一种基于新型发光法的中枢神经特异性蛋白S100β检测试剂盒的性能评估

目的:对基于新型发光法的Pylon中枢神经特异性蛋白S100β检测试剂的性能进行评估。方法:依据美国临床和实验室标准委员会相关文件方案对S100β检测试剂盒的分析性能,包括精密度、线性范围、抗干扰能力、正常人群参考区间等性能进行评估,并与电化学发光法ElecsysS100β检测进行方法学比对。比较不同疾病与健康人群的S100β水平,以评估该方法的临床应用价值。结果:PylonS100β检测在低浓度(平均值0.250μg/L)重复性精密度和实验室内总不精密度均为6.30%,在高浓度(平均值2.96μg/L)重复性精密度和实验室内总不精密度分别为6.48%、6.53%。该方法在0.05~36.9μg/L之间呈线性。干扰物质(甘油三酯≤15mg/mL、血红蛋白≤10mg/mL、生物素≤50ng/mL、胆红素≤0.4mg/mL)对PylonS100β检测结果无影响。PylonS100β检测厂家说明书申明的参考区间(<0.105μg/L)适合本实验室检测人群。40例样本同时进行PylonS100β检测与罗氏电化学发光法检测,结果表明两种检测方法结果一致性良好。在体外循环心脏手术后、ICU昏迷、脑卒中、轻度和重度创伤性脑损伤患者的S100β显著升高(P<0.001)。结论:PylonS100β检测具有良好的精密度、线性范围、抗干扰能力,其与罗氏电化学发光法S100检测结果一致性好,符合于临床分析的要求,并且S100β在多种脑损伤相关疾病中显示出潜在的临床应用价值。

调神解郁针法结合康复训练治疗卒中后抑郁的疗效及对S100β、5-HT的影响

探究调神解郁针法结合康复训练治疗脑卒中后抑郁(PSD)的疗效及对S100钙结合蛋白β(S100β)、5-羟色胺(5-HT)的影响。方法 随机将海南省中医院2021年11月-2023年3月接收的PSD患者60例分为两组,各30例。将实施基础治疗的患者纳入对照组,将实施基础治疗+调神解郁针法+康复训练的患者纳入观察组。比较两组治疗效果。结果 治疗4周,观察组总有效率较对照组高(P<0.05)。两组治疗4周汉密尔顿抑郁量表24项(HAMD-24)评分、血清S100β降低,观察组较低,改良Barthel指数(ADL)评分、5-HT升高,观察组较高(P<0.05)。结论 调神解郁针法结合康复训练治疗PSD效果显著,可改善其血清S100β及5-HT水平,减轻其抑郁症状,提高日常生活能力。

纳米金刚石膜/{100}晶面多晶金刚石膜台阶法快速生长研究

通过高功率微波等离子体化学气相沉积(MPCVD)以及台阶式基底排列方法,可以在一次沉积过程中同时沉积纳米晶粒及<100>取向的{100}面多晶金刚石薄膜。详细比较在同一次沉积中同时制备的多种不同类别的金刚石产物的生长速率。采用台阶法并添加少量空气,微波功率从2.0k W增加至3.2 kW,在下面大硅片上生长的纳米金刚石膜的平均生长速率可从0.3μm/h增大到3.0μm/h;而在上面小硅片上生长的纳米金刚石膜的平均生长速率从3.8μm/h也增加到11.2μm/h,同时产物也转变为{100}晶面的多晶膜。另外,在上面小硅片上生长的金刚石膜的边角效应明显,在边界生长的金刚石产物的生长速率更高,从17.0μm/h增大到27.1μm/h。该结果表明少量氮气和氧气同时添加对金刚石生长的形貌多样性调节作用和对生长速率的提升作用强烈依赖于生长条件。

微量DNA提取工作站与Chelex-100法提取指纹脱落细胞DNA效果比较

比较Chelex-100法或自动化工作站提取法对脱落细胞提取DNA的效果。方法 选取3名志愿者制作脱落细胞,用两步擦拭法分别提取脱落细胞检材,使用博坤24道全自动DNA提取工作站和Chelex-100方法分别提取模板DNA,用VeriFilerTM Plus试剂盒进行PCR扩增,扩增产物应用3500型全自动荧光分析仪进行检测、分析,并对分析结果进行比较。结果 两种方法提取的DNA模板经过分型分析,均出现了不同程度的丢峰现象,Chelex-100法的STR基因座检出数平均数为15.3,博坤24道全自动DNA提取工作站检出的STR基因座平均数为19.5。结论 本实验中博坤24道全自动DNA提取工作站提取的脱落细胞DNA检出率高于Chelex-100法。

