中药及其制剂辐照灭菌技术应用现状分析

制药卫生是药品生产质量管理规范(GMP)的一项重要内容,也是药品生产最基本的要求之一。药品生产过程中涉及到人、机、料、环等因素均是微生物污染的来源,而微生物的污染和滋生会严重影响中药及其制剂的质量和临床疗效。因此,针对污染源选择适宜的灭菌方式关系到临床用药的有效性和安全性。辐照灭菌技术具有快捷、彻底、绿色环保、无污染、无残留、节能的特点,该技术已广泛应用于药品、医疗器械、食品等领域。文章主要对辐照灭菌技术的原理、特点、应用现状、工艺存在的问题、研究方向与思路进行了全面分析,期望能为辐照灭菌技术合理地应用于中药科研与生产提供参考。

抗生素类药品无菌检查方法研究进展

无菌检查法是无菌药品检查的法定检验方法,其中薄膜过滤法因易操作、风险低和准确度高等优点比直接接种法应用更广泛。无菌药品剂型种类繁多,其中抗生素类药品因品种结构多变、抑菌性强和抗菌谱广等因素,一直以来是建立无菌检查方法的难点。本文就薄膜过滤法中的溶解、过滤、冲洗和培养等4个关键步骤展开讨论,通过对已建立的13类47个品种共61个抗生素药品无菌检查方法的综述,探讨建立无菌检查方法的基本策略,并对无菌检查方法和结果的局限性进行讨论,以期为建立抗生素类无菌药品无菌检查方法及正确认识无菌检查结果提供思路和参考。

氯霉素和土霉素可视化适配体检测试纸研究与制备

为实现多抗生素的便捷、可视化检测,本文以核酸适配体作为分子识别元件,采用ISM技术进行定向进化,利用碳点纳米材料作换能器,采用链置换信号传导技术和表面临近杂交信号的输出策略,研制出了氯霉素和土霉素可视化检测试纸。结果显示,氯霉素和土霉素可视化适配体检测试纸是一种signal-on比色型传感器,检测带的亮度与靶标的浓度正相关。经液质联用法确证,该检测试纸的灵敏度为:土霉素≥24.6μg/L,氯霉素>10.26μg/L。实验结果证明该检测试纸具有经济、快捷、高特异性的优点,有望为政府部门的抗生素风险评估、滥用监管和基层用户的质量控制提供技术支撑。

无菌检查中污染微生物多样性分析及数据偏差调查

目的对无菌检查中污染微生物进行多样性分析及数据偏差调查。方法以曲安奈德注射液为例,按2020年版《中国药典》方法进行无菌检查,对污染微生物分离纯化后进行生化鉴定及基于16SrRNA的微生物多样性分析,与实验环境中的环境菌库进行比较并溯源,同时进行微生物数据检查偏差数据调查(MDD)。结果样品中检出表皮葡萄球菌、克式柠檬酸杆菌、唾液链球菌,且均在试验环境菌库39株环境菌中。MDD结果表明,样品中污染的微生物是由操作人员未完全按无菌隔离器使用的标准操作规程进行规范操作而导致的。即样品中污染的微生物来源于环境,而非样品本身,试验结果无效,应重试。结论对无菌检查中污染微生物进行溯源及数据偏差调查,可确认其阳性结果的准确性。

无菌鼠细菌检测方法的选择与探讨

目的 比较培养法、革兰染色镜检法和16S rRNA PCR方法对无菌小鼠粪便样品细菌检测的检测性能,为无菌鼠细菌检测方法的选择提供依据。方法 利用培养法、革兰染色镜检法、16S rRNA PCR方法,分别检测GF小鼠粪便、SPF小鼠粪便以及已知含菌量的测试样品(无菌小鼠粪便与金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌混合,人为制作而成),验证3种方法对无菌小鼠粪便中细菌的检测限度;并同时使用3种方法检测临床样品,对比3种检测方法的优缺点,分析3种方法在实际检测中的可行性。结果 培养法、革兰染色镜检法和16S rRNA PCR方法检测灵敏度分别为102CFU/g、108CFU/g和106CFU/g,临床样品检测中阳性率均为1.36%(6/441)。结论 培养法、革兰染色镜检法、16S rRNA PCR法3种检测方法各有优缺点,需要联合使用,取长补短,确保检测结果的可靠。

