基于高通量测序分析菊苣不同组织内生真菌多样性

为了探究菊苣内生真菌的多样性及群落结构,本试验采用高通量测序技术对菊苣叶、根、茎中内生真菌进行真菌的ITS序列测序。结果显示,样品中真菌多样性测序共得到221个OUT序列,分属7门、23纲、43目、72科、111属,其中未分类的真菌门、担子菌门和子囊菌门的真菌是门水平上的优势菌门。未分类的真菌属(unclassified_k__Fungi)、链格孢属(Alternaria)在菊苣叶和茎样品中的检测率90%以上,作为菊苣茎和叶样品中的优势属;unclassified_k__Fungi和纹枯菌属(Rhizoctonia)、Alternaria、刺盘孢属(Colletotrichum)、禾状囊壳属(Poaceascoma)分别在3份根样品中检出率比较高,作为根样品中的优势属。Alpha多样性分析显示,菊苣根样品内生真菌群落的丰度最高,其次苣叶,菊苣茎样品的丰富度最低;而菊苣根样品多样性最丰富,其次是菊苣茎样品,菊苣叶样品多样性最低。主坐标分析结果表明菊苣根、茎、叶样品内生真菌菌落组成上差异比较大。丰度前20属的群落Heatmap图显示根样品内真菌多样性以及丰度均较高,而大部分茎和叶样品内生真菌群落相似性高。本研究分析了菊苣不同组织内生真菌多样性和群落结构,为菊苣内生真菌资源的开发利用及其他研究提供了理论依据。

黑黄小斑蝥中挥发性化学成分的SPME-GC-MS分析

采用固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术(SPME-GC-MS)分析黑黄小斑蝥(Mylabris cichorii Linnaeus)挥发性成分的方法。SPME的萃取头为100μm PDMS,样品用量为0.4 g,平衡及吸附温度为80℃,平衡时间为30 min,吸附时间为15 min,解吸时间为2 min。从斑蝥样品中分离得到21个色谱峰,鉴定出11个化合物,其中共有峰为斑蝥素、环己甲醇、十三烷、环己醇和1,13-十四碳二烯,但产地间成分和含量差异较大。该法可用于斑蝥挥发性成分的快速分析,为评价斑蝥质量提供参考。

UPLC法测定黄黑小斑蝥中的斑蝥素

建立一种超高效液相色谱法(UPLC)测定斑蝥素的含量,同时比较了野生与人工饲养黄黑小斑蝥(Mylabris cichorii Linnaeus)中斑蝥素含量差异。前处理以1%盐酸/丙酮作溶剂,超声提取斑蝥素;采用C_(18)为分析柱,流动相为乙腈-水(40∶60),紫外检测波长为230 nm,流速0.2 mL/min,柱温35℃,进样量2μL。结果表明,斑蝥素在0.02~1.00 mg/mL线性关系良好(R^(2)=0.9999);不同加标水平下平均回收率为97.9%~100.9%,RSD在1.7%~3.8%。采用该法测得野生斑蝥斑蝥素含量为3.080%,人工饲养斑蝥斑蝥素含量为1.680%,两者均高于药典中斑蝥药材的斑蝥素含量不得少于0.35%的要求。该方法准确、可靠,适用于斑蝥中斑蝥素的测定,人工饲养黄黑小斑蝥亦可用作斑蝥素的来源药材。

鹌鹑高尿酸血症模型建立及菊苣提取物对其影响的实验研究

目的 :塑造与人类代谢类似的高尿酸血症动物模型 ,观察中药菊苣提取物对其影响。方法 :选择鹌鹑作为模型动物 ,以酵母食饵为造模剂 ,塑造高尿酸血症模型 ,动态检测鹌鹑血清尿酸等生化指标 ,观察菊苣提取物对该模型动物血清尿酸水平等的影响。结果 :饲酵母食饵 (15 g/kg) 7天 ,鹌鹑血清尿酸水平明显升高 ,持续 5周。菊苣提取物小剂量给药 7天可明显降低酵母诱发的鹌鹑血尿酸升高和对抗其一过性血糖的增高 ,给药 14天其作用优于阳性对照药苯溴马龙。结论 :(1)该模型是筛选防治高尿酸血症中药及研究其机制较理想的动物模型。 (2 )菊苣提取物有明显的降尿酸作用。 (3)造模机制和药物作用机理有待进一步深入研究。