晶体相场法研究小角晶界<100>位错芯的扩展演化

位错扩展对材料的性能有重要影响。本文应用晶体相场(PFC)法模拟体心立方(BCC)晶体的双晶晶界在施加双轴应变下,晶界的<100>位错芯的扩展现象。研究发现,晶界的<100>位错芯区域出现空位,从而给位错芯的扩展提供了条件。研究表明:随着应变量的增加,<100>位错发生分解反应,位错芯从单个刃位错分解成两个混合位错,然后,两个相邻的位错芯扩展成一个整体。这个大位错芯里包括4个柏氏矢量不同的1/2<111>位错,晶界的<100>位错的分解反应与这个1/2<111>位错相关,应变场分析表明<100>位错芯扩展时出现应变集中。

Chelex-100法提取滤纸血痕DNA影响因素的比较

目的改进滤纸血痕DNA提取方法,建立更简便、廉价,适合当前DNA建库需要的提取方法。方法将752份滤纸血痕分成四组,分别按照四种不同的Chelex-100法进行DNA提取并进行比较研究;63份新鲜血痕分别按照两种方法提取并进行对比研究。结果对于陈旧滤纸血痕,四种提取方法的检测成功率无显著差异(P>0.05);对于新鲜血痕,两种提取方法的检测成功率有显著差异(P<0.05)。结论对于建库陈旧滤纸血痕样本的DNA提取可采用不加纯水处理,直接加入Chelex-100的方法进行。

一种适用于梅花鹿源性产品鉴定的微量组织DNA提取方法的建立

为建立一种适宜梅花鹿源性产品分子鉴定的高效、便捷微量组织基因组DNA提取的方法。本研究分别以鲜品梅花鹿茸、风干梅花鹿茸、烘干梅花鹿茸、鲜品梅花鹿鞭、烘干梅花鹿鞭、风干梅花鹿鞭、鲜品梅花鹿肉、干品梅花鹿尾、梅花鹿血为样本,采用Chelex-100树脂溶液和蛋白酶K结合的方法提取基因组DNA,并检测其浓度与纯度;以此DNA为模板,扩增梅花鹿线粒体DNA的Dloop区特异性基因,并对PCR扩增产物进行琼脂糖核酸电泳及测序。结果表明,基于Chelex-100树脂提取法获得的基因组DNA模板浓度为52.57~63.39 ng/μL,A260/A280比值为1.75~1.96;梅花鹿线粒体特异性基因扩增产物电泳条带清晰,且长度准确;扩增产物测序,相似性大于95%。Chelex-100树脂提取法能够提取微量梅花鹿组织样本基因组DNA,且此方法低价、简便,适用于梅花鹿源性产品的真伪鉴定。

A-100钢晶粒显示方法研究

【目的】研究建立一套快速稳定的A-100(23Co14Ni12Cr3MoE)超高强度钢晶粒清晰显示方法。【方法】采用化学浸蚀法、氧化法和电解法腐蚀A-100钢的晶粒,并利用金相显微镜观察该钢种的晶界是否显示清晰,通过改变浸蚀溶液、温度、时间、电解参数等方法调整晶粒显示效果。【结果】化学浸蚀法和电解法每次需要摸索不同的腐蚀条件,晶界显示效果不稳定,A-100钢晶粒显示最有效稳定的方式是氧化法。【结论】结合A-100钢的标准热处理制度选择885℃热氧化可获得准确清晰的晶界。

