钟冠唇柱苣苔组织培养研究

为了筛选出适合钟冠唇柱苣苔[Chirita swinglei(Merr.)W.T.Wang]不定芽诱导、分化和生根的培养体系,以其嫩叶为材料,在不同培养条件下进行了组织培养研究。结果表明,用体积分数为75%的乙醇灭菌20 s,再用1 g/L HgCl2浸泡7 min为最佳的外植体灭菌方法;MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L为不定芽诱导的最适培养基;MS+6-BA 0.3 mg/L+NAA 0.1 mg/L为不定芽分化的最适培养基;1/2MS+NAA 0.1 mg/L+活性炭1 g/L为最适的生根培养基。

三苞唇柱苣苔离体培养体系的建立

以三苞唇柱苣苔(Chirita tribracteata W.T.Wang)的幼嫩叶片为外植体,开展外植体消毒灭菌、叶片愈伤组织的诱导及分化、继代增殖培养、生根培养以及植株玻璃化的研究。结果表明:叶片的灭菌方法可采用乙醇浸泡10 s结合升汞浸泡12~16 s;叶片的最佳愈伤组织诱导、分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;继代增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1~0.5 mg/L或者MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1~0.5 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.1~0.3 mg/L,生根率为100.00%;培养基中不添加6-BA或添加低浓度的6-BA或者添加适量活性炭均可减轻植株的玻璃化。

条叶唇柱苣苔组织培养研究

以条叶唇柱苣苔(Chirita ophiopogoides D Fang et W T Wang)的幼嫩叶片、种子为外植体,以MS为基本培养基,建立了条叶唇柱苣苔的组织培养和再生体系。试验结果表明:条叶唇柱苣苔叶片诱导不定芽的最佳培养基为MS+2,4-D0.5 mg/L+IAA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L,丛生芽分化的最佳培养基为MS+KT 1.0 mg/L+IAA 3.0 mg/L+NAA 0.5mg/L;MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.5 mg/L的培养基最适合继代,MS+IBA 2.0 mg/L+AC 0.5 mg/L培养基的生根效果最好,平均根长为4.67 cm,生根率达100%。

桂林唇柱苣苔传粉生物学及生殖配置研究

对桂林唇柱苣苔在不同生境下(YZ居群,半野生,林下裸露岩石上;DB居群,洞穴岩石上)的生殖生态学进行了比较研究。结果表明:(1)桂林唇柱苣苔的花期为2月下旬至4月中旬,受环境因素的影响,单花期在DB居群(16～24d)明显长于YZ居群(10～17d);(2)两个居群的P/O比差异显著,花粉量比胚珠量有更明显的变化,这可能与其生境有关;(3)桂林唇柱苣苔属于兼性异交系统,不存在无融合生殖现象;(4)传粉和种子后熟阶段均存在限制,致使各种处理的结实率均处在较低的水平(<45%);(5)白颊尤垫蜂与小蜂类(DB居群)或蜜蜂(YZ居群)为桂林唇柱苣苔较为稳定的传粉者;(6)桂林唇柱苣苔植株个体越大,花期繁殖投入就越高,繁殖分配越低;(7)与DB居群相比,YZ居群可利用资源较为丰富、植株生物量较大,因此其花期投入繁殖也较高,而DB居群将更多的资源分配给营养器官,从而提高了对资源获取能力。

药用唇柱苣苔叶片分化及植株再生研究

目的:建立濒危药用植物药用唇柱苣苔叶片分化及植株再生体系。方法:以药用唇柱苣苔(Chirita medica D.Fangex W.T.Wang)叶片为外植体,灭菌后接种到附加不同激素配比的培养基中培养,筛选各阶段合适的培养基。结果:不定芽诱导的最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,pH=6.0,诱导率为100%;最佳继代增殖培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,pH 6.0,增殖系数为12.6/30 d;最适合的生根培养基为1/2 MS+0.2 mg/L NAA,pH=6.0,生根率高达100%,移栽成活率为95.0%。结论:本繁殖体系可在短时间内提供大量种苗,并为种质资源的保护和可持续利用提供技术指导。

大苞短毛唇柱苣苔离体培养和快速繁殖

为了探索大苞短毛唇柱苣苔离体培养和快速繁殖的最佳培养条件。以大苞短毛唇柱苣苔叶片为外植体,建立其组培快繁再生体系。结果表明大苞短毛唇柱苣苔叶片外植体的最优消毒方法为:采用75%酒精灭菌15 s,0.1%Hg Cl2灭菌4 min;叶片诱导不定芽最佳培养基为:MS+TDZ0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L,诱导率为83.75%;不定芽增殖最佳培养基为MS+6-BA0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L,增殖系数可达16,且不定芽生长良好;生根培养基以1/2MS+IBA0.1 mg/L为最好,生根率达96.67%以上。组培苗经炼苗及移栽,成活率达95%以上。建立了大苞短毛唇柱叶片组织培养的快繁体系,为规模化生产大苞短毛唇柱苣苔提供技术指导。