滁菊多糖结构特性及其免疫活性研究

目的分离纯化滁菊多糖(Chuzhou chrysanthemum polysaccharides,CCPS),对其进行结构解析,并研究其免疫活性。方法以滁菊为原料,热水浸提,乙醇沉淀得到CCPS;通过快流速二乙氨基乙基-琼脂糖凝胶(diethylaminoethyl-sepharose fast flow,DEAE-FF)和葡聚糖凝胶G-100(Sephadex G-100)层析柱分离纯化CCPS,得到中性多糖CCPS-1-1。用高效液相色谱法、紫外和红外光谱法、刚果红实验等进行CCPS-1-1结构解析,建立小鼠单核巨噬细胞(mouse mononuclear macrophages cells,RAW264.7)的免疫模型探究其免疫刺激活性。结果CCPS-1-1主要由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、半乳糖醛酸组成,具有三股螺旋结构。体外免疫活性实验表明,CCPS-1-1可以促进RAW264.7细胞的增殖和吞噬作用,显著诱导RAW264.7细胞中一氧化氮(nitric oxide,NO)的分泌及细胞因子包括肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的释放。结论分离纯化得到的滁菊CCPS-1-1具有促进免疫活性的作用,在调节机体免疫力方面具有一定的应用价值。

一株滁菊枯萎病拮抗菌的筛选及生防效果的研究

筛选出滁菊枯萎病病原菌的拮抗菌株,可为滁菊枯萎病的防治提供菌株资源。使用连作滁菊根际土壤作为供试土壤分离微生物,经过CAS培养基和平板对峙试验筛选出产铁载体拮抗菌株。共分离纯化出183株细菌分离株,通过CAS培养基筛选出77株具有产铁载体功能的菌株,与尖孢镰刀菌平板对峙试验复筛出5株拮抗菌。其中TZ-8抑菌率为59.68%,且具备固氮、解磷、解钾和分泌IAA的能力,鉴定表明该菌株为越南伯克霍尔德氏菌(Burkholderia vietnamiensis)。侵染试验表明该菌株能够有效抵御病原菌侵染植物组织,盆栽试验表明该菌株对滁菊枯萎病具备良好的生防效果。通过侵染试验和盆栽试验验证拮抗菌株对滁菊枯萎病具有一定的防治效果,可纳入滁菊枯萎病生防菌剂的菌株资源库。

滁菊米酒发酵工艺优化

目的:探究滁菊米酒的最佳发酵工艺。方法:通过单因素试验确定发酵酵母、发酵时间、酵母接种量、发酵温度和物料比,通过响应面试验构建Box-Behnken多元回归模型确定滁菊米酒的最佳工艺。结果:本试验最佳酵母为安琪酿酒曲,最佳配比为200 g糯米,滁菊与糯米物料比2%,酵母接种量0.9%,发酵温度28℃,发酵时间7 d;在此工艺下生产的滁菊米酒酒精度为9.10%vol,可溶性固形物含量11.90°Brix,黄酮含量为1.98 mg/L,总酸含量为2.48 g/L。结论:在该条件下的滁菊米酒色泽均匀,并带有滁菊香味,口感极佳。

滁菊粉对面团特性和面包风味及其抗氧化活性的影响

为探究将滁菊粉应用至面包加工中,对面团特性以及面包风味、抗氧化活性的影响,采用Mixolab 2混合试验仪对面团热机械学特性进行测定,并利用气相色谱-离子迁移谱法检测及分析面包中的挥发性风味物质,同时测定面包对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二胺盐(2,2’-azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate),ABTS)阳离子自由基的清除能力以及面包中的总黄酮含量。结果显示,滁菊粉的加入显著增加了面团的吸水率同时降低了淀粉的峰值黏度和回生值,与对照面包相比,滁菊面包的风味物质含量更加丰富,其中d-樟脑为滁菊的特征风味成分,通过主成分分析得到2种样品的挥发性风味成分存在明显差异。在抗氧化活性方面,滁菊面包的总黄酮含量为260.47 mg/100 g,明显高于对照面包,且对DPPH自由基、ABTS阳离子自由基的清除率均大于对照组。综上可知,面包中添加滁菊粉能够丰富面包的风味成分同时提高面包的抗氧化活性,为滁菊在面包类焙烤食品中的应用提供参考依据。

