期刊文献+
共找到20篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
对金龟子幼虫有杀虫活性的苏云金杆菌HBF-1菌株发酵培养基优选 被引量:8
1
作者 王容燕 冯书亮 +2 位作者 范秀华 曹伟平 胡明峻 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2003年第F09期96-98,共3页
通过正交试验优选出对金龟子幼虫有杀虫活性的苏云金杆菌HBF 1菌株的发酵培养基组合为:氮源B4 4%,淀粉1 2%,酵母粉0.5%,KH2PO40.04%,MgSO40.05%。用此配方进行摇瓶发酵,发酵液的平均菌数可达到44亿/mL,晶体产生量为2 1130mg/mL,发酵液稀... 通过正交试验优选出对金龟子幼虫有杀虫活性的苏云金杆菌HBF 1菌株的发酵培养基组合为:氮源B4 4%,淀粉1 2%,酵母粉0.5%,KH2PO40.04%,MgSO40.05%。用此配方进行摇瓶发酵,发酵液的平均菌数可达到44亿/mL,晶体产生量为2 1130mg/mL,发酵液稀释50倍对铜绿丽金龟幼虫进行生测,14d平均死亡率达到78 3%。 展开更多
关键词 苏云金杆菌 微生物杀 培养基 金龟科幼 活性 HBF-1
下载PDF
苏云金芽孢杆菌cyt1 Aa基因在拟步甲亚种菌株中的表达及重组菌株杀虫活性研究
2
作者 袁美妗 汤慕瑾 +2 位作者 师永霞 王莉 庞义 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期71-74,共4页
将含苏云金芽孢杆菌以色列亚种(Bacillus thuringiensis subsp.israelensis,简称Bti)cyt1Aa基因的质粒电激转化至对鞘翅目害虫有专一活性的Bt拟步甲亚种(Bacillus thuringiensis subsp.tenebrionis,简称Btt)菌株中进行表达,获得重组菌株... 将含苏云金芽孢杆菌以色列亚种(Bacillus thuringiensis subsp.israelensis,简称Bti)cyt1Aa基因的质粒电激转化至对鞘翅目害虫有专一活性的Bt拟步甲亚种(Bacillus thuringiensis subsp.tenebrionis,简称Btt)菌株中进行表达,获得重组菌株Btt-WF45。对表达产物进行SDS-PAGE分析,显示Cyt1Aa蛋白获得了大量表达。生物测定结果表明,Btt-WF45对鞘翅目小圆叶甲(Plagiodera Redtenbacher)幼虫没有毒力,对致倦库蚊(Culex quinquefasciatus)的毒力比对照菌株4Q7-WF45高0.33倍,对白纹伊蚊(Aedes albopictus)的毒力比4Q7-WF45高0.63倍。由于在重组菌株Btt-WF45中Cry3A蛋白的表达量太低,所以在该结果中未能显示Cyt1Aa蛋白与Cry3A蛋白是否存在协同增效作用。 展开更多
关键词 苏云金杆菌 cyt1 AA Btt菌 表达 活性
下载PDF
马泰勒虫新疆株EMA-1基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立 被引量:6
3
作者 宋瑞其 王盼举 +4 位作者 王振宝 瓦热斯.吐尔松 闻秀秀 张杨 巴音查汗 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1737-1743,共7页
马泰勒虫裂殖子表面抗原1(EMA-1)是用于马梨形虫病诊断的重要靶抗原之一。为建立实用有效的间接酶联免疫吸附试验方法,笔者根据马泰勒虫EMA-1基因序列设计并合成引物,将新疆株EMA-1全基因序列克隆于原核表达载体pGEX-4T-1上,构建pGEX-4T... 马泰勒虫裂殖子表面抗原1(EMA-1)是用于马梨形虫病诊断的重要靶抗原之一。为建立实用有效的间接酶联免疫吸附试验方法,笔者根据马泰勒虫EMA-1基因序列设计并合成引物,将新疆株EMA-1全基因序列克隆于原核表达载体pGEX-4T-1上,构建pGEX-4T-1/EMA1重组质粒,转化至BL21(DE3)中,经IPTG诱导得到EMA-1融合蛋白,切胶纯化后作为包被抗原建立检测马泰勒虫抗体的rELISA方法。结果显示:(1)GST-EMA1蛋白相对分子质量56ku,与其理论值基本一致;(2)通过Western blot分析证明其具有很好的特异性和反应原性;(3)以GST-EMA1蛋白作为包被抗原建立的rELISA可明显区分马泰勒虫、驽巴贝斯虫阳性血清和健康马血清;批内和批间重复试验的最大变异系数分别为14.79%和11.06%;(4)使用建立的间接ELISA与cELISA商品试剂盒分别对新疆伊犁马场收集的96份马血清样品进行检测,检出阳性率分别为27.1%(26/96)和25.0%(24/96),两者总符合率为95.8%。结果表明,基于原核表达的GST-EMA1蛋白所建立的rELISA特异性、重复性好,检出率与马泰勒虫临床分离率接近,可为新疆马泰勒虫病(特别是隐性带虫马)的检测、监控提供有效手段。 展开更多
