不同炮制方法对续断中总皂苷和川续断皂苷Ⅵ含量的影响

目的:研究续断生品及不同炮制品中总皂苷与川续断皂苷Ⅵ的含量变化,探讨不同炮制方法对续断中总皂苷和川续断皂苷Ⅵ含量的影响。方法:采用分光光度法测定续断生品及炮制品中总皂苷的含量;采用高效液相色谱法测定川续断皂苷Ⅵ的含量。结果:与续断生品相比较,各炮制品的总皂苷含量略有增加;但炮制后川续断皂苷Ⅵ的含量增加显著。结论:不同炮制方法均能影响续断中川续断皂苷Ⅵ的含量变化,证明了传统炮制方法的合理性。

重庆产区不同居群续断中总皂苷与川续断皂苷Ⅵ的含量分析

目的测定重庆产区不同居群续断中总皂苷与川续断皂苷Ⅵ的含量,探讨其在居群间的含量差异。方法以香草醛-冰醋酸-高氯酸为显色体系,采用分光光度法测定续段中总皂苷的含量;采用HPLC法测定续断中川续断皂苷Ⅵ的含量。结果各居群续断均能达到药典规定的药用标准,但不同居群续断中皂苷类成分的含量差异较大,以武隆产续断中皂苷成分含量较高。结论实验方法适用于续断的质量分析,可以为续断的质量评价提供参考。

HPLC测定损伤复元颗粒中川续断皂苷Ⅵ的含量

目的为有效控制损伤复元颗粒的质量,建立制剂中川续断皂苷Ⅵ的HPLC定量测定方法。方法 Kromasil C18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相乙腈-水(28∶72);检测波长212nm;体积流量1.0mL/min;柱温30℃。结果川续断皂苷Ⅵ在0.104～0.936mg/mL范围内呈良好的线性关系,r=0.999 6,平均加样回收率为100.17%,RSD为1.87%。结论该方法快速、灵敏,准确度高,可用于该制剂的质量控制。

辽东楤木叶有效部位中楤木皂苷Ⅴ、Ⅵ及总皂苷质量控制

目的建立HPLC-ELSD法测定辽东楤木叶中楤木皂苷Ⅴ和Ⅵ量及可见分光光度法测定辽东楤木叶总皂苷量的方法。方法采用HPLC-ELSD法测定楤木皂苷Ⅴ和Ⅵ,Diamonsil-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为水-乙腈,体积流量0.7 mL/min,柱温35℃,漂移管温度115℃,载气体积流量3.2 L/min。采用可见分光光度法测定辽东楤木叶总皂苷量,检测波长550 nm。结果楤木皂苷Ⅴ、Ⅵ、辽东楤木叶总皂苷分别在1.253～8.768μg(r=0.999 7),1.251～8.767μg(r=0.999 7),0.1549～1.549 mg(r=0.999 8)呈良好的线性关系;加样回收率分别为99.67%(RSD为1.30%),99.17%(RSD为0.97%),99.57%(RSD为0.53%)。结论本实验采用的方法简便快速、准确、重复性好,可用于辽东楤木叶有效部位中皂苷类成分的质量控制。

不同灭菌法对续断中川续断皂苷Ⅵ含量的影响

目的考察在保证灭菌效率的前提下,不同灭菌法对续断中川续断皂苷Ⅵ含量的影响。方法分别采用不同方法灭菌后采用高效液相色谱法测定川续断皂苷Ⅵ灭菌前后的含量。结果水洗灭菌后川续断皂苷Ⅵ含量下降最多,为8.2%,而化学灭菌为4.6%、热灭菌为3.8%、辐射灭菌为2.1%。结论辐照灭菌最适合续断灭菌。

HPLC测定妇科止血灵片中川续断皂苷Ⅵ的含量

目的:建立高效液相法测定妇科止血灵片中川续断皂苷Ⅵ含量的方法。方法:采用Diamonsil-C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱;流动相:乙腈-0.05%磷酸(28∶72);检测波长:212nm;流速:1.0ml/min。结果:川续断皂苷Ⅵ在0.0012～0.0110μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9992)。平均回收率为99.58%(RSD=0.94%)。结论:本方法简便、准确、重现性好,可用于妇科止血灵片中川续断皂苷Ⅵ的质量控制。

