中药复方益糖康增强足细胞自噬改善糖尿病肾脏疾病的机制研究

目的观察中药复方益糖康(YTK)对糖尿病肾脏疾病(DKD)大鼠足细胞自噬的影响,探讨YTK改善DKD的作用机制。方法96只8周龄健康Wistar大鼠使用随机数字表法分为空白对照组、模型对照组、YTK高剂量(40 g·kg^(-1))组、YTK中剂量(20 g·kg^(-1))组、YTK低剂量(10 g·kg^(-1))组,西药对照(20 mg·kg^(-1))组(氯沙坦片),使用高脂饲料喂养联合腹腔单次注射链脲佐菌素建立DKD模型,成功建立模型的86只DKD大鼠分别给药干预8周后取材。采用快速血糖仪测定各组大鼠空腹血糖(FPG),手工法测定各组大鼠血清中尿素氮(BUN)、血白蛋白(ALB)、血肌酐(Scr)、血尿酸(UA)、血清总蛋白(TP)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHO)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平。苏木精伊红(HE)染色观察大鼠肾脏组织病理形态。Western blotting法检测足细胞自噬相关蛋白(LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、p62、ATG5、Beclin1)表达。结果与空白对照组相比,模型对照组大鼠肾脏组织可见细胞排列不规则,结构紊乱,炎症细胞聚集;FBG、BUN、TG、CHO、LDL-C、Scr、UA、TP水平均明显升高,ALB、HDL-C水平明显下降(P<0.01),肾组织LC3-Ⅰ、p62、Beclin1蛋白表达增多,LC3-Ⅱ、ATG5蛋白表达减少(P<0.01);与模型对照组相比,YTK各剂量组和西药对照组大鼠肾脏病理损伤明显缓解,炎症浸润明显减轻。FBG、BUN、TG、CHO、LDL-C、Scr、UA、TP水平均明显下降,ALB、HDL-C水平明显升高(P<0.01),肾组织LC3-Ⅰ、p62、Beclin1蛋白表达减少,LC3-Ⅱ、ATG5蛋白表达增多(P<0.01)。结论YTK能够有效改善DKD大鼠肾脏损伤,其可能是通过下调LC3-Ⅰ、p62、Beclin1蛋白表达,增多LC3-Ⅱ、ATG5蛋白表达来调节DKD自噬水平发挥对肾脏的保护作用。

基于“诸转反戾,水液浑浊,皆属于热”理论探讨复方益糖康调控糖尿病肾病“炎症因子”研究进展

糖尿病是对生命健康具有不良影响的代谢障碍性疾病,糖尿病肾病是糖尿病最为常见的并发症之一,炎症因子是发生糖尿病肾病的重要病理基础,“诸转反戾,水液浑浊,皆属于热”理论是《素问·至真要大论篇》中“病机十九条”之一,该文以此理论为基础,探讨炎症因子对糖尿病肾病的病理演变作用。“湿热内伤,脾肾失司,精微不固”为发病之本,诸多炎症因子作用于机体导致“阴火炽盛,壮火内生”是糖尿病肾病形成的关键。复方益糖康具有健脾清热、养阴益气、活血化瘀功效,方中各药物的有效成分都具有保护肾脏、防止肾损伤的作用,方中药物组合使用能够通过抑制JAK2/STAT3、NF-κB、MAPK等信号通路,降低肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)、转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)等炎症因子的水平,对糖尿病肾病起到良好的治疗作用。

中药复方益糖康对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子、色素上皮衍生因子表达的影响

目的 通过观察中药复方益糖康对糖尿病大鼠视网膜组织中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)与色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived factor, PEDF)表达的影响,探讨中药复方益糖康对糖尿病大鼠视网膜的作用机制。方法 从80只SD大鼠中随机选取20只作为空白对照组。其余60只以腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin, STZ)溶液,小剂量、多次诱导的方法复制2型糖尿病大鼠模型,并随机分为中药组、西药组、模型组进行不同干预。中药组和西药组分别给予中药复方益糖康和羟苯磺酸钙进行灌胃,模型组及空白对照组给予相同体积生理盐水灌胃,连续给药12周观察大鼠血糖、视网膜结构变化及大鼠视网膜组织VEGF、PEDF蛋白的表达情况。结果 与空白对照组相比较,其余3组大鼠空腹血糖(fasting blood glucose, FBG)显著升高,3组大鼠视网膜组织中VEGF水平明显升高,PEDF水平均降低;给予药物干预后,与模型组相比较,中药组大鼠FBG则显著降低,大鼠视网膜组织中VEGF表达水平均显著下降,而PEDF蛋白的表达水平明显上升。结论 中药复方益糖康对糖尿病大鼠视网膜的保护作用是通过下调VEGF、上调PEDF的表达来实现的。