关键词 马泰勒 新疆EMA-1 间接ELISA 抗体 诊断
下载PDF
欧洲毛毕吸虫不同虫株间ITS1和ITS2基因序列的比较
4
作者 徐绍锐 《国外医学(寄生虫病分册)》 2003年第2期88-89,共2页
关键词 欧洲毛毕吸 ITS1 ITS2 毛毕吸 基因序列
下载PDF
对鳞翅目害虫高毒力的Bt cry1 Aa基因的分离克隆及表达 被引量:4
5
作者 姚江 张杰 +4 位作者 陈中义 宋福平 李长友 胡玉琴 黄大昉 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期150-155,共6页
Bt菌Ly30株是我国自行分离的对多种害虫具有高毒力的苏云金芽孢杆菌 ,经CAPS (cleavedamplifiedpolymorphicse quences)系统鉴定 ,它含有cry1Aa基因。以全长基因PCR产物的粘端定向克隆的方法 ,设计一对特异引物 ,分别引入NcoⅠ和BamHⅠ ... Bt菌Ly30株是我国自行分离的对多种害虫具有高毒力的苏云金芽孢杆菌 ,经CAPS (cleavedamplifiedpolymorphicse quences)系统鉴定 ,它含有cry1Aa基因。以全长基因PCR产物的粘端定向克隆的方法 ,设计一对特异引物 ,分别引入NcoⅠ和BamHⅠ NcoⅠ酶切位点。以Ly30质粒DNA为模板扩增cry1Aa全长基因 ,与表达载体pKK2 33 2相应酶切产物连接 ,转化大肠杆菌 ,获得含有cry1Aa基因重组质粒pKKLy1Aa。完成了该基因的亚克隆和序列测定 ,结果表明 ,该基因的编码区为 3 5 31bp ,编码蛋白分子量为 133 2kD ,含 1176个氨基酸 ,等电点pI为 4 99。该基因序列已在GenBank中登记注册 ,登录号为AF3842 11,并被国际Bt杀虫晶体蛋白基因命名委员会正式命名为cry1Aa12。对重组菌KKLy1Aa进行诱导表达研究。在 0 6mmol LIPTG、 37℃、 8h培养条件下 ,该基因获得高效表达 ,SDS PAGE电泳检测到明显的 133 2kD蛋白带。室内生测结果表明 ,Cry1Aa蛋白对不同的小菜蛾品系均有较高的杀虫活性 ,其LC50 值分别为 0 2 0 3μg mL和 0 5 5 4μg mL。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 Ly30菌 cry1Aa基因 克隆 表达 活性
下载PDF
转Bt基因植物中杀虫蛋白的酶联免疫检测技术研究Ⅰ.Bt菌HD-1的杀虫晶体蛋白抗原制备 被引量:4
6
作者 严吉明 叶华智 +1 位作者 张敏 伍光庆 《四川农业大学学报》 CSCD 2005年第1期29-32,38,共5页
研究了培养时间对苏云金杆菌(Bacillusthuringiensis)HD-1菌株孢晶混合物的产量、杀虫晶体蛋白裂解液的种类和处理温度与时间对杀虫晶体蛋白提取率及纯度的影响。结果表明BtHD-1菌株在Bt生长繁殖平板培养基上,30℃下培养41~55h均可获... 研究了培养时间对苏云金杆菌(Bacillusthuringiensis)HD-1菌株孢晶混合物的产量、杀虫晶体蛋白裂解液的种类和处理温度与时间对杀虫晶体蛋白提取率及纯度的影响。结果表明BtHD-1菌株在Bt生长繁殖平板培养基上,30℃下培养41~55h均可获得大量孢晶混合物。采用50mmol/LNa2CO3裂解液处理孢晶混合物,可获得纯度高的130kD杀虫晶体蛋白,而用40mmol/LNaOH提取的杀虫晶体蛋白中含有较多杂蛋白。所研究的处理温度和时间对杀虫晶体蛋白提取量和组成无明显影响。这些结果为杀虫晶体蛋白抗原的制备提供了依据。 展开更多
关键词 Bt菌 HD-1 晶体蛋白 抗原
下载PDF
永州市羊捻转血矛线虫线粒体Cox1基因序列的测定及分析 被引量:1
7
作者 刘俊琦 刘树忠 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第10期135-136,共2页
