磁分散固相萃取-高效液相色谱法检测人体尿样中天麻素

建立了一种磁分散固相萃取技术结合高效液相色谱法,用于快速检测人体尿液样本中的天麻素。采用化学共沉淀法自组装制备磁性活性炭/大孔树脂三元复合材料(Fe_3O_(4)/AC/MR),并将该材料用作吸附剂,实现尿液样本中天麻素的分离富集。在最佳实验条件下,天麻素浓度与峰面积间呈良好线性关系,线性范围为3.0×10^(-2)~10.0μg·mL^(-1),线性相关系数为0.9994,检出限为5.4μg·L^(-1)。以模拟人体尿液作为实际样品进行加标回收验证,加标回收率为94.87%~106.3%,相对标准偏差(RSD)在2.8%-4.2%之间。本研究建立的方法简便、快速、有效,为生物样本中天麻素的分离提纯提供了新方法。

复方银唑散的含量测定及微生物限度检查方法学验证

目的建立反向高效液相色谱法同时测定复方银唑散中磺胺嘧啶银和酮康唑的含量并探讨其微生物限度检查方法。方法色谱柱为Agilent C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:0.07%三乙胺(A,冰醋酸调节pH至5.07)-甲醇(B),梯度洗脱:0~6 min,A80%;6~8 min,A80%~22%;8~21 min,A保持22%;21~22 min,A22%~80%,流速1.0 mL/min,检测波长:240 nm,柱温:30℃。采用培养基稀释法作为需氧菌总数、霉菌及酵母菌总数计数方法并按《中国药典》2020年版四部通则微生物限度检查法对控制菌检查法进行验证。结果磺胺嘧啶银在0.02964~0.06915 g/L浓度范围下与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),酮康唑在0.03054~0.07126 g/L浓度范围下与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998),磺胺嘧啶银和酮康唑的平均回收率分别为101.5%(n=6,RSD=0.33%)和98.8%(n=6,RSD=0.65%)。采用培养基稀释法,各试验菌的回收率均在0.5~2.0。结论所建立的高效液相色谱法定量准确、专属性良好,可用于同时测定复方银唑散中磺胺嘧啶银和酮康唑的含量。采用培养基稀释法对复方银唑散进行微生物限度检查可行。

分光光度法与高效液相色谱法检测甲醛含量的方法比较

对比了分光光度法、高效液相色谱法(中性条件衍生)、高效液相色谱法(酸性条件衍生)测定皮革、纺织品阳性样品中的甲醛含量。结果表明,酸性条件下的高效液相色谱法会使检测结果偏高;中性条件下的高效液相色谱法和分光光度法测试结果接近,并且在纺织品上表现得更明显。经比较分析认为高效液相色谱法(中性条件衍生)测试方法更可取。

妇科九味洗剂高效液相色谱法特征指纹图谱及成分定量研究

目的建立妇科九味洗剂的高效液相色谱法(HPLC)特征指纹图谱及多指标成分测定方法。方法该研究于2020年5—8月在芜湖市中医医院制剂室实验室中进行。采用HPLC法,色谱柱Agilent Zorbax SB-C_(18)(4.6 mm×150 mm,5µm),流动相甲醇-0.4%甲酸不同比例梯度洗脱,波长334 nm,柱温30℃;13批妇科九味洗剂样品的特征图谱运用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012版)评价其相似度;同时测定咖啡酸、木犀草苷和蒙花苷的含量。结果13批样品共标定16个共有峰,相似度均在0.91以上;通过对照品比对,识别出咖啡酸、木犀草苷和蒙花苷成分。3个成分分别在5.82~58.20 ng(r=0.9995)、9.44~94.40 ng(r=0.9995)、20.08~200.80 ng(r=0.9996)范围内呈现良好的线性关系。结论所建立的方法简单,准确可靠,可用于妇科九味洗剂的质量控制。

基于UPLC-Q-TOF MS技术的陈皮陈化年份鉴别方法研究

建立了一种陈皮陈化年份的鉴定方法。利用超高效液相色谱-四极杆串联飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF MS)对陈皮的主要化学成分进行鉴定,研究了不同陈化年份陈皮样品中化学成分的变化规律,结合统计分析方法发现了6个同分异构体在陈皮陈化过程中的相互转化规律。结果表明,6个分子式为C_(20)H_(22)O_(7)的五甲氧基黄烷酮同分异构体中,前3个化合物含量随年份的增加而降低,后3个化合物含量随年份的增加而升高,其比值与陈化年份具有显著的线性关系。利用该6个特征性成分的转化因子(S),建立了陈皮陈化年份计算模型,相关系数(r^(2))为0.90。训练集样品的年份预测误差均不大于2年。盲样测试结果中90.0%样品的年份预测误差不大于2年。该方法准确可靠,为陈皮陈化年份的鉴定提供了科学依据。