中药复方益糖康通过介导伴侣自噬和免疫平衡防治早期糖尿病肾病机制探讨

糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)是糖尿病最常见的微血管并发症之一,是糖尿病发病和死亡的主要原因之一,同时也是终末期肾病中最常见的蛋白尿和非蛋白尿形成的原因。自噬作为机体的一种防御机制,参与DKD中多种靶细胞损害的调控过程,并能有效减轻DKD的病理表现。因此,通过调控自噬途径,可能成为治疗DKD的潜在疗法、新靶点和方向。中药复方益糖康具有健脾益气养阴、活血化瘀之功,其重要化合物黄芩素之一,可通过增加结合蛋白HSP90AA1的表达,诱导分子伴侣介导的自噬,减少由自噬缺陷导致的足细胞损伤;重要化合物槲皮素可能通过促进前列腺素内过氧化物合酶2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2,PTGS2)的组蛋白3赖氨酸4(histone3lysine4,H3K4)甲基化,抑制PTGS2表达,减少炎症产生,抑制Th17向Treg分化,最终实现改善DKD的作用。但仍需要进一步动物实验验证及阐释,为中医药治疗糖尿病肾病提供新的思路与方案。进一步明确中药复方益糖康通过介导伴侣自噬和免疫平衡对糖尿病肾病防治以及机制探讨具有重要意义,并为临床上治疗糖尿病肾病提供新的思路与策略。该文就益糖康通过伴侣自噬和免疫平衡防治糖尿病肾病作一简述。

基于网络药理学与分子对接技术探讨复方益糖康“心脾论治”糖尿病认知功能障碍

目的依托网络药理学及分子对接技术对中药复方益糖康“心脾论治”糖尿病认知功能障碍的机制进行预测,提供复方益糖康中医治则在现代生物信息学层面的证据。方法TCMSP平台搜索复方益糖康各组成药物的有效成分和靶点,再在GeneCards、OMIM、PharmGkb、TTD、DrugBank数据库筛选糖尿病认知功能障碍的相关靶点基因,再利用Cytoscape软件、STRING和R语言对数据集进行可视化分析,筛选出复方益糖康药物靶基因与疾病相关性基因,同时构绘中药调控网络和蛋白互作网络图,并进行GO与KEGG富集分析,最后通过分子对接技术预测结合活性。结果筛选出复方益糖康组成药物活性成分211种,对应靶点241个,糖尿病认知功能障碍疾病靶点5932个,交集靶点共204个,筛选出JUN、MYC、ESR1、STAT3等17个核心关键靶蛋白。GO富集分析生物学过程分析发现复方益糖康可调控对金属离子的反应、细胞的化学物质应激、对氧化应激的反应及对脂多糖反应等生物学进程。KEGG通路分析得到脂质与动脉粥样硬化信号通路、PI3K/Akt信号通路、糖尿病并发症的AGE-RAGE信号通路等。通过分子对接技术对中药复方益糖康的核心成分与疾病核心靶点基因做对接验证,结果显示对接受体与配体均具有良好的自发结合能力。结论通过网络药理学与分子对接技术对中药复方益糖康从“心脾论治”糖尿病认知功能障碍的现代医学机制进行预测,为该方多靶点、多途径发挥作用提供一定证据。