捻转血矛线虫[1-3](Haemonchus contortus)属血矛属(Haemonchus)线虫,分布广泛,多见于羊第4胃和小肠,以黏膜和血液为食,可导致宿主发育不良及引起一系列的并发症,并伴发Fe3+的缺乏病[4-6],严重时可致死,给养殖户和畜牧业造成的经... 捻转血矛线虫[1-3](Haemonchus contortus)属血矛属(Haemonchus)线虫,分布广泛,多见于羊第4胃和小肠,以黏膜和血液为食,可导致宿主发育不良及引起一系列的并发症,并伴发Fe3+的缺乏病[4-6],严重时可致死,给养殖户和畜牧业造成的经济损失严重[7]。 展开更多
关键词 捻转血矛线 Cox1 线粒体基因组 血矛属 母系遗传 基因序列 发育不良 进化速率 遗传标记 分离
下载PDF
苏云金芽孢杆菌新菌株GGD-4杀虫晶体蛋白基因分析
8
作者 刘旭光 张广杰 +1 位作者 郑霞 朱正勇 《中国农学通报》 CSCD 2005年第10期60-62,共3页
利用稀释平板培养法从连云港地区的土壤中分离了一株苏云金芽孢杆菌新菌株GGD-4,通过PCR-RFLP鉴定体系和SDS-PAGE方法分析了此菌株中cry基因类型和表达蛋白.结果表明:该菌株中含有cry1Aa基因型,同时表达130~140kD的蛋白;但EcoR Ⅰ和Pst... 利用稀释平板培养法从连云港地区的土壤中分离了一株苏云金芽孢杆菌新菌株GGD-4,通过PCR-RFLP鉴定体系和SDS-PAGE方法分析了此菌株中cry基因类型和表达蛋白.结果表明:该菌株中含有cry1Aa基因型,同时表达130~140kD的蛋白;但EcoR Ⅰ和Pst Ⅰ酶切结果不同于正常的cry1Aa基因,实验中利用生物信息学方法设计的cry1Aa基因特异引物对扩增后也证明含有cry1Aa基因.室内生测结果显示,该菌株对重要的农业害虫甜菜夜蛾、菜青虫等均有较高的杀虫毒力. 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 GGD-4 PCR-RFLP cry基因. 晶体蛋白 苏云金芽孢杆菌 新菌 cry1Aa基因 基因分析 PCR-RFLP 连云港地区 平板培养法 AGE方法
下载PDF
转基因抗虫玉米转育株Bt蛋白的表达特性分析 被引量:3
9
作者 刘金洋 江海洋 +3 位作者 赵阳 曹建刚 李倩 程备久 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期725-730,共6页
为了对转基因抗虫玉米转育株Bt蛋白的表达特性进行分析,用Cry1Ab/Cry1Ac平板试剂盒定量检测了3种含Bt基因的玉米回交后代品系BC1F1(HZ3152、HZ3342、HC0142)在相同生长时期不同组织和不同生长时期相同组织中Bt蛋白的表达量。结果表明,... 为了对转基因抗虫玉米转育株Bt蛋白的表达特性进行分析,用Cry1Ab/Cry1Ac平板试剂盒定量检测了3种含Bt基因的玉米回交后代品系BC1F1(HZ3152、HZ3342、HC0142)在相同生长时期不同组织和不同生长时期相同组织中Bt蛋白的表达量。结果表明,在乳熟期BC1F1不同组织中Bt蛋白表达含量的高低顺序为:叶片>胚乳>花丝>种子苞叶;在BC1F1不同的生长发育阶段(苗期、抽丝期和乳熟期),叶片中Bt蛋白的含量随生育期的推移呈明显先上升后下降趋势,Bt蛋白含量在抽丝期达到最大,之后又开始下降;苗期(HC0142、HZ3152、HZ3342)Bt蛋白的含量(4.16、3.75和3.72μg·g-1)和乳熟期(5.56、4.58和4.79μg·g-1)的含量分别是抽丝期(6.05、5.36和5.50μg·g-1)的68%、69%、67%和91%、85%、87%。一般在玉米生长后期Bt蛋白的浓度有所下降,但幅度不大,对其抗性不会造成太大影响。该研究表明Bt蛋白在玉米回交后代中可以稳定表达,对Bt的相关研究为转基因育种等提供了参考依据。 展开更多
关键词 转基因抗玉米转育 BT蛋白 Cry1Ab/Cry1Ac平板试剂盒 检测
下载PDF
海南省热带农业资源研究所从菌株Bt W015中克隆Cry 1Ac基因家族新成员——Bt Cry 1AC22基因
10
《分子植物育种》 CAS CSCD 2008年第2期386-386,共1页
最近,海南省热带农业资源开发利用研究所在Bt项目的研究工作方面取得了突破性进展。所长方宣钧博士及其博士研究生张文飞,在病死幼虫中分离出一株高产菱形杀虫晶体蛋白的Bt菌株W015,通过PCR-RFLP方法鉴定该菌株含有Cry1Ac基因,
关键词 海南省热带农业资源开发利用研究所 CRY1AC基因 BT菌 基因家族 PCR-RFLP方法 博士研究生 克隆 晶体蛋白
下载PDF
捻转血矛线虫Hc-hrg-2拯救血红素缺陷型酵母生长表型
11
