三肽囊素对鸡脾脏淋巴细胞增殖转化、IL-2和IL-6分泌及其基因表达的影响

为探讨人工合成的三肽囊素(BS)作为新型免疫增强剂的作用机制,本研究采用MTT比色法、放射免疫测定法(RIA)和相对半定量RTPCR法,分别研究了BS对体外培养的鸡脾脏淋巴细胞的增殖、对白细胞介素2(IL2)和白细胞介素6(IL6)分泌及其mRNA表达水平的影响。试验结果表明,0.5μg/ml、5μg/ml和50μg/mlBS处理36h,均可显著提高ConA诱导的脾脏淋巴细胞的增殖反应性;5μg/mlBS处理能显著促进脾脏淋巴细胞分泌IL6,显著升高IL6mRNA表达水平,但对IL2的分泌及其mRNA表达水平无显著影响。本研究结果进一步提示,BS可能主要通过激活IL6基因的表达和促进脾脏淋巴细胞的增殖反应。

蛹虫草多糖对鸡脾脏淋巴细胞的影响

试验将7种浓度蛹虫草多糖（CMP）单独或与刀豆蛋白A（ConA）、脂多糖（LPS）同时加入鸡脾脏淋巴细胞的培养体系中,培养48 h时用MTT法测定淋巴细胞增殖（A570值）的变化;将5种浓度的CMP 40％乙醇提取物（CMP40）、CMP 50％乙醇提取物（CMP50）分别与ConA加入到鸡脾淋巴细胞的培养体系中,培养24 h后收集细胞培养上清液,测定白细胞介素-2（IL-2）和γ-干扰素（IFN-γ的含量.结果显示,CMP在31.25～2 000 μg/mL时,CMP40＋ConA组的A570值显著高于ConA对照组;CMP在31.25～500μg,/mL时,CMP50＋ConA组A570值显著高于ConA对照组,CMP40＋LPS组、CMP50＋LPS组的A570值显著高于LPS对照组;CMP40在125～1 000μg/mL时、CMP50在500 μg/mL时,各多糖组的A570值显著高于细胞对照组;CMP40和CMP50在250～1 000 μg/mL时,各多糖组的IL-2和IFN-γ浓度显著高于对照组.结果表明,CMP40和CMP50在合适的剂量能单独或协同ConA、LPS刺激鸡的T、B淋巴细胞增殖,促进淋巴细胞分泌IL-2和IFN-γ,从而增强鸡的细胞免疫能力.

硫酸化酵母葡聚糖对鸡淋巴细胞的影响

为研究硫酸化酵母葡聚糖（SCG）对鸡细胞免疫的影响,将7种浓度SCG单独或与Con A、LPS加入到鸡脾脏淋巴细胞的培养体系中,培养48 h时用MTT法测定淋巴细胞增殖的变化;将5种浓度的SCG分别与Con A加入到鸡脾淋巴细胞的培养体系中,培养24 h后收集细胞培养上清液,测定IL-2和IFN-γ的含量。结果显示,SCG浓度在在250-2 000μg/m L时,SCG＋Con A、SCG各剂量组随着多糖浓度的增加其A570值先增加后降低（P〈0.05）;SCG＋LPS各剂量组的A570随着多糖浓度的增加而降低,2 000μg/m L剂量组显著低于其他三组（P〈0.05）;均具有显著的量效关系。SCG浓度在62.25-1 000μg/m L时,多糖组脾脏淋巴细胞体外培养上清液中IL-2与IFN-γ浓度,随着多糖浓度的增加其促进淋巴细胞分泌细胞因子的能力先增加后降低,具有明显量效关系;且均在250μg/m L时效果最好。结果表明,SCG在合适剂量能单独或协同Con A、LPS刺激鸡T、B淋巴细胞增殖,促进淋巴细胞分泌IL-2和IFN-γ,从而增强鸡的细胞免疫。

胸腺素α_1对鸡脾脏淋巴细胞增殖转化及IL-2基因表达与分泌的影响

为进一步阐明胸腺素α1(Tα1)的作用机制,采用MTT比色法、RT-PCR相对半定量法和RIA法研究了不同浓度的Tα1对离体培养的鸡脾脏淋巴细胞增殖转化、IL-2基因表达及其分泌的影响。结果表明,10μg/mL和1μg/mL Tα1处理鸡脾脏淋巴细胞能显著提高由ConA诱导的淋巴细胞增殖转化率(P<0.05),显著提高鸡脾脏淋巴细胞IL-2基因表达水平以及细胞培养上清液中的IL-2含量(P<0.05),且以10μg/mL浓度的效果最佳。0.1μg/mL的Tα1对脾脏淋巴细胞增殖转化和IL-2基因表达与分泌无显著作用(P>0.05)。提示,Tα1对鸡免疫功能的调节同其剂量有关,并可能在基因转录水平上调节IL-2的分泌。

重组鸡白细胞介素-6-2融合蛋白对鸡T淋巴细胞和B淋巴细胞免疫活性的影响

为研究重组鸡白细胞介素-6-2融合蛋白（rChIL-6-Linker-ChIL-2）对鸡体免疫功能的影响,采用MTS法检测重组融合蛋白在28日龄SPF鸡体内接种后不同时间对外周血淋巴细胞（PBLC）中T淋巴细胞和脾B淋巴细胞增殖活性的影响,采用流式细胞术检测它对鸡PBLC中CD3＋CD4＋T淋巴细胞、CD3＋CD8＋T淋巴细胞百分含量及CD4＋/CD8＋比值的影响。结果显示,接种后第7~35天,重组融合蛋白可显著提高鸡体PBLC中T淋巴细胞和脾中B淋巴细胞的增殖活性,两者活性分别高于单一rChIL-2蛋白或单一rChIL-6蛋白对照、低于或接近于rChIL-6蛋白＋rChIL-2蛋白混合物。接种后第7~21天,重组融合蛋白可显著提高CD3＋CD4＋T淋巴细胞百分含量、降低CD3＋CD8＋T淋巴细胞百分含量,显著提高CD4＋/CD8＋比值,其活性显著高于单一rChIL-6蛋白或单一rChIL-2蛋白对照,但与rChIL-6蛋白＋rChIL-2蛋白混合组差异不显著。结果表明,重组融合蛋白在鸡体内可显著促进T、B淋巴细胞增殖,提高CD3＋CD4＋T淋巴细胞百分含量和CD4＋/CD8＋比值,从而增强鸡体的体液免疫和细胞免疫功能;重组融合蛋白在体内发挥了ChIL-6和ChIL-2的协同作用活性。