基于分子对接技术、分子动力学模拟中药复方益糖康防治糖尿病肾病作用机制研究

目的通过生信分析、分子对接及分子动力学技术探讨中药复方益糖康(YTK)防治糖尿病肾病的作用机制。方法通过网站、数据库及文献检索获取YTK的有效成分及糖尿病肾病疾病靶点,经筛选后进行生信分析。结合生信分析结果及CTD数据库选择5个重要蛋白受体,分别与YTK符合筛选标准的有效成分通过Auto Dock Vina软件进行分子对接,将分子对接结果中结合能较强且具有继续研究意义的构象应用分子动力学技术进行进一步分析。结果槲皮素、黄芩素、山柰酚、丹参酮II等22个化合物可能是YTK防治糖尿病肾病的重要活性成分,涉及氧化应激反应、调节活性氧代谢、炎症反应等多个生物过程及AGE-RAGE、TNF、PI3K-Akt、VEGF、p53、mTOR等多个信号通路;重要蛋白受体为PTGS1、PTGS2、NCOA2、HSP90AA1、RXRA,研究上述重要蛋白受体对精准阐释糖尿病肾病的发病与防治有重要的意义。YTK筛选的活性成分与受体结合能平均值为-8.16 kcaL·moL^(-1),超过96.36%的结合能低于-5.6 kcaL·moL^(-1),证实了其防治DN效果良好。baicalein-HSP90AA1、quercetin-PTGS2作为有继续研究意义的构象进一步进行分子动力学模拟,结果均可以稳定地结合,为范德华势能和静电作用、氢键作用共同作用的结果。结论研究揭示了YTK防治糖尿病肾病的潜在分子机制,为后续研究提供理论依据及参考。

基于网络药理学探讨中药复方益糖康从脾论治糖尿病的机制

目的基于网络药理学研究中药复方益糖康从脾论治糖尿病的分子机制。方法应用中药系统药理学技术平台(TCMSP)数据库检索中药复方益糖康中脾经药物红参、黄芪、黄连、黄精、茯苓、白术6味中药的有效成分,并进行靶点预测。通过DisGeNET、TTD数据库检索糖尿病相关的疾病靶点,将中药靶点与疾病靶点进行交集,筛选得到共同靶蛋白。应用STRING平台构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络模型。使用Cytoscape软件对该网络进行拓扑学分析得到核心关键靶点,并对核心靶点基因进行GO-BP生物功能富集分析,应用DAVID平台对其进行KEGG通路分析。结果经数据库分析共筛选出红参有效活性成分3个,黄芪有效活性成分16个,黄精有效活性成分11个,黄连有效活性成分10个,茯苓有效活性成分14个,白术有效活性成分5个和635个潜在作用靶点,其中与糖尿病共有靶点103个,通过对共同靶点的拓扑分析,筛选出32个核心关键蛋白。经GO-BP富集分析,发现中药复方益糖康可能通过保护调节能量代谢、MAP激酶的活性、改善血管功能、调控神经营养素受体信号传导、以及调节脂质、磷脂、活性氧的代谢过程等生物功能发挥对从脾论治糖尿病的治疗作用。通过KEGG通路分析,得到5条与糖尿病相关通路,即VEFG信号通路、MAPK信号通路、mTOR信号通路、胰岛素信号通路以及2型糖尿病信号通路。结论从多角度探索了中药复方益糖康从脾论治糖尿病的分子机制,为其临床应用提供了科学依据。

益糖康对初诊气阴两虚型T2DM患者胰岛β细胞功能及炎症因子影响

目的观察中药复方益糖康对气阴两虚型2型糖尿病(T2DM)患者胰岛β细胞功能及炎症因子的影响。方法选取符合纳入标准的90例初诊断气阴两虚证T2DM患者,随机分成对照组和观察组,各45例。对照组予以糖尿病教育、饮食、运动治疗及二甲双胍治疗,观察组患者在对照组基础上给予中药复方益糖康,观察治疗前后两组患者的血糖水平[空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 h PG)、糖化血红蛋白(HbA1c)]、胰岛β细胞功能[空腹C肽(FCP)、餐后2 h C肽(2 h PCP)]、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、中医证候积分、血清炎症因子[C反应蛋白(CRP)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)]变化情况。结果治疗2周后,两组患者血糖水平较治疗前均显著下降(P<0.05),但组间比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者血糖水平、HbA1c、FCP、2 h CP、HOMA-IR、CRP、IL-6、TNF-α均低于对照组(P<0.05),而HOMA-β高于对照组(P<0.05);观察组中医证候积分明显改善(P<0.05)。结论中药复方益糖康能够改善气阴两虚型T2DM患者的胰岛β细胞功能,增加胰岛素敏感性,减轻胰岛素抵抗,增强血糖控制效果,并可以一定程度的改善患者的乏力、手足心热、酸胀沉重等临床表现。