作者 周静茹 吴飞 +4 位作者 陈学秋 黄艳 时恒枝 杜爱芳 杨怡 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1795-1804,共10页
【目的】已有研究表明捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)Hc-hrg-2属于血红素应答基因,高浓度血红素的刺激可导致该基因的转录水平上调,但其在血红素调控中的功能尚缺乏研究。研究通过同源重组技术构建血红素合成缺陷型酿酒酵母(Saccha... 【目的】已有研究表明捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)Hc-hrg-2属于血红素应答基因,高浓度血红素的刺激可导致该基因的转录水平上调,但其在血红素调控中的功能尚缺乏研究。研究通过同源重组技术构建血红素合成缺陷型酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)hem1敲除株,通过异源表达Hc-hrg-2对该敲除株进行表型拯救试验,以期验证Hc-hrg-2参与细胞内血红素转运的功能。【方法】以S.cerevisiae BY4741基因组为模板,设计引物,扩增获得hem1(SGD:S000002640)基因序列5'和3'侧翼区同源臂;同时以pYES2-CT质粒为模板设计引物,扩增获得筛选标记URA3序列;利用两次重叠PCR技术依次将测序正确的上游同源臂、URA3、下游同源臂序列串联成基因敲除组件,并通过醇沉法对敲除组件进行纯化。采用醋酸锂转化法将纯化的敲除组件转化至BY4741感受态细胞中,经SD/-URA(含250μmol·L^(-1)5-氨基乙酰丙酸(ALA))培养基筛选,并利用多对引物进行PCR鉴定,以验证Δhem1敲除株的正确性。同时以含有H.contortus浙江株Hc-hrg-2序列(GenBank:MK371241)及其功能域缺失序列Hc-hrg-2(Δgst-n)和Hc-hrg-2(Δgst-c)的质粒为模板,利用特异性引物分别进行PCR扩增,通过无缝克隆将扩增得到的目的片段插入酵母pESC-LEU表达载体,经PCR鉴定以及测序验证后,采用醋酸锂转化法将正确的表达载体转化至Δhem1感受态细胞中,通过SD/-URA/-LEU(含250μmol·L^(-1)ALA)培养基筛选以及PCR鉴定验证阳性异源表达株的正确性。通过比较Δhem1敲除株及其各异源表达株在含有或不含有250μmol·L^(-1)ALA的SD/-URA/-LEU液体培养基中的生长情况,进一步验证敲除株的表型同时排除表达载体对表型的影响。用2%半乳糖对含有阳性表达质粒的敲除株进行诱导,取部分菌液进行超裂破碎,收集蛋白,通过Western Blot鉴定目的蛋白的表达;剩余菌体用去离子水重悬至OD600=0.2,用去离子水进行5倍比稀释,取4μL稀释后的菌液点至含有250μmol·L^(-1)ALA或者不同浓度血红素的诱导平板上,28℃培养2—3 d后比较敲除株的生长情况。【结果】成功获得hem1基因敲除株Δhem1,与野生株相比,Δhem1不能合成血红素,需外源添加ALA(250μmol·L^(-1))或血红素(≥10μmol·L^(-1))才能生长,且异源表达株和敲除株的表型一致。Western Blot结果表明2%半乳糖能诱导Hc-hrg-2及其功能域缺失基因在敲除株中成功表达,且表达Hc-hrg-2能够在低血红素浓度下(≤1μmol·L^(-1))促进酵母对血红素的摄取,拯救敲除株的生长缺陷,其硫氧还蛋白样结构域(GST-N)和谷胱甘肽S-转移酶C末端结构域(GST-C)的缺失会降低拯救的效果。【结论】捻转血矛线虫血红素应答基因Hc-hrg-2可促进细胞对血红素的摄取,其GST-N和GST-C功能域在该过程中发挥着重要作用,研究成果为后续深入研究捻转血矛线虫的血红素转运机制奠定基础。 展开更多
关键词 捻转血矛线 血红素 Hc-hrg-2 酿酒酵母 Δhem1敲除 异源表达 拯救
下载PDF
Protein Characteristics and Field Efficacy of YN1-1, a Highly Virulent Strain of Bacillus thuringiensis
12
作者 李真 金大勇 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2017年第5期930-932,947,共4页
