Friable Callus Induction of Hedera nepalensis var.sinensis

[Objectives]The purpose was to establish an induction system for friable callus of Hedera nepalensis var.sinensis with different parts.[Methods]By screening the most suitable explant and adjusting the hormone ratio of medium,friable calli of H.nepalensis var.sinensis were induced.[Results]The calli could be induced from leaves,petioles and stem segments,but the ideal explant was stem segments,with induction rate reaching 98%.The optimal medium for callus proliferation was MS+0.5 mg/L KT+1.0 mg/L 2,4-D+30.0 g/L sucrose.After 3-4 generations of subculture on MS+0.5 mg/L BA+1.0 mg/L 2,4-D+30.0 g/L sucrose,favorable friable calli of H.nepalensis var.sinensis were obtained.[Conclusions]The friable calli induced in this experiment can lay a foundation for in-vitro regeneration and cellular secondary metabolite production of H.nepalensis var.sinensis.

常春藤挥发油的提取及GC-MS分析

用正交实验法对水蒸气蒸馏提取常春藤挥发油的提取条件进行了研究;结果表明,最佳提取条件为常春藤粉末(20目)加入900 mL的蒸馏水(20℃)浸泡4 h,水蒸气蒸馏7 h。用气相色谱-质谱联用技术测定了最佳提取条件下所得常春藤挥发油的化学成分及其相对质量分数,共分离出30种成分并鉴定出其中21种,主要是萜烯类化合物以及环氧衍生物(33.17%),邻苯二甲酸异丁基酯(18.89%),氧化石竹烯(15.10%),花生酸(13.65%),香紫苏内酯(6.17%),匙叶桉油烯醇(4.77%),葎草烯(2.49%),α-石竹萜烯(1.41%)。

常春油麻藤等3种藤本植物抗旱性生理指标研究

为研究常春油麻藤Mucuna sempervirens的抗旱机制,利用聚乙二醇(PEG 6000)模拟50 g.L-1(轻度干旱胁迫)和200 g.L-1(重度干旱胁迫)2种质量浓度的干旱胁迫环境,分别处理1,3和5 d后,测定常春油麻藤在干旱胁迫下的生理指标,并以中华常春藤Hedera nepalensis var.sinensis和扶芳藤Euonymus fortunei为对比材料,比较分析常春油麻藤的抗旱性。研究表明,随着PEG 6000质量浓度和处理时间的增加,3种藤本的叶片含水量和失水速率均呈下降趋势,而叶片水分饱和亏缺、细胞膜透性和游离脯氨酸指标数均显著上升,超氧化物岐化酶活性变化呈先上升后下降趋势。重度胁迫下,常春油麻藤的游离脯氨酸质量分数显著高于扶芳藤和常春藤,而细胞膜透性却上升幅度不大。3种被测藤本中抗旱性排序为:扶芳藤>常春油麻藤>中华常春藤。常春油麻藤主要通过提高体内渗透调节物质的积累和保护酶活性来抵抗干旱胁迫,保护细胞膜结构,提高抗旱性。

常春油麻藤、中华常春藤和扶芳藤的光合特性比较分析

采用LI-6400光合测定仪对盆栽的常春油麻藤（Mucuna sempervirens）、中华常春藤（Hedera nepalensisvar、sinensi）和扶芳藤（Euonymus fortunei）进行光响应曲线、温度响应曲线和相对湿度响应曲线的测定。对比分析3种藤本植物的光补偿点（LCP）、光饱和点（LSP）、最大净光合速率（Pn）、最大表观量子效率（AQymax）等光合特性指标，并研究分析光强、温度和相对湿度对3种藤本光合特性的影响。结果表明，常春油麻藤对有效光能辐射的利用范围最大，其次是扶芳藤，再次为中华常春藤，3种藤本植物的最适温度均在26～30℃，且对高湿环境条件的适应性均比较强。

有效积温对中华常春藤生长的影响

通过调查中华常春藤的生境和测量茎的生长情况,总结了中华常春藤的种植特点和分枝方式,同时利用SPSS软件的回归分析建立回归模型,并根据建立的模型用Excel软件绘制坐标图。结果表明:中华常春藤主枝生长完毕所需的有效积温为2 718.34℃/d;茎伸长量随有效积温延续的变化呈"S"形曲线,而茎伸长速度变化趋于钟罩型单峰曲线。再利用此结果估算出:在理想的生长条件下采用三角形定植方式定植中华常春藤为宜,并且植株与植株之间的最佳定植密度为510 mm×510 mm。

常春藤的形态组织鉴定

对常青藤Hedera nepalensis var.sinensis药材性材、组织、粉末及紫外最大吸收进行鉴定。常春藤鳞毛、增厚的木栓细胞及淡黄色木栓厚壁碎片、树脂道以及在205±2nm波长处有最大吸收是常春藤鉴定的特征。