基于数字图像处理技术的滁菊花盘和花蕊面积的计算方法

【目的】通过数字图像处理技术来计算滁菊花盘和花蕊的面积,为滁菊分级划分提供依据。【方法】首先对采集到的滁菊图像进行蓝色通道灰度化处理;其次进行图像分割,对分割后的图像进行形态学处理,从而去除孔洞;最后分别用区域生长算法、差值运算分离出参考装置区域、滁菊花盘区域和花蕊区域,并统计各区域像素点的个数。由于参考装置的面积已知,根据比例关系可计算出滁菊花盘面积和花蕊面积。【结果】采用该方法计算出的滁菊花盘和花蕊面积准确,效率高。【结论】该方法解决了人工计算滁菊花盘和花蕊面积存在的数据不可靠问题,具有重要的现实意义。

5种酚酸物质对滁菊扦插幼苗生长及酶活性的影响

以滁菊扦插幼苗为材料,采用营养液水培方式研究对羟基苯甲酸、肉桂酸、阿魏酸、香草醛和水杨酸5种酚酸物质对其生理生化指标的影响。结果表明:5种酚酸物质在100μmol·L-1的高浓度处理中对滁菊幼苗的根长度、可溶性蛋白、可溶性糖、叶绿素a和叶绿素b含量产生显著抑制作用。在10和50μmol·L-1浓度处理下,过氧化物酶(POD)活性受到抑制,且增加了过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,而在100μmol·L-1处理浓度时,3种酶的活性显著降低。随着酚酸物质浓度的增加,丙二醛(MDA)在根系中含量逐渐增加。在10和50μmol·L-1处理中,苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性均高于对照,而在100μmol·L-1处理条件下,5种酚酸物质对PAL均呈现抑制作用,其酶活性均低于对照。5种酚酸物质浓度在100μmol·L-1时可以抑制根长度,减少滁菊叶绿素、可溶性蛋白、可溶性糖的含量,降低滁菊植株体内POD、CAT、SOD、PAL活性,增加MDA含量,从而对滁菊生长产生毒害作用。

滁菊低产原因分析及对策

为解决滁菊种植的产量偏低问题,促进滁菊产业的发展,采用调查走访与取样分析相结合的方法在滁菊核心种植区域开展滁菊低产原因调查分析。结果表明,造成滁菊低产的主要原因是:土壤肥力较低,土壤养分供应不平衡,水分状况不良,连作障碍以及栽培管理技术落后等。在今后的种植中应加强以平整土地、培肥土壤、完善田间水利系统为主体的农田基本建设,科学使用养分资源,推广使用生物有机肥料或合理轮作,依据滁菊生长发育规律和种植区域的生态条件制定科学统一的栽培管理技术。

水氮耦合对道地药材滁菊产量及生物量的影响

目的:探讨滁菊人工栽培适宜的水氮管理模式。方法:采用二因素二次回归旋转组合设计,盆栽试验方式。结果:水氮耦合对滁菊花个数、产量、地上部分生物量有极显著影响,水氮间存在显著正相交互作用。水分对滁菊第一水花的产量、地上部生物量影响大于氮肥用量,而氮肥对菊花总产量的影响大于水分。结论:从鲜花产量角度考虑,盆栽滁菊水氮管理以田间持水量93%、氮肥用量(N)0.34 g/kg时较为适宜;从干花产量角度考虑,盆栽滁菊水氮管理以田间持水量75%、氮肥用量(N)0.2 g/kg时较为适宜。

滁菊总黄酮的镇痛作用及与一氧化氮和前列腺素E_2的关系

目的研究滁菊总黄酮(TFCC)的镇痛作用及其可能机制。方法镇痛作用采用小鼠扭体法、温浴法、福尔马林法、热板法进行检测;血清和脑组织中一氧化氮(NO)和前列腺素E2(PGE2)含量分别采用Griess法和紫外分光光度法测定。结果灌胃给药TFCC 100、200 mg/kg可明显减少小鼠扭体反应数,降低小鼠福尔马林致痛作用第Ⅱ时相疼痛反应评分值,延长小鼠热板舔足反应潜伏期和热水缩尾反应潜伏期;小鼠侧脑室给药TFCC 5、10 mg/kg可明显抑制小鼠扭体反应。灌胃给药TFCC 100、200 mg/kg可明显提高小鼠血清和脑组织中NO含量,但可降低PGE2含量。结论 TFCC具有明显镇痛作用,其镇痛机制可能与促进NO释放和抑制PGE2生成有关。

