低温离心净化-高效液相色谱法快速测定腐竹中的碱性橙II和碱性嫩黄O

目的建立腐竹中碱性橙II和碱性嫩黄O的低温离心净化-高效液相色谱测定方法。方法样品经70%的乙腈-氨水(0.5%)提取,4℃低温、12000 r/min离心净化,高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)分离,最后采用二极管阵列检测器(PDA)检测,以保留时间(Rt)定性,外标法定量。结果在0.00125~0.05 mg/m L的浓度范围内,标准曲线有良好的线性关系,相关系数大于0.9999;样品在0.05、2.0、10.0 mg/kg三个加标水平内的回收率范围为95.0%~103.0%(n=10),相对标准偏差小于5.0%。方法的检出限(LOD)为0.02 mg/kg,定量限(LOQ)为0.05 mg/kg。结论对实际样品测试结果与参考文献方法比较,该方法具有简便、快速、灵敏、费用低,便于推广应用。

碱性橙Ⅱ的酶联免疫检测方法的研究

建立碱性橙Ⅱ的酶联免疫分析方法。采用戊二醛偶联法将半抗原碱性橙Ⅱ与载体牛血清白蛋白(BSA)及卵清蛋白(OVA)制备免疫抗原碱性橙Ⅱ-BSA和包被抗原碱性橙Ⅱ-OVA。经紫外可见吸收光谱鉴定和大白兔免疫实验证实人工抗原成功合成,并制备抗碱性橙Ⅱ的多克隆抗体,该抗体可检测快速定量食品中的碱性橙Ⅱ,最低检测限为10 pg。该检测方法具有高灵敏度和特异性,可应用于食品中碱性橙Ⅱ检测试剂盒的研制。