赤芍承气汤对急性肝衰竭大鼠肝细胞凋亡的影响

目的:观察赤芍承气汤对内毒素脂多糖(LPS)致急性肝衰竭大鼠肝细胞凋亡的影响。方法:以内毒素(LPS)+D-氨基半乳糖(D-GalN)联合制备大鼠急性肝衰竭模型,模型组用生理盐水、治疗组用复方中药赤芍承气汤分别灌胃,4天后开腹取鼠肝组织作病理检查,以HE染色观察大鼠肝组织病理学变化;以免疫组化法(SP法)检测Fas、FasL蛋白在大鼠肝组织中的表达情况,并观察赤芍承气汤对肝细胞凋亡的影响。结果:LPS+D-GalN可引起严重的急性肝坏死并有广泛的肝细胞凋亡,伴Fas、FasL蛋白在肝细胞中强烈表达,肝细胞Fas/FasL阳性率,模型组为83％∶92％,中药组为53％∶50％,经统计学分析,P<0.01;其阳性表达率随肝细胞坏死程度加重而增加。结论:赤芍承气汤可减轻肝细胞Fas/FasL的表达,抵抗内毒素诱发的肝细胞凋亡。

解毒化瘀Ⅱ方对急性肝衰竭大鼠肝细胞Bcl-2及细胞色素C表达的影响

目的通过观察解毒化瘀Ⅱ方对急性肝衰竭大鼠肝线粒体Bcl-2、细胞色素C表达的影响,探讨其抗肝衰竭的作用机制。方法以硫代乙酰胺(TAA)皮下注射复制急性肝衰竭大鼠模型,SPF级Wistar大鼠84只,随机分为空白组,模型组,解毒化瘀Ⅱ方低、中、高剂量组,安宫牛黄丸组,乳果糖组;造模前3d开始灌胃给药,共给药5.5d;采用WesternBlot法检测各组大鼠肝细胞线粒体Bcl-2表达及细胞色素C在肝线粒体和细胞质中的表达情况。结果与空白组比较,模型组大鼠肝线粒体内Bcl-2表达强度显著降低,细胞色素C在细胞质中的表达增强,在线粒体中的表达减弱;解毒化瘀Ⅱ方能提高急性肝衰竭大鼠肝线粒体内Bcl-2的表达,抑制细胞色素C从肝线粒体释放到细胞质中,并呈现剂量-效应关系。结论解毒化瘀Ⅱ方对暴发性肝衰竭大鼠肝细胞的保护作用机制有可能是通过增强肝细胞线粒体Bcl-2表达,抑制肝线粒体膜通透性转换孔开放,阻止细胞色素C释放到细胞质,抑制肝细胞凋亡的发生。

赤芍承气汤对急性肝衰竭大鼠保护作用的实验研究

目的:探讨赤芍承气汤对内毒素脂多糖(LPS)致急性肝衰竭大鼠的保护作用。方法:以内毒素(LPS)加 D-氨基半乳糖(D-GalN)联合制备大鼠急性肝衰竭合并内毒素血症模型,以促肝细胞生成素颗粒剂(促肝康)和赤芍承气汤对模型动物进行治疗,观察血清 ALT、AST、TBIl 及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、内毒素(ET)的变化;常规 HE 染色,观察大鼠肝组织病理学改变;以免疫组化法检测 Fas、FasL 蛋白在大鼠肝组织中的表达情况,观察赤芍承气汤对肝细胞凋亡的作用。结果:LPS 加 D-GalN 可引起严重的急性肝坏死并有广泛的肝细胞凋亡。模型组 ALT、AST、TNF-α、ET 均显著升高,伴 Fas、FasL 蛋白在肝细胞中表达增强;中药组 ALT 及以上各指标的水平均较模型组明显降低(P<0.05),中药组大鼠肝坏死程度也较模型组明显减轻,肝细胞 Fas、FasL 阳性率,模型组为83%、92%,中药组为53%、50%,经统计学分析,差异有显著性(P<0.01)。促肝康可明显降低血清 ALT、AST,减轻肝组织病理损害。结论:赤芍承气汤能降低 ET、TNF-α的生成和释放,它和促肝康均具有良好的保护肝细胞、抗肝衰竭的作用;赤芍承气汤可减轻肝细胞 Fas/FasL 的表达,抵抗内毒素诱发的肝细胞凋亡。

大承气汤对急性肝衰竭大鼠肝组织Smac、细胞色素C及Caspase-3表达的影响

目的:研究大承气汤对急性肝衰竭大鼠肝组织Smac、细胞色素C及Caspase-3表达的影响。方法:40只大鼠随机分为4组,分为正常对照组,模型组,大承气汤低、高剂量治疗组,每组各10只。大承气汤高、低剂量组大鼠于造模前2d分别灌胃不同剂量大承气汤2m L,其他组予同等剂量0.9%氯化钠溶液灌胃,继而模型、大承气汤高、低剂量组大鼠均采用皮下注射硫代乙酰胺完成急性肝衰竭动物模型,造模完成后继续予药物灌胃3d。处死所有大鼠,行细胞色素C含量测定,肝脏组织细胞凋亡检测,肝脏病理学检测,应用实时荧光定量PCR进行肝组织Smac mRNA表达检测,应用免疫组化方法检测Caspase-3的表达。结果:硫代乙酰胺可引起急性肝衰竭并有广泛的肝细胞凋亡,与模型组比较,大承气汤各剂量组肝组织衰竭减轻,肝细胞凋亡率降低(P<0.05,P<0.01),细胞色素C含量显著下降(P<0.01),Caspase-3在肝细胞中的表达显著降低(P<0.05,P<0.01),肝组织Smac mRNA表达显著降低(P<0.05)。结论:大承气汤可防治肝细胞凋亡,其作用机制可能通过抑制Smac基因、细胞色素C及Caspase-3表达,进而影响了线粒体相关因素介导的细胞凋亡调控通路,从而保护肝脏细胞,抑制肝衰竭。