流苏树种子霉变环境条件与致霉菌种类研究

流苏(Chionanthus retusus)种子在室内常温干燥贮藏和室温湿沙层积赤霉素处理湿沙催芽过程中极易发生霉变现象,基于高通量测序对引起流苏种子霉变的环境条件与主要致霉菌种进行了初步研究。结果表明,流苏种子在日均温14.2℃、相对湿度为67.00%的环境中极易发生霉变。室内常温干燥贮藏过程中发生霉变会导致流苏种子生活力从正常状况下的81.82%降为44.00%。室内常温贮藏的霉变种子中共鉴定出40种致霉菌,其中帚状曲霉(Aspergillus penicillioides)和脂节担菌(Wallemia sebi)的丰度最高,分别为33.93%、31.20%;室温湿沙层积赤霉素处理湿沙催芽霉变种子中共鉴定出13种致霉菌,其中茄病镰刀菌(Fusarium solani)丰度最高为97.30%。结果提示,流苏种子在常规贮藏和催芽过程中应严格控菌、杀菌以保持种子活力和发芽率。

古流苏树根接繁育技术

研究采用流苏树(Chionanthus retusus)2年生播种苗根段作为砧木,以不同种源地的古流苏树1年生枝条作为接穗,采用劈接法进行嫁接,将流苏树嫁接成活率提高至95.9%~98.2%,远高于传统干接成活率,说明根系作为砧木与流苏树接穗的亲和力更强,更易于成活;根接还有效避免了传统干接砧木萌蘖多的问题,管理简便且有利于保持古流苏树种质资源的纯净,不失为一种全新的古流苏树种质资源保存繁育方式。

流苏树根尖染色体制片技术优化及核型分析

本研究以流苏树(Chionanthus retusus)种子的初生根尖为材料,从取材时间、预处理试剂、预处理时间以及解离方法等条件对常规染色体压片技术进行改进与优化,以获得流苏树核型分析的清晰制片。结果表明,取材时间为9:30~10:00 am时根尖中期细胞最多,约占20%~25%;对二氯苯、0.002 mol/L 8-羟基喹啉溶液、对二氯苯与8-羟基喹啉混合液以及冰水混合物四种不同预处理试剂均可获得形态清晰、分散良好的适用于核型分析的清晰制片,其中对二氯苯的最适预处理时间为1 h,0.002 mol/L 8-羟基喹啉和对二氯苯与8-羟基喹啉混合液的最适预处理时间均为6 h,冰水混合物的最适预处理时间为6 h;解离的最适方法为:先用0.075 mol/L KCl溶液前低渗20 min,接着蒸馏水冲洗后放入1 mol/L HCl溶液中60℃处理10 min。流苏树染色体核型公式为2n=2x=46=40m+6sm,流苏树染色体为2B型,核型不对称系数As·K%为57.18%,染色体相对长度组成为2n=7L+14M2+19M1+6S。

流苏树属SSR-PCR反应体系的建立与优化

本研究先采用单因素试验确定5个影响因素的浓度区域,然后进一步进行正交试验筛选各因素最优水平,通过两种实验方法相结合,优化、建立流苏树属(Chionanthus)SSR-PCR反应体系,最后检测其稳定性。研究结果表明,优化后的20μL流苏树属SSR-PCR反应体系为:10×Buffer 2μL,DNA模板2.0 ng/μL,Mg2+2.5 mmol/L,Taq酶2.5 U,dNTPs 250μmol/L,引物0.3μmol/L(正反引物各0.15μmol/L),ddH2O补足。用4份材料对反应体系进行验证均可得到多态性丰富、清晰稳定的条带,证明该反应条件可用于流苏树属的遗传多样性分析,可为流苏树属的遗传多样性研究、遗传变异分析、亲缘关系探讨及种质资源的科学保护奠定坚实的基础提供基础数据。

流苏树桩景的制作与创新

本研究是通过对流苏树(Chionanthus retusus Lindl.et Paxt.)开展嫁接成活试验,选出最佳嫁接技术与方法,为快速制作流苏树树桩盆景提供了技术指导。结果显示,采用插皮、嵌合、叠加、打孔嫁接技术,使得流苏树枝干成活率达到80%~90%之间。运用接根技术将流苏树幼苗的根系直接嫁接到大树上,采用这种方法,大树的移栽成活率在95%以上,移栽后第2年就能恢复生长。该研究对流苏树种质资源的保存及利用具有重要意义。

流苏树繁育与引种技术

以流苏树(Chionanthus retusus Lindl.etPaxt.)种子为材料,对其进行不同方法的催芽试验。结果表明:1)流苏种子为双休眠性状,种子具有胚根和胚轴双休眠的习性,即胚根需要经过1~2月或更长时间的20~30℃高温阶段才能打破休眠,而胚轴需要3~5℃低温1~3月才能解除休眠。2)流苏种子在高温15~26℃,低温-2~10℃催芽后发芽率高。