续断皂苷Ⅵ诱导的脂肪间充质干细胞复合纳米羟基磷灰石/壳聚糖支架治疗大鼠桡骨骨缺损

摘要目的：探讨续断皂苷Ⅵ诱导的大鼠脂肪间充质干细胞（ADMSCs）联合纳米羟基磷灰石／壳聚糖（n-HA／CS）人工骨材料修复大鼠桡骨骨缺损的效果。方法：应用细胞表面抗原鉴定ADMSCs。取传至第3代的ADMSCs，培养基中加入续断皂苷Ⅵ诱导15d。诱导后的ADMSCs和n-HA／CS复合培养获得的植骨材料修复大鼠桡骨骨缺损模型，于术后第4、12周骨缺损区行X光拍片并按照改良Gray标准进行结果分析。H—E染色，并按改良Nilsson的组织学评分标准进行成骨效应评估。结果：ADMSCs呈成纤维细胞样贴壁生长，高表达CD44。续断皂苷Ⅵ诱导后的细胞呈三角形、矮方形及多边形。茜素红染色可见散在的红色阳性结节，骨钙素表达阳性，阳性细胞率85．46％±5．22％。骨缺损修复术后4周移植材料已部分被吸收。术后12周实验组部分新生骨皮质恢复连续，开始出现骨髓腔。改良Gray评分显示，在各时间点实验组均高于各对照组，差异有统计学意义。第4周行H-E染色可见植入支架部分被吸收，实验组支架间隙和周围均充满细胞。第12周实验组出现类似骨单位样结构，骨基质中为淡粉色。改良Nilsson评分显示实验组在术后的4周和12周均高于各个对照组，有统计学意义。结论：续断皂苷Ⅵ能够诱导大鼠ADMSCs分化为成骨细胞，复合n-HA／CS支架能很好修复骨缺损。

HPLC法测定宫血宁胶囊中重楼皂苷Ⅵ的含量

目的建立RP-HPLC法测定宫血宁胶囊中重楼皂苷Ⅵ的含量。方法用Chromatorax C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(50∶50),流速1.0mL·min-1,检测波长203nm,柱温30℃进行测定。结果重楼皂苷Ⅵ进样量在1.015～7.105μg(r=0.9999,n=6)范围内呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)为101.5%。结论用ODS柱可对宫血宁胶囊中重楼皂苷Ⅵ的含量进行测定,该方法简便、快速、准确,可用于宫血宁胶囊的质量控制。

根痛平胶囊和根痛平片中川续断皂苷Ⅵ的含量测定方法研究及续断的投料情况分析

目的建立根痛平胶囊和根痛平片中川续断皂苷Ⅵ的含量测定方法,监测生产企业续断投料情况。方法采用高效液相色谱(HPLC)法,Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-水(27∶73)为流动相等度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长为212 nm。结果川续断皂苷Ⅵ在30~280μg·mL-1的范围内呈良好的线性关系,回归方程为Y=2 029.357 0 X+3.688 5,R2=0.999 7,平均回收率为96.08%,RSD为1.01%。结论该法简单准确,可用于测定根痛平胶囊和根痛平片中川续断皂苷Ⅵ的含量,为根痛平系列制剂的质量标准提高提供理论依据;制定了川续断皂苷Ⅵ含量参考限度值,考察企业续断的投料情况,提示个别企业未投料或投料用续断质量差。

高效液相色谱法测定加味去伤片重楼皂苷Ⅵ的含量

目的：建立测定加味去伤片中重楼皂苷Ⅵ含量的方法。方法：采用高效液相色谱法测定重楼中重楼皂苷Ⅵ的含量，色谱柱为ThermoC8（4．6mm×250mm，5μm），流动相为乙腈-水（40：60），检测波长为205nm，流速为1．0ml·min-1。结果：重楼皂苷Ⅵ在0．6395-1．1877,ug线性关系良好（r-0．9998），平均回收率为100．98％，RSD为0．49％。结论：该实验方法线性关系良好、简便、准确、专属性强，可作为加味去伤片控制原药材和成品的质量方法。

重楼中皂苷类成分抗肿瘤作用及机制研究进展

重楼作为清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊的传统中药,近年来因其较好抗肿瘤活性逐渐得到重视,重楼皂苷是重楼最主要的抗肿瘤活性成分。大量科学研究表明其主要活性成分重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ为抗肿瘤的物质基础,以上成分抗肿瘤机制主要是通过诱导细胞凋亡和自噬、抑制细胞生长增殖和阻滞增殖周期、抑制肿瘤转移、抑制肿瘤耐药,增强化疗敏感性、影响细胞器(线粒体、内质网)的功能活动、抑制肿瘤血管生成等途径抑制多种恶性肿瘤细胞生长。本文对重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ在抗肿瘤研究方面的成果及作用机制进行归纳总结,为重楼皂苷类药物的开发和利用及临床抗肿瘤的应用进一步提供思路。