[Objective] This study aimed to investigate the biological characteristics of a Bacillus thuringiensis strain YNI-1, which has high virulence to Lepidoptera spp. [Method] The crystal protein of YNI-1 was analyzed by S... [Objective] This study aimed to investigate the biological characteristics of a Bacillus thuringiensis strain YNI-1, which has high virulence to Lepidoptera spp. [Method] The crystal protein of YNI-1 was analyzed by SDS-PAGE, and its indoor and field efficacy for Lepidoptera spp. was investigated. [Result] The parasporal crystal of YNI-1 has a diamond-like structure. The molecular weight of the original toxin protein is 136 kDa. After trypsin treatment, the original toxin protein was hy- drolyzed into active toxin protein with molecular weight of 63 kDa. For Plutella xy- Iostella and Pieris rapae, the indoor efficacy of B. thuringiensis was better than that of commercial B. thuringiensis (WP). In view of field efficacy, rate of YNI-1 strain was higher than that of commercial B [Conelusion] YNI-1 strain has excellent development potential. the insects reduced thuringiensis (WP). 展开更多
关键词 Bacillus thuringiensis YNI-1 strain Insecticidal crystal protein Pharma-cology Control efficacy
下载PDF
国抗棉1号品种介绍及栽培技术要点
13
作者 章琳琳 《安徽农业》 2003年第3期20-20,共1页
国家"863"重大成果转基因抗虫棉品种--国抗棉1号是利用国家专利"编码杀虫蛋白质融合基因和表达载体及其应用"技术,将Bt杀虫基因用花粉管通道法导入我国主栽品种泗棉3号,经系谱法于1997年选育而成,1998年通过安徽省... 国家"863"重大成果转基因抗虫棉品种--国抗棉1号是利用国家专利"编码杀虫蛋白质融合基因和表达载体及其应用"技术,将Bt杀虫基因用花粉管通道法导入我国主栽品种泗棉3号,经系谱法于1997年选育而成,1998年通过安徽省审定. 展开更多
关键词 转基因抗 审定 品种特性 国抗棉1 栽培技术
下载PDF
寄生虫学
14
《中国医学文摘(基础医学)》 CSCD 2005年第4期220-225,共6页
抗恶性疟原虫重组谷氨酸脱氢酶单克隆抗体的制备及其鉴定;恶性疟原虫MESA基因的克隆和测序;海南省恶性疟原虫氯喹抗性相关基因Pfmdr1多态性分析;间日疟原虫MSPIC端基因亚克隆及在大肠埃希菌中的融合表达;NO在IL-12诱导抗伯氏疟原虫... 抗恶性疟原虫重组谷氨酸脱氢酶单克隆抗体的制备及其鉴定;恶性疟原虫MESA基因的克隆和测序;海南省恶性疟原虫氯喹抗性相关基因Pfmdr1多态性分析;间日疟原虫MSPIC端基因亚克隆及在大肠埃希菌中的融合表达;NO在IL-12诱导抗伯氏疟原虫感染免疫效应中的作用;IL-12对伯氏疟原虫红内期感染小鼠Th1/Th2细胞因子表达水平的影响;儿童先天性病残与弓形虫感染关系的研究;宫内感染弓形虫影响儿童生长发育的观察;弓形虫表面抗原P22基因片段的克隆、表达及鉴定;弓形虫和乙型肝炎病毒混合核酸疫苗的研究Ⅱ.pcDNA3-HBsAg-GRA1在COS-7细胞中的表达及鉴定;弓形虫GRA7基因在大肠埃希菌中的表达;小鼠过继转移致敏小肠IEL抗弓形虫感染;弓形虫SAG1基因成熟蛋白编码区在大,肠杆菌中的表达;卡氏肺孢子虫肺炎动物模型的实验观察;丝虫特异IgG4检测试剂盒的研制;日本血吸虫FKBP12基因的原核克隆表达及表达产物的纯化;日本血吸虫中国大陆株雌性特异性DNA片段及重复序列的分离与鉴定;左旋咪唑防御日本血吸虫尾蚴感染的实验研究;核酸疫苗VR1012/Sj31粘膜免疫诱导小鼠抗攻击感染的研究;日本血吸虫染色体核型及其G带带型分析;蚯蚓与日本血吸虫间共同抗原的初步研究;致弱日本血吸虫尾蚴感染小鼠皮肤组织中CD11c分子的动态表达;日本血吸虫副肌球蛋白T细胞表位的预测和鉴定;日本血吸虫Sj14FABP与细胞因子IL-12重组质粒的构建和表达;Mago