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Molecular Cloning and Expression Analysis of an Actin Gene from Chinese Licorice(Glycyrrhiza uralensis Fisch) 被引量:1
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作者 WANG Fang DONG Le YUAN Jian-jun 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 2009年第3期357-361,共5页
A PCR-based homologous cloning strategy was used to identify an actin gene from the roots of Chinese licorice(Glycyrrhiza uralensis Fisch). Results of sequence analysis indicate that a 1137 bp cDNA with an open read... A PCR-based homologous cloning strategy was used to identify an actin gene from the roots of Chinese licorice(Glycyrrhiza uralensis Fisch). Results of sequence analysis indicate that a 1137 bp cDNA with an open reading frame encoding 377 amino acids, actin ortholog, GuActin, was successfully cloned and characterized(GenBank accession No. EU190972). Thus far, GuActin is the first actin of Chinese licorice that has been identified at a molecular level. Analysis by Northern blot shows that GuActin was expressed strongly in the roots, particularly in radicles than in stems and leaves. These results suggest that GuActin may be a member of the vegetative subfamily of the actin family. 展开更多
关键词 ACTIN Gene cloning chinese licorice(glycyrrhiza uralensis fisch) Gene expression
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乌拉尔甘草种子硬实率的近红外光谱分析 被引量:4
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作者 孙群 李欣 +4 位作者 李航 吴坷 李军会 王建华 孙宝启 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第1期70-73,共4页
以收获年份不同、收获地点不同的112份乌拉尔甘草种子为材料,其硬实率分布范围为0.3%~99.3%,根据3:1的比例划分校正集和检验集,采用近红外光谱技术结合定量偏最小二乘法对其硬实率进行了分析。研究结果表明,光谱范围采用5 000~6 000 c... 以收获年份不同、收获地点不同的112份乌拉尔甘草种子为材料,其硬实率分布范围为0.3%~99.3%,根据3:1的比例划分校正集和检验集,采用近红外光谱技术结合定量偏最小二乘法对其硬实率进行了分析。研究结果表明,光谱范围采用5 000~6 000 cm^(-1),主成分数为6时,校正集和检验集的决定系数分别为90.85%和91.51%,相关系数分别为0.953 2和0.957 9,平均绝对误差分别为7.73%和6.96%,标准差分别为9.98和9.57。采用该方法建模时,即使采用不同的建模样品,校正集和检验集的决定系数均在90%以上,校正标准差和预测标准差在10.00左右,平均绝对误差在7.90%左右。该研究旨在利用近红外光谱法提出乌拉尔甘草种子硬实率的快速检测方法,以促进硬实种子在生产上的利用。 展开更多
关键词 近红外光谱 乌拉尔甘草 种子 硬实率
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甘草GuPIP1基因启动子的克隆及序列分析 被引量:3
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作者 王芳 董乐 +2 位作者 袁建军 黄周英 林娈 《植物生理学通讯》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期413-416,共4页