HPLC测定彝肤软膏中重楼皂苷Ⅰ,Ⅱ的含量

目的：建立同时测定彝肤软膏中重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ高效液相色谱分析方法。方法：采用高效液相色谱法对彝肤软膏中重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ同时进行含量测定：Hypersil ODS2（4．6mm×150mm，5μm）；预柱：IBBM-612111，C-18柱芯；乙腈-0．02％磷酸（43：57）为流动相，流速1mL·min^-1，检测波长203nm，柱温40℃。结果：重楼皂苷Ⅰ在0．1024～3．2μg线形关系良好，r=0．9998，平均回收率97．4％，RSD1．8％（n=6）；重楼皂苷Ⅱ在0．064—2．0μg线形关系良好，r=0．9999，平均回收率101．4％，RSD1．0％（n=6）。结论：本方法准确可靠、重复性好，能有效控制该制剂的质量。

热毒清胶囊质量标准研究

目的研究并建立中药热毒清胶囊的质量标准。方法采用薄层色谱（TLC）法对方中的重楼、南板蓝根和冰片进行了色谱鉴别，采用高效液相色谱（HPLC）法测定了重楼中重楼皂苷Ⅰ（C51H82O20）的含量。结果鉴别方法重复性好，专属性强。当进样量在0．0792～0．7920mg范围内时，重楼皂苷Ⅰ进样量与峰面积积分值呈良好的线性关系，平均回收率为98．49％，RSD=1．58％。结论所研究的方法可有效地控制热毒清胶囊的质量。

重楼皂苷对肝纤维化大鼠纤维化标志物的影响及其相关性分析

目的:探讨重楼皂苷对四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠肝功能以及肝纤维化标志物的影响及其相关性。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组,重楼皂苷低、中、高剂量组,复方鳖甲软肝片组、秋水仙碱组。除正常组外,其余各组采用CCl4致肝纤维化造模。第7周后,正常组灌胃生理盐水,其余各组灌胃相应药物,1次/d。末次给药后,禁食8 h,处死动物取血,ELISA法检测大鼠血清ALT、AST、肝纤四项指标(CⅣ、PCⅢ、LN、HA)含量以及肝组织HYP水平。结果:与模型组比较,重楼皂苷各剂量组大鼠血清ALT、AST和肝纤四项指标含量、肝组织HYP含量降低(P<0.05,P<0.01)。ALT、AST含量与CⅣ、PCⅢ、LN、HA含量具有相关性(P<0.05,P<0.01)。结论:重楼皂苷具有一定的保肝降酶作用,能减轻肝纤维化程度。

反相高效液相色谱法测定季德胜蛇药片中重楼皂苷I的含量

目的建立反相高效液相色谱法测定季德胜蛇药片中重楼皂苷Ⅰ的含量。方法采用Agilent Zorbax SB C18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm）；流动相为乙腈-水（45：55）；流速1．0ml／min，柱温30℃，检测波长为210nm。结果重楼皂苷Ⅰ在0．009645-0．9645mg／ml范围内与峰面积呈良好的线性关系，r=1．0000；平均加样回收率为99．21％，RSD为0．75％（n=9）。结论该法简便、准确，重复性较好，可用于测定季德胜蛇药片中重楼皂苷Ⅰ的含量。

不同加工工艺对续断质量的影响

目的测定川续断皂苷Ⅵ和川续断总皂苷的含量,探讨不同产业化加工工艺对川续断质量的影响。方法采用高效液相色谱法和紫外分光光度法分别对不同片型和不同干燥温度加工的续断饮片中川续断皂苷Ⅵ和川续断总皂苷的含量进行测定。结果切4 mm的续断片,50℃烘干后,川续断皂苷Ⅵ及川续断总皂苷的含量均高于其他加工工艺所得饮片。结论为保证续断饮片的质量,确定了切制片型厚度和烘干温度等工艺参数。

