球孢白僵菌胞外壳聚糖酶的纯化和性质

球孢白僵菌Beauveria bassiana 1316-V1的培养上清液经硫酸铵分级沉淀，SephadexG-75凝胶过滤，Chitosan-bead亲和层析，第二次SephadexG-75凝胶过滤，得到电泳纯的一种胞外壳聚糖酶，比活力达到45u/mg。此酶的分子量为36kD；最适酶反应温度为60℃；最适pH为4.0；最适离子强度为0.25mol/LNaCl;37℃以下，pH2.0-5.0之间稳定性好；Cu^2+,Hg^2+,Pb^2+,Ni^2+对该酶有强烈抑制作用；Ag^+,Mn^2+也有较强抑制作用；Fe^2+有轻微激活作用，该壳聚糖酶是一种糖蛋白，含糖约为12.6%。酶的最适底物为脱乙酰度为90%的胶体壳聚糖；也能轻微水解CMC、DEAE-Cellulose和胶体几丁质；但不能水解片状的壳聚糖和几丁质。