nashi:一个日本血吸虫性别决定基因的发现与鉴定;CpG ODN对B本血吸虫感染小鼠Th1/Th2细胞因子表达水平的影响;日本血吸虫Sj16基因重组杆状病毒的构建和鉴定;日本血吸虫精蠹酸酶基因启动子序列的扩增及序列分析;日本血吸虫天然抗原分子的柱纯析分离纯化与鉴定;铜锈环梭螺(Bellamya aeruginosa)作为广州管圆线虫中间宿主的发现;抗华支睾吸虫代谢抗原单克隆抗体的制备及鉴定研究;华支睾吸虫病大鼠肝细胞凋亡的实验研究;猪囊尾蚴液、固相多种抗原对囊虫病免疫诊断效果评价。 展开更多
关键词 日本血吸中国大陆 寄生 细胞因子表达水平 日本血吸尾蚴感染 Th1/Th2 弓形表面抗原 弓形感染 单克隆抗体 卡氏肺孢子肺炎
下载PDF
犬新孢子虫新疆Nc-1株NcSRS2基因的克隆及原核表达 被引量:4
15
作者 杨帆 陈亮 +1 位作者 王莲芳 巴音查汗 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期846-850,共5页
根据GenBank中犬新孢子虫NcSRS2基因序列设计了1对引物,从新孢子虫病阳性牛血液中提取总DNA,经PCR扩增NcSRS2基因,将其插入原核表达质粒pGEX-4T-2中,重组质粒pGEX-4T-NcSRS2经测序确定后,转入表达菌株BL21,优化其表达条件,并探讨了GST-N... 根据GenBank中犬新孢子虫NcSRS2基因序列设计了1对引物,从新孢子虫病阳性牛血液中提取总DNA,经PCR扩增NcSRS2基因,将其插入原核表达质粒pGEX-4T-2中,重组质粒pGEX-4T-NcSRS2经测序确定后,转入表达菌株BL21,优化其表达条件,并探讨了GST-NcSRS2蛋白的生物活性。结果显示,在37℃条件下,经终浓度为0.5mmol/L的IPTG诱导表达4h后,获得融合蛋白。Western-blot分析表明该融合蛋白可与相应抗体发生特异性结合,rELISA检测与弓形虫和布鲁氏菌阳性血清无交叉反应。 展开更多
关键词 犬新孢子 新疆Nc-1 NCSRS2基因 原核表达
原文传递
长沙市122例输入性恶性疟原虫多药抗性基因1拷贝数变异分析
16
作者 田斌 廖瑜 +3 位作者 文岚 肖芳 张兵 申晓君 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CSCD 北大核心 2022年第1期127-131,共5页
为了解输入性恶性疟原虫多药抗性基因1 (Pfmdr1)拷贝数变异(CNV)情况,对长沙市2016—2019年输入的恶性疟患者滤纸干血斑样品中Pfmdr1与恶性疟原虫微管蛋白基因(Pftub)进行实时荧光定量PCR检测,以Pftub基因为参比基因,计算获得样品的Pfmd... 为了解输入性恶性疟原虫多药抗性基因1 (Pfmdr1)拷贝数变异(CNV)情况,对长沙市2016—2019年输入的恶性疟患者滤纸干血斑样品中Pfmdr1与恶性疟原虫微管蛋白基因(Pftub)进行实时荧光定量PCR检测,以Pftub基因为参比基因,计算获得样品的Pfmdr1 CNV值。采用SPSS 23.0统计学软件对检测结果和治疗信息进行统计分析。结果显示,122份血样中有18份发生Pfmdr1 CNV变异,变异率为14.8%(18/122)。2016—2019年血样Pfmdr1 CNV均值分别为1.020±0.076、 1.136±0.403、 1.387±0.657和1.142±0.349。变异血样输入地来源为赤道几内亚、安哥拉、贝宁、塞拉利昂、刚果民主共和国、尼日利亚、喀麦隆、加纳和刚果共和国。输入地为东非、西非和中非的患者血样Pfmdr1 CNV均值分别为0.999±0.073、 1.150±0.368和1.249±0.448。东非和西非、中非相比差异有统计学意义(t=2.663、 3.995,P <0.05)。变异血样的患者平均用药时长为(5.93±0.94) d,长于非变异血样患者的(3.21±1.23) d (t=8.930,P <0.01)。治疗结束后1个月变异血样的患者再燃2例,非变异血样的患者再燃1例(似然比χ^(2)=3.831,P <0.05)。治疗结束后1年变异血样的患者再燃2例,非变异血样的患者再燃1例(似然比χ^(2)=5.372,P <0.05)。血涂片中存在配子体的变异血样5例,非变异血样3例(似然比χ^(2)=10.599,P <0.01)。长沙市输入性恶性疟原虫存在Pfmdr1 CNV变异,变异会造成患者治疗时间延长和原虫不能完全清除。 展开更多
