中间锦鸡儿CiMYB15基因正调控拟南芥黄酮代谢

目的：R2R3-MYB类转录因子参与调控植物初生和次生代谢。方法：从中间锦鸡儿（Caragana intermedia）干旱转录组数据库中搜索并克隆了一个R2R3-MYB基因,命名为CiMYB15（GenBank登录号MH678649）;将CiMYB15基因编码区转入野生型拟南芥中,利用分光光度法测定了野生型和转基因拟南芥中总黄酮含量,并用qRT-PCR检测了转基因植物中At CHS基因的表达情况。同时采用染色体步移法克隆了CiMYB15基因的启动子序列。结果表明：（1） CiMYB15基因gDNA长度为1 960 bp,包含三个外显子（134、131和521 bp）和两个内含子（281和893 bp）;开放阅读框长度为786 bp,编码262个氨基酸。（2）克隆得到1 580 bp的启动子序列,序列中主要包含损伤诱导元件G-box和P-box、盐诱导作用元件GT1-motif、参与干旱诱导的反应元件MBS,以及真菌侵害应答元件BOX-W1、植物-病原菌互作元件EIER;此外,还包含调节黄酮合成基因的MYB转录因子的结合位点。（3） CiMYB15基因的表达受到紫外胁迫的诱导。（4） CiMYB15基因过表达株系的总黄酮含量高于野生型。（5）过表达植物中At CHS基因的表达量亦高于野生型。以上结果说明,CiMYB15基因正调控拟南芥黄酮代谢。