从甘草叶中提取总DNA,并用染色体步行技术克隆甘草GuPIP1基因5′端上游调控区序列(GenBank accession No.EU 262597)。采用生物信息学方法进行序列分析表明,该序列具有典型的启动子结构,具干旱和ABA激素调控序列等顺式作用元件。
关键词 甘草 质膜水通道蛋白基因 启动子 干旱和ABA激素调控序列
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甘草质膜水通道蛋白GuPIP1对甘油的转运 被引量:2
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作者 王芳 董乐 +1 位作者 戴聪杰 林娈 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期172-177,共6页
旨在进行甘草质膜水通道蛋白GuPIP1对水和溶质通透性的鉴定。将GuPIP1全长编码区的cDNA构入非洲爪蟾卵母细胞检测系统的表达载体psp64 Poly(A),并将体外转录获得GuPIP1的cRNA显微注射入卵母细胞,使GuPIP1基因在卵母细胞中表达,通过测定... 旨在进行甘草质膜水通道蛋白GuPIP1对水和溶质通透性的鉴定。将GuPIP1全长编码区的cDNA构入非洲爪蟾卵母细胞检测系统的表达载体psp64 Poly(A),并将体外转录获得GuPIP1的cRNA显微注射入卵母细胞,使GuPIP1基因在卵母细胞中表达,通过测定卵母细胞对水和溶质的转运功能来鉴定GuPIP1的转运功能。结果表明,GuPIP1在异源表达系统非洲爪蟾卵母细胞中具水和甘油通透性,但不能转运尿素,为探讨GuPIP1在植株生理中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 甘草 甘油 水通道蛋白 通透性
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甘草水通道蛋白PIP1基因正义和反义表达载体的构建
5
作者 王芳 董乐 黄周英 《内蒙古民族大学学报(自然科学版)》 2008年第6期642-646,共5页
〕根据已报道的GuPIP1基因序列设计特异引物,克隆甘草水通道蛋白GuPIP1基因cDNA序列,将该片段正向、反向分别插入植物表达载体pMBW 330的CaMV 35S启动子和OCS终止子之间,构建了正义、反义表达载体.通过双酶切、PCR和DNA测序鉴定后,分别... 〕根据已报道的GuPIP1基因序列设计特异引物,克隆甘草水通道蛋白GuPIP1基因cDNA序列,将该片段正向、反向分别插入植物表达载体pMBW 330的CaMV 35S启动子和OCS终止子之间,构建了正义、反义表达载体.通过双酶切、PCR和DNA测序鉴定后,分别导入农杆菌EHA105中. 展开更多
关键词 甘草 水通道蛋白 GuPIP1 表达载体
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两相分配法制备甘草根质膜及其纯度鉴定
6
作者 王芳 黄周英 董乐 《内蒙古民族大学学报(自然科学版)》 2008年第2期157-160,共4页
以甘草(Glycyrrhiza uralensis F.)根为材料,利用差速离心法获取细胞微粒体,通过水溶性聚合物Dextran T-500和PEG 4000所构成的两相分配体系制备质膜.标志酶鉴定结果表明,上相中富含质膜,内膜污染较少,质膜纯度较高;下相中富含其它内膜.... 以甘草(Glycyrrhiza uralensis F.)根为材料,利用差速离心法获取细胞微粒体,通过水溶性聚合物Dextran T-500和PEG 4000所构成的两相分配体系制备质膜.标志酶鉴定结果表明,上相中富含质膜,内膜污染较少,质膜纯度较高;下相中富含其它内膜.Western blot分析结果表明,在对应于水通道蛋白分子量大小的位置存在特异条带.实验证明,PEG-Dextran两相分配体系可获得较高纯度的甘草根密实正向型质膜囊泡. 展开更多
关键词 两相分配法 质膜 甘草 标志酶 WESTERN BLOT
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甘草水通道蛋白基因(GuPIP1)RNAi双元表达载体的构建及鉴定
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作者 王芳 董乐 戴聪杰 《内蒙古民族大学学报(自然科学版)》 2009年第5期526-530,共5页
植物水通道蛋白(Aquaporins,AQPs)是细胞膜上选择性高效转运水分子的特异蛋白孔道.本文根据植物中hpRNA(hairpin RNA)的原理,以甘草质膜水通道蛋白基因GuPIP1为靶基因,在GuPIP1-cDNA序列中选择378bp作为构建RNAi的序列,经三次亚克隆,最... 植物水通道蛋白(Aquaporins,AQPs)是细胞膜上选择性高效转运水分子的特异蛋白孔道.本文根据植物中hpRNA(hairpin RNA)的原理,以甘草质膜水通道蛋白基因GuPIP1为靶基因,在GuPIP1-cDNA序列中选择378bp作为构建RNAi的序列,经三次亚克隆,最后形成含GuPIP1-hpRNAi表达盒的双元表达载体,并转入农杆菌EHA105. 展开更多
关键词 甘草 水通道蛋白 RNAI 双元表达载体