高效液相色谱-二极管阵列法测定高蛋白食品中的三聚氰胺

建立用高效液相色谱-二极管阵列法测定高蛋白食品中的三聚氰胺的检测方法。对不同样品采用不同的前处理方法,然后用AgilentTC-C184.6×250mm色谱柱,柱温为40℃,流动相为0.02mol/L硫酸铵∶甲醇=94∶6(V∶V),流速0.8mL/min,二极管阵列检测器于235nm波长下进行检测,并以保留时间和三维光谱图相似性系数进行定性,外标法定量。不同样品的加标回收率为98.8%～101.5%,RSD小于1.2%。方法线性范围为0.1～150μg/mL,检测限为0.01μg/mL,相关系数R=0.9999。

反相高效液相色谱荧光法测定大鼠脑组织中氨基酸类神经递质

目的 建立并改良反相高效液相色谱法,测定大鼠不同脑组织分区氨基酸类神经递质含量。方法 改良使用K2 CO3 缓冲溶液作为稀释液,反相高效液相色谱洗脱,高丝氨酸作为内标,邻苯二甲醛柱前衍生和荧光检测器检测大鼠大脑皮质、海马、纹状体和小脑中4种氨基酸类神经递质:天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)和γ氨基丁酸(GABA)的含量。结果 4种氨基酸在18min内洗脱完全,分离效果良好;在0 .5～4 0 μmol/L浓度范围有较好的线性关系,其相关系数不低于0 .9997;4种氨基酸天内精密度范围为0 .70 %～4 .0 1% ,天间精密度为2 .78%～9.5 8% ;Asp、Glu和GABA的最低检测限为0 .0 1μmol/L ,而Gly为0 .0 2 μmol/L ;海马组织4种氨基酸绝对回收率不低于89.39%。结论 改良后的反相高效液相色谱荧光法灵敏度高、重复性好,能有效分离检测大鼠脑组织分区中氨基酸类神经递质。

海洋平肝潜阳中药石决明对血管紧张素转化酶抑制作用研究

为研究海洋平肝潜阳中药石决明的降血压活性,采用高效液相色谱法,体外测定石决明对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制作用。以马尿酰-组氨酰-亮氨酸为反应底物,血管紧张素转化酶为催化剂,反应所生成的马尿酸为测定指标,未加酶抑制剂的反应为空白对照。采用Waters C18色谱柱,以乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速0.6mL·min-1,检测波长228nm,进样量10μL;马尿酸在0.005～1.000mmol·L-1范围内呈良好的线性关系(R2=0.999 9),最低检测限为0.2μmol·L-1,对马尿酸的回收率范围为95.0%～102.8%。将方法应用于海洋中药石决明的ACE抑制活性测定,其IC50值为49.20mg·mL-1。本研究为石决明治疗肝阳上亢型高血压的机制和有效成分的深入探讨提供一定依据。

高效液相色谱/荧光检测法测定纺织品中7种阴离子荧光增白剂

建立了纺织品中MST，ABP，VBL，4BK，CBS，CXT和WG7种阴离子荧光增白剂（FWAs）的前处理方法以及高效液相色谱荧光检测（HPLC／FLD）方法。样品经水-甲醇（25：75）提取后直接由HPLC／FLD进行定性定量分析。采用Phenomenex Gemini5u C18（150mmx4.6mm，5μm）色谱柱进行分离，以乙腈-2.5mmol／L醋酸铵溶液为流动相，梯度洗脱。7种阴离子FWAs的相关系数均不小于0.9996，定量下限（LOQs，SIN=10）为0.1～5.0mg／kg。不同添加水平下，阴性棉织品和毛织品中7种阴离子FWAs的回收率为89.5％～98.9％，相对标准偏差（RSDs）为2.4％～4.7％。该方法简单、灵敏度高、分析时间短，具有一定实际应用价值。

基于介孔Fe_3O_4@mSiO_2@Cu^(2+)磁性纳米粒子的固相萃取-高效液相色谱法测定水中微囊藻毒素

通过水热合成和常温合成的方法制备了介孔Fe3O4@mSiO2@Cu2+磁性复合纳米粒子(NPs),其具有均匀的尺寸大小、良好的磁性能和特异的选择性。本研究将合成的NPs用作磁性固相萃取(MSPE)介质,结合高效液相色谱(HPLC)发展了一种测定水样品中痕量微囊藻毒素MC-LR的方法。在优化MSPE和HPLC条件后,该方法在0.1~15μg/L范围内呈现良好的线性,线性相关系数(r)为0.999 4,检出限为0.025μg/L,定量限为0.082μg/L。进一步将该方法用于水样中痕量藻毒素分析,结果发现回收率达到78%。这一结果表明:制得的磁性纳米粒子具有良好的萃取性能,可有效用于水样中痕量藻毒素的测定。