关键词 疟疾 恶性疟原 多药抗性基因1基因 拷贝数变异 抗性
原文传递
Study on the Activity of Herbal Extract to Kill Root-knot Nematode of Cucumber Seedlings Stage 被引量:4
17
作者 张敏 苏康宇 +3 位作者 刘晟 马永清 董书琦 宋吉青 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2010年第5期129-133,共5页
Present mature plants hydroponic technology was used,combined with some excellent characteristics,such as growth conditions was easy to control and process of root growth was easy to continuously observe,the nematicid... Present mature plants hydroponic technology was used,combined with some excellent characteristics,such as growth conditions was easy to control and process of root growth was easy to continuously observe,the nematicidal activity of 5 kinds of Chinese herbs extracts and the compound solution of Avermectin,with strong contact toxicity effect indoor,was systematically studied and investigated the affection on the root-knot nematode parasitized on the cucumber seeding stage. It is found that under the premise of no influence on root growth of cucumber,extracts from Picrorhiza scrophulariiflora and Punica granatum showed strong prevention and nematicidal activity,and had the similar efficacy of Avermectin; while the extracts from Cibotium barometz,Aucklandia lappa Decne and Fructus cnidii showed low nematicidal activity and various degrees inhibition effect on plant growth. 展开更多
关键词 chinese herbal extract Cucumber Hydroponics Root-knot nematode Nemeticidal activity
下载PDF
环形泰勒虫新疆喀什株抗布帕伐醌分析 被引量:2
18
作者 张志刚 赵帅阳 +7 位作者 曹天行 石苗 赵保才 关贵全 李有全 殷宏 罗建勋 刘军龙 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1341-1346,共6页