滁菊幼苗对除草剂乙草胺的生理响应

以滁菊(Dendranthema morifolium L.)为材料,研究除草剂乙草胺对滁菊幼苗生理特性的影响。结果表明:与对照相比,分别用浓度为500、1 000、1 500、2 000μmol/L的乙草胺处理滁菊幼苗,其根系活力、叶绿素含量及净光合速率降低,抑制其生长,表现在株高、根芽数、茎粗、鲜重等下降,尤其是根系鲜重降低显著。乙草胺处理还降低了滁菊叶片抗氧化酶SOD、POD和CAT活性,较低的抗氧化酶活性有利于滁菊叶片内活性氧的积累,从而加剧了乙草胺对细胞膜的破坏,表现在滁菊叶片相对电导率和MDA含量增加。乙草胺处理浓度越高,对滁菊幼苗的抑制作用越显著。乙草胺作为滁菊的除草剂,建议使用浓度为400～500μmol/L。

水氮耦合对滁菊产量和品质的影响

采用二因素二次回归旋转组合设计,以盆栽试验方式研究了水、氮因子对滁菊产量和品质的影响,探讨了滁菊人工栽培适宜的水氮管理模式。研究结果表明,水氮耦合对滁菊花产量、叶片水提总黄酮和氯原酸含量、滁菊花水提总黄酮和氯原酸含量均有极显著影响,水氮间存在显著交互作用。氮肥因子对滁菊花产量、总黄酮含量、氯原酸含量的影响大于水分因子。当土壤水分水平为0.284 1,氮肥水平为0.403 7时,即田间持水量80%,氮肥用量0.257g/kg时,滁菊花产量最高,达18.09g/株;当土壤水分和氮肥用量均为-1.414水平时,即田间持水量50%,氮肥用量为0g/kg时,滁菊花总黄酮含量和氯原酸含量最大。从滁菊花产量、品质角度综合考虑,滁菊生育前期水氮管理以中水中氮较为适宜,滁菊现蕾开花期以低水低氮较为适宜。

滁菊电化学指纹图谱研究

为评价滁菊的整体性质和判别菊花种类,通过以丙二酸为耗散物的"BrO_3^--Ce^(4+)-H^+-丙二酸"振荡体系绘制滁菊电化学指纹图谱,并分析讨论其特征数据。结果表明:绘制滁菊电化学指纹图谱的最佳条件为:体系温度25℃,菊花用量为1.0g、粒度为60目;滁菊参与化学振荡反应在诱导期间的表观活化能为69.07kJ·mol^(-1),在振荡期间的表观活化能为56.57kJ·mol^(-1);相同振荡反应条件下,滁菊、杭白菊和黄山贡菊具有不同的特征振荡指纹信息,这些特征数据有利于判别菊花种类。因此。

滁菊总黄酮的抗炎作用及部分机制研究

目的研究滁菊总黄酮(total flavone of Chuzhou chrysanthemum,TFCC)的抗炎作用及其机制。方法抗炎实验采用小鼠耳肿胀法、大鼠足爪肿胀法、大鼠棉球肉芽肿法;采用抗炎药物萘普生做阳性对照,观察TFCC对炎性反应的抑制作用。血清和足爪组织中一氧化氮(NO)和前列腺素E2(PGE2)含量分别采用Griess法和紫外分光光度法测定。结果灌胃给药TFCC 400 mg/kg可明显抑制二甲苯诱导的小鼠耳肿胀;TFCC 160、320 mg/kg可明显抑制角叉菜胶诱导的大鼠足爪肿胀;TFCC 320 mg/kg可明显抑制棉球诱导的肉芽肿。TFCC 160、320 mg/kg可减少足爪局部炎症组织NO和PGE2含量,但对血清中PGE2含量未见明显影响。结论 TFCC具有明显的抗炎作用,其抗炎机制可能与抑制局部炎症组织中的NO和PGE2合成有关。