自制混合型固相萃取柱-高效液相色谱法同时测定食品中黄曲霉毒素B_1、M_1

建立了基于自制混合型固相萃取柱的样品净化/高效液相色谱测定食品中黄曲霉毒素B1、M1的方法。样品经60%乙腈水溶液提取、离心后,通过自制固相萃取柱排除杂质干扰,流出液以Shim-pack VP-ODS C18色谱柱为分离柱,水和乙腈为流动相,用荧光检测器检测,外标法定量。考察了柱类型、柱容量、取样量、提取溶液和流速等对检测的影响,优化了实验条件。在优化条件下,2种毒素在0.40～100μg/L质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数为0.999 4～0.999 7,检出限(S/N=3)为0.050μg/kg。在样品中分别加入0.40、1.0、100μg/L 3种浓度水平的标准品,其加标回收率为53%～112%,相对标准偏差为2.7%～7.1%。该法灵敏度高,操作简单﹑快速,适用于花生、开心果和奶粉等食品中痕量黄曲霉毒素B1和M1的测定。

板蓝根化学成分及抗氧化活性的研究

采用高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)和直接进样的电喷雾串联质谱法(ESI-MS/MS)分析板蓝根乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和95%乙醇提取物的化学成分。同时,采用铁离子还原能力法(FRAP)评价板蓝根的抗氧化活性,并通过自由基清除能力法(DPPH)对FRAP法的测试结果进行验证。结果表明:在板蓝根乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和95%乙醇提取物中共鉴别出吲哚类、喹唑酮类、有机酸类、核苷类、嘌呤类、氨基酸类、黄酮类以及糖类等28个化合物。研究发现,板蓝根抗氧化活性部位主要集中在极性较低的化学组分中,吲哚类、喹唑酮类和有机酸类化合物是其主要的有效成分。该方法简便、快捷、灵敏,可为中药化学成分分析和抗氧化活性评价提供方法参考。

高效液相色谱法测定利塞膦酸钠片的含量

目的 采用反相高效液相色谱法建立利塞膦酸钠片剂的含量测定方法。方法 色谱柱为 Shi-madzu CLC-ODS柱 ,流动相为甲醇 -水 (含 5 mmol/ L磷酸二氢铵 ,2 mmol/ L四丁基溴化铵 ,1 .5 mmol/ L乙二胺四乙酸二钠 ,用氢氧化钠溶液调节 p H至 7.2 ) (2 5∶ 75 ,v/ v) ,检测波长为 2 62 nm,流速为 1 ml/ min。结果 辅料及中间体对样品测定不产生干扰 ,利塞膦酸钠在浓度 2 .0～ 64 .0 μg/ ml与峰面积呈良好线性关系 ,平均回收率为 99.76% (n=9) ,RSD为 0 .4 5 (n=6)。

超临界流体色谱与高效液相色谱分离手性化合物的比较

超临界流体色谱(SFC)分离具有速度快、分离效率高、溶剂消耗少等优点,近年来在手性化合物的分离分析中得到诸多应用。本文对比研究了涂覆型多糖手性色谱柱在SFC和高效液相色谱(HPLC)上拆分24种手性化合物的差异。通过比较这些化合物在色谱柱上的保留时间和选择因子等发现多数化合物在SFC上的分离效率要高于其在HPLC上的分离效率,但HPLC对轴手性化合物的分离效率要优于SFC。SFC和HPLC的分离表现出一定的互补性,随着苯环侧链烷基的碳数增加,化合物在SFC上的保留逐渐增强,而在HPLC的保留却逐渐减弱。叶菌唑在使用SFC和HPLC分析时出现了洗脱顺序反转的现象。这些结果为SFC手性拆分提供了参考。

铂-钯共显色衍生络合物的高效液相色谱研究

研究了Pd(Ⅱ)和4,4′-二(二乙氨基)苯硫酮(BDPTK)共显色所生成的Pt(Ⅱ)络合物,于Nucleosil C_8柱上,用含3×10^(-3)mol/L CSA和0.02mol/L HAc-NaAc(pH3.5)的乙腈-丙酮-水(72:5:23,V/V)作流动相(1.0ml/min)分离并检测。Pt的校正曲线的线性范围为0.2～3.0μg/ml,Pt检测限为0.7ng。此方法已应用于抗癌药物顺铂和卡铂的分析。