为了解我国是否存在环形泰勒虫耐受布帕伐醌虫株及导致对该药耐受的原因,使用布帕伐醌处理环形泰勒虫不同地方株转化的细胞TaDC(新疆喀什株)和TaNM1(内蒙古株),观察转化细胞的增殖速度、细胞内虫体情况、环形泰勒虫Ta SP基因转录及宿主... 为了解我国是否存在环形泰勒虫耐受布帕伐醌虫株及导致对该药耐受的原因,使用布帕伐醌处理环形泰勒虫不同地方株转化的细胞TaDC(新疆喀什株)和TaNM1(内蒙古株),观察转化细胞的增殖速度、细胞内虫体情况、环形泰勒虫Ta SP基因转录及宿主细胞的细胞周期,确定药物的处理效果并分析比对布帕伐醌靶基因Ta PIN1蛋白氨基酸序列。结果显示,与TaNM1细胞相比,TaDC细胞的增殖速度受布帕伐醌影响较小;环形泰勒虫Ta SP基因的转录水平与TaDC细胞空白对照组相比略低。细胞周期检测结果显示,TaDC细胞G0/G1、G2/M和S期细胞比例相对于对照组无显著差异。氨基酸序列分析发现,新疆喀什株TaPIN1存在5个氨基酸突变位点(V24I,P26A,T53A,K121E,G124E),与国外报道的耐布帕伐醌虫株的TaPIN1蛋白具有相似的突变位点。本研究证实环形泰勒虫新疆喀什株为布帕伐醌耐药虫株,并确定该虫株Ta PIN1基因的突变是其产生耐药性的主要原因。本研究结果为我国环形泰勒虫病临床治疗和药物应用提供了数据参考。 展开更多
关键词 环形泰勒 布帕伐醌 耐药 TaPIN1
原文传递
杀松材线虫活性菌株筛选及活性成分分析 被引量:7
19
作者 张壤心 梁英辉 +1 位作者 逯昕明 宋瑞清 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期157-163,共7页
在室内条件下,测定了3株淡紫拟青霉菌(Paecilomyces lilacinus)和4株厚垣孢普可尼亚菌(Pochonia chlamydosporia)发酵液及7种不同溶剂萃取物对松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)的毒杀活性,并通过柱层析和气质联用对活性菌株的高效... 在室内条件下,测定了3株淡紫拟青霉菌(Paecilomyces lilacinus)和4株厚垣孢普可尼亚菌(Pochonia chlamydosporia)发酵液及7种不同溶剂萃取物对松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)的毒杀活性,并通过柱层析和气质联用对活性菌株的高效萃取物进行了分离和分析。结果表明:淡紫拟青霉PT1菌株的发酵液对松材线虫的毒杀作用最强,处理72 h后松材线虫的校正死亡率高达88.37%。从7种有机溶剂萃取物中筛选出乙酸乙酯是PT1菌株活性成分较合适的萃取溶剂,浸渍法测定结果表明PT1菌株乙酸乙酯萃取物处理松材线虫24 h和48 h的LC_(50)分别为36.001μg/mL和25.317μg/mL。乙酸乙酯萃取物经柱层析后,得到活性组分YZ-4。用GC-MS分析YZ-4组分,共鉴定出4种化合物,分别为假石榴皮碱、棕榈酸、邻苯二甲酸苯基丁基酯和油酸。推测活性菌株PT1发酵产物有望研发出新型微生物源杀虫剂。 展开更多
关键词 淡紫拟青霉PT1 松材线 萃取物 活性成分 气质联用
原文传递
BALB/c和IFN-γ^-/-小鼠感染虎源弓形虫急性期组织损伤和抗原分布 被引量:1
20
作者 董辉 苏瑞景 +1 位作者 杨卫华 杨玉荣 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1153-1157,共5页
以BALB/c小鼠和IFN-γ^-/-小鼠为研究对象,应用病理组织学方法,H&E和IHC技术,观察研究TgTigerCHn2(Chinese1,ToxoDB#9)弓形虫感染后急性期死亡小鼠主要器官的组织细胞损伤和虫体分布特点。病理和组织学检查显示,106个TgTigerCHn2速... 以BALB/c小鼠和IFN-γ^-/-小鼠为研究对象,应用病理组织学方法,H&E和IHC技术,观察研究TgTigerCHn2(Chinese1,ToxoDB#9)弓形虫感染后急性期死亡小鼠主要器官的组织细胞损伤和虫体分布特点。病理和组织学检查显示,106个TgTigerCHn2速殖子腹腔感染的BALB/c和IFN-γ^-/-小鼠平均生存时间分别约为9.8 DPI(days post infection)和7.7 DPI(P<0.05)。BALB/c小鼠病理表现为脾脏和淋巴结淋巴细胞坏死,弓形虫虫体抗原弥散性分布;间质性肺炎;肝细胞空泡变性及坏死,淋巴细胞弥散性浸润;大脑可见严重的脑膜炎和血管袖套现象。IFN-γ^-/-小鼠主要表现为肝脏有坏死灶,脾脏和淋巴结实质细胞的坏死和减少。IHC显示,BALB/c小鼠大脑的虫体抗原显著多于IFN-γ^-/-小鼠(P<0.01)。结果表明,TgTigerCHn2感染BALB/c小鼠后,虫体主要分布在大脑、肝脏、脾脏、淋巴结和肺脏,而IFN-γ^-/-小鼠各器官表现为炎症反应较轻的坏死性病变。 展开更多
关键词 虎源弓形 chinese1虫株 组织损伤 抗原分布 BALB/c小鼠 IFN-γ^-/-小鼠
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部