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天然功效成分的提取及其在漱口水中的运用 被引量:2
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作者 杨政 梁佩兰 李念桥 《香料香精化妆品》 CAS 北大核心 2000年第1期14-17,共4页
文中简单介绍了从田七、绞股兰、甘草等中草药中提取天然功效成分的方法,阐述了天然功效成分在漱口水产品中的运用研究。临床试用试验结果表明:研制的漱口水产品对牙周炎、牙龈炎和冠周炎等口腔疾病患者具有止病、止血及促进愈合的作... 文中简单介绍了从田七、绞股兰、甘草等中草药中提取天然功效成分的方法,阐述了天然功效成分在漱口水产品中的运用研究。临床试用试验结果表明:研制的漱口水产品对牙周炎、牙龈炎和冠周炎等口腔疾病患者具有止病、止血及促进愈合的作用,有效率达91%。 展开更多
关键词 田七 绞股兰 甘草 中草药 漱口水 口腔用品
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甘草肌动蛋白基因GuActin2的克隆和表达分析 被引量:9
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作者 王芳 《植物生理学通讯》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期995-1000,共6页
以乌拉尔甘草根为材料,从中提取总RNA,根据植物肌动蛋白的5'和3'末端设计简并引物。采用RT-PCR技术和5'RACE试剂盒,从乌拉尔甘草根中克隆到一个肌动蛋白基因编码区全长cDNA序列(GenBank登录号GQ404511),长度为1137bp。该基... 以乌拉尔甘草根为材料,从中提取总RNA,根据植物肌动蛋白的5'和3'末端设计简并引物。采用RT-PCR技术和5'RACE试剂盒,从乌拉尔甘草根中克隆到一个肌动蛋白基因编码区全长cDNA序列(GenBank登录号GQ404511),长度为1137bp。该基因编码一个由377个氨基酸残基组成的蛋白质。甘草GuActin2具有肌动蛋白(YVGDEAQs.KRG和WISKgEYDE)和肌动蛋白类似物(LLTEApLNPkaNR)的特征信号序列。Northern blot分析表明,GuActin2在甘草的根、茎、叶组织中都有表达,在根中,尤其在胚根中的表达强于茎和叶中的表达。该基因属于营养型亚类。 展开更多
关键词 肌动蛋白 基因表达 基因克隆 乌拉尔甘草
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甘草CHS基因家族鉴定、表达特性分析及其与甘草查尔酮A积累的关系研究 被引量:6
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作者 何梦媛 姚华 +2 位作者 李国治 杨茂 沈海涛 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期141-154,共14页
查尔酮合成酶(CHS)是植物黄酮类化合物合成途径中的关键限速酶,与植物类黄酮化合物的合成有密切关系。为了解甘草(Glycyrrhiza uralensis) CHS基因家族与甘草查尔酮A (licochalcone A)合成、积累的关系,本文研究了非生物胁迫下不同时间... 查尔酮合成酶(CHS)是植物黄酮类化合物合成途径中的关键限速酶,与植物类黄酮化合物的合成有密切关系。为了解甘草(Glycyrrhiza uralensis) CHS基因家族与甘草查尔酮A (licochalcone A)合成、积累的关系,本文研究了非生物胁迫下不同时间的甘草不同部位中甘草查尔酮A含量,进行了CHS基因家族表达特性和生物信息学分析。结果显示,甘草查尔酮A主要在甘草地下部分中积累,非生物胁迫明显提升地下部分甘草查尔酮A含量,其在盐胁迫处理6 h组的含量是对照组(0 h组)的2.41倍,而在聚乙二醇(PEG)胁迫2 h组的含量是对照组的1.76倍。基于对上述材料的转录组测序数据分析结果,发现有20个序列注释为CHS基因。其中,有14个GuCHS基因具有完整的读码框,且这些CHS基因具有时空表达差异性。非生物胁迫诱导地下部分中的GuCHS基因上调, GuCHS1、GuCHS4和GuCHS5经胁迫诱导后表达量最高分别为对照的31.3倍、25倍和35倍,在处理2 h组和12 h组上调最为明显,而GuCHS2仅在PEG胁迫下明显上调,表达量变化趋势与甘草查尔酮A含量变化趋势相似。14个GuCHS基因的生物信息学分析显示, GuCHS1、GuCHS2、GuCHS4和GuCHS5较其他GuCHS基因的启动子区域包含更多的G-box元件、MYC结合位点,故推测胁迫处理诱导茉莉酸、脱落酸等应激响应因子合成,调控地下部分GuCHS1、GuCHS2、GuCHS4和GuCHS5表达,提升甘草中甘草查尔酮A含量。本研究结果为优化甘草栽培体系、提升栽培甘草品质、探究GuCHS基因在甘草中的功能以及对甘草查尔酮A合成及调控机制提供研究基础。 展开更多
关键词 甘草 甘草查尔酮A GuCHS 基因家族鉴定 生物信息学分析
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