响应面法优化藜麦麸皮皂苷酸水解工艺

为了提高藜麦麸皮皂苷的抗氧化性,以DPPH·清除率为指标,对其酸水解工艺条件进行了响应面法优化。结果表明:影响藜麦麸皮皂苷酸水解的因素大小顺序为:水解时间>水解温度>盐酸浓度>液液比,优化的最佳工艺条件为:盐酸浓度4.8 mol/L、液液比1∶2(mL/mL)、水解温度80℃、水解时间2.5 h。此工艺条件下,藜麦麸皮皂苷水解产物对DPPH·的清除率为68.84%,较水解前清除率提高了2倍多。酸水解可有效提高藜麦麸皮皂苷清除自由基及抗氧化活性。

响应面法优化藜麦种皮过氧化物酶固定化条件

以从藜麦种皮中提取的过氧化物酶为原材料,利用0.2%聚乙烯醇-3%海藻酸钠(PVA-CA)为载体,Ca Cl2溶液作固定剂,采用包埋法对藜麦种皮过氧化物酶进行固定。在单因素实验的基础上,利用响应面分析法对藜麦种皮过氧化酶固定化的影响因素进行了优化。优化后得到的最佳固定化条件如下:氯化钙浓度为7%,固定化时间为26 min,载体与酶液的比例为1.25∶1(m L/m L),在此条件下实际测得固定化酶的活性为416.5 U。实测值与理论值(417.4U)相差较小,充分验证了所建模型的可靠性。

响应面法优化藜麦麸皮皂苷最佳提取工艺及其α-葡萄糖苷酶抑制活性

采用响应面法优化了藜麦麸皮超声提取皂苷的最佳工艺,并考察了最佳提取工艺条件下提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。同时建立酶反应动力学方程对其抑制动力学进行分析,探讨了藜麦麸皮提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制机制。实验结果表明,藜麦麸皮超声提取皂苷的最佳工艺条件为液料比15 mL/g,75%乙醇超声提取,超声时间1.5 h,超声温度45℃,在此条件下藜麦麸皮皂苷的提取得率为2.370%±0.022%。α-葡萄糖苷酶抑制活性实验表明提取物的抑制作用明显强于阳性药阿卡波糖(P<0.05),其IC_(50)值为0.620±0.057 mg/mL。酶动力学研究表明藜麦麸皮总皂苷提取物是一种可逆的混合性抑制类型。本研究为明确藜麦麸皮提取物的降低餐后血糖作用机理提供了参考,为藜麦麸皮的开发与利用提供了依据。

响应面法优化藜麦糠皂苷的提取及抗氧化活性

采用超声波浸提法提取皂苷,通过单因素试验考察液料比(A)、乙醇体积分数(B)和超声时间(C)对藜麦糠皂苷得率的影响,并采用Box-Behnken中心组合实验及响应曲面分析法优化藜麦糠皂苷的提取;同时采用还原Fe3+能力及清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、羟自由基(·OH)和超氧阴离子(O2-·)能力分析藜麦糠皂苷抗氧化活性。结果表明,最佳提取工艺条件为液料比39∶1(m L/g),乙醇体积分数74%,超声时间33 min。在此条件下,皂苷得率为23.371 mg/g。抗氧化试验结果表明,藜麦糠皂苷有显著的抗氧化活性,且与皂苷的质量浓度呈剂量依赖性。

添加纤维素酶与藜麦麸皮及小麦麸皮对台湾红藜青贮的影响

为研究纤维素酶与藜麦(Chenopodium quinoa Willd.)麸皮及小麦(Triticum aestivum L.)麸皮对台湾红藜(Chenopodium formosanum Koidz.)青贮发酵品质的影响,本试验设对照组(CK)、纤维素酶组(0.5 g·kg^(-1)鲜草,A1)、纤维素酶(0.5 g·kg^(-1)鲜草)+5%藜麦麸皮组(A2)、纤维素酶(0.5 g·kg^(-1)鲜草)+5%小麦麸皮组(A3)等4个处理组合,青贮60 d后分析发酵品质。结果表明:CK组在感官评价上低于试验组;与CK相比,A2,A3组粗蛋白含量、相对饲喂价值、粗饲料分级指数显著提高,中性洗涤纤维显著降低(P<0.05);试验组的pH值均显著低于CK(P<0.05),根据Fleigh评分法,CK,A1组饲料品质为良,A2,A3组为优;通过隶属函数法综合分析,纤维素酶(0.5 g·kg^(-1)鲜草)+5%藜麦麸皮可显著提高台湾红藜青贮饲料的饲用价值,效果最佳,上述结果为藜麦资源的合理利用提供了一定科学依据。

藜麦麸过氧化物酶分离纯化及酶学特性研究

经浸提、硫酸铵分级沉淀和DEAE-SepharoseFastFlow阴离子交换层析,从藜麦麸中纯化得到了电泳纯的过氧化物酶(peroxidase,POD),其纯化倍数、比活力和回收率分别为23.78,22753.09U/mg和19.36%。经SDS-PAGE鉴定,该酶相对分子质量为57.1ku。在催化愈创木酚与过氧化氢的反应中,酶的最适温度为60℃,最适pH值为6.0,在40~60℃及pH值4~8范围内具有较好的稳定性。以H2O2为底物,测得该酶的Km值为5.61mmol/L。尿素、Mg^2+和Fe^3+对酶有激活作用,当其浓度为50mmol/L时,酶活力被分别激活至119%,117%,161%;K^+,Ca^2+对藜麦麸POD无显著影响;甲醇,乙醇,异丙醇,正丁醇,KSCN,SDS,Zn^2+,Cu^2+,Mn^2+对酶有抑制作用,其中,正丁醇和SDS对酶的抑制作用很强,当正丁醇体积分数为20%,SDS浓度为10mmol/L时,酶的活性完全丧失。