菊苣药材中菊苣多糖的含量测定研究

目的:建立菊苣多糖的含量测定方法。方法:采用紫外-可见分光光度法测定菊苣总糖、菊苣还原糖含量,计算得菊苣多糖的含量。结果:菊苣总糖含量测定中,果糖在0.006～0.016 mg/mL范围呈良好的线性关系,回归方程为Y=6.108X-0.026 6(r=0.999 1);菊苣还原糖含量测定中,果糖在0.06～0.11 mg/mL范围呈良好的线性关系,回归方程为Y=1.515 2X-0.258 9(r=0.999 2)。结论:本方法能简便有效的定量研究菊苣多糖,可用于完善菊苣药材的质量标准。

菊苣有效组分对高甘油三酯和高尿酸血症并高血糖大鼠脂代谢的影响

目的:观察菊苣有效组分对高甘油三酯(triglyceride,TG)并高尿酸(uric acid,UA)血症和高血糖(glucose,GLU)大鼠脂代谢的影响,并探讨其作用机制。方法:通过喂饲高果糖食饵21d诱发大鼠高甘油三酯并高尿酸血症和高血糖模型后,开始给药治疗,连续35d,观察3个不同剂量的菊苣有效组分对TG、UA、GLU及与脂代谢相关的代谢产物游离脂肪酸(freefatty acids,FFA)和代谢酶脂肪酸合成酶(fatty acid synthetase,FAS)、肝脂酶(hepatic lipase,HL)及脂蛋白脂酶(lipoproteinlipase,LPL)的影响。结果:造模21d,高果糖模型大鼠血清TG、UA、GLU水平较正常对照组明显升高;给药35d,模型组肝脏FAS活性、血清FFA水平显著升高(P<0.01);肝脏HL活性显著降低(P<0.01),心肌LPL活性的差异无统计学意义。菊苣有效组分可显著降低模型大鼠血清TG、UA、GLU、FFA水平和FAS活性,并显著升高LPL和HL活性。结论:菊苣有效组分可明显降低由高果糖引发的血清TG、UA、GLU升高,其作用机制可能是通过降低肝脏FAS活性和血清FFA水平,并升高心肌LPL和肝脏HL活性来达到综合调节脂、糖、尿酸交互紊乱作用的。

菊苣提取物对高尿酸血症动物模型的作用及机制研究

目的 观察菊苣提取物对高尿酸高甘油三酯血症鹌鹑血尿酸、血脂的影响。方法 通过喂饲用酵母配制的造模饲料造成鹌鹑高尿酸高甘油三酯血症复合模型 ,选择大、中、小 3种不同剂量的菊苣提取物进行药效学观察。结果 喂饲造模饲料的鹌鹑血清中尿酸 (UA)和甘油三酯 (TG)水平较正常对照组明显升高。菊苣提取物大、中、小剂量均可显著降低鹌鹑血清中的UA和TG含量。结论 菊苣提取物具有降脂降尿酸的功能。

人工饲养条件下眼斑芫菁不同发育阶段斑蝥素含量的变化

【目的】分析人工饲养条件下眼斑芫菁Mylabris cichorii Linnaeus不同发育阶段体内斑蝥素含量的变化。【方法】收集不同发育阶段的眼斑芫菁,通过热碱浸提法提取斑蝥素,而后以气相色谱法检测含量。【结果】在幼虫期,1龄幼虫斑蝥素相对含量最高,2龄幼虫斑蝥素相对含量降到最低点;以后随着虫体的发育,幼虫体重和斑蝥素含量都逐渐增加。羽化后的成虫经隔离饲养,雄虫在羽化后5～30天大量合成斑蝥素,而雌虫体内斑蝥素含量则极低,具有典型的性二型现象;雌雄混合饲养组中,20～30天雌虫体内可以检测到大量斑蝥素,而同期雄虫斑蝥素含量远低于隔离饲养组。【结论】幼虫期斑蝥素含量随虫体发育而增加;成虫期主要由雄虫合成斑蝥素。混合饲养组成虫平均单头斑蝥素含量高于隔离饲养组雌雄虫平均斑蝥素含量。成虫身体各部位的斑蝥素含量以腹部最高,胸部次之。

菊苣提取物对鹌鹑血尿酸血脂的影响

目的研究菊苣提取物N2对高尿酸高甘油三酯血症鹌鹑血尿酸血酯的影响。方法用酵母高尿酸高甘油三酯血症鹌鹑模型,观察菊苣提取物N2对模型血清中尿酸、甘油三酯、黄嘌呤氧化酶、一氧化氮的作用。结果与对照组相比,菊苣提取物N2三个剂量组血清尿酸,甘油三酯及一氧化氮水平明显降低,其高、中剂量还能降低血清黄嘌呤氧化酶活性。结论菊苣提取物具有降低高尿酸高甘油三酯血症鹌鹑血尿酸、血脂的作用。