开放无糖环境下不同激素对常青藤生根的影响

为探索开放条件下常青藤快繁的最适培养基,以应用于花卉苗木的快繁生产,以常青藤单叶节茎段为外植体,以1/2MS无糖蛭石培养基为基本培养基,研究不同浓度和组合激素对常青藤生根的影响。结果表明：常青藤茎段培养最适宜的激素为NAA0.2mg·L-1,在此浓度下,茎段保留叶的大小在3/4~1叶片,培养时间为15~20d为宜。

有效积温对中华常春藤叶片生长和衰老的影响

通过测定中华常春藤叶片生长期和衰老期的叶长、叶宽、叶面积和有效积温,建立叶片生长和衰老过程的回归方程,并根据方程绘制出对应曲线。经分析发现中华常春藤叶片的叶长优先伸长,并且叶长比叶宽先达到生长最大值,而最大叶长小于最大叶宽;叶片枯萎率随有效积温延续的变化呈"J"形曲线,而叶片衰老速度变化趋于钟罩型单峰曲线。

中华常春藤细菌性叶斑病病原菌的鉴定

2015年春季在昆明市区绿化带种植的中华常春藤上发现一种由细菌侵染而引起的病害,称为中华常春藤细菌性叶斑病。通过发病症状、菌落形态观察、致病性测定、Biolog分析,16S rDNA序列和核糖体DNA内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列分析比较,对昆明地区的常春藤叶斑病病原菌及其系统进化关系进行研究。分离病原菌接种中华常春藤叶片完成科赫法则验证,发病初期在叶片表面形成带有黄色叶晕的不规则褐色斑点,后期叶片边缘形成倒V字型坏死并起皱。将菌株CCT1和CCT6测序结果与现有的黄单胞菌菌株的16S rDNA序列和核糖体DNA的ITS序列构建进化树,结果均显示病原菌与野油菜黄单胞菌的序列相似度最大,属于同一支。研究确定该病原菌为野油菜黄单胞菌(Xanthomonas campestris)。这是中国首次报道由X.campestris引起的中华常春藤叶斑病。

铅胁迫对中华常春藤叶绿素含量及荧光特性的影响

以当年生中华常春藤扦插苗为试验材料,采用不同浓度Pb (CH3COO)2溶液(0, 50μmol/L, 200μmol/L,400μmol/L, 800μmol/L)对其进行胁迫处理,研究其叶绿素荧光特性对重金属Pb2+胁迫响应。结果表明:与对照组相比,随着Pb2+浓度的增加,各处理组叶片荧光参数呈波动性变化,表现出抑制-促进-抑制的趋势。与对照组相比,中华常春藤叶片的最大光化学效率(Fv/Fm)、PSⅡ实际光合效率(YⅡ)在低浓度(50μmol/L)和较低浓度(200μmol/L) Pb2+处理下均显著下降,中等浓度(400μmol/L) Pb2+处理下却显著上升,而高浓度(800μmol/L) Pb2+处理下无显著变化。Pb2+胁迫对中华常春藤叶绿素含量无显著抑制作用,叶绿素a和叶绿素b含量均随Pb2+胁迫浓度的增大呈上升的趋势。本研究结果表明,中华常春藤对重金属铅胁迫具有较强的耐受性。本研究为特殊立地环境下城市绿化植物的选择提供了理论依据,也可为重金属污染下的植物修复技术提供理论参考。

利用SSH文库技术分离鉴定常春藤应答甲醛胁迫相关基因

很多研究结果证实常春藤可以有效吸收气体甲醛,本研究结果表明常春藤叶片也可以有效吸收液体甲醛,甲醛吸收量和时间呈指数函数关系。2、4、6 mmol·L^(-1)液体甲醛处理均在常春藤叶片内诱发氧化胁迫,但2 mmol·L^(-1)液体甲醛胁迫在常春藤叶片内诱发的氧化胁迫水平较低。此外,2 mmol·L^(-1)液体甲醛胁迫还显著提高了常春藤叶片内可溶性糖和可溶性蛋白的含量,说明常春藤对2 mmol·L^(-1)液体甲醛胁迫的抗性较强。通过构建2 mmol·L^(-1)液体甲醛胁迫2~48 h常春藤叶片的正向SSH cDNA文库,分离鉴定常春藤叶片中的甲醛胁迫应答基因并对甲醛胁迫应答基因进行功能聚类,结果说明光合作用和代谢相关基因占的比例最大,表达分析结果证实光合作用和代谢相关基因在2 mmol·L^(-1)液体甲醛胁迫的不同阶段被诱导上调表达,这些基因的上调表达可能和甲醛在常春藤叶片内的代谢脱毒有关。此外,参与植物对多种生物和非生物胁迫应答的14-3-3蛋白基因(14-3-3p)也受2 mmol·L^(-1)液体甲醛胁迫的强烈诱导,该基因的上调表达可能参与甲醛胁迫下常春藤叶片内可溶性蛋白的合成与抗氧化系统活性的调控作用,是常春藤叶片应答甲醛胁迫的重要基因之一。