注射用七叶皂苷钠无菌检查方法适用性研究

文章探索并改进注射用七叶皂苷钠的无菌检查方法。通过运用薄膜过滤法,从多个方面进行了深入研究,包括检验过程中使用的稀释液与冲洗液的对比、薄膜过滤器冲洗泵速的对比,以及不同取样方式的比较。经过实验和分析,将七叶皂苷钠注射液的无菌检查方法优化统一为:采用单筒过滤法,冲洗方法确定为每膜冲洗100 mL 0.1%无菌蛋白胨水溶液,控制溶解泵速为50 r/min,同时确保冲洗泵速不大于150 r/min。此方法可为注射用七叶皂苷钠的无菌检查提供有效的参考依据。

属性层次模型-熵权法联合正交试验优化黄芩药材高温瞬时灭菌工艺

目的优化黄芩药材的高温瞬时灭菌工艺。方法取灭菌前后黄芩药材细粉样品3批,固定出料温度为35℃,以进料速率、灭菌温度和灭菌时间为考察因素,采用属性层次模型(AHM)-熵权法(EWM)计算灭菌率、黄芩苷转移率和浸出率的相对权重,并以3个指标的综合评分为考察指标,采用L_(9)(3^(4))正交试验法优选黄芩药材的高温瞬时灭菌工艺,并验证。结果优选的工艺为进料速率120kg/h,灭菌温度170℃,灭菌时间6s(出料温度为35℃)。灭菌后黄芩药材中需氧菌总数及霉菌和酵母菌总数均大幅下降,灭菌率均大于99%;黄芩苷转移率及浸出率均大于95%;黄芩苷含量、浸出物检查结果较灭菌前无明显改变。结论优选的黄芩药材高温瞬时灭菌工艺重复性好,对黄芩有效成分的含量无明显影响。

^(60)Co辐射灭菌对紫草油质量的影响

目的:考察三批次不同剂量^(60)Co辐射灭菌对院内制剂紫草油的性状、定性鉴别、含量测定、微生物限度检查等质量控制指标的影响,为紫草油实现最终灭菌提供参考。方法:根据2020版《中华人民共和国药典》、四川省药品监督管理局批准的质量标准SZBZ20081112要求,观察紫草油性状变化;采用薄层色谱法对紫草油与紫草对照药材进行定性鉴别;采用紫外分光光度法,检测羟基萘醌总色素含量,在520 nm波长处测定吸光度,按左旋紫草素(C6H16O5)的吸收系数(E1%1 cm)为242计;采用微生物计数法,进行需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、控制菌检查(金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌)等微生物限度检测。结果:3 kgy、5 kgy、6 kgy辐射灭菌后的制剂均符合质量标准的要求,10 kgy、20 kgy辐射灭菌后的制剂不符合质量标准的要求。结论:^(60)Co辐射灭菌,具有灭菌作用显著、穿透力强、不需升高温度、无化学残留物、可实现带包装最终灭菌、操作简便等特点,能达到灭菌的效果,不影响紫草油质量,有实用价值。

四种液相色谱串联质谱国家标准方法测定水产品中氯霉素残留量的对比研究

为提升水产品中氯霉素检测的准确度,让检测人员选择准确度更高、试验结果更稳定的国标方法,本研究使用四种现行氯霉素检测的液相质谱国标方法进行检测,分析检测过程及结果,并对方法提出改进建议。

复方阿莫西林乳房注入剂无菌检查方法的优化

将阿莫西林乳房注入剂无菌检查方法由直接接种法优化为薄膜过滤法。采用肉豆蔻酸异丙酯将样品破乳,与pH 6.0磷酸盐缓冲液混合进行萃取,取萃取后的水相薄膜过滤,采用pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液进行冲洗,冲洗完毕加入硫乙醇酸盐液体培养基和胰酪大豆胨液体培养基,定量加入青霉素酶破坏残余的阿莫西林,按照规定条件培养。该方法与直接接种法相比,操作简单,可靠性增强,结果判断准确性提高。

速康宁滴眼液和速康宁滴鼻液的生物检查方法适用性研究

目的建立速康宁滴眼液和速康宁滴鼻液的生物检查方法,并评估检查方法的适用性。方法参照《中华人民共和国药典》,采用薄膜过滤法对速康宁滴眼液进行无菌检查,采用倾注平皿法和薄膜过滤法对速康宁滴鼻液进行微生物限度检查,采用直接接种法和薄膜过滤法对速康宁滴鼻液进行控制菌检查,并对上述方法进行适用性试验。结果以0.9%无菌氯化钠溶液作为冲洗剂(总冲洗量为300 mL)进行薄膜过滤法检测,可以对速康宁滴眼液中的大肠埃希菌、生孢梭菌、白色念珠菌、黑曲霉菌进行无菌检查;分别以0.9%无菌氯化钠溶液及含0.1%(体积比)聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液作为冲洗剂(总冲洗量为500 mL)进行薄膜过滤法检测,可对速康宁滴眼液中的金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌进行无菌检查。以含0.1%(体积比)聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液作为冲洗剂(总冲洗量为500 mL)进行薄膜过滤法检测,可以对速康宁滴鼻液中的需氧菌(铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌)进行微生物限度检查及控制菌检查,采用倾注平皿法可以对速康宁滴鼻液中的霉菌和酵母菌(白色念珠菌和黑曲霉菌)进行微生物限度检查。结论速康宁滴眼液的无菌检查、速康宁滴鼻液的需氧菌微生物限度检查及控制菌检查均可采用薄膜过滤法,速康宁滴鼻液的霉菌及酵母菌微生物限度检查可采用倾注平皿法。上述检查方法实用简便、准确可靠且重现性好。