金银花和金银花露中绿原酸和4种黄酮含量的测定

建立了一种反相高效液相色谱法同时分离和测定金银花和金银花露中绿原酸和4种黄酮类化合物的含量.优化样品提取条件和实验条件下,采用甲醇-水(H3PO4调pH=2.6)梯度洗脱,外标法定量.结果显示绿原酸、槲皮素、金丝桃苷、木犀草素、芹菜素的线性范围分别为0.1～50,0.055～100,0.05～200,0.05～100,0.1～100mg/L(R>0.999),回收率分别为94.40%,100.72%,97.60%和96.80%(相对标准偏差小于1.2%).此实验方法简便,快速,线性关系良好,可作为金银花品质的测定.

诱惑红溶液标准物质的研制及不确定度评定

建立了食用合成色素诱惑红溶液标准物质的制备和定值方法,研制了100 mg/L的诱惑红溶液标准物质。采用制备液相色谱对筛选的市售原料纯化,得到纯度大于99%的诱惑红纯品;通过核磁共振(1H NMR谱)和液相色谱-质谱(HPLC-LTQ/MS)准确定性分析后,利用高效液相色谱法(HPLC)对诱惑红纯物质进行纯度定值。以0.1 mol/L乙酸铵和甲醇为流动相进行等度洗脱,采用Intersil ODS-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)进行分离,检测波长240 nm。为保证纯度测量的准确性,采用多家联合定值对诱惑红的纯度进行定值,诱惑红纯物质的定值纯度为99.61%(λ=240 nm)。诱惑红溶液标准物质经重量-容量法配制后,进行均匀性和稳定性实验,浓度赋值后进行不确定度评定,诱惑红溶液的量值为100 mg/L,扩展相对不确定度为1.0%(k=2)。该溶液标准物质已批准为国家级标准物质,可为相关部门提供检测标准。

高效液相色谱法测定纺织品中的N,N-二甲基乙酰胺以及1-甲基-2-吡咯烷酮

建立了纺织品中N,N-二甲基乙酰胺和1-甲基-2-吡咯烷酮的高效液相色谱测定方法。纺织品中的N,N-二甲基乙酰胺和1-甲基-2-吡咯烷酮经高纯水在超声波辅助条件下提取后,在反相C18柱上用乙腈和磷酸二氢钾洗脱,用二极管阵列检测器检测,检测N,N-二甲基乙酰胺的定量波长为210 nm,检测1-甲基-2-吡咯烷酮的定量波长为200 nm。N,N-二甲基乙酰胺的定量限为0.25 mg/kg,1-甲基-2-吡咯烷酮的定量限为0.50 mg/kg。回收率N,N-二甲基乙酰胺为90.3%~98.1%,1-甲基-2-吡咯烷酮为93.2%~99.8%。N,N-二甲基乙酰胺的相对标准偏差(RSD)为3.18%~8.43%,1-甲基-2-吡咯烷酮的相对标准偏差(RSD)为2.78%~6.56%,符合残留物分析的技术指标要求。

RP-HPLC法测定大黄复方喷雾剂大黄素、大黄酚的含量

目的建立HPLC法测定大黄复方喷雾剂中大黄素、大黄酚含量的方法。方法采用ODS柱,以甲醇-水(87∶13)为流动相,检测波长为254nm,流速为0.65mL/min。结果加样回收试验显示大黄素平均回收率99.48%,RSD=1.75%(n=9);大黄酚平均回收率101.46%,RSD=2.85%(n=9)。结论该方法简便,分离完全,结果可靠,适用于该制剂的质量控制。

天然丹皮酚与合成丹皮酚的鉴别

目的:建立天然丹皮酚与合成丹皮酚的鉴别方法。方法:以3种不同产地天然丹皮为原料,采用水蒸气蒸馏法制备天然丹皮酚。以间苯二酚为原料,分别经过乙酸乙酰化和硫酸二甲酯甲基化得到合成丹皮酚,以水蒸汽蒸馏法进行纯化。采用HPLC法、薄层色谱(TLC)、气相-质谱法(GC-MS)对天然丹皮酚与合成丹皮酚进行鉴别。结果:天然丹皮酚与合成丹皮酚的HPLC色谱图中,杂质的出峰时间有明显差别;在TLC谱图中合成丹皮酚有杂质斑点;在GC-MS谱图中合成丹皮酚有杂质峰(2,4-二甲氧基苯乙酮)。以上3种方法均能鉴别天然丹皮酚与合成丹皮酚。结论:本研究建立的方法简便、快速、高效,可用于鉴别天然丹皮酚与合成丹皮酚。