滁菊鲜品与干品中化学成分的色谱分析

目的研究滁菊鲜品与干品中化学成分的组成。方法采用水蒸气蒸馏法分别提取滁菊鲜品与干品中的挥发油,利用气相色谱—质谱联用技术和高效液相色谱法分析其化学组成,并对鲜品与干品中的成分进行相似度评价。结果气质图谱显示滁菊鲜品中鉴定出43个成分,占总峰面积的77.08%;干品中鉴定出41个成分,占总峰面积的80.35%;鲜品中有8个成分在干品中未测到,干品中有6个成分在鲜品中未测到;高效液相指纹图谱显示滁菊鲜品与干品的相似度不高,说明滁菊在干燥前后化学成分发生了较大的变化。结论滁菊在干燥工艺上应选择低温干燥,以保持滁菊原有的成分及功效。

滁菊叶提取物有效成分测定及在四季豆保鲜中的应用

以不同方法(蒸馏处理、水煮处理、超声波处理)制备滁菊叶提取物,测定其有效成分含量,并对四季豆进行涂膜保鲜,通过研究四季豆中Vc、总酸、叶绿素、可溶性固形物的含量变化得出:超声波处理所获得的滁菊叶提取物中总黄酮的含量相对较高,其抗菌抑菌的活性更高,四季豆的保鲜效果更好。

脱毒滁菊的特征特性与高产栽培技术

归纳了滁菊经脱除病毒后的植物学特性和经济性状,明确了脱毒苗对环境条件的需求及适宜种植地。总结出脱毒苗的高产栽培技术要点。

滁菊组织培养脱病毒技术研究

采用改良热处理结合茎尖分生组织培养的方法,建立滁菊组培脱毒快繁技术体系。研究结果表明,滁菊茎段诱导的最佳培养基为MS+2.0 mg/L6-BA+0.1 mg/LNAA;茎尖增殖的最佳培养基为MS+1.0 mg/L6-BA+0.1 mg/LNAA;壮苗生根的最佳培养基为1/2MS+0.1 mg/LNAA。接种脱毒结果为,脱毒率>83%,茎尖成活率>42%。

响应面法优化闪式提取滁菊总黄酮的工艺

利用响应面法优化闪式提取滁菊总黄酮的最佳提取工艺。比较温浸法、超声波提取法和闪式提取法对滁菊总黄酮提取率的影响;在单因素试验基础上,采用响应面法对闪式提取溶剂浓度、料液比、提取时间进行优化,从而得到最佳的提取工艺条件。结果表明,闪式提取滁菊总黄酮最佳提取工艺为提取时间103 s,乙醇浓度62%,料液比1∶44,此条件下滁菊总黄酮提取率为6.90%。

PB-CCD响应面法对滁菊抗氧化物质超声提取工艺的优化

目的探讨Plackett-Burman(PB)和Central Composite Design(CCD)联合法在滁菊抗氧化物质超声提取工艺优化中的可行性。方法采用PB法确定待测因素中影响滁菊抗氧化物质提取率的最显著三大关键因素;运用CCD法对已确定的三大因素进行优化设计,建立响应值与影响因素间的二次多项式回归模型,并确定滁菊抗氧化物质超声提取的最佳工艺。结果影响滁菊抗氧化物质提取率的三大显著因素分别为超声时间、乙醇浓度及提取温度;滁菊抗氧化物质超声提取最佳工艺条件为:超声时间39.54min,乙醇浓度为79.43%,提取温度为42.78℃,超声功率为96 W,液料比为20∶1,DPPH清除率理论最大值为92.2784%。结论 PB联合CCD响应面法用于优化滁菊抗氧化物质提取工艺是可行的。

同步荧光光谱法测定滁菊中氨基酸总量

氨基酸与乙酰丙酮和甲醛反应得到的产物能发出荧光,据此建立了同步荧光光谱法测定滁菊中氨基酸总量的方法。以苯丙氨酸作为测定滁菊中氨基酸总量的目标物。优化的试验条件如下:1苯丙氨酸、谷氨酸的波长差为55nm;2甘氨酸和混合氨基酸的波长差为60nm;3反应体系的pH为6.0;4反应温度为100℃;5反应时间为60min;6 4%甲醛溶液用量为1.5mL;7 2%乙酰丙酮溶液用量为1.25mL。苯丙氨酸的质量浓度在5.00~50.0mg·L-1范围内与其荧光强度呈线性关系,方法的检出限(3s/k)在0.30~0.87mg·L-1之间。对苯丙氨酸样品连续测定10次,测定值的相对标准偏差为1.2%。用标准加入法做方法的回收试验,计算得回收率在64.7%~103%之间。