注射用亚胺培南西司他丁钠无菌检查法的优化及标准化

目的对注射用亚胺培南西司他丁钠的无菌检查方法进行优化及确认。方法依据《中国药典》2020版四部通则1101无菌检查法,对供试液、敏感菌、冲洗量和中和剂等可能的影响因素进行了探讨,并在供试液配制,滤膜,冲洗量及冲洗次数、中和剂及其使用量、阳性对照菌等方面对注射用亚胺培南西司他丁钠的无菌检查方法进行优化。结果选取4个厂家样品对注射用亚胺培南西司他丁钠的无菌检查方法进行确认,6株阳性试验菌在规定时间内都生长良好。结论该方法能有效去除注射用亚胺培南西司他丁钠的抑菌性,具有操作简便,高效可靠等优点,适用于注射用亚胺培南西司他丁钠上市抽验样品和批出厂产品的无菌检查。

氯霉素氧化锌乳膏微生物限度检查方法验证

目的建立氯霉素氧化锌乳膏的微生物限度检验方法。方法按照《中国药典》2020年版四部通则1105、1106,分别采用常规法、增加稀释液、增加培养基体积、增加稀释液-增加培养基体积联合、薄膜过滤法进行方法适用性试验。结果氯霉素氧化锌乳膏对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌抑制作用较强,需要用薄膜过滤法才能使回收率在0.5~2;控制菌适用性试验中,增加培养基体积可消除样品对金黄色葡萄球菌的抑制作用。结论需氧菌总数测定采用薄膜过滤法;霉菌和酵母菌总数测定采用常规法;金黄色葡萄球菌检查采用增加培养基体积法;铜绿假单胞菌检查采用常规法。

玉米雄性不育突变体x50的基因定位与遗传分析

为了挖掘雄性不育种质资源,鉴定雄性育性基因,为玉米雄性不育化制种提供基础材料。以玉米雄性不育突变体x50为试验材料,研究突变体雄性不育表型,构建x50与自交系Mo17的F1和F2群体,确定突变体x50雄性不育性状的遗传模式。以F2群体为材料,应用图位克隆技术定位雄性育性基因X50,通过基因等位性测验确定候选基因。结果显示,与野生型相比,雄性不育突变体x50花药不能从颖壳露出,花药体积较小且萎蔫,无成熟花粉粒形成。F1群体植株均表现为雄性可育,F2群体植株出现雄性育性分离,可育植株与不育植株分离比例符合3∶1,说明突变体x50不育性状受1对隐性核基因控制。通过图位克隆方法将雄性育性基因X50定位于玉米第2染色体分子标记2-4901与2-4963之间,物理区间为237.42~241.39 Mb。定位区间内候选基因分析发现,区间存在玉米雄性不育基因ZmMs33。以ms33纯合突变体ms33-6029和ms33-6052分别与x50杂合型+/x50杂交,杂交后代可育植株与不育植株分离比例符合1∶1,表明x50是ZmMs33基因一个等位突变体。玉米雄性不育突变体x50的鉴定为玉米杂交种子生产和ZmMs33基因功能研究提供了种质材料。

白鲜皮水提液与苯扎溴铵的协同杀菌效果观察

目的:考察白鲜皮水提液与苯扎溴铵的协同杀菌作用。方法:通过悬液定量杀菌试验,以协同系数T/E值为指标研究白鲜皮水提液与苯扎溴铵的协同杀菌效果。结果:白鲜皮水提液与苯扎溴铵混合溶液对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和白色念珠菌作用1 min,T/E值分别为1.75、1.70和2.41。结论:白鲜皮水提液与苯扎溴铵具有显著协同杀菌效果。