重楼皂苷Ⅶ、H及总皂苷镇痛抗炎作用研究

目的:探讨重楼皂苷Ⅶ、H和总皂苷镇痛、抗炎作用。方法:采用小鼠热板法实验和小鼠醋酸扭体实验观察重楼皂苷Ⅶ、H和总皂苷的镇痛作用;采用二甲苯引起的小鼠耳肿胀炎症实验和角叉菜胶引起的小鼠足肿胀炎症实验观察重楼皂苷Ⅶ、H和总皂苷的抗炎作用。结果:重楼皂苷Ⅶ组给药后90min,各剂量组均能提高小鼠的痛阈值,和空白对照组比较,有统计学意义(P<0.01,P<0.05),10、20、40mg/kg组分别在给药后90min、60min、60min起效。重楼皂苷H 10、40mg/kg组在给药后90min提高小鼠痛阈值(P<0.05),重楼总皂苷40mg/kg组在90min后提高小鼠痛阈值(P<0.05)。在小鼠醋酸扭体实验中,重楼皂苷Ⅶ40mg/kg组、重楼皂苷H40mg/kg组的镇痛抑制率分别为27.35%、23.67%,和空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。重楼总皂苷组作用不明显。重楼皂苷H 20、40mg/kg及总皂苷1000、2000mg/kg组均能使小鼠耳廓肿胀度明显降低,抑制率分别为34.07%、23.63%、30.22%、47.80%,其差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。重楼皂苷Ⅶ组能减轻二甲苯所致小鼠耳肿胀,作用较弱。重楼皂苷H 20、40mg/kg及总皂苷1000、2000mg/kg组均能使小鼠耳廓肿胀度明显降低,抑制率分别为25.35%、29.43%、27.82%、44.47%,其差异具有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。重楼皂苷Ⅶ组减轻足肿胀不显著(P>0.05)。重楼皂苷H 20、40mg/kg及总皂苷1000、2000mg/kg组使血清中SOD活力明显升高,MDA和PGE2的含量降低。与空白对照比相比,具有统计学意义(P<0.01,P<0.05);重楼皂苷Ⅶ对各指标无明显影响。结论:重楼皂苷Ⅶ和H具有较好的镇痛作用,重楼总皂苷镇痛作用不明显,重楼皂苷Ⅶ比H作用强、起效快;重楼皂苷H和总皂苷具有较好的抗炎作用,重楼皂苷Ⅶ抗炎作用不明显。重楼皂苷H及总皂苷能使血清中SOD活力升高,MDA和PGE2的含量降低。

重楼皂苷I对大鼠原代成骨细胞增殖的影响及机制研究

目的:研究重楼皂苷I(PPL I)对大鼠原代成骨细胞增殖的影响及其机制。方法:选择酶消化法分离大鼠原代成骨细胞并进行培养,加入含不同浓度PPL I(3、10、30、100μmol/L)的培养液,采用CCK-8试剂盒、EdU试剂盒、碱性磷酸酶活性试剂盒检测大鼠原代成骨细胞的增殖情况,采用免疫印迹法观察PPL I(3、10、30μmol/L)对大鼠成骨细胞中骨保护蛋白(OPG)/核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响。结果:PPL I可有效地促进大鼠原代成骨细胞的增殖,降低RANKL的表达,升高OPG的表达,呈浓度依赖性。结论:PPL I可能通过影响OPG/RANKL通路,发挥促进大鼠原代成骨细胞增殖与分化的作用。

超高效液相色谱-蒸发光散射检测法同时测定重楼消瘤方中5种皂苷类成分含量

建立了同时测定抗肿瘤中药复方——重楼消瘤方中重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅶ、柴胡皂苷a、柴胡皂苷d 5种皂苷类成分含量的超高效液相色谱-蒸发光散射检测(UPLC-ELSD)法。复方制剂经甲醇提取,采用Waters Cortecs UPLC C18(150 mm×2.1 mm,1.6μm)色谱柱分离,乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,蒸发光散射检测器进行检测,以外标法定量。结果显示,5种皂苷类成分的分离度良好,分别在7.1174~177.94μg/mL、 9.4072~235.18μg/mL、 8.8726~221.82μg/mL、 7.4862~187.15μg/mL、9.761 3~244.03μg/mL范围内线性关系良好,相关系数(r)为0.999 2~0.999 8,检出限为0.7~1.0μg/mL,定量下限为1.8~2.4μg/mL;平均回收率分别为93.9%、103%、102%、104%、105%,相对标准偏差(RSD)分别为3.8%、4.0%、4.2%、3.6%、3.2%。该方法简便、快速、准确,可同时对重楼消瘤方中的5个皂苷类成分进行分析,能有效地消除杂质干扰,为重楼消瘤方的质量评价提供实验依据。

HPLC测定不同生长年限安徽地产重楼中重楼皂苷的含量

目的:采用HPLC法测定不同生长年限安徽地产重楼中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent SB-C_(18)(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-水(梯度洗脱),检测波长为203nm,流速:1.0mL·min^(-1),柱温30℃。结果:安徽地产重楼中含有重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ,但其含量低于药典标准规定,而且不同生长年限中重楼皂苷的含量差异较明显,5年生药材含量最高。结论:研究结果可为重楼资源的开发利用和确保临床用药质量提供依据。