慢性淋巴细胞白血病间期荧光原位杂交检测染色体异常及临床分析

本研究旨在了解慢性淋巴细胞白血病(CLL)常见染色体异常情况及其与临床指标和疗效的关系。以4种序列特异性探针P53、D13S25、ATM、RB1和1种着丝粒探针CSP12,采用间期荧光原位杂交技术(I-FISH)对10例正常对照者骨髓建立各探针的检测阈值,然后对9例染色体核型分析阴性/无分裂相的CLL患者进行检测,检测结果大于阈值为阳性,小于阈值为阴性。结果表明:用p53与D13S25检测7例患者结果均呈阳性,ATM探针检测5例患者结果呈阳性,用RB1与CSP12探针检测4例患者结果呈阳性。9例患者I-FISH检测结果均显示有遗传学异常。检测显示,ATM缺失与患者血红蛋白水平有显著相关性,ATM缺失阳性的患者更易出现全身广泛淋巴结肿大。结论:I-FISH技术适用于CLL患者的细胞遗传学分析,提高了CLL的染色体异常检出率。但I-FISH检测的细胞遗传学异常是否是CLL患者的重要预后因素,尚需扩大样本量的研究和长期随访观察。

人类精子间期核荧光原位杂交

为研究人类精子染色体的畸变，用3号染色体涂染探针对人类精子间期核进行荧光原位杂交（简称FISH），检测了10名正常健康男子和2名涉及3号染色体平衡易位携带者t（3；7）、t（3；9）的精液。结果表明，正常男性精子间期核中3号染色体数目和（或）结构畸变率＜2％，涉及3号染色体平衡易位携带者的畸变率＞10％。

iFISH技术检测多发性骨髓瘤遗传学异常及其临床意义

目的:采用iFISH技术了解多发性骨髓瘤染色体异常情况,分析染色体异常与多发性骨髓瘤部分临床资料、治疗效果及预后之间的关系。方法:采用组合探针(1q21、DLEU/RB1、p53、IGH)对94例初诊MM患者骨髓细胞进行iFISH检测,分析其细胞遗传学异常,探讨其与临床资料及治疗效果之间的关系,明确其预后价值。结果:94例患者中,74例(78.72%)检测出1种及1种以上细胞遗传学异常;其中1种异常的34例(34/74,45.95%),2种异常的15例(15/74,20.27%),25例存在3种及3种以上异常(25/74,33.78%)。其异常的比例从高到低分别为:p53缺失(45/74,60.81%),1q21扩增(44/74,59.46%),IGH重排(31/74,41.89%),DLEU/RB1缺失(28/74,37.84%)。分析发现,p53缺失与血小板计数、白蛋白及球蛋白水平有关,IGH重排与白蛋白及瘤细胞负荷有关,DLEU/RB1缺失与血红蛋白、血沉、白蛋白及球蛋白水平有关,未发现1q21扩增与各项临床指标之间的关系。将患者按照治疗方案分为VAD组和硼替佐米组,结果显示VAD组中iFISH阴性者的疗效明显优于iFISH阳性者,而在硼替佐米组未发现FISH阳性者和阴性者的疗效有差异。生存分析发现,IGH重排与总生存时间相关,而p53缺失与总生存时间和无病生存时间均明显相关,为MM患者的独立预后因素。结论:多数MM患者存在细胞遗传学异常;1q21扩增、p53缺失及IGH重排的发生率较高;细胞遗传学异常与多种不良临床指标相关,并与临床治疗反应性相关,存在异常者治疗效果欠佳,预后较差。

双色荧光原位杂交检测苯系物接触者精子7、8号染色体数目畸变

目的 检测苯系物接触者精子 7、8号染色体数目畸变率。方法 用生物素标记 7号染色体探针 (D7Z1)和地高辛标记 8号染色体探针 (D8Z1)与精子核进行双色荧光原位杂交 ,测定精子染色体畸变率。结果 车间空气中苯的时间加权浓度为 42 .2 9mg/m3 ,高于国家卫生标准 ( 6mg/m3 )。苯系物接触者尿粘康酸浓度 ( 0 .861mg/g肌酐 ) ,高于对照组 ( 0 .44 4mg/g肌酐 )。杂交效率 99.77%～ 99.97% ,共计数15例苯系物接触者 15 5 72 1条精子核和 12名对照组者 12 3 771条精子核型。接触组二倍体精子率 ,平均7、8号染色体双体精子率 (分别为 0 .12 9%、0 .170 %和 0 .0 78% )均高于对照组 (分别为 0 .0 5 5 %、0 .0 5 3 %、0 0 3 3 % )。接触组 7号、8号染色体缺体精子率 (分别为 0 .165 %和 0 .0 88% ) ,也分别高于对照组 ( 0 .0 5 6%、0 0 2 9% )。总数目畸变精子率接触组为 0 .745 % ,高于对照组的 0 .2 89%。结论 较高浓度的苯系物暴露可引起接触者精子 7、8号染色体非整倍体率和二倍体精子率增高。

精子荧光原位杂交技术在胚胎植入前遗传学诊断中的作用

目的初步探讨精子荧光原位杂交（FISH）技术在男性染色体异常胚胎植入前遗传学诊断（PGD）中的作用。方法2006年7月—2008年8月，选择于郑州大学第一附属医院生殖医学中心就诊的9对因男方染色体异常而导致不孕的夫妇，其中包括染色体罗氏易位携带者7例，相互易位携带者1例，克氏综合征患者1例。采用FISH技术对精子和胚胎进行分析，并分析精子和胚胎FISH分析结果之间的相关性。结果（1）9例患者的精子FISH分析共计数精子8568个，无荧光信号24个。7例罗氏易位携带者正常或平衡（即染色体平衡易位）精子比例为85．71％（6045／7053）；1例染色体相互易位携带者正常或平衡精子比例为30．42％（306／1006），1例克氏综合征患者正常精子比例为68．76％（350／509）。（2）共活检158个胚胎，成功固定135个，其中111个出现明显诊断信号，36个为染色体正常或平衡易位胚胎（26．7％），75个为染色体异常胚胎。共移植21个胚胎，成功妊娠1例，现已分娩健康婴儿。7例罗氏易位携带者中，正常或平衡胚胎比例为29．0％（31／107），1例相互易位携带者中正常或平衡胚胎比例为6．3％（1／16），1例克氏综合征患者正常胚胎比例为33．3％（4／12）。（3）PGD中正常精子的比例与正常胚胎的比例呈正相关关系（r=0．75，P=0．02）。结论精子FISH分析对PGD前生殖遗传咨询有重要的临床意义。

荧光原位杂交技术在胎儿染色体异常产前诊断中的应用

目的探讨荧光原位杂交(FISH)技术在检测胎儿染色体异常的临床应用。方法选用13、21、18、X、Y特异性探针对1128例孕16～22周有产前诊断指征的妊娠妇女羊水间期细胞进行分析,并与同时进行的羊水细胞培养核型分析结果进行对照。结果被检1128例羊水间期细胞FISH检测均成功,其中检出正常核型1081例,数目异常核型20例,与常规细胞染色体核型分析结果一致,另外27例结构异常FISH技术未能检出。结论 FISH技术检测胎儿染色体数目异常具有快速、简便、准确性高、特异性强等优点,有较大的临床应用价值,并对产前细胞遗传学诊断有重要意义。