氯霉素检测用纳米纤维基试剂盒的制备及应用初探

为提高胶体金免疫诊断产品对氯霉素(chloramphenicol, CAP)检测的灵敏度,利用静电纺丝技术制备纳米纤维膜替代硝酸纤维素(nitrocellulose, NC)膜作为层析材料,通过调控静电纺丝工艺参数,制备了不同质量分数的乙烯-乙烯醇共聚物(ethylene-vinyl alcohol copolymer, EVOH)纳米纤维膜作为蛋白承载体,并采用N,N′-二琥珀酰亚胺基碳酸酯(N,N′-disuccinimidyl carbonate, DSC)对其进行改性处理,分析改性处理前后不同质量分数EVOH纳米纤维膜的表面形貌、力学性能、蛋白吸附性能、芯吸性能的差异和变化规律。优选出一款综合性能良好的EVOH纳米纤维膜,将其组装成试纸条后对CAP进行检测。研究结果表明,EVOH纳米纤维膜是一种韧性材料,经DSC改性处理后,EVOH纳米纤维膜由疏水转变为亲水,蛋白吸附量较商用NC膜有大幅度提高。其中,质量分数为8%的EVOH纳米纤维膜的蛋白吸附量高达198.7μg/cm2,组装成试纸条后可实现对质量浓度为0.1 ng/mL的CAP的快速检测。采用静电纺丝技术和简单的改性处理工艺,即可制备出芯吸性能和蛋白吸附性能良好的纳米纤维膜,这有助于推进纳米纤维在胶体金免疫诊断领域的应用。

氯霉素的毒性作用及检测方法研究进展

氯霉素(CAP)在一段时间内,曾作为广谱抗生素广泛应用于养殖业,后由于其毒副作用,在中国、美国、欧盟等多个国家和地区的相关检测标准中,均已规定动物性食品中不得检出氯霉素。氯霉素在我国,被要求禁止应用于动物性食品,但依旧存在违法滥用现象,造成氯霉素残留。因此,对常见的氯霉素检测方法进行对比,包括常见的色谱法、免疫法、化学发光法等多种方法,分析了各种方法的优劣势。

盐酸莫西沙星氯化钠注射液无菌检查方法优化

目的优化盐酸莫西沙星氯化钠注射液的无菌检查方法。方法按照《中华人民共和国药典》2020年版无菌检查方法适用性试验相关要求,采用HPLC法测定混合纤维素(MCE)膜、尼龙(N66)膜和聚偏二氟乙烯(PVDF)膜过滤后膜上样品的残留量,确定样品吸附性小的滤膜;采用HPLC法测定4种不同冲洗液(0.1%无菌蛋白胨水溶液、pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液、0.9%无菌氯化钠溶液及含卵磷脂和聚山梨酯80组分的0.9%无菌氯化钠溶液)分别冲洗300 mL、500 mL后膜上样品的残留量,确定适宜的冲洗液。结果药典规定的6种试验菌均可在5 d内正常生长。结论采用薄膜过滤法选择滤膜材质为PVDF或N66的集菌培养器,在冲洗液中添加0.1%卵磷脂和0.5%聚山梨酯80能减少冲洗液用量,且降低因冲洗对污染菌造成的机械损伤并缩短检验耗时和节约检验成本。

非水溶液氯硝西泮注射剂无菌检查法的研究

目的 建立非水溶液氯硝西泮注射液无菌检查方法,探索有机溶剂对于无菌检查法的影响。方法 参考《中国药典》2020年版,通过薄膜过滤法无菌检查及膜通透性实验,考察氯硝西泮注射液中有机溶剂对集菌培养器不同材质的滤膜及杯体的影响,以及样品溶液pH值,冲洗液的品种及数量对样品中微生物的影响。结果 苯甲醇、冰醋酸及无水乙醇会造成集菌培养器复合纤维素膜、尼龙膜及聚偏二氟乙烯(PVDF)膜不同程度溶解,复合纤维素膜溶解程度更严重,残留于杯体及滤膜的苯甲醇不溶于培养基造成浑浊;丙二醇与AS杯体反应故培养基呈浑浊。不同冲洗液冲洗后培养基pH范围在5.99~7.16之间。结论 建立了一种合理的无菌检验方法,该方法为其他以有机相为溶剂的注射液无菌检查提供较好的参考价值。

可见异物检查中注射用无菌制剂和无菌原料药样品制备方法的考察

文章主要是对于可见异物检查中注射用无菌制剂和无菌原料药样品制备方法的考察。在实验过程中,主要采用光散射可见异物检测仪考察水的处理、注射器与西林瓶的清洗与无菌原料药的称量方法。最后,能够得到以下结论:注射用无菌制剂和无菌原料药样品制备过程中的多个环节均有引入外来异物的风险,需要建立科学可行的样品制备与验证方法。