S100B时间分辨荧光免疫检测试剂盒的制备及性能评价

目的:制备一种快捷、准确、定量检测血清中S100B蛋白浓度的时间分辨荧光免疫检测试剂盒,并对其进行性能评价。方法:使用时间分辨荧光微球标记的抗S100B多克隆抗体及兔IgG抗体、标记垫、样品垫、S100B硝酸纤维素膜板、吸水纸制备试纸条,组装卡壳得到S100B时间分辨荧光免疫层析试剂盒。通过标准曲线、准确度、最低检测限、线性区间、特异度、重复性、稳定性等检测对该试剂盒进行性能评估。采用该试剂盒对某地区199例健康者血清及血浆样本的参考区间进行研究,并采用同步盲法测试该试剂盒与罗氏Elecsys S100检测试剂盒的临床应用性能,评估2种试剂盒对于142例样本检测结果的一致性。结果:该试剂盒所得标准曲线方程为y=(1.13302+1.75224)/[1+(x/1.08220)×(-0.60352)]-1.75224,R2=0.99908,线性范围为[0.05,30]ng/mL。该试剂盒可满足准确度相对偏差在±15%内、最低检测限≤0.05 ng/mL、特异度相对偏差在±15%内、批内差和批间差的变异系数均<15%的产品设计要求。稳定性检测结果标明该试剂盒可在2~30℃条件下有效保存12个月。同时,通过该试剂盒测得血清及血浆样本参考区间均<0.3 ng/mL。临床验证结果表明该试剂盒与罗氏Elecsys S100检测试剂盒的测定结果具有高度一致性(Kappa=0.9061>0.80),符合标准。结论:该试剂盒可快捷、准确、定量检测血清中S100B蛋白浓度,为神经类疾病、自身免疫病性疾病、脑血管疾病等的诊断与治疗提供了参考。

100米烟囱塔架吊装技术

中石化洛阳分公司油品质量升级工程硫黄回收装置烟囱高度为100 m,质量160 t,烟囱塔架为三棱体不等截面柔性结构,整体吊装难度极大。介绍了利用双吊车抬吊滑移法进行整体吊装的施工过程,并以此供业内施工借鉴。

改良Chelex-100法和CTAB法用于转基因抗草甘膦大豆检测效果的比较

以转基因抗草甘膦大豆为研究材料,分别采用改良Chelex-100法和常规CTAB法提取基因组DNA,以提取DNA的浓度和纯度,同时以PCR扩增大豆的内源基因(lectin)及外源特异性序列(CaMV35S,nos,Cp4-epsps)的效果对两种方法进行比较和评价。结果表明:虽然改良Chelex-100法DNA提取纯度不高,但是提取效率与常规CTAB法相当,而且改良Chelex-100法能够快速在1 h之内从大豆中提取DNA,所提取的DNA可以直接用于PCR扩增反应,PCR扩增产物电泳条带清晰。因此,改良Chelex-100法可以替代CTAB法提取DNA用于转基因检测,该方法具有经济、简便、快速的特点。

改良Chelex-100法快速提取转基因农产品DNA

旨在建立一种从转基因农产品中快速提取DNA的方法。分别采用改良Chelex-100法和常规CTAB法提取转基因大豆GTS40-3-2基因组DNA,测其浓度和纯度,PCR扩增其内源基因(Lectin)、启动子(CaMV35S)和品系特异性序列,对两种方法进行比较和评价,并研究两种方法提取的DNA在-20℃下保存一个月内的检测效果,以及改良Chelex-100法在玉米、小麦和水稻等其他转基因农产品的应用效果。结果表明,改良Chelex-100法能够快速在1.5 h之内从样品中提取DNA,所提取的DNA直接用于PCR扩增反应,产物电泳条带清晰明亮。两种方法提取的DNA在-20℃下保存一个月内的检测效果未见明显差别。该方法在玉米、小麦和水稻等转基因农产品的应用效果稳定。因此,改良Chelex-100法提取的DNA可以作为PCR扩增模板用于转基因农产品检测。该方法具有经济、简便、快速、安全的特点,适合转基因农产品大规模筛选和鉴别。

基于响应曲面法的Aermet100磨削力预测模型研究

为了优化超高强度钢Aermet100磨削参数,采用响应曲面实验法,对Aermet100平面磨削力展开了预测模型研究,建立了磨削力的全系数项回归预测模型;采用显著性检验方法,对磨削力预测模型的显著项和不显著项进行了分析,去除了不显著项,对磨削力预测模型进行了简化;基于所建模型,分析了磨削参数对磨削力的影响规律。结果表明:简化的磨削力预测模型误差小,可对磨削力进行有效预测;磨削深度ap与工件速度vw、砂轮速度vs的交互作用对磨削力影响显著;磨削力随着工件速度vw、磨削深度ap的增加而增加,随着砂轮速度vs的增加而降低。

Triton X-100快速提取甲醛固定、石蜡包埋组织内DNA的方法

目的建立一种快速提取甲醛固定、石蜡包埋组织内DNA的方法。方法利用TritonX-100一步提取甲醛固定、石蜡包埋组织内DNA,并具体研究了不同浓度TritonX-100对提取后DNA-STR分型效果的影响。结果成功地一步提取出甲醛固定、石蜡包埋组织内DNA,浓度为1%的TritonX-100提取效果较好。结论利用TritonX-100提取甲醛固定、石蜡包埋组织内的DNA,为快速提取DNA提供了有效的途径,是法科学领域中一种值得推荐的方法。

