毛发育的化感效应.数据显示:1)土荆芥挥发油对发芽率和发芽势具有剂量依赖的抑制效应,而对伞花素和α-萜品烯的影响与对照差异不显著(P>0.05).2)挥发油和对伞花素对玉米种子活力有显著抑制(P<0.05),对伞花素的抑制效应为挥发油的17.92%;α-萜品烯对玉米种子活力有显著促进(P<0.05),当对伞花素和α-萜品烯联合作用时,对伞花素削弱了α-萜品烯的促进效应.3)挥发油对玉米根毛发育有明显抑制现象,玉米根毛弯曲缠结,数量减少甚至消失;对伞花素和α-萜品烯对根毛长度有显著促进(P<0.05).结果表明,在土荆芥挥发油对玉米种子萌发和根毛发育的化感胁迫中,对伞花素和α-萜品烯的作用较弱;对伞花素在挥发油抑制种子活力方面具有一定的贡献.

土荆芥精油对小菜蛾幼虫表皮的渗透促进作用

【目的】了解土荆芥精油对杀虫剂的渗透促进作用,明确土荆芥精油对小菜蛾幼虫透皮吸收的效果。【方法】采用扫描电镜观察施用土荆芥精油后小菜蛾表皮超微结构的变化,并利用气质联用仪测定和分析土荆芥精油对杀虫剂透皮吸收量的影响。【结果】与蒸馏水对照和丙酮处理相比,土荆芥精油或氮酮处理后,小菜蛾表皮蜡质层结构出现明显的结构性损伤,刺状突起排列变得较为松散,刺状突起变得平滑,刺状突下部变得褶皱或开裂。随着时间的延续,土荆芥精油对3种杀虫剂的透皮吸收量和渗透率均大幅增加;处理24 h后,土荆芥精油处理的氟虫腈渗透率达99.34%,显著高于氟虫腈单剂(55.12%)。【结论】土荆芥精油与氮酮处理对小菜蛾幼虫表皮的影响相似,土荆芥精油对敌百虫、氟虫腈、毒死蜱都具有很好的渗透促进作用。本研究结果可为利用土荆芥精油促进有机磷、苯基吡唑类和硫代磷酸酯类杀虫剂的透皮作用提供理论依据。

贵州土荆芥挥发油化学成分研究

采用水蒸气蒸馏法提取土荆芥全草挥发性成分 ,用气相色谱 /质谱进行分离测定 ,结合计算机检索技术对分离的化合物进行结构鉴定 ,鉴定出 48个化学成分 ,主要成分为单萜烯类、倍半萜烯类及其含氧衍生物等 ,主要有吉马烯D、β 石竹烯、吉马烯B、β 榄香烯、莪术烯、β 侧柏烯和α 杜松醇。

基于组效关系的土荆芥挥发油熏蒸抑菌活性组分鉴定

通过分析土荆芥Chenopodium ambrosioides L.挥发油对灰葡萄孢Botrytis cinerea Pers.的熏蒸抑制作用与其化学组分之间的组效关系,鉴定挥发油中与抑菌作用显著相关的活性成分。采用气相色谱-质谱联用(gas chromatograph-mass spectrometry,GC-MS)技术分析29个土荆芥挥发油样品的化学组分和相对含量,同时以菌丝生长速率法分别测定各样品对灰葡萄孢的熏蒸抑制效能。在此基础上,我们选取相对含量占总挥发油91.39%~99.50%的13种共有化合物为特征化合物,采用正交最小偏二乘判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)法分析组效关系,同时利用双变量相关分析验证组效分析结果。结果表明,3-甲基-4-异丙基苯酚、麝香草酚、α-萜品烯、p-伞花烃和驱蛔萜等化合物是土荆芥挥发油对灰葡萄孢菌发挥熏蒸抑制作用的主要活性组分。

土荆芥挥发油经挥发途径诱导蚕豆根尖细胞遗传损伤的研究

采用培养皿滤纸法,模拟土荆芥通过挥发途径的化感作用,探讨了土荆芥挥发油对蚕豆根尖细胞的遗传损伤效应。结果表明:1在土荆芥挥发油化感胁迫下,蚕豆幼根长度及根尖细胞有丝分裂指数均显著下降(P<0.05),并在一定范围内与挥发油处理时间和剂量均呈负相关(P<0.05)。2中、后、末期细胞在有丝分裂细胞中的比例增加,而前期细胞比例减少,表明挥发油可延滞细胞分裂过程。3根尖细胞微核率在挥发油剂量为5μl时,与处理时间呈正相关(P<0.05);处理时间为24、48 h,处理剂量小于15μl时,与处理剂量呈正相关(P<0.05)。由此可见,土荆芥可通过挥发途径释放化感物质,诱导周围植物发生细胞损伤和遗传毒害,抑制其幼根生长,从而排挤附近植物,在竞争中取胜。