菊苣正己烷提取物药理活性研究

从菊苣（ＨｅｒｂａＣｉｃｈｏｒｉ）提取到一种白色结晶，该成分可降低四氧嘧啶模型小鼠血糖及血清甘油三酯水平，对抗高糖高脂血清导致的兔主动脉平滑肌细胞损伤，改善平滑肌细胞膜微粘度，降低培养液中过氧化脂质浓度。

菊苣提取物对雌性鹌鹑高尿酸血症模型胰岛素抵抗和雌二醇、三磷酸甘油醛脱氢酶的影响

目的以胰岛素抵抗(IR)、雌二醇(E2)、三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)为观察指标,探讨菊苣提取物降尿酸的机理。方法鹌鹑按体质量随机分为5组:正常组、模型组、阳性药组及菊苣提取物大、小剂量组,每组15只。正常组给予普通饲料,其余各组均予以造模饲料,同时各给药组予相应药物干预,连续给药28 d。检测血清尿酸(UA)、胰岛素(Ins)、E2水平及全血GAPDH活性,并计算胰岛素抵抗指数(ISI)。结果与正常组比较,用药28 d期间模型组UA水平显著升高(P<0.05)。与模型组比较,菊苣提取物各剂量组UA水平显著降低(P<0.05)。各组比较Ins、ISI均未见显著变化(P>0.05)。与正常组比较,模型组E2水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,菊苣提取物大剂量组E2显著升高(P<0.05)。与正常组比较,模型组GAPDH显著降低(P<0.05),各给药组GAPDH显著升高(P<0.05)。结论菊苣提取物降尿酸的机理可能一方面通过直接升高E2水平促进UA排泄,另一方面还与其升高E2水平,使GAPDH间接升高有关。此外,菊苣提取物还可通过直接升高GAPDH活性降低UA水平。

菊苣提取物amyrin对家兔主动脉平滑肌细胞膜微粘度的影响

目的观察菊苣提取物αａｍｙｒｉｎ对高糖高脂环境中家兔主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）膜微粘度及过氧化脂质（ＬＰＯ）含量的影响。方法采用两种离体方法对比观察，即以家兔灌服该提取物后获取的含药物血清加至细胞培养基中的血清药理学方法和将提取物直接加至培养基中的直接体外给药法。结果两种方法给药均可降低高脂高糖模型细胞膜微粘度、改善细胞膜流动性，降低培养液中ＬＰＯ含量；两者之间作用强度无明显差异。结论该提取物具有一定的对抗ＳＭＣ高糖高脂损伤的药理活性；且在体内外对ＳＭＣ膜流动性作用相似；可能是菊苣防治糖尿病大血管并发症的重要组分之一。

结合斑蝥素对人肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的作用

目的研究贵州罗甸地区南方大斑蝥(Mylabris phalerata Pallas)和黄黑小斑蝥(Mylabris cichorii Linnaeus)体内的结合斑蝥素(conjugated cantharidin)对人肝癌Hep G2细胞增殖和凋亡的影响。方法采用两种斑蝥三氯甲烷提取物的水浸液获取结合斑蝥素。运用磺酰罗丹明染色法(SRB)检测结合斑蝥素对Hep G2细胞增殖的作用。利用Annexin V-FITC/PI双染法检测结合斑蝥素对Hep G2细胞凋亡的影响。应用倒置相差显微镜、透射电子显微镜观察凋亡细胞的形态学变化。结果两种结合斑蝥素对Hep G2细胞的增殖均有显著的抑制作用,呈剂量依赖性,其半数抑制浓度(IC50)分别为0.90、0.85 mg/L。流式细胞术结果显示,以0.90 mg/L的南方大斑蝥结合斑蝥素和0.85 mg/L黄黑小斑蝥结合斑蝥素作用Hep G2细胞24 h后,细胞呈典型的凋亡形态特征,凋亡率分别为(10.5±1.45)%和(12.8±1.53)%;结论两种来源斑蝥体内结合斑蝥素均可抑制肝癌Hep G2细胞的增殖并促进其凋亡。