火焰原子吸收法间接测定曲通－100

本文研究了曲通－１００与硫氰络镉形成缔合物，被萃入二甲苯内，用火焰原子吸收法测定二甲苯层中镉的吸光度，间接测出曲通－１００的含量。介质的ｐＨ为５．０，线性范围为０．１０～１．００μｇ／ｍｌ．

用Chelex100法及有机溶剂提取法联合提取DNA扩增STR基因座的比较研究

为了比较不同方法提取DNA扩增STR基因座的成功率 ,本文用Chelex10 0法及Chelex10 0法联合有机溶剂提取法分别提取性犯罪案件 6份血斑及 6份混合斑中精子DNA ,并用PE公司ProfilerPlus系统复合扩增 ,ABI 310型基因分型仪检测。结果表明 ,常规采用Chelex10 0法提取血斑及精斑等生物检材DNA作STR基因座检验失败或所检测的位点较少时 ,应对Chelex10 0法提取的DNA上清液再用有机溶剂提取法提取 ,可极大提高DNA检验成功率。采用本文建立的Chelex10 0法联合有机溶剂提取法 ,提高了PCR扩增阳性率 ,对实际检案很有帮助 ;在PCR扩增前应常规进行DNA定量检验 ,否则对于重要检材应进行梯度扩增。

Chelex100法和有机法联合应用检验微量精斑DNA

某日一女学生(16岁)在放学回家途中被犯罪分子强奸.现场提取卫生纸1份,在其边缘部位留有少许擦拭状斑迹,据受害人回忆,这是案发时犯罪分子曾用过并弃下的.

Chelex-100法从颊粘膜拭子提取DNA进行基因型分析的研究

目的 :探讨采用Chelex 10 0法从颊粘膜拭子提取DNA这一方法的有效性和可靠性。 方法 :用棉签刮取 130例个体口腔颊粘膜脱落细胞 ,采用Chelex 10 0法从颊粘膜拭子中提取DNA ,采用SSP PCR及PCR PFLP法对其进行检测 ,观察结果的有效性和可靠性。 结果 :所有样本中都获得成功。电泳结果显示 ,PCR扩增及酶切的靶带清晰 ,无非特异性杂带 ,扩增结果重复性好。 结论 :采用Chelex 10 0法从颊粘膜拭子提取DNA ,方法稳定可靠 ,可以用于基因型检测。

Chelex-100法提取甘薯小象甲DNA及云南地区甘薯小象甲的分子鉴定

甘薯小象甲是国内外重要的检疫性害虫,除本身为害薯块外,引起的伤口还会诱致病菌侵入,使受害薯块发生恶臭和苦味无法食用。准确鉴定云南地区的甘薯小象甲,特别是研究其遗传变异可为检疫提供依据。本研究采集了云南元谋县甘薯小象甲,采用Chelex-100法快速提取甘薯小象甲基因组DNA,分别对雌雄成虫rDNA ITS-1序列进行系统发育分析,首次发现云南元谋县的甘薯小象甲属于东亚分支的东南亚亚支,与我国之前报道的甘薯小象甲属于东亚分支的东北亚亚支不同,说明云南元谋县的甘薯小象甲种群来源与中国广东、福建、浙江和重庆的种群来源不同。

发电机断路器T100a试验方法比对研究及试验实施

发电机断路器作为发电厂的一个关键设备,投入使用前对其进行标准的型式试验考核非常重要,由于其特殊的工况,标准规定的试验方法也比较特殊。其中T100a试验是发电机断路器最关键、也最难通过的试验项目之一,目前国内发电机断路器制造厂家试验一般依据国家标准GB/T 14824—2008《高压交流发电机断路器》,新的IEC 62271-37-013《交流发电机断路器》标准也即将颁布,其中对于T100a(非对称电流开断能力)试验的规定与国家标准GB/T 14824—2008《高压交流发电机断路器》不同。文中针对两套标准T100a试验方法的不同点进行了对比研究,认为IEC 62271-37-013标准的规定相对来说与实际运行工况更具等价性,并按IEC 62271-37-013标准的要求,结合西高院的现实条件,采用并机合成试验法对24 kV、160 kA发电机断路器实施了T100a试验。