菊苣水提取物干预高嘌呤饮食诱导的鹌鹑尿酸及脂代谢紊乱的实验研究

目的观察菊苣水提取物对高嘌呤饮食诱导的鹌鹑尿酸(UA)、脂代谢紊乱的影响,并探讨其作用机制。方法鹌鹑按体重随机分为5组:正常组、模型组、阳性药组及菊苣水提取物大、小剂量组,每组15只。正常组给予普通饲料,其余各组均予以造模饲料。阳性药组予苯溴马隆按20mg/(kg·d)灌胃,菊苣水提取物大、小剂量组分别予15、l0g/(kg·d)灌胃,正常组与模型组予等体积蒸馏水灌胃,每日1次。7d后检测UA、三酰甘油(TG)、游离脂肪酸(FFA)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)水平及尿酸代谢相关酶黄嘌呤氧化酶(XOD)、腺苷脱氨酶(ADA)、鸟嘌呤脱氨酶(GD)活性。结果与正常组比较,模型组UA、TG、FFA显著升高,HDL显著降低;与模型组比较,菊苣水提取物大、小剂量组可显著降低血UA、TG、FFA水平。模型组GD活性较正常组显著升高,菊苣水提取物大、小剂量组可显著降低GD活性;各组XOD与ADA活性比较差异无统计学意义。结论菊苣水提取物具有明显的调节尿酸、脂代谢紊乱的作用,可能的机理是通过降低GD活性而降低UA水平,通过降低UA、FFA水平从而降低TG水平。

菊苣胶囊对糖尿病复合高脂兔血糖血脂及血尿酸的影响

采用四氧嘧啶静脉注射合高脂食饵的复合兔模型，观察菊苣胶囊对高血糖、高血脂模型兔血糖、血脂及血尿酸的影响。结果发现，菊苣胶囊在连续口服给药时，可降低模型动物第２周、第４周、第８周时空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇水平，同时降低第４周、第８周时血尿酸水平。表明菊苣具有改善代谢紊乱的多方面作用。

温湿度变化与两种芫菁繁殖的关系

在实验条件下研究了两种药用芫菁繁殖与温湿度变化的关系,表明:交配的最适温度为22～28℃,湿度为60～90％,而大斑芫菁随着气温上升,相对湿度下降,交配活动逐渐减弱,眼斑芫菁则随着气温下降,相对湿度上升,交配活动逐渐减弱;产卵最适温湿度,大斑芫菁为26～28℃及60～68％,眼斑芫菁为23～26℃及72～78％;大斑芫菁最适孵化的温湿度为26～28℃及70～75％,而眼斑芫菁的卵要经过高低温度的变化,有效积温达到1680.85日·度时才能孵化。

大斑芫菁与眼斑芫菁斑蝥素的含量差异

为斑蝥素的开发利用提供参考依据,以野生大斑芫菁和野生眼斑芫菁为研究对象,采用超声波-高效液相色谱仪法提取斑蝥素,比较大斑芫菁和眼斑芫菁内斑蝥素的含量差异。结果表明:在最佳提取条件下(超声时间60 min、丙酮加入量30 mL),眼斑芫菁和大斑芫菁的斑蝥素含量分别为1.015%和0.307%,眼斑芫菁的斑蝥素含量约是大斑芫菁3.3倍。

菊苣多糖的研究进展

菊苣多糖是菊苣中重要活性成分之一,是目前研究热点之一。本文对国内外近年来关于菊苣多糖的提取、分离纯化、纯度鉴定等技术方法,以及菊苣多糖化学结构、理化性质、生物活性等方面的研究进行了综述,为菊苣资源的深入研究和开发提供借鉴。

气质联用分析眼斑芫菁挥发性成分

目的研究眼斑芫菁的挥发油性成分,确定挥发性成分的化学成分组成。方法采用水蒸气蒸馏法提取眼斑芫菁的挥发性成分,并采用气相色谱-质谱联用技术对其进行分析鉴定。结果从眼斑芫菁中共检出64种挥发性成分,其中40种物质结构得以鉴定,以酸类物质含量最多。其中相对百分含量较高的有(E)-9-十八碳烯酸(9.69%)、硬脂酸(5.01%)、1,13-十四碳(3.00%)、亚油酸(1.69%)等。结论眼斑芫菁中含有大量挥发性成分,采用气相色谱-质谱联用技术能够很好的对其分离和鉴定。

菊苣假单胞菌对有机磷农药乐果的降解作用初报

从农药厂废水流经地中筛选出降解乐果的菊苣假单胞茵菌株Ⅺ-11,该菌株能以乐 果为唯一磷源和氮源生长.经碳氮源优化,菌株在30℃、150 r/min培养7d后对乐果的降解率为 74.6％.柠檬酸钠的加入有利于降解,推测降